耐盐乳酸菌的筛选和鉴定

本实验从酱油厂提供的酱油原醅中分离筛选出耐盐乳酸菌,该菌在18%以上NaCl浓度的条件下能够正常生长代谢,初步鉴定其为四联球菌属,可用于高盐稀醪酱油酿造.目前国内尚无耐盐度达18%的乳酸菌种, 该菌种的成功选育为国内首创.     

耐盐乳酸菌的筛选和鉴定

本实验从酱油厂提供的酱油原醅中分离筛选出耐盐乳酸菌，该菌在18％以上NaCl浓度的条件下能够正常生长代谢，初步鉴定其为四联球菌属，可用于高盐稀醪酱油酿造。目前国内尚无耐盐度达18％的乳酸菌种，该菌种的成功选育为国内首创。     

高盐稀态发酵酱油酱醅中耐盐乳酸菌的分离与鉴定

对高盐稀态发酵酱油酱醅中的乳酸菌进行了分离和鉴定,从中筛选得到5株耐盐乳酸菌。经形态学特征、生理生化实验及16SrRNA序列分析鉴定表明:菌株RB1,RB2和RB5为嗜盐四联球菌(Tetragenococcus halophilus),菌株RB2和RB3为盐水四联球菌(Tetragenococcus muriaticus)。对筛选得到乳酸菌的温度耐受性、盐耐受性及产酸性能研究,结果表明5株乳酸菌的最适生长温度均为35~37℃,能耐受18%NaCl浓度,菌株RB5产酸能力最强。     

豆豉和腐乳中耐盐乳酸菌的筛选鉴定

以市售不同厂家的豆豉和腐乳为原料,采用溶钙圈法,从中分离得到31株菌株;经Na Cl耐受性试验,筛选得到5株耐盐性较强的菌株,即BD2、DB15、FW1-2、GH1-2B和WZH1-3B,耐盐性可达到12%,耐盐性菌株的筛选对提高豆豉腐乳的品质起着重要作用。然后通过生理生化和分子生物学鉴定,确定BD2、DB15、GH1-2B和WZH1-3B为坚强肠球菌(Enterococcus durans),FW1-2为粪肠球菌(Enterococcus faecalis)。     

乳饮品中耐胃酸乳酸菌的分离鉴定与筛选

利用溶钙圈法结合乳酸菌纸层析实验从乳饮品中分离出3株乳酸菌,对分离出的乳酸菌进行形态学鉴定及生理生化鉴定,根据鉴定结果结合伯杰细菌学鉴定手册,初步判定3株乳酸菌均为短乳杆菌。对三株乳酸菌进行人工胃酸模拟实验,结果L2、L3经过人工胃酸处理后存活率分别为2.7%和3.9%,存活率比L1高,所以L2、L3菌株可以作为耐胃酸乳酸菌,经过驯化后应用食品的生产加工。     

新疆地区自然发酵辣椒酱中耐盐乳酸菌的筛选鉴定

以新疆地区自然发酵的辣椒酱为材料,在厌氧条件下采用富集培养法、溶钙圈法对产酸乳酸菌进行初筛;通过测定菌株的产酸能力和NaCl耐受能力进行复筛;通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对耐盐乳酸菌进行鉴定。结果表明,筛选得到7株产酸乳酸菌,其中,3株产酸能力强、耐盐性能好,分别为菌株B、SS、T,均可耐受7%NaCl。菌株B、SS及T均被鉴定为植物乳酸杆菌（Lactobacillus plantarum）。耐盐性乳酸菌的筛选对提高自然发酵辣椒酱的品质起着重要作用。     

阿拉善双峰驼酸驼乳中乳酸菌的分离鉴定及耐酸和耐盐研究

以采自内蒙古阿拉善地区的传统发酵阿拉善双峰驼酸驼乳为材料,采用乳酸细菌培养基(MRS)对其中的乳酸菌进行初分离,经平板划线法纯化后,借助16 SrDNA的序列分析法进行分子鉴定,并对其耐酸性、产酸能力、最适pH值及耐盐性等性质进行研究。结果表明,分离纯化出3株疑似优势乳酸菌,分别为乳杆菌属的Lactobacillus plantarum strain KC28、Lactobacillus plantarum strain K25和Lactobacillus sp. D1501。3株菌均为革兰氏阳性,耐酸性较好,产酸性能适中;最适培养p H值为6.5。     

产耐盐蛋白酶深海细菌的分离鉴定

本文采用高盐富集、复筛发酵及耐盐稳定性实验的方式,从深海海泥中筛选产耐盐蛋白酶的深海海洋细菌。从深海海洋微生物中共筛选出25株耐盐菌,在这25株菌株中有14株在酪蛋白平板上能产生较大的水解圈;通过发酵复筛及耐盐稳定性实验,筛选得到一株酶活性能高且耐盐稳定性好的菌株,将其编号为SWJSS3;对菌株SWJSS3进行16SrDNA的鉴定并初步研究了盐浓度对产酶情况和酶稳定性的影响。菌株SWJSS3在0~10%(m/V)的盐浓度条件下均能生长,在0~10%的盐浓度下,菌液OD600的吸光值范围为0.08-1.98;通过发酵复筛其所产生的蛋白酶酶活在盐浓度为1%时达最高,为233.56±2.16U/mL;所产蛋白酶在终浓度为15%(m/V)的NaCl溶液下,混匀4℃保存1h,残余酶活为初始酶活的40.70±2.06%,继续存放一段时间到第9h,酶活基本保持不变;通过16SrDNA鉴定其为铜绿假单胞菌,与PseudomonasaeruginosaRP2816SrDNA的相似性达到99%以上。     

乳酸菌耐盐分子机制研究进展

乳酸菌广泛应用于食品和发酵行业。在酱油、熏肉、泡菜等发酵食品的生产过程中,乳酸菌的生长常受到 高盐浓度的影响。盐胁迫引起的渗透压变化会引起乳酸菌细胞结构损伤,导致细胞生理代谢活动紊乱甚至死亡。因 此,乳酸菌在盐胁迫条件下生存、生长和代谢的能力在食品发酵过程中是非常重要的。本文就乳酸菌的耐盐机制进 行阐释,以期为乳酸菌科学研究及食品发酵工业应用提供参考。     

酱醪中耐高温耐盐酵母菌分离鉴定

为了改善工业化生产酱油的风味,从辽宁地区传统工艺发酵的酱醅中分离、筛选耐高温嗜盐酵母菌,对其进行形态、生理生化特性及26S rDNA序列分析确定其分类地位,筛选菌株为鲁氏结合酵母。实验表明,所筛菌株能在NaCl质量浓度17%,发酵温度45℃的环境下生长良好,非常适合工业化生产酱油的发酵过程,又通过香气对比实验证明,添加所筛菌株的酱醅中其全氮含量和氨基态氮含量均有一定提高,并且在第32d时氨基酸生成率达到52.94%。通过顶空固相微萃取,气相色谱-质谱联用分析挥发性成分,分离出七大类共48种挥发性物质,并与安琪酵母进行比较,发现JY-7明显优于安琪酵母。因此所筛菌株可以作为增香酵母添加到生产酱油的后熟过程中,以改善酱油的风味。      

自然发酵黄豆酱中嗜盐乳酸菌的分离、鉴定与筛选

从黑龙江省8个地区采集到11份自然发酵黄豆酱样品并分离出28株嗜盐细菌，经鉴定全部为四联球菌属乳酸菌。通过测定各菌株在不同培养时间和含高浓度21％NaCl培养液的OD直和pH值，从中筛选出一株耐盐性最好、活力旺盛且产酸能力强的菌株（T5），经生理生化鉴定其为嗜盐四联球菌。     

腐乳中乳酸菌的分离与鉴定

文章主要对青方、白方和红方腐乳中的乳酸菌进行了分离鉴定。从青方和白方腐乳中分别分离到乳酸菌7株和5株,红方中没有分离到乳酸菌。鉴定结果表明,白方中4株为鼠李糖乳杆菌,1株清酒乳杆菌;青方中有1株为植物乳杆菌,1株干酪乳杆菌,3株鼠李糖乳杆菌,2株清酒乳杆菌。最后,对不同菌株的耐盐性和耐酒精性进行了测试。     

牦牛酸乳中耐酸耐胆盐乳酸菌的分离筛选和鉴定

通过对青海地区采集的牦牛酸乳中乳酸菌的分离鉴定,共获得48株乳酸菌。以生长旺盛且可用于食品的11株乳酸菌为研究对象,进行人工胃液和胆盐耐受性评价。结果表明,有6株菌株在pH 3.00人工胃液中存活率50.00%,2株菌株在0.30%胆盐中生长率15%。其中鼠李糖乳杆菌2016SWU.05.0601为最佳抗性菌株,在人工胃液中存活率为119.53%,在0.30%胆盐中生长率为41.64%。     

耐乙醇乳酸菌的分离和培养

乳酸菌是食用酵素的主要发酵菌种之一。由于酵母代谢产生乙醇的因素,果蔬自然发酵液中乳酸菌的生长代谢易受乙醇的抑制。从产酸良好的天然果蔬发酵液中分离耐乙醇、耐酸的乳酸菌菌株,并分析其发酵能力和代谢产物。经16S rDNA序列测定,分离出2株乳酸菌,均为副干酪乳杆菌,经分析能耐受5%乙醇。以果蔬为发酵基质进行发酵,菠萝发酵液、胡萝卜发酵液、苹果发酵液中的DPPH自由基清除率均有增长;三种发酵液中总酚的含量均呈增长趋势;三种发酵液中可滴定酸含量在发酵初期上升较快,乳酸含量增长较乙酸和苹果酸高;三种发酵液对沙门氏菌等4种致病菌具有明显的抑制作作用。     

耐酸耐胆盐益生乳酸菌的筛选与鉴定

为了筛选出人源性的耐酸、耐胆盐的益生菌,利用含胆盐(0.2%)的5种选择性培养基(TPY、BHI、MRS、SL、乳酸杆菌选择性琼脂培养基),以溴甲酚紫为酸性指示剂,从婴儿粪便中初步筛选出42株耐胆盐的乳酸菌。根据菌株在pH5.0,4.0,3.5的MRS液体培养基中培养时OD值的变化情况,筛选出3株具有较好酸耐受性的菌株。然后通过平板菌落计数方法测定筛选出的3株菌在pH 3.0条件下0~3h存活率的变化情况,筛选出对酸和胆盐耐受能力最强且最稳定的菌株经16SrDNA分子生物学鉴定为Lactobacillus plantarum。该菌能够作为潜在的益生菌菌株用于后期深入地挖掘其益生功能。     

耐胃液乳酸菌的筛选、鉴定与驯化

利用本实验室分离保存的乳酸菌菌种17株,经过耐胃液实验筛选,得到耐胃液能力较强、生长良好的乳酸菌菌株5株,选取4株菌株利用API乳酸菌生化系统和16S rDNA分析鉴定,并进行耐胃液驯化选育。结果表明,鉴定的4株乳酸菌中2株（编号:BR1-2和R8）为副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）,1株（编号:BR3-2）为屎肠球菌（Enterococcus faecium）,1株（编号:BR2-2）为乳酸片球菌（Pediococcus acidilactici）;驯化后各菌株耐胃液能力均有不同程度的提高,其中BR1-2经人工胃液处理存活率提高52.2%;其他三株菌株的存活率也均提高20%以上。      

盐干带鱼中乳酸菌的分离鉴定及其生物学特性研究

研究了盐干带鱼加工过程中微生物的消长规律,并对产品中乳酸菌进行了分离鉴定和生物学特性研究。研究结果表明,盐干带鱼加工过程中细菌总数、酵母、乳酸菌、葡萄球菌和微球菌均呈现逐步增加趋势,其中乳酸菌为优势菌群。从产品中分离得到G+、H2O2-乳酸菌疑似菌株19株,经生理生化鉴定初步确定为食品乳酸菌（6株）、短乳杆菌（5株）和戊糖乳杆菌（2株）,其它未能鉴定种属。食品乳杆菌、戊糖乳杆菌和短乳杆菌均表现出良好的生长性能和耐盐性,未检测到其脂肪酶活性,且仅戊糖乳杆菌表现出弱蛋白酶活性。      

辣白菜中乳酸菌的分离鉴定

从沈阳市7 个区25 份朝鲜族家庭制作的传统发酵辣白菜中分离出81 株乳酸菌疑似菌株,初步鉴定34 株为杆菌,47 株为球菌。进一步采用16S rDNA序列分析对81 株菌进行分子鉴定,通过序列分析进行属种鉴定。结果表明：81 株菌均为乳酸菌,分别来自2 个属6 个种,45 株为屎肠球菌,25 株为植物乳杆菌,4 株为干酪乳杆菌,3 株为戊糖乳杆菌,2 株为短乳杆菌,2 株为坚强肠球菌。研究结果为我国东北辣白菜中乳酸菌作进一步研究奠定了基础。     

酱醅中乳酸菌的分离与鉴定

对豆酱和酱油发酵酱醅中的乳酸菌进行了分离鉴定.通过溶钙圈实验、乳酸纸层析、形态特征和培养特征观察,从中筛选出8株菌.经API系统鉴定,JY-1和JY-6为戊糖片球菌,JY-2、JY-4和JY-7为短乳杆菌,JY-3为肠膜明串珠菌葡聚糖亚种,JY-5和JY-8为植物乳杆菌,并对菌株JY-1、JY-2、JY-3和JY-5的耐盐性进行了测试.     

乳酸菌素生产菌的分离与鉴定

对乳酸菌素产生菌进行分离,得到4株理想菌株。利用高效液相色谱检测其发酵液,初步确定4菌株均为乳酸菌,其中Ⅱ32菌株产乳酸最多,对各指示菌的抑制作用最显著,对该菌株作进一步的研究。Ⅱ32菌株在MRS培养基上可以生长,最适生长温度为28℃,革兰氏染色呈阳性,无芽孢。通过API生化反应实验、16SrDNA测序可进一步确定该菌株是L·paraplantarum或L·paraplantarum。最终通过对recA-gen的PCR产物检测,鉴定菌株Ⅱ32为Lactobacillusparaplantarum(类植物乳杆菌)。牛津杯抑菌试验显示,该菌株的发酵液不仅对多数G+细菌的生长有较强的抑制作用,而且对大肠杆菌、沙门氏菌等Gˉ细菌的生长也具有明显的抑制作用,但对真菌没有活性。