QuEChERS前处理结合高效液相色谱法及高效液相色谱-串联质谱法检测葡萄酒中3种赭曲霉毒素

目的建立QuEChERS净化技术结合高效液相色谱法及高效液相色谱-串联质谱法检测葡萄酒中赭曲霉毒素A(OTA)、赭曲霉毒素B(OTB)和赭曲霉毒素C(OTC)3种赭曲霉毒素的方法。方法对QuEChERS净化条件和高效液相色谱及高效液相色谱-串联质谱检测条件进行优化,葡萄酒样品先用乙腈-冰乙酸(90∶10,V/V)进行酸化稀释,离心后取上清液经C_(18)+SiO_2+MgSO_4净化剂组合净化过滤,待测样液经液相色谱C_(18)柱(4.6 mm×250 mm,5μm)梯度洗脱分离后,分别采用荧光检测器和串联质谱电喷雾技术,在多反应监测(MRM)模式下,实现同时对葡萄酒中OTA、OTB和OTC三种赭曲霉毒素的定性和定量分析。结果方法最低定量限(LOQ)均为2.0μg/kg,相对标准偏差(RSD)为2.01%～7.52%(n=6)。结论该方法操作方便、灵敏度高、重现性好,适用于日常监管工作中对葡萄酒中赭曲霉毒素的检测。     

同位素内标高效液相色谱-串联质谱法测定粮食及其制品中赭曲霉毒素A、B和C

建立一种同位素内标高效液相色谱—串联质谱法同时测定粮食及其制品中赭曲霉毒素A、B和C的方法。样品用乙腈-水(84:16,V/V)提取,振荡离心后取上清液过赭曲霉毒素免疫亲和柱富集净化,经Waters ACQUITY BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)进行液相色谱-串联质谱分析,采用多反应监测(MRM)、正离子模式和内标法定量,同时对线性范围、准确度、精密度和加标回收率等进行方法学验证。结果表明,在优化的条件下,赭曲霉毒素A、B和C在0.25~2.5 ng/mL线性范围内线性良好,决定系数均在0.999以上,本方法对赭曲霉毒素的检出限(LODs,S/N=3)和定量限(LOQs,S/N=10)分别为0.003~0.018、0.011~0.059 μg/kg;在2.0~10.0 μg/kg 三个加标水平下,方法的平均回收率为80.50%~107.08%,相对偏差(RSDs)介于0.14%~4.94%(n=6)。利用此方法对10个批次的粮食及其制品进行检测,发现1个批次的样品检出赭曲霉毒素A,含量为(0.35±0.01) μg/kg。此方法操作简便、灵敏度高,适用于粮食及其制品中赭曲霉毒素A、B和C的检测。     

免疫亲和层析-液相色谱-串联质谱法测定玉米和小麦中的赭曲霉毒素A

目的建立免疫亲和层析净化-液相色谱-串联质谱法测定食品中的赭曲霉毒素A的方法。方法玉米和小麦样品经50%甲醇水溶液(V:V)提取,免疫亲和柱净化后,采用液相色谱-串联质谱法进行测定,外标法定量。结果玉米、小麦添加浓度在1.0~10.0μg/kg时,回收率在70%~100%之间,变异系数小于10%,在2017年度法帕斯国际能力验证中(Food Analysis Performance Assessment Scheme),此方法测定样品中赭曲霉毒素A含量为2.8μg/kg,Z值为-0.4,统计结论为满意。结论该方法简单快速,灵敏度高,定量准确,适合于玉米和小麦中赭曲霉毒素A的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定全麦粉中的赭曲霉毒素A

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法测定全麦粉中赭曲霉毒素A的含量。方法：全麦粉样品经甲醇-水(60∶40,V∶V)提取,磷酸盐缓冲溶液稀释,赭曲霉毒素A免疫亲和柱净化,超高效液相色谱-串联质谱测定分析,内标法定量。结果：赭曲霉毒素A在0.475～9.500 ng·mL^-1具有良好的线性关系(R²=0.999 9),3个加标水平下的平均回收率为85.62%～99.42%,相对标准偏差为1.92%～4.66%,检出限为0.68μg·kg^-1、定量限为2.27μg·kg^-1。结论：该方法便捷、稳定、灵敏度高、准确度好,可用于快速分析全麦粉中赭曲霉毒素A的含量。     

超高效液相色谱-串联质谱法检测中草药中赭曲霉毒素A

本研究通过优化液相色谱条件和质谱条件,并结合碳酸氢钠溶液提取稀释的方法法有效克服了基质效应的干扰,建立了中草药中赭曲霉毒素A的超高效液相色谱-串联质谱法快速检方法。试样经碳酸氢钠溶液提取,超声波提取,再经过免疫亲和柱净化后,用C18液相色谱柱分离,多级反应选择离子正离子模式检测。经方法学验证,赭曲霉毒素A质量浓度在0.1~50.0μg/L范围内呈现良好的线性关系,r0.99;样品在1.0、2.0和10.0μg/kg三个添加水平下的回收率为78.5%~98.0%;相对标准偏差为2.6%~11.8%;方法检出限为1.0μg/kg。将该方法应用于实际8批样品的检测,结果显示8批样品中检出1批的赭曲霉毒素A检测结果呈阳性(7.3μg/kg)。实际样品检测结果表明,本方法可实现中草药中赭曲霉毒素A灵敏、准确的定性定量分析。     

高效液相色谱-串联质谱法检测茶叶中的 赭曲霉毒素A

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用技术检测茶叶中赭曲霉毒素A(OTA)的方法。方法用甲醇-2%Na HCO3溶液(60:40,V:V)提取样品中的赭曲霉毒素A,采用免疫亲和柱对茶叶中的赭曲霉毒素A净化,使用甲醇-5 mmol/L乙酸铵(含0.1%乙酸)为流动相,检测赭曲霉毒素A,采用正离子模式。结果本方法中赭曲霉毒素A在0.5~10 ng/m L质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.996),回收率在83.6%~92.5%之间,相对标准偏差在6.5%~9.1%之间,检出限为0.1μg/kg。结论该方法准确性好、灵敏度高,适用于茶叶样品的检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定普洱茶中赭曲霉毒素A

目的 建立超高效液相色谱-串联质谱对普洱茶中赭曲霉毒素A进行测定的分析方法。 方法 普洱茶样品采用乙腈/水(7:3,v/v)提取,PriboFast Multi-Toxin IAC免疫亲和净化柱净化,超高效液相色谱串联质谱进行测定分析,采用内标法定量。 结果 赭曲霉毒素A在浓度5.32-99.50μg.L_^-1范围内具有良好的线性关系,相关系数为0.9993,3个加标水平下的回收率为92.5%~95.6%, 相对标准偏差为2.18%~3.25%,检出限为0.10μg.kg_^-1。普洱茶样品中的赭曲霉毒素A均为未检出。 结论 普洱茶中复杂基质的存在对赭曲霉毒素A的测定有干扰,应采用免疫亲和净化柱净化处理,该方法具有较高的灵敏度及准确度,适用于普洱茶中赭曲霉毒素A的实际检测。     

对SPE—HPLC检测葡萄酒中赭曲霉毒素A方法中SPE法的优化

对固相萃取-高效液相色谱检测法(SPE-HPLC)检测葡萄酒中赭曲霉毒素A方法中SPE法进行了系统优化.研究选用6mL 500mg的C18柱萃取葡萄酒样品,利用反相C18柱分离样品,使用带荧光检测器的高效液相色谱仪检测样品中的赭曲霉毒素A.确定了固相萃取方法,最佳上样速度为1.5mL/min,最佳洗脱体积为100mL,最佳淋洗液为40%的甲醇水溶液,洗脱液体积为2mL甲醇.经过以上条件净化处理,得到相对干净的色谱图,可以满足对葡萄酒中赭曲霉毒素A的定量检测.     

进口葡萄酒中赭曲霉毒素A的含量分析

为了解进口葡萄酒中赭曲霉毒素A的含量和污染状况,本研究建立了无需净化、浓缩,直接进样,采用液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)测定葡萄酒中赭曲霉毒素A的方法。赭曲霉毒素A空白基质标准溶液在1.0～20.0 ng/mL浓度范围内线性良好,方法检测限达到0.05 ng/mL,添加浓度为2.0 ng/mL质控样品的回收率为98.7%～113.2%,精密度<5.7%。应用该方法测定了84个进口葡萄酒样品中赭曲霉毒素A的含量,结果表明,赭曲霉毒素的检出率为100%,含量为0.14～1.10 ng/mL,平均含量为0.32 ng/mL。     

番茄酱中6种交链孢霉毒素的液相色谱-串联质谱检测方法

目的 研究利用固相萃取-液相色谱-串联质谱法测定番茄酱中6种交链孢霉毒素。方法 番茄酱样品经提取液提取,固相萃取柱净化后,采用液相色谱-串联质谱进行测定,外标法定量。 结果 番茄酱样品中交链孢霉毒素添加浓度在2.0μg/kg~200μg/kg 时,回收率在66.5%~113.5%之间。结论 该方法简单快速,灵敏度高,定量准确,是实现番茄酱中6种交链孢霉毒素快速定量检测的可靠方法。     

Occurrence of ochratoxin A in Australian wine

A survey of 601 samples of Australian wine for the presence of ochratoxin A (OA) was undertaken. The study sampled predominantly bottled wines, approximately equal numbers of red and white wines, wines made from a range of grape varieties and wines from all the major producing areas and some of the minor ones. A validated HPLC assay that did not utilise expensive immunoaffinity columns was developed for quantifying OA in wine, with limits of detection and quantification of 0.02 and 0.05 μg/L respectively. OA was detected in 90 (15.0%) of the 601 samples, but at uniformly low levels, with 85% of positive samples containing less than 0.2 μg/L OA. Only one sample exceeded 0.5 μg/L OA and no sample exceeded 1.0 μg/L OA. No region of Australia appeared more or less likely to produce wines containing OA.     

葡萄酒中17种残留农药的固相萃取-气相色谱/负化学离子源质谱测定方法研究

建立了葡萄酒中17种残留杀虫剂和杀菌剂的气相色谱～负化学离子源质谱（GC—NCI／MS）测定方法。采用C18。固相萃取小柱对葡萄酒中的残留农药进行富集,进一步完成萃取和净化,农药经乙酸乙酯洗脱后供GC—NCI／MS测定,采用基质匹配标准溶液外标法定量。验证实验表明,各农药在10-200μg／L浓度范围内线性关系良好,该方法定量检测限（S／N〉10）为5-20μg/L,在20μg,L和50μg／L处的加标回收率为70．1％-119．0％,相对标准偏差为3．5％-9．4％。该方法前处理简便快速,所采用的检测技术选择性和灵敏度高,适合葡萄酒中残留农药的测定．应用前景广阔。     

Removal of Ochratoxin A (OTA) from Naturally Contaminated Wines During the Vinification Process

In this study, 28 red and 18 white musts, from seven different local wineries in Turkey, were investigated to determine their ochratoxin A (OTA) content following the 2006 harvest period. The removal conditions of OTA during the main stages of the wine making processes (alcoholic fermentation, malolactic fermentation, racking, fining and storage) were investigated using HPLC techniques. In addition, the removal of OTA from two samples of red musts containing more than 1.0 μg/L of OTA and one sample of white must containing 0.83 μg/L of OTA were studied. The percentage of OTA removal in the final wine was found to be 41.8% (Sample A) and 53.7% (Sample B) in red wine and 44.7% in the white wine. The activated carbon had no greater effect on removing OTA than the other fining agents. The wine bottle ageing processes decreased the OTA content of the red wine between 11.8% and 17.6% during 12 and 18 months of storage, respectively. The 24 month ageing period did not affect the OTA level of the red wine further compared to the 18 month period.     

山药酒中甾醇含量测定及清除DPPH自由基活性研究

采用固相微萃取（SPME）结合气相色谱-质谱联用（GC-MS）仪测定葡萄酒用软木塞中2,4,6-三氯苯甲醚的迁移量,对整个过程引入的不确定度进行分析评定。依据CNAS-GL006：2019《化学分析中不确定度的评估指南》和JJF 1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》,构建了不确定度评定的数学模型,分析了不确定度来源,并对各分量加以量化和合成。评定结果表明,其不确定度主要来源于标准溶液系列配制过程,其次是内标物质添加过程;当木塞中2,4,6-三氯苯甲醚迁移量为2.04 ng/L时,其扩展不确定度为0.26 ng/L（k=2）。     

基于渗透汽化膜生产脱醇葡萄酒、葡萄烈酒的安全性分析

为探究渗透汽化膜生产脱醇葡萄酒、葡萄烈酒的安全性情况,采用高效液相色谱等方法检测干红葡萄酒原酒、一级6 h、9 h、12 h停留液、二级6 h、9 h、12 h渗透液样品中氨基甲酸乙酯、赭曲霉毒素A、生物胺、甲醇、Fe³⁺、Cu²⁺含量。结果表明,在一级系统中,一级停留液氨基甲酸乙酯、赭曲霉毒素A、生物胺含量分别由3.31μg/kg、0.33μg/kg、10.86μg/kg升至4.33μg/kg、0.57μg/kg、32.23μg/kg,甲醇含量由138.47 mg/L下降至24.18 mg/L。在二级系统中,二级渗透液氨基甲酸乙酯、赭曲霉毒素A、生物胺、Fe³⁺、Cu²⁺含量分别下降至0.18μg/kg、0.06μg/kg、0.061 mg/L、0.38 mg/L、0.03 mg/L,甲醇含量升至486.75 mg/L,所有安全性指标均符合国内外相关标准,脱醇酒、葡萄烈酒样品具有良好的安全性。该研究结果为使用渗透汽化膜生产脱醇葡萄酒和葡萄烈酒的企业提供了相关理论依据。     

基于氢化物原子荧光光谱法分析富硒酿酒葡萄与酿造产物中的硒

建立了氢化物原子荧光光谱(HG-AFS)检测酿酒葡萄中总硒和无机硒的方法,并追踪分析了施用富硒叶面肥的酿酒葡萄与酿造产物中硒的含量变化。样品经HNO₃-HClO₄(4+1)180 ℃消解,盐酸100 ℃还原,HG-AFS测定总硒;样品经水提取,甲酸酸化,过Cleanert PCX小柱,消解还原,HG-AFS检测无机硒。结果表明,该方法在0.25~4 μg/L范围内线性良好(R2=0.9989),方法的检出限为2 μg/kg,定量限为5 μg/kg;总硒回收率为96.47%~97.39%,相对标准差为1.76%~5.65%;无机硒回收率为85.20%~88.91%,标准偏差为5.97%~21.45%。追踪检测显示,硒肥组酿酒葡萄总硒含量提高约3倍,含量为9.65~38.6 μg/kg;硒肥组、对照组酿酒葡萄均未检出无机硒;酿造后,酒渣、酒泥和成品酒中硒存留分数分别为89.3%、8.7%和2.0%。施富硒叶面肥可显著提高酿酒葡萄的硒含量,达到富硒食品标准,但酿造后硒主要随酒渣、酒泥流失,仅少量留存在葡萄酒中。     

Study of ochratoxin A content in South Moravian and foreign wines by the UPLC method with fluorescence detection

In 2009–2010, 72 wine samples of Moravian and foreign origin were analysed for ochratoxin A contamination. A fast analytical method based on immunoaffinity column clean-up and followed by the ultra performance liquid chromatography coupled to fluorescence detection was used. LOD and LOQ values were 0.3 and 1.0 ng/L. Ochratoxin A was detected in 11% of Moravian wines and the detected OTA level ranged from 1.2 to 71.2 ng/L. In foreign wines, OTA level ranged from 1.6 to 227.0 ng/L. The values of OTA in all studied samples were significantly below the maximum allowable limit, 2.0 μg/kg, set by the European Union.     

超高效液相色谱-串联质谱法测定保健酒中紫杉醇的含量

建立了超高效液相色谱-串联质谱法测定保健酒中紫杉醇含量的方法。样品用水稀释10倍后经GCB固相萃取小柱净化,采用LunaC₈ 100A(150 mm×2 mm,3 μm)柱以0.2%甲酸溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱分离,电喷雾电离(ESI)正离子化和多反应监测模式(MRM)检测。紫杉醇在1~100 μg/L范围内呈良好的线性关系,决定系数(R2)大于0.999,方法的定量限(S/N=10)为10 μg/L;以保健酒为基质,紫杉醇在10.0、50.0和100.0 μg/L 3个水平下的平均加标回收率为88.9%~92.4%,相对标准偏差(RSD,n=6)为7.8%~9.5%;用建立的方法分析了17批实际样品,其中2批次样品有检出,且含量均超过方法定量限的100倍以上。该法简单、高效、灵敏、准确,可用于测定保健酒中紫杉醇的含量,为执法机关监管保健酒里添加红豆杉的违法行为提供了技术支持。     

UPLC-MS/MS测定葡萄酒中3种双酰胺类杀虫剂

建立了葡萄酒中氰虫酰胺、氯虫苯甲酰胺、氟苯虫酰胺等3种双酰胺类杀虫剂残留量的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC- MS/MS)检测方法。葡萄酒中的3种双酰胺类杀虫剂经乙腈提取后,用GCB/NH2固相萃取柱净化,以乙腈-5 mmol/L乙酸铵-甲酸作为流动相,梯度洗脱,通过UPLC-MS/MS进行测定。结果表明,3种双酰胺类杀虫剂在质量浓度1～20 μg/L范围内呈良好的线性关系,相关系数(R)≥0.999 5,方法检出限＜1.0 μg/kg;以1.0 μg/kg、2.0 μg/kg、10 μg/kg为添加水平,平均回收率在76.3%～91.1%之间,相对标准偏差(RSD)为3.9%～9.8%。表明该方法快速简便、净化效果好、准确度较好、精密度较高,可应用于葡萄酒中3种双酰胺类杀虫剂的同时测定。