双歧杆菌菊芋复合汁增菌培养基的优化筛选

以菊芋为主要原料,以两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidus,Bbm)和长双歧杆菌(Bifidobacteriu.longum,Blm)为试验菌株,研究了菊芋汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm细胞生长量的影响.利用正交试验优化筛选出Bbm菊芋复合汁增菌培养基;利用优选的菊芋复合汁增菌培养基对Blm进行验证性增菌试验.结果表明大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进Bbm的细胞增殖(P＜0.01),而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长,又有缓冲培养基pH值的作用;利用L934筛选出Bbm菊芋复合汁增菌培养基的最佳配比是在10 Brix菊芋汁中添加0.6%大豆蛋白胨、0.9%牛肉浸膏、0.3%酵母膏、0.4%玉米浆、0.2%磷酸氢二钾.在菊芋复合汁增菌培养基中,经37℃培养12 h,Bbm活菌数6.80×109 cfu/mL,Blm活菌数6.65×109 cfu/mL,较时照菊芋汁培养基的活菌数分别提高了13.5倍和7.63倍;较实验室常用的改良MRS培养基的成本降低了2770元/t.     

保加利亚乳杆菌菊芋复合汁增菌培养基的优化筛选

以菊芋为主要原料,以自行分离选育的高活力保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)L.b-DR为试验菌株,研究了在菊芋汁培养基中添加单一营养因子对保加利亚乳杆菌L.b-DR细胞生长量的影响;利用正交试验优化筛选出保加利亚乳杆菌L.b-DR的菊芋复合汁增菌培养基。试验结果表明:在菊芋汁基础培养基中添加番茄汁、乳糖、蛋白胨、碳酸钙,可显著促进试验菌株的细胞生长(P<0.01);利用L934正交试验筛选出菊芋复合汁增菌培养基的最佳配比是:在菊芋汁培养基中添加7.5%番茄汁,1.5%乳糖,1%蛋白胨,0.3%碳酸钙。保加利亚乳杆菌L.b-DR经过复原脱脂乳培养基和液体MRS培养基活化后,以1%(约1×106cfu/mL)接入菊芋汁复合增菌培养基中,37℃培养16h,活菌数可达1.50×109cfu/mL,较对照菊芋汁培养基的活菌数提高23.96倍,与实验室常用的MRS培养基的活菌数相当,而其成本较实验室常用的液体MRS培养基的成本降低了2400元/t。     

双歧杆菌麦芽复合汁增菌培养基优选的研究

选择麦芽汁为主要原料，以两歧双歧杆菌Bbm和长双歧杆菌Blm为实验菌株，研究了麦芽汁基础培养基中添加单一营养因子对Bbm菌细胞生长量的影响，进一步利用正交试验优化筛选出Bbm菌麦芽复合汁增菌培养基；利用优选的麦芽复合汁增菌培养基对Blm菌进行验证性增菌试验。结果表明：大豆蛋白胨、牛肉浸膏、酵母膏、玉米浆可显著促进双歧杆菌Bbm的细胞增殖（p〈0．01），而磷酸氢二钾既能促进Bbm生长，又有缓冲培养基pH值的作用；利用L9（3^4）筛选出Bbm的麦芽复合汁增菌培养基的最佳配比为：在10°麦芽汁中添加0．3％大豆蛋白胨，0．6％牛肉浸膏，0．5％酵母膏，0．4％玉米浆，0．2％磷酸氢二钾，在麦芽复合汁增菌培养基中，经37℃培养12h，Bbm活菌数3．84×109CFU/ml，Blm活菌数达到3．90×109CFU／ml，较对照麦芽汁培养基的活菌数分别提高了8．17倍和8．14倍，较实验室常用的改良MRS培养基的成本降低1000元/吨。     

冻干保加利亚乳杆菌增菌培养基的筛选

本文采用正交实验对冻干保加利亚乳杆菌的增菌培养基进行了筛选,研究了保加利亚乳杆菌在增菌培养基中的活菌数及菌活力,以寻找冻干保加利亚乳杆菌发酵的最适收获期。结果表明:冻干保加利亚乳杆菌的增菌培养基为:MRS基础培养基、麦芽汁体积分数为10%、番茄汁体积分数10%、CaCO3的质量分数为0.05%、乳糖的质量分数为1.0%。保加利亚乳杆菌的最适收获期为发酵18h,此时为对数生长期后期,活菌数为3.96×1011cfu/g,OD值为0.922,菌活力为500T、pH4.46。增菌培养基增菌效果明显,经增菌培养基培养所得活菌数是基础培养基的202倍,且菌活力也较基础培养基强,OD值和滴定酸度分别是基础培养基的5.6倍和1.3倍。     

嗜酸乳杆菌的筛选及培养基的优化

通过模拟正常人体胃内状态,筛选出10株耐酸耐胆盐的嗜酸乳杆菌。针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比:蛋白胨1%,葡萄糖0.5%,大豆低聚糖1.5%,酵母膏1.0%(均为质量分数);最佳增殖因子添加量为西红柿汁12%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH值和OD值的变化确定增菌培养终止时间为16h,通过平板菌落计数,此时菌数可达2.2×1012mL-1。     

嗜热链球菌与保加利亚乳杆菌麦芽复合汁增菌培养基的优化筛选

研究了在麦芽汁中添加不同的营养因子对嗜热链球菌S.t-3的细胞生长量的影响,进一步采用正交试验优化筛选出S.t-3的麦芽复合汁增菌培养基,并对保加利亚乳杆菌L.b-DR和L.b-S1进行了验证性增菌试验。结果表明,S.t-3、L.b-DR和L.b-S1在麦芽汁中能进行正常的产酸代谢,大豆蛋白胨、牛肉膏、酵母膏可显著促进S.t-3的细胞生长(P<0.05);K2HPO4不仅可以促进菌体增殖,而且还可缓冲基质pH值的变化,避免了低pH值对乳酸菌的伤害;利用L9(33)正交试验,筛选出S.t-3的麦芽复合汁增菌培养基最佳配比为:在10%的麦芽汁中添加0.5%大豆蛋白胨、0.5%酵母膏、1%牛肉膏、0.2%K2HPO4;在麦芽复合汁增菌培养基中,S.t-3、L.b-DR和L.b-S1,37℃恒温培养16 h,活菌数分别为2.42×109cfu/mL、2.85×109cfu/mL和4.81×109cfu/mL,与液体MRS培养基的活菌数相当,成本较MRS培养基降低1 000元人民币/t。     

嗜酸乳杆菌增菌培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比是:大豆蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.6%,蛋白胨0.6%,牛肉浸膏1.2%,葡萄糖1%,低聚糖0.5%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%;最佳增殖因子添加量是:胡萝卜汁15%,西红柿汁15%,黄豆芽汁15%,11°啤酒5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10h,通过平板菌落计数,此时菌数可达6.8×109cfu/ml。     

嗜酸乳杆菌增菌培养基的优化

针对嗜酸乳杆菌的营养需要,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量,得出最佳基础培养基配比是:大豆蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.6%,蛋白胨0.6%,牛肉浸膏1.2%,葡萄糖1%,低聚糖0.5%,乳糖0.5%,酵母浸出粉0.5%;最佳增殖因子添加量是:胡萝卜汁15%,西红柿汁15%,黄豆芽汁15%,11°啤酒5%。最后使用优化出的增菌培养基测定生长曲线,同时测定pH和滴定酸度的变化,确定增菌培养终止时间为10h,通过平板菌落计数,此时菌数可达6.8×109cfu/ml。      

保加利亚乳杆菌冻干菌种的研究

对酸奶发酵菌种之一--保加利亚乳杆菌的增菌培养基进行了筛选,得到了高活菌数的保加利亚乳杆菌增菌培养基,并进行冷冻升华干燥得到保加利亚乳杆菌的冻干菌种。结果表明:在添加有10%麦芽汁、10%番茄汁、0.05%CaCO3、1.0%乳糖的MRS基础培养基中培养保加利亚乳杆菌18h后活菌数可达到3.96×1011cfu/g。其冻干菌种的活菌数为2.53×1011cfu/g。     

乳酸菌摇瓶增殖培养工艺研究

采用自行筛选的适用于作为高效冻干酸奶发酵剂的嗜热链球菌S.t-SY和保加利亚乳杆菌L.b-DR为出发菌株,在优化的麦芽复合汁增菌培养基上进行摇瓶增殖培养。通过研究培养温度、培养方式、基质起始pH值、接种量、中间补料方式等因素对乳酸菌摇瓶增殖培养的影响,优化乳酸菌摇瓶增殖培养的工艺条件。试验结果表明:在麦芽复合汁增菌培养基中乳酸菌增殖培养的最适条件是:培养温度37℃,基质起始pH值6.5～7.5,接种量0.2%～0.3%,静置培养16h,收获期S.t-SY和L.b-DR活菌数分别达到2.93×109、2.74×109cfu/mL。本试验结果为乳酸菌进一步应用麦芽复合汁增菌培养基生产高效浓缩直投式发酵剂提供了技术参数。