桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的 从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析.方法 热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构.结果 分离纯化得到相对分子质量分别为14.2×103,22.2×103的多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B,两者都是结构复杂的中性杂多糖.PL-B中,糖占71%,蛋白质占7%;PL-A,PL-B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL-B中还有部分鼠李糖;PL-B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸.结论 多糖PL-A与蛋白聚糖PL-B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分.     

桑黄子实体两种新多糖的分离纯化与结构研究

目的从桑黄子实体中分离具有抗肿瘤活性的多糖成分,并进行结构分析。方法热水浸提法提取桑黄子实体中的粗多糖,经醇沉、冷冻干燥、离子交换层析、凝胶层析和超滤,得到纯度较高的多糖,通过HPLC、IR、1H-NMR、13C-NMR、高碘酸氧化及Smith降解确定2种多糖的相对分子质量、组成及结构。结果分离纯化得到相对分子质量分别为14.2×103,22.2×103的多糖PL-A及蛋白聚糖PL-B,两者都是结构复杂的中性杂多糖。PL-B中,糖占71%,蛋白质占7%;PL-A,PL-B均含大量葡萄糖及少量甘露糖,PL-B中还有部分鼠李糖;PL-B所含氨基酸包括缬氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、甘氨酸。结论多糖PL-A与蛋白聚糖PL-B为首次从桑黄子实体中提取到的多糖成分。     

桑黄多糖分离纯化及其结构初步鉴定

本文用离子交换和凝胶层析对桑黄多糖进行了纯化,并对多糖的结构、组成及理化常数进行了分析。结果表明,经弱碱性阴离子和弱酸性阳离子交换树脂一次串联脱蛋白,蛋白脱除率达94.96%,多糖回收率为77.77%。再经凝胶层析,得到大分子量多糖组分HHM(2.84×106Da)和小分子量多糖组分HLM(5.33×104Da),HLM和HHM的旋光度分别为[α]D25= 64.8°和[α]D25= 58.4°,由IR分析,初步推测该HHM和HLM多糖为β型吡喃多糖,由TLC法测得的HHM的单糖组成为葡萄糖,HLM单糖组成分别为葡萄糖和半乳糖。     

桑黄子实体与桑黄菌丝多糖抗氧化活性研究

桑黄是我国一种非常珍贵的功能性真菌,多糖是其的主要生物活性成分,试验提取桑黄子实体多糖和二种不同生长期的菌丝多糖,对其进行抗氧化试验,以总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除羟基自由基能力、对Fe~(2+)螯合能力、超氧阴离子自由基清除能力测定5种方法评价其抗氧化活性,试验结果表明桑黄子实体多糖表现出较强的抗氧化活性,对比桑黄子实体多糖与桑黄菌丝多糖,子实体多糖抗氧化效果显著高于菌丝体多糖,不同生长期的菌丝多糖也呈现出不同的抗氧化性,生长期短的菌丝多糖表现出更强的抗氧化性。试验结果为今后桑黄产业提供重要的理论基础。     

桑黄菌丝体多糖的分离纯化及理化性质分析

研究桑黄粗多糖的分离和纯化工艺,并对多糖组分进行理化性质分析。结果表明：经DEAE-52纤维素离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析得到两个组分P-47000和P-8700;经高效液相色谱分析证明,两组分均为纯品,且不含蛋白质、核酸,为非淀粉类多糖,分子质量分别为4.74×104D和8.71×103D,均由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、葡萄糖、半乳糖组成,P-47000中各单糖物质的量比为3.47:1.99:1:63.27:13.44,P-8700中各单糖物质的量比为10.46:1:1.03:182.75:30.94。     

桑黄子实体与菌丝多糖抗肿瘤活性研究

多糖是桑黄的主要生物活性物质之一,存在于桑黄子实体,发酵液以及其菌丝体中。本试验提取了桑黄子实体多糖和二种不同生长期的桑黄菌丝多糖,研究其分子结构,并且对其抗肿瘤活性进行了研究。试验结果表明,桑黄子实体多糖单糖组成为:半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖;桑黄菌丝多糖的单糖组成为:半乳糖、葡萄糖和甘露糖,桑黄子实体多糖和桑黄菌丝多糖结构存在较大差异。桑黄子实体多糖对人肝癌细胞、人肺癌细胞和人宫颈癌细胞的抑制率IC_(50)值分别为:0.34 mg/mL、0.65 mg/mL、0.95mg/mL,表现出很强的抗肿瘤活性。体内和体外试验表明,桑黄子实体多糖抗肿瘤效果显著高于桑黄菌丝体多糖,不同生长期的菌丝多糖也呈现出不同的抗肿瘤活性,生长期长的菌丝多糖表现出更强的抗肿瘤活性。     

枸杞多糖的分离纯化及结构研究

枸杞子经提取,醇沉,得到枸杞水溶性多糖粗品(LBP)。最佳乙醇沉淀添加量为50 m L浓缩液中添加80 m L体积分数95%乙醇;最佳乙醇醇沉时间为12 h;Sevag法除蛋白次数为6次,脱除率为83.45%。枸杞粗多糖经DEAE-52纤维素(OH-)色谱柱、Sephedex G-50柱层析纯化后,得到LBP1和LBP2。采用紫外光谱扫描和Sephedex G-100柱层析鉴定LBP1和LBP2均为分子质量相对均一的组分。高效液相色谱检测LBP1和LBP2的相对分子质量分别为367和358。苯酚-硫酸法测得:LBP1和LBP2的中性糖含量分别为82.20%和74.50%;咔唑-硫酸法测得LBP1和LBP2的半乳糖醛酸含量为7.50%和14.30%。气相色谱测得LBP1的单糖组成摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.79∶1.00∶3.08;LBP2的单糖组成的摩尔比为半乳糖∶甘露糖∶葡萄糖=1.32∶1.00∶7.38。红外光谱测定结果显示,LBP1和LBP2均由吡喃糖构成。β消去反应检测得LBP1和LBP2与氨基酸是通过O-糖苷键相连。刚果红实验证明LBP1和LBP2均不存在三股螺旋结构。粒度实验表明,溶液酸碱度会影响枸杞多糖的粒度分布。     

阿魏菇多糖的分离纯化与结构分析

通过对新疆阿魏菇多糖进行提纯及分析,了解其基本理化性质,在理论上为深入探究阿魏菇多糖的结构以及构效活性奠定了基础。阿魏菇的热水提取液经乙醇沉淀、去蛋白、逆向流水透析、DEAE-Cellulose和SephadexG-100柱层析得纯品阿魏菇多糖。薄层色谱分析表明阿魏菇总多糖是由半乳糖,葡萄糖,果糖,甘露糖组成。以红外和电泳为基础,分析了阿魏菇多糖组分的结构,表明其是一种较纯的多糖,原子力显微镜分析表明阿魏菇多糖分子具有高度分枝结构。     

山药多糖的分离纯化及其结构鉴定

以山药为原料,经分离提取纯化等一系列步骤得到山药水溶性多糖,用Sephadex G-100柱层析,发现经DEAE层析后的多糖为均一组分,其比旋光度为+162.5°,属于水溶中性多糖。经薄层层析以及GC-MS分析测定该中性糖为葡萄糖和甘露糖组成,其摩尔比为0.56:0.44。红外光谱和NMR谱分析显示该中性糖有α-异构体吡喃己糖环,它们归属为α-D-葡萄糖和α-D-甘露糖。     

金耳多糖的分离纯化与结构分析

对金耳粗多糖的提取方法作了探讨，筛选出了最佳的工节条件，并采用了较新颖的去蛋白工艺与纯化手段，获得了金耳多糖的纯品ＡＰ３。对ＡＰ３的纯度、分子结构、单糖组成进行了初步分析。     

碱提桑黄菌丝体多糖的抗氧化活性

为了研究碱提桑黄菌丝体多糖PL-N的抗氧化活性。利用物理、化学方法分析了PL-N的化学组成及基本理化性质,在此基础上,通过体外抗氧化模型、细胞试验和D-半乳糖所致的小鼠亚急性衰老模型综合评价了PL-N对DPPH和羟自由基的清除作用、过氧化氢诱导SH-SY5Y神经细胞的保护作用及体内抗氧化活性。结果表明:PL-N的总糖和糖醛酸含量分别为84.92%和16.92%,不含蛋白质,主要由D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其分子摩尔比为5.5:7.8:1.8:1。PL-N具有明显的清除自由基能力,且呈剂量依赖关系,在2.0 mg/mL时,PL-N的DPPH和羟自由基清除率分别为72.1%和83.3%。同时,在80 μg/mL时,PL-N预处理对氧化损伤细胞的存活率达到88.7%,揭示其突出的体外抗氧化活性。与模型组相比,灌胃高剂量PL-N的小鼠脏器指数、血清和肝脏中的抗氧化酶活性和总抗氧化能力均极显著增加(P<0.01),丙二醛含量极显著降低(P<0.01)。由此可见,PL-N具有突出的抗氧化活性,可作为功能性食品应用于膳食、理疗中。     

冠县灵芝多糖的分离纯化、结构表征及抗氧化活性研究

以冠县灵芝为研究对象,采用传统浸提法获得水溶性灵芝多糖GLP,经Sevag法去蛋白及活性炭脱色,然后依次采用Capto TM DEAE离子柱层析和Superdex 6 prep Grad凝胶柱层析进行分离纯化,获得均一多糖GLPS80a,经高效凝胶色谱(HPGPC)法检测,其相对分子量为9024 Da,高效阴离子色谱(HPAEC)、红外光谱(FT-IR)和核磁共振(NMR)图谱分析结果表明,GLPS80a是由岩藻糖(Fuc)、氨基葡萄糖(GlcN)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)和葡萄糖醛酸(GluA)等7种单糖组成,摩尔比为0.06:0.23:0.17:1.00:0.08:0.19:0.23,主要以β-D-(1,6)糖苷键连接的吡喃糖为主要组成且不含三股螺旋的酸性多糖。抗氧化结果表明,GLPS80a具有一定的DPPH自由基、OH自由基和ABTS+自由基的清除能力,它们的EC₅₀分别为7.40、8.74和0.33 mg/mL,还原力RP_0.5AU为8.33 mg/mL。本研究将为合理开发冠县灵芝资源和精深...     

超声波复合酶法提取桑黄多糖研究

采用单因子分析和正交试验,以桑黄菌丝体提取物中多糖得率为指标,对超声波复合酶法中影响多糖提取效果的主要因素进行研究。结果表明：超声波提取优化工艺条件为超声处理时间20min、料液比1:25(g/mL)、功率500W,在此基础上提取多糖得率为3.356%,在超声波优化结果基础上,进一步进行复合酶法处理,酶解最佳提取条件是pH6.5,酶解温度50℃,纤维素酶添加量2.5%、果胶酶添加量2.5%、蛋白酶添加量1%,酶解时间120min,多糖得率为6.619%,由此可见,超声波和复合酶法双重处理提取桑黄多糖是一种有效的提取方法,适合大规模生产运用。     

桑黄菌丝球多糖的分离纯化

桑黄菌丝球多糖经大孔树脂除蛋白、DEAE-纤维素初步纯化后得到三个组分,其中Ap2含量最多,且有两个峰部分重叠,将Ap2过Sephadex G-100凝胶柱层析进一步纯化,得到Ap2-1和Ap2-2两个单一多糖组分,纯化后的多糖各组分经紫外光谱分析不含蛋白质和核酸,整个分离纯化过程,多糖的回收率仅为48%,但纯度达到了96%。     

桑黄菌液体发酵工艺条件的研究

为能够提高桑黄液体菌丝体粗多糖产量,通过单因素试验,以菌丝生物量及菌丝多糖产量为指标,考察了接种龄、发酵液初始pH、装液量、接种量以及摇床转速等因素对其的影响,采用正交试验确定较佳发酵条件。结果表明:当装液量130mL/500mL,pH5.5,摇床转速180r/min时,菌丝生物量达18.2g/L,桑黄胞外粗多糖产量达6.02g/L。     

大孔吸附树脂去除桑黄粗多糖中蛋白的研究

从5种大孔吸附树脂中筛选出D-101-I作为去除桑黄粗多糖中蛋白的树脂。考察洗脱剂类型及其浓度、多糖浓度、上样量和洗脱剂用量对树脂脱蛋白效果的影响。结果表明,室温下,多糖液浓度300mg/mL、上样量为2BV时蛋白的吸附率达90%;50%乙醇做洗脱剂,用量为2BV时蛋白洗脱率较低,多糖则可富集洗脱。可见大孔树脂脱除多糖中蛋白的方法是可行的,且蛋白脱除率达83·9%,多糖损失率为25·1%。