鲫鱼乙酰胆碱酯酶性质及对有机磷农药的敏感性研究

以鲫鱼为原料,分别提取鱼脑、肌肉和肝脏乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,ACh E),研究其酶学性质及对有机磷农药的敏感性。结果表明,鲫鱼脑ACh E最适反应温度为30℃,最适p H为8.0,米氏常数(Michaelis constant,Km)为0.548 mmol/L;鲫鱼肌肉ACh E最适反应温度为35℃,最适p H为7.5,Km为1.75 mmol/L;鲫鱼肝脏ACh E最适反应温度为30℃,最适p H为8.0,Km为0.406 mmol/L。敌敌畏对鱼脑、肌肉和肝脏ACh E的半数抑制质量浓度(50%inhibition concentration,IC50)分别为1.70,3.55和4.52μg/m L,双分子速率常数(bimolecular rate constant,Ki)分别为7.40、7.21、5.94 L/mg·min;辛硫磷对鱼脑、肌肉和肝脏ACh E的IC50分别为2.45,4.05和9.46μg/m L,Ki分别为10.54,10.11和8.32 L/mg·min;毒死蜱对鱼脑、肌肉和肝脏ACh E的IC50分别为10.89、14.33和17.00μg/m L,Ki分别为7.81,6.85和4.99 L/mg·min。鲫鱼脑ACh E对常用有机磷农药表现出了较强的敏感性,可作为环境中有机磷农药残留监测的指示酶。     

鲫鱼脑乙酰胆碱酯酶（ACHE）的活性测定及对有机磷农药的敏感性研究

提取不同生长期的鲫鱼脑中乙酰胆碱酶（acetylcholinesterase，AChE）并做比较，以Ellman法测定其酶活。并用正交试验方法确定了最佳测定条件。采用体外实验法研究了在最佳条件下鲫鱼脑AChE对三种有机磷农药的敏感性。研究结果表明，以体长12cm左右的鲫鱼体内AChE活性最高，正交试验得出AChE最佳测定条件组合为：酶的剂量为40μl、底物最终浓度为120mmol／L、pH值7．5、温度35℃；时间15min。鲫鱼脑AChE对农药的敏感性为敌敌畏〉辛硫磷〉乐果。     

自制乙酰胆碱酯酶膜对有机磷农药残留的检测研究

首次以自行制备的壳聚糖-乙酰胆碱酯酶膜分别检测了乐果、甲胺磷、敌百虫、敌敌畏、甲基对硫磷5种有机磷农药,发现酶膜对不同类型的有机磷农药的敏感性差异很大,对甲基对硫磷最为敏感,其pI 50为5.57左右,对其他四种农药较不敏感,其pI 50为4左右。以酶活力抑制率20%为农药检出标准,甲基对硫磷与甲胺磷的检出限分别为0.4ppm和1.5 ppm,基本达到实际检测要求。     

小麦酯酶提取及其对有机磷农药检测初探

研究从小麦面粉提取小麦酯酶提取条件及其粗酶液对4种有机磷农药最低检测限和灵敏度。运用单因素实验和正交实验对小麦酯酶提取条件进行优化,确定适宜提取条件,提取液为0.15 mol/L NaCl溶液、料液比1∶4、40℃振荡提取60 min,提取粗酶液酶活为1.675 U/mL;并确定粗酶液对敌敌畏、敌百虫、乐果和毒死蜱等4种有机磷农药最低检测限分别为0.05 mg/kg、0.04 mg/kg、0.05 mg/kg和0.07 mg/kg,均低于国家规定农药最大残留量,且粗酶液对敌敌畏灵敏度最佳。     

酶抑制法检测蔬菜中有机磷农药残留

对酶抑制法快速检测有机磷农药残留进行研究.以鲫鱼脑、肝脏和肌肉乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)为检测用酶,对5种蔬菜中有机磷农药残留进行检测.根据AChE酶活抑制率和农药抑制方程,判断农药残留情况.当AChE酶活抑制率大于35%时,可判断该样品中农药残留超标.结果表明,试验中5种蔬菜样品农药残留均未超标.除豆角外,该方法的回收率均在80%～120%之间,表明该方法的检测结果准确可靠.     

用于有机磷农药残留快速检测的固定化小麦酯酶研究

以大孔径强碱性阴离子交换树脂作为固定化载体，采用离子结合法，对植物粗酶液进行固定化。在室温及酶液对载体比例为4(ml)：1(g)的条件下，对酶固定化的环境pH值、缓冲液浓度及固定化特性进行了研究。得到的固定化酶对l0^-7mol/L水平下敌敌畏的抑制仍有明显的响应，这一效果明显优于游离酶的抑制响应。     

聚硫堇修饰的有机磷农药生物传感器的研制

研制了一种用于蔬菜中有机磷农药残留快速检测的电化学酶传感器。通过循环伏安法将电子媒介体硫堇电聚合在玻碳电极上作为电子传递体,用壳聚糖凝胶将乙酰胆碱酯酶固定于聚硫堇电极表面,制成了新型的有机磷农药生物传感器。结果表明在有机磷农药乐果浓度为0.1~60μg/mL范围内,酶电极抑制率(%)与乐果的浓度(C)的对数呈良好的线性关系,相关系数为0.9961,检出限以抑制率10%的农药浓度计算为0.05μg/mL。     

乙酰胆碱酯酶在有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测中的应用

为满足食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药的快速检测，研究采用酶抑制显色方法，应用自制的乙酰胆碱酯酶制成农药快速检测试剂盒检测有机磷和氨基甲酸酯类农药，检测灵敏度在0．001mg／kg-0．1mg／kg范围。试剂盒为现场检测这两类农药提供了简便而快捷的方法。     

基于MnO2纳米片类氧化酶特性的有机磷农药荧光分析方法建立

利用MnO2纳米片类氧化酶特性并结合有机磷农药的酶抑制原理,构建一种快速、简便、高灵敏有机磷农药荧光分析方法.通过测定反应体系荧光强度前后的变化,可以检测样品中有机磷农药的含量.通过优化酶浓度、底物浓度和反应时间,发现乙酰胆碱酯酶浓度为9.375 U/L,底物浓度为10mmol/L,反应时间为11 min时,该荧光分析...     

臭氧对有机磷农药残留降解效果及检测方法的研究

实验采用臭氧对敌敌畏、甲胺磷、久效磷、乙基对硫磷四种有机磷农药残留进行降解,并分别采用了酶抑制法和气相色谱法对其降解效果进行检测。结果表明,一定浓度的臭氧,作用不同时间,对上述四种有机磷农药残留均有不同程度的降解作用,作用10min即可达到较为理想的降解效果。其中,对甲胺磷降解作用最强为81.72%,敌敌畏57.86%、乙基对硫磷56.78%、久效磷47.53%。      

臭氧水降解苹果表面有机磷农药的研究

有机磷农药残留超标是制约我国浓缩苹果汁出口的一大瓶颈。文中建立了苹果表面有机磷农药降解模拟体系,比较了在不同清洗方式和起始浓度下,臭氧水对苹果中常见的甲胺磷、甲拌磷、乐果、二螓磷、马拉硫磷、毒死蜱等6种有机磷农药的降解效果。结果表明,臭氧水能有效降解苹果表面的有机磷农药残留。臭氧浓度越高,有机磷农药的降解效果越好；苹果表面有机磷农药起始浓度越低,农药残留的降解率越高。当苹果表面有机磷农药起始浓度为1～2 mg/kg 时,用浓度为14 mg/L 的臭氧水溶液动态清洗20 min,6种有机磷农药的降解效果可达35%～64%。     

电位法快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药灵敏度的研究

以黄豆中提取的植物酯酶为检测用酶,根据酶抑制反应前后ΔpH变化,建立了电位法快速检测有机磷及氨基甲酸酯类农药残留的方法。测定了20种有机磷及9种氨基甲酸酯类农药的灵敏度,经与国家规定的最大残留限量(MRL)相比较,有28种农药的最低检测限(LDC)可达到MRL限值要求。     

猪腰豆幼苗中乙酰胆碱酯酶和酯酶活性及其对农药的敏感性

选取猪腰豆为研究对象,测定不同时期、不同部位猪腰豆幼苗中乙酰胆碱酯酶(AchE)和酯酶活性,选取活性最高的部位提取酶,分别检测其对有机磷及氨基甲酸酯类农药的灵敏性,确定最低检测限。结果表明：AChE在6d子叶中比活力最高为0.969U/mg;酯酶活力在2d幼芽中最高为1.9433U/mL;AChE对农药反应的灵敏性高于酯酶,对敌敌畏、氧化乐果、灭多威的最低检测限分别为0.025、0.07、0.07mg/kg,低于国家规定的允许残留限量,可以满足农药残留快速检测的要求。     

气相色谱-负化学离子化-质谱法同时分析果蔬中9种有机磷农药残留

建立同时分析果蔬中多种有机磷农药残留。果蔬样品经乙酸乙酯提取剂提取与Florisil硅藻土层析柱净化后,以乙硫磷为内标物,采用气相色谱-负化学离子化-质谱法同时的选择离子监测方式对多种有机磷农药残留进行定性与定量分析。结果表明：此方法快速、简便、灵敏度高和选择性好;9种有机磷农药残留的检测限为0.12～1.21μg/kg,平均回收率为76.5%～112%,相对标准偏差为1.45%～11.0%。     

鸡肝酯酶在有机磷和氨基甲酸酯类农药检测中的应用研究

利用农药对酯酶活力的抑制反应,分别采用游离的和固定化的鸡肝酯酶,对不同浓度的敌敌畏、敌百虫、马拉硫磷和西维因进行了测定。结果发现,在低浓度时,农药浓度的对数值与其对应的酶活抑制率之间具有较好的线性关系;并且与游离鸡肝酯酶相比,固定化酶不同程度地降低了对农药检测的下限值。敌敌畏、马拉硫磷和西维因的检测下限值依次从游离酶检测时的0．001、4．34和2．52mg/L,降低到了用固定化酶检测时的0．00004、0．0004和0．78mg/L。固定化的鸡肝酯酶对敌百虫的检测下限改善不大。     

乙酰胆碱酯酶生物传感器及其研究进展

本实验介绍了乙酰胆碱酯酶生物传感器的基本原理,组成与分类。重点介绍了近年来国内外乙酰胆碱酯酶固定化技术和乙酰胆碱酯酶生物传感器研究进展,并分析了未来乙酰胆碱酯酶生物传感器的发展趋势。     

超声波提取-气相色谱法测定食品包装材料中的有机磷酸酯

建立了食品包装材料中三（1,3-二氯丙基）磷酸酯、磷酸三氯丙酯2种有机磷酸酯含量测定的气相色谱检测方法。对前处理过程中超声波萃取条件进行优化：选择丙酮为萃取溶剂,用量为20mL,萃取时间为30min。试验结果表明：2种有机磷酸酯的线性范围为0．1～50mg/L,检出限为0．04mg/kg,方法的加标回收率为89．2％～96．2％,相对标准偏差为2．62％～4．78％。     

娃娃菜农残消降组合方法及对品质的影响

以娃娃菜为试验对象,研究了有机磷水解酶、吐温、臭氧3种处理方法及其两两组合方法对蔬菜中7种有机磷农药残留的消降效果及对蔬菜营养、色泽和质地的影响。结果表明:6种消降方法都能有效降解娃娃菜表面的残留农药,吐温+臭氧、吐温+酶制剂组合方法较单一消降方法有明显的增效作用。吐温+臭氧组合处理消降率达65%～81%,吐温+酶制剂组合处理敌敌畏、毒死蜱、马拉硫磷、甲基对硫磷的消降率达65%～99%,但对甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧乐果等内吸性农药的消降率只有40%。蔬菜经消降技术处理后,L*值、a*值、b*值与对照相比没有明显差异,还原型Vc仍保留在80%以上,且能保持其固有的感官质量要求。