鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301发酵乳改善大鼠非酒精性脂肪肝特性研究

前期体外试验发现,鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301经长时间发酵(72 h)可提升其益生特性;本文在前期研究的基础上,通过体内动物试验进一步验证鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301长时发酵乳(72 h)与常规时间发酵乳(17 h)干预对非酒精性脂肪肝大鼠的益生作用;并测定了大鼠血清中血脂指标、游离脂肪酸、活性氧及炎症因子等含量。研究结果表明:72 h发酵乳干预后,大鼠血清中TC、TG以及LDL-L含量分别为2.06 mmol/L、1.47 mmol/L、1.03 mmol/L,显著低于模型组(P0.05),HDL-L含量为0.60 mmol/L,显著高于模型组(P0.05);17 h发酵乳组和72 h发酵乳组两者之间含量无显著性差异(P0.05);17 h发酵乳组和72 h发酵乳组还显著降低了大鼠血清中游离脂肪酸、活性氧、TNF-α和IL-6的含量,其中,72 h发酵乳分别为1188.68 U/L、339.88 U/mL、143.11 pg/mL及112.37 pg/mL,显著低于17 h发酵乳(P0.05)。综上,鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301发酵乳对大鼠的非酒精性脂肪肝具有良好的改善作用,其中72 h发酵乳具有更好地抗炎、抗氧化特性,为进一步研究鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301发酵乳益生特性提供指导意义。     

鼠李糖乳杆菌改善慢性酒精性肝损伤的机制

来源于肠道内革兰氏阴性细菌细胞壁的内毒素是促成慢性酒精性肝损伤的关键因素之一。益生菌已成功用于处理酒精引起的与消化道泄露和内毒素增加相关的动物肝损伤模型及患者。其机制目前不明确。为探讨其机制,对C57BJ/6N小鼠用含5%酒精的Lieberde Carli饲料饲喂8周,在最后2周添加鼠李糖乳杆菌(B10)发酵液,结果 B10发酵液修复了酒精引起的肠道通透性的显著增加,显著降低了酒精引起的肝脏脂肪积累和转氨酶增加。在酒精性肝损伤小鼠模型中,酒精引起小鼠肠道缺氧诱导因子(HIF)表达及其靶向蛋白(小肠屏障保护蛋白三叶草因子ITF、黏液素MUC1和p-糖蛋白等)表达明显下降,B10发酵液可显著提高HIF及其靶向蛋白ITF、MUC1和p-糖蛋白等表达。结论 :B10发酵液的积极作用与HIF有直接的关系,B10发酵液作用缺氧诱导因子,修复酒精引起的小肠屏障保护因子表达降低,对改善酒精性肝损伤起到关键作用。     

鼠李糖乳杆菌LGG在Cottage干酪中的应用

采用两种方式添加鼠李糖乳杆菌LGG制作益生菌Cottage干酪,即与发酵剂同时添加和堆积前添加到凝乳中,对其4℃贮藏期间的组成成分,乳酸菌总数和LGG菌数变化,蛋白水解程度,质构及感官特性进行比较分析,确定LGG的添加方式为与发酵剂同时加入,在干酪贮藏期间可保持较高数量(107 CFU/g),并能加速干酪中蛋白质次级水解,对干酪质构和感官特性无负面影响,此研究为开发益生菌干酪奠定基础。     

鼠李糖乳杆菌B10通过抗氧化途径改善酒精性肝损伤的研究

旨在探讨鼠李糖乳杆菌B10对小鼠酒精性肝损伤的改善作用。采用C57BL/6N小鼠,随机分为对照组、酒精组和鼠李糖乳杆菌B10干预组。8周后,下腔静脉取血,分析血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、脂多糖(LPS)、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。取肝脏进行HE染色和ROS染色,观察肝脏组织病理学变化及氧化损伤的程度,分析肝脏中游离脂肪酸(FFA)、甘油三酯(TG)及胆固醇含量。结果表明:鼠李糖乳杆菌B10显著降低了酒精引起的肝脏脂肪变性及氧化损伤程度(P<0.05),明显降低了酒精引起的小鼠血清中ALT、LPS和MDA含量(P<0.05)的升高,使SOD活性显著升高(P<0.05);明显降低了酒精引起的小鼠肝脏游离脂肪酸(FFA)、TG及胆固醇含量升高(P<0.05)。提示鼠李糖乳杆菌B10通过抗氧化途径能够减低酒精对小鼠肝脏氧化损伤达到修复酒精性肝损伤的作用。     

鼠李糖乳杆菌(LGG)的功能特性及其应用前景

鼠李糖乳杆菌LGG(Lactobacillus rhamnosus GG,ATCC 53103)是目前最受全球关注的益生菌之一。该菌能够耐受动物消化道环境,具有能够在人和动物肠道内定植,起到调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、排除毒素、预防龋齿和提高机体免疫力等功能特性。     

发酵乳杆菌发酵人参缓解酒精性脂肪肝损伤的研究

酒精性脂肪肝损伤由酒精过度摄入所致,为人类的健康带来严重的风险,且治疗方法有限。研究表明,人参具有缓解酒精性脂肪肝损伤的功能,且经微生物发酵后具有高生物活性的稀有皂苷含量增加,提高人参生理药理活性。试验用发酵乳杆菌KP-3发酵人参,探究其对酒精性脂肪肝损伤小鼠的缓解作用。发酵人参干预酒精饮食小鼠2周后,小鼠肝脏脂肪堆积减少,血清和肝脏中的甘油三酯和低密度脂蛋白水平显著下降;肝脏及血清中氨基转移酶水平下降。此外,酒精性脂肪肝病患者常伴随着肠道微生物的失调,发酵人参干预后,小鼠肠道中益生菌数量增加,有害菌数量减少。结果表明,发酵乳杆菌KP-3发酵人参能够通过抑制肝脏炎症反应、改善肝脏脂肪堆积和调整肠道微生物,有效缓解酒精性脂肪肝损伤。     

鼠李糖乳杆菌LGG芳香酯酶的酶学表征与结构分析

为获得新型益生菌酯酶资源,通过挖掘鼠李糖乳杆菌（Lacticaseibacillus rhamnosus GG,LGG）的基因组信息,对芳香酯酶LggAE进行基因克隆、表达纯化、酶学表征与结构分析。结果表明：LggAE的最适反应pH值为7.5,在pH 7.0～10.0范围内保持75%以上酶活力,最适反应温度为50℃,偏好水解中链对硝基苯酚酯,最适底物为对硝基苯酚辛酸酯,在40℃条件下具有一定热稳定性,乙二醇可提升LggAE 17.3%酶活力,LggAE耐受二甲基亚砜,在较高盐浓度柠檬酸钠和氯化钠存在下能保持39.1%～71.0%酶活力,脱氧胆酸钠在高温下显著抑制酶活力。结构分析显示LggAE的底物结合口袋呈较小孔洞状,主要由脂肪族氨基酸残基构成。     

鼠李糖乳杆菌B10上清液改善酒精所致Caco-2细胞层屏障功能紊乱的机制

研究表明,来源于肠道内G-细菌细胞壁的内毒素是促成酒精性肝损伤的关键因素之一。益生菌已成功用于处理酒精引起的与消化道泄露和内毒素增加相关的动物肝损伤模型及患者,然而其机制还不明确。以Caco-2细胞为对象,体外研究表明,通过添加鼠李糖乳杆菌B10上清液,阻止了酒精引起的上皮单层功能紊乱。采用Si RNA干扰沉默Caco-2细胞HIF-1α/2α基因,B10上清液改善酒精引起的屏障功能紊乱作用不复存在。该结果表明:B10的积极作用与HIF有直接的关系,其作用可能是上清液中的成分通过调节缺氧诱导因子上调了肠道保护因子表达,修复酒精所致肠道屏障功能紊乱。     

鼠李糖乳杆菌的培养上清液对几个致病菌和腐败菌的抑菌作用研究

研究了Lactobacillus rhamnosus6013菌在MRS中的最佳培养条件，再用琼脂杯扩散法研究该条件下的培养上清液对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、沙门氏菌、大肠杆菌和EHEC0157的抑菌作用，发现该菌的最佳培养条件为37℃，厌氧培养48h，该培养上清液对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、沙门氏菌有良好的抑菌作用。通过HPLC分析得知，乳酸含量高达4．38g/100mL，该浓度的乳酸溶液对金黄色葡萄球菌有很好的抑菌效果。抑菌效果受1mol／L的NaOH溶液，胰蛋白酶，胃蛋白酶处理的影响，表明发酵上清液的抑菌效果可能是乳酸和蛋白质类物质的综合作用。     

鼠李糖乳杆菌电转化条件的研究

目的:研究不同因素对鼠李糖乳杆菌电转化效率的影响,探讨电转化的最适条件,提高电转化效率。方法:以鼠李糖乳杆菌05-28为受体菌株,大肠杆菌-乳酸菌穿梭型质粒p MG36e为载体,通过原生质体电转化的方法研究了质粒浓度、电击缓冲液、电转化参数、复苏培养基组成及复苏培养时间对电转化效率的影响。结果:利用1μL质量浓度为1μg/μL的质粒p MG36e,在电场强度8 k V/cm,电阻200Ω,电容25μF的条件下进行电击转化,以含有0.5 mol/L蔗糖和20 mmol/L的MgCl_2、CaCl_2且无吐温80的MRS再生培养基复苏培养2.5 h,并采用添加红霉素的筛选培养基,获得1.66×105CFU/μg DNA的电转化效率。结论 :实现了鼠李糖乳杆菌的高效遗传转化,为遗传育种提供了技术支持。     

鼠李糖乳杆菌冻干保护剂的研究

以菌种冻干后存活率为指标,研究糖类、蛋白质类、多元醇类对鼠李糖乳杆菌的冻干保护作用。实验结果表明,在脱脂乳、甘油、海藻糖、蔗糖、葡萄糖、乳糖、糊精、抗坏血酸、谷氨酸钠、麦芽糖10种物质中保护效果较好的物质分别为脱脂乳、海藻糖、甘油。将它们确定为单因素进行响应面分析,响应面优化结果为:脱脂乳11.12%、海藻糖4.87、甘油2.96%。菌种冻干后的细胞成活率能达到96.48%±1.27%,与理论预测值接近。     

鼠李糖乳杆菌乳饮料发酵工艺

对无稳定剂鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnose发酵乳饮料的发酵工艺进行优化。以L.rhamnose在不同碳源培养基中的发酵速度为评价指标,筛选出葡萄糖是其发酵的最适碳源。发酵时间、杀菌条件、发酵温度对发酵乳饮料的活菌数及沉淀率均有明显的影响。优化工艺参数为:杀菌条件115℃,15 min,发酵温度为37℃,发酵时间为84 h,按照此工艺制得的发酵乳饮料,活菌数达到8.5×108CFU/m L,沉淀率为1.1%。     

鼠李糖乳杆菌燕麦益生乳的研制

探讨了以燕麦和脱脂奶粉为主要原料,燕麦经双酶水解所得的糖化液,配以脱脂奶粉,经杀菌冷却,以鼠李糖乳杆菌为发酵剂,接种发酵而成的含有活性成分且具有保健功能的生物乳,它的活性多糖β-葡聚糖量为236mg/L,酸度为108°T,活菌数高达1010cuf/ml。      

鼠李糖乳杆菌乳酸发酵动力学的研究

鼠李糖乳杆菌是一类重要的L-乳酸生产菌,研究其发酵条件及其动力学对发酵工艺及其过程控制具有重要意义.本文针对鼠李糖乳杆菌1.549,通过摇瓶悬浮试验确定其最佳培养条件及发酵培养基组成.在此基础上,研究初始葡萄糖浓度和产物乳酸的积累对发酵过程的影响,建立发酵动力学模型.结果表明,鼠李糖乳杆菌1.549摇瓶发酵最佳培养条件:温度34℃,种龄8 h,接种量5%.由正交试验确定的摇瓶最佳发酵培养基组成:酪蛋白胨15 g/L,酵母膏4 g/L,葡萄糖50 g/L,柠檬酸二铵1 g/L,K2HPO4 2 g,L,乙酸钠2 g/L,MgSO4 0.3g/L,MnSO4·H2O 0.03 g/L,FeSO4·7H2O 0.03 g/L.鼠李糖乳杆菌利用葡萄糖L-乳酸发酵动力学模型结果与本试验结果吻合较好,其乳酸发酵机制属部分生长耦联型.动力学参数揭示,高浓度的初始葡萄糖底物和乳酸的积累对发酵的影响在于其对细胞生长的抑制.     

鼠李糖乳杆菌耐酸及胆盐能力研究

本实验对来源于婴儿粪便鼠李糖乳杆菌进行耐酸、耐胆盐能力表征及模拟胃液和模拟肠液实验。结果获得鼠李糖乳杆菌菌株B在pH1.8条件下,维持2h,活菌数达到107CFU/ml以上;在pH值为2.2以上的培养基中生长良好,而且随着时间的延长菌株的数量增加。在胆盐浓度在0.5%以下的MRS-broth培养基中鼠李糖乳杆菌B菌株维持4h,活菌数均达到108CFU/ml以上,而且随着时间的延长活菌数均有所增加。模拟胃液和模拟肠液实验结果表明该菌株能够有效通过胃环境,并能在肠道中繁殖。结果可见,鼠李糖乳杆菌B具有较强的酸的胆盐的耐受能力,符合微生态制剂和乳酸菌发酵功能食品菌种的要求。     

鼠李糖乳杆菌降解亚硝酸盐影响因素研究

该试验研究鼠李糖乳杆菌降解亚硝酸盐的影响因素.研究发现,鼠李糖乳杆菌降解亚硝酸盐的最适pH值是5.0～6.0,最适温度是40℃;培养基中碳源、氮源、酵母膏、金属离子成分分别为2%葡萄糖、0.5%大豆蛋白胨、0.4%酵母膏;添加Fe2+、Fe3+、Cu2+的亚硝酸盐降解效果明显;最适接种量3%;最适培养方式为动态培养.     

鼠李糖乳杆菌hsryfm 1301发酵乳在非酒精性脂肪肝细胞模型中对人肝细胞L-02的益生作用

建立由游离脂肪酸(free fat acid,FFA)诱导的体外人肝细胞L-02非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fat-ty liver disease,NAFLD)模型,探究益生菌发酵乳在模型中对人肝细胞的益生作用.利用FFA(油酸:棕榈酸=2:1,摩尔比)诱导人肝细胞脂肪变性,通过细胞存活率、胞内甘油...     

鼠李糖乳杆菌发酵及冻干保护的研究

对鼠李糖乳杆菌发酵性能和冷冻干燥存活率与保护剂、发酵时间和温度的关系进行了研究。利用液体发酵、紫外分光测量法、微量活菌计数法进行培养、测量。结果表明，鼠李糖乳杆菌发酵周期为12－16h；乳清粉和双歧因子对鼠李糖乳杆菌发酵产酸性能和细菌总数有定的影响。正交实验结果表明，10％乳清粉，15％脱脂奶粉，16h发酵时间的组合，冷冻干燥后存活的影响无显著性差异。结论：乳清粉和双歧因子在发酵后期会对鼠李糖乳杆菌的生长和发酵有促进作用可能是含糖量较高的原因。在冻干时，蛋白质（特别是酪蛋白）对细菌有保护作用。     

鼠李糖乳杆菌发酵大豆酸乳工艺优化研究

以大豆为主要原料,将鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)进行活化、驯化与保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)按一定比例混合制备发酵剂,通过单因素实验和正交实验优化确定酸豆乳发酵的生产工艺。结果通过单因素实验确定上述三个菌种按1∶0.5∶1混合作为工作发酵剂;正交实验研究结果表明影响豆乳发酵的显著因素依次为料水比、接种量、发酵时间和蔗糖添加量,最佳条件是:接种量为5%,磨制豆浆料水比为1∶8,蔗糖添加量为8%,在43℃条件下发酵5h,该条件下生产的酸豆乳,具有浓郁的风味和细腻酸甜的口感。      

干酪乳杆菌鼠李糖亚种冻干保护剂的研究

以存活率为指标,对干酪乳杆菌鼠李糖亚种(Lactobacillus casei subsp.rhamnosus 719)的菌体进行冻干保护研究,通过优化冻干保护剂,以降低冻干过程中的细胞损伤.结果表明,7种保护剂中,保护效果由大到小依次为海藻糖、脱脂奶粉、蔗糖、甘油、可溶性淀粉、硫酸锰、抗坏血酸;复配则以质量分数10%海藻糖+10%脱脂奶粉的组合为最佳,其菌体存活率达100%,冻干菌粉活菌数达1011 g-1.