青霉(Penicillium)P-1007产酸性蛋白酶的条件和酶学性质

本文报道了青霉(Penicillium)P-1007产酸性蛋白酶固体发酵条件优化和酶学性质的研究结果。适合该菌株的最佳固体发酵培养基为:麦麸15g,黄豆粉10g,葡萄糖3g,NaH2PO41.5g,CuSO41.5g,水35mL,最佳起始pH7.0,最适温度40℃。该酸性蛋白酶的最佳反应pH为5.5,最佳反应温度为50℃。50℃条件下保温8h后其相对酶活在83%以上,pH值为5.5条件下60℃水浴2h后,测定其相对酶活可达60%。5×10-3mol/L的MnCL2、CuSO4均对该酶有激活作用,而其他金属盐类对该酶有不同程度的抑制作用。     

青霉P-1007酸性蛋白酶酶学性质及其固体发酵条件的初步研究

青霉P-1007产胞外酸性蛋白酶，其酶活可达1500u／g。该酶的最适温度为50℃，最适pH值为5．5；酶的pH稳定性和耐温性较好，在pH5．5，：50℃条件下保温8h，其相对酶活仍在83％以上；在pH值为5．5，60℃条件下水浴2h后，相对酶活为60％。不同金属盐对该酶酶活及不同氮源、碳源、温度、pH、含水量以及发酵时间对菌株产酶的影响试验结果表明：MnCl2，CuSO4均对该酶有激活作用，其他金属盐类对该酶有不同程度的抑制作用；添加黄豆粉（1％）和葡萄糖（1％）可使菌株产酶酶活分别提高71％和31％；培养温度为40℃以及培养基起始pH为7．0时产酶最高；含水量和发酵时间对产酶也有不同程度的影响。     

黑曲霉HU53菌株产酸性蛋白酶的条件和酶学性质

本文报道了黑曲霉（Aspergillus niger)HU53菌株产酸性蛋白酶的固体发酵条件优化和酶学特性的研究结果。适合该菌株的最佳固体发酵培养基为麦麸38．8％，豆粕9．7％，NH4NO31．5％和水50．0％，最佳起始pH5．5。在28℃下发酵50h后酸性蛋白酶的比活力达到93．8U／g，且在52h发酵期内基本不产孢子。该酸性蛋白酶的最佳反应酸碱度为pH3．0，最佳反应温度为50℃，对酪蛋白的Km为2．8016mg／ml，在40℃下保温180min后相对酶活力为93．50％。2．0mmol／L的Cu^2 和Mn^2 对该酸性蛋白酶具有极其显著的激活作用，相对酶活力分别为对照的171．9％和121．1％；而相同浓度的Fe^3 和Ca^2 则对其表现出强烈的抑制作用，相对酶活力分别仅为对照的62．5％和44．6％。     

Rhizopus oryzae产酸性蛋白酶条件及其酶学性质研究

本文以少孢根霉(Rhizopus oligosporus)为对照研究了豆豉中的一个分离菌株米根霉(Rhizopus oryzae)产生酸性蛋白酶的条件及所产蛋白酶的性质,结果表明这个菌株的产酶条件和蛋白酶的性质与少孢根霉相比有相似性但也存在一些差异:米根霉在水分含量57%~59%、pH2.5~3.0的酸性介质中、28~31℃下培养36h时产酸性蛋白酶能力最强,所分泌的蛋白酶系在pH4.0和pH6.0附近有最强的催化活性,在pH3.0~6.0的范围内有较好的稳定性,催化反应的最适作用温度为50℃,它的温度稳定性很差,在50℃保温30min已完全失活;少孢根霉在水分含量52%~55%、pH2.5~3.0的酸性介质中、31℃下培养48h时产酸性蛋白酶能力最强,在35℃条件下培养36h也能产生较高的酶活力,少孢根霉分泌的蛋白酶系在pH3.0和pH6.0附近有最强的催化活性,在pH4.0～6.0范围内很稳定,催化反应的最适作用温度可达55～60℃,但它的温度稳定性较差,在50℃保温30min,酶活力损失达到90%,保温120min酶几乎完全失活。     

产耐热蛋白酶乳酸菌的筛选、产酶条件及其酶学性质的研究

从内蒙古部分传统发酵乳样品以及酸菜汤中分离到105株乳酸菌,用检测蛋白酶产生水解圈和福林酚蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出一株耐热蛋白酶产生菌株WH29-3-1,该菌株经初步鉴定为Enterococcus faecium.同时,对其产酶条件及酶学性质进行研究.结果表明,菌株WH29-3-1是在以葡萄糖为碳源、蛋白胨 牛肉膏 酵母粉为氮源、碳氮比为0.8、pH7.0的最适产酶培养基中45℃、接种量为4%的条件下发酵培养30h,具有最大产酶量13.13U/ml.且K2HPO4、MgSO4有促进蛋白酶产生的作用.由菌株WH29-3-1产生的耐热蛋白酶的最适作用pH值为7,最适作用温度为50℃.结果表明,该菌是一株具有进一步改造利用价值的产蛋白酶菌株.     

产酸性蛋白酶菌株分子鉴定和酶学性质研究

本文采用透明水解圈法筛选到一株产酸性蛋白酶菌株PX8,以16S rDNA序列分析,确定其为Pectobacterium sp.菌株。通过改变酶促反应的pH、温度、金属离子和发酵时间等条件,采用正交实验分析了该菌株产酸性蛋白酶的特征。结果显示,在酶促反应液中Fe2+浓度为1.2mg/mL,反应温度为40℃,pH4,反应时间为10min时,酶活达到最大值34.625U/mL。      

纺织用酸性蛋白酶的性质及其在羊毛处理中的应用

以蛋白酶水解羊毛的能力来衡量自制酸性蛋白酶的活力，对自制酸性蛋白酶的性质及其在羊毛细化处理中的应用进行研究。发现所用酸性蛋白酶最适作用温度为40℃，最适作用pH值为3．0；一些金属离子在一定条件下可提高蛋白酶的活力，促进蛋白酶对羊毛纤维的减量细化．除温度、pH值外，酶用量、浴比、表面活性剂JFC的用量对蛋白酶水解羊毛的效果也有一定的影响。用所制得的酸性蛋白酶处理64支内蒙古羊毛的最佳条件为温度40℃，pH值3．0，酶用量4％，浴比1：25．JFC0．9％。     

章鱼肠道产蛋白酶菌的筛选、产酶条件及酶学性质

采用检测水解透明圈和测定蛋白酶活力的方法,从章鱼肠道中分离筛选出一株高产蛋白酶的菌株QDV-3,并对其产酶条件及酶学性质进行研究。结果表明:QDV-3菌株在以果糖为碳源,蛋白胨为氮源,培养基初始pH8.0,培养温度30℃的条件下振荡培养3.5d时,所产蛋白酶活力最高,Mn2+和Ba2+对菌株产蛋白酶有促进作用。所产蛋白酶在SDS-PAGE电泳上显示至少有5种蛋白酶,分子质量范围为32.4～124.2kD,蛋白酶的最适作用温度为50～60℃,最适作用pH值为9～11,在50℃条件下保温1h,剩余酶活力为95%,热稳定性较好。     

鱼露产蛋白酶菌产酶条件优化

从鱼露中筛选出高产蛋白菌株,研究不同发酵条件对产蛋白酶菌所产蛋白酶的酶活力的影响,以得到蛋白酶菌产酶的最佳发酵工艺条件。采用酪蛋白溶解圈法,从鱼露中筛选出活性较大的蛋白酶菌,以酶活力为指标,通过单因素试验和正交试验,研究该菌产蛋白酶的最佳发酵工艺。研究结果表明,鱼露中产蛋白酶菌最佳产酶条件为:碳源为葡萄糖,碳源添加量为1%,氮源为牛肉膏,温度为37℃,p H值为8,蛋白酶的酶活为(36.6±2.1)U/m L。     

黑曲霉酸性蛋白酶EXPA的克隆表达与酶学性质解析

酸性蛋白酶在食品、酿造、饲料和皮革等行业具有重要的应用价值。然而,现有的酸性蛋白酶在50℃以上或pH 3. 0时不稳定,限制了其应用范围。该研究通过分子克隆技术将黑曲霉CICIM F0510的酸性蛋白酶基因exp A在毕赤酵母中进行了克隆表达,构建获得了重组菌GS115 (p PIC-expA)。摇瓶发酵条件下,重组酶EXPA的酶活为257 380 RFU/h。生物信息学分析的结果显示,该酶属于天冬氨酸蛋白酶A1A家族。酶学性质的研究表明,该重组酶的最适反应温度和pH分别为50℃和3. 0;分别在40～50℃或pH 2. 5～3. 5孵育1 h后,仍能保留80%左右的活力。Zn~(2+)、Ca~(2+)、Fe~(2+)和Mn~(2+)对其活性有一定的促进作用;而Cu~(2+)、Co~(2+)、Fe~(3+)、EDTA和SDS则对其活性有显著的抑制作用。此外,重组酶EXPA对大豆分离蛋白、水溶性玉米蛋白和小麦水解蛋白均具有较好的水解作用。较好的耐热性和pH稳定性为EXPA在食品、饲料等领域的应用奠定了基础。     

柠檬酸沉淀法提取生姜蛋白酶的工艺优化

目的对柠檬酸沉淀法提取生姜蛋白酶的工艺进行优化,并确立最佳酶反应条件。方法采用柠檬酸沉淀法提取姜汁中生姜蛋白酶,比较加入不同浓度柠檬酸反应后的酶活力值;在不同pH缓冲液、底物浓度和温度条件下测定酶比活力,并确定最佳酶反应条件。结果柠檬酸浓度为20 mmol/L时,酶活力最高,为353.153 U。最佳酶反应条件如下:反应底物浓度为1%,反应温度60℃,反应pH值为5。结论柠檬酸沉淀法操作简单、提取效率高,通过生姜蛋白酶酶促反应的条件优化,可以实现生姜蛋白酶酶活的快速测定。     

扩展青霉侵染柑橘机制分析

从细胞壁降解酶的角度利用转录组技术分析扩展青霉（Penicillium expansum）侵染柑橘的机制。P. expansum H1在改良的Marcus培养基和柑橘体内均可以产生细胞壁降解酶聚半乳糖醛酸酶、果胶甲基半乳糖醛酸酶、内切β-1,4-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶。同时,与P. expansum H1侵染柑橘相关的基因表达量均上调,如与细胞壁降解相关的基因、与桔霉素产生相关的基因、与宿主pH值改变相关的基因、与抗氧化应激反应相关及与效应因子相关的基因。结果表明：在P. expansum H1侵染柑橘的过程中,细胞壁降解酶、桔霉素、pH值、抗氧化酶等均起到重要的作用。     

影响生姜蛋白酶稳定性因素的探讨

生姜蛋白酶作为一种重要的植物蛋白酶在食品工业中有广泛的应用,实验研究了金属离子、巯基试剂、抗氧化剂、螯合剂、食品加工试剂对生姜蛋白酶稳定性的影响。结果表明:KCl,MnCl2,FeCl2,巯基乙醇、异抗坏血酸钠、EDTA二钠、蔗糖、NaCl对生姜蛋白酶有激活作用,尤其较低浓度的FeCl2对酶就有很强的激活作用,ZnSO4、CuSO4可抑制其活性。     

不同染化药剂对蛋白酶YL-1活力的影响

在蛋白酶YL-1稀释液中添加不同的染化药剂，按照蛋白酶活力的测试方法进行测试，比较不同药剂对该酶活力的影响结果表明，适量的非离子表面活性剂平平加O对蛋白酶YL-1的活力有明显的增强作用；亚硫酸钠对酶的活力也有提升作用．     

用于羊毛细化的酸性蛋白酶产生菌的选育

利用紫外线和亚硝酸对黑曲霉进行联合诱变，使用自制的培养基筛选出7株对羊毛细化具有效果的菌株，又通过摇瓶复筛出1株对羊毛细化具有明显效果的菌株。同时设计了1种以羊毛作为底物的酶活力的测定方法，用这种测定方法，筛选出的菌株的最高产酶活力可以达到620μg／ml。     

哈尔滨地区生鲜牛乳中嗜冷菌数量与蛋白酶酶活力关系的测定

对嗜冷菌产生的蛋白酶的活性进行了研究。原料生奶经过4℃贮藏,在贮藏0,12,20,28,36,44,48,52 h分别对牛奶取样测定嗜冷菌数量和其酶的活力,实验结果表明,在4℃下贮存44~48 h时嗜冷菌数量最多,蛋白酶活力最强。     

枯草芽孢杆菌中性蛋白酶的研究进展

中性蛋白酶因作用条件温和广泛应用于食品、医药以及饲料等领域。枯草芽孢杆菌为肠道益生菌,且具有较强的蛋白酶活性 而受到极大关注。该文对枯草芽孢杆菌中性蛋白酶的特性与应用、提高枯草芽孢杆菌中性蛋白酶活力的途径以及枯草芽孢杆菌中性 蛋白酶的分离纯化方法进行了综述,并对存在的问题进行了分析与展望,旨在为枯草芽孢杆菌产中性蛋白酶的深入研究提供参考。