重组人溶菌酶的分离纯化及鉴定

目的建立重组人溶菌酶(human lysozyme,h LYZ)的分离纯化方法,并对纯化产物进行鉴定。方法采用固液分离、膜过滤、疏水层析及离子交换层析对hLYZ进行分离纯化;SDS-PAGE及HPLC法检测hLYZ纯度;按《中国药典》二部(2015版)蛋清溶菌酶效价检查法检测其效价;Western blot法检测其特异性;基质辅助激光解吸飞行时间质谱(MALDI-TOF)测定其相对分子质量。结果该分离方法可获得单一组分的重组hLYZ;SDS-PAGE检测纯度达99%,HPLC分析纯度达98. 8%;纯化后的hLYZ可与抗人LYZ抗体特异性结合,活性为1. 2×105 U/mg,相对分子质量为14 697。结论建立的分离纯化方法易操作,成本低,得到的hLYZ纯度大于98%,该分离方法可用于hLYZ的规模化生产。     

溶菌酶结晶法提取及其酶活力的探讨

以湖光岩鹌鹑蛋为原料,采用结晶法从蛋清中分离提取溶菌酶。探讨不同条件对溶菌酶收率及活性的影响,确定溶菌酶最佳的分离提取条件:盐析Na Cl质量分数为5.1%,pH=10.7,盐析时间为120h,收率达到0.378%,酶活力达到13700 U/mg。     

卧式加压溶气泡沫分离水溶液中低含量蛋白质

以大豆蛋白为目标蛋白,蛋白水溶液为模拟体系,采用卧式加压溶气泡沫分离装置考察了原料液流量、pH值、溶气水流量等因素对蛋白质脱除率的影响,并根据其分子结构特征从过程工程视角分析了以卧式泡沫分离装置由水中去除的优势.结果表明,最佳操作条件为:原料液浓度8mg/L,原料液流量50L/h,pH值4.5,溶气水流量275L/h,该条件下水中蛋白质的脱除率可达90.5%.     

电渗析处理电镀镍回收液的实验研究

采用电渗析法对电镀镍回收液进行分离浓缩实验。实验表明,选用BJT离子交换膜,在溶液Ni2+初始浓度为2 g/L、电压值为7.5 V、浓缩室和淡化室流量均为8 L/h时,Ni2+浓缩到8.39 g/L,有机物的相对去除率达46.46%。电渗析法能实现镍回收液中镍离子与杂质的分离,达到净化回收液和浓缩镍离子的目的。     

气扫式多效膜蒸馏过程研究

针对气扫式膜蒸馏(SGMD)过程能耗高的问题,设计了1种气扫式多效膜蒸馏(SGMEMD)过程,其特征是在传统SGMD过程中设立独特的热量回用系统。该系统同时具有蒸汽的换热冷凝与料液的预热升温双重作用,从而实现蒸汽潜热的梯级回收利用。实验研究了吹扫气流速、料液循环流量、膜组件内料液与吹扫气流向、料液浓度对SGMEMD过程膜蒸馏通量和造水比(GOR)的影响。结果表明,当采用质量分数2.5%的NaCl溶液作为原料液,料液温度为78℃、循环体积流量为5.0L/h、吹扫气流速为1.6m/s(标准状态),膜组件内吹扫气与料液为逆向流动时,SGMEMD过程的GOR可达3.1。     

电渗析法去除电镀镍回收液中的有机物

研究了电渗析法去除电镀镍回收液中有机物的工艺。考察了不同工作电压、进料流量和浓室流量对COD去除的影响。结果表明:当工作电压为5.5V、进料量为6L/h、浓室流量为6L/h时,COD的相对去除率可达56.9%。本研究为电镀镍回收液的净化提供了新的思路和方法。     

扩散渗析法回收硝化棉生产酸性废水

为了探讨回收硝化棉生产酸性废水的可行性,采用扩散渗析法回收某化工厂硝化棉生产酸性废水。考察了流速、流量比、酸度、温度等因素对酸回收及COD分离效果的影响。结果表明:处理水量为10 mL/min,在回收液与残液出水流量比为1:1,流速为1.0 m/h,酸度为9.5 g/L,温度为30℃时,酸回收率可达到94.16%,COD截留率可达84.81%。扩散渗析可以实现酸性废水的回收利用和COD的有效分离,具有技术可行性。     

温敏型聚合物PNIPA和P(NIPA-co-SA)的制备及其协助溶菌酶复性研究

采用反相悬浮法合成了温敏型聚合物聚N-异丙基丙烯酰胺(PNIPA)凝胶及其与丙烯酸钠(SA)的共聚凝胶P(NIPA-co-SA),对凝胶的形态、粒径分布、表面特性以及温敏性能进行了考察,共单体丙烯酸钠的引入使得凝胶的最大溶胀倍率和低临界溶解温度(LCST)都有明显的提高。将两种凝胶用于目标蛋白溶菌酶的体外复性过程,考察了其协助复性的效果。结果表明:当蛋白浓度为250μg·mL-1时,加入80mg·mL-1PNIPA凝胶可使溶菌酶的活性回收率由稀释复性的51.3%提高到72.9%;加入120mg·mL-1P(NIPA-co-SA)共聚凝胶可使活性回收率达到71.5%。溶菌酶的浓度越高,与稀释复性相比凝胶协助复性的效果就越好。复性后凝胶可方便地分离回收,PNIPA凝胶重复使用6次后,溶菌酶的活性回收率仍高于稀释复性15%以上。     

陶瓷膜在高固含铝盐料液固液分离过程中的应用

本文对陶瓷膜在高固含铝盐料液固液分离工艺中的应用进行了研究。探讨了陶瓷膜对高固含铝盐料将固液分离效果、陶瓷膜过滤过程的膜通量、陶瓷膜是否截留铝盐料浆中铝离子、加水洗涤洗循环回收铝离子的效果等问题。研究结果表明:采用平均孔径为200 nm的陶瓷膜分离技术,可实现高固含铝盐料液固液分离目的 ;过滤过程平均膜通量为120 L/h·m~2,可以满足过滤要求;过滤过程不会截留铝离子;采用加水洗涤循环过滤方法,可以达到回收铝离子目的,铝离子回收率可达96.4%。     

超声波均质和GOD脱糖预处理鸡蛋清

考察了超声波均质及葡萄糖氧化酶(GOD)脱糖对鸡蛋清(CEW)粘度、蛋清中溶菌酶浓度和活力的影响. 结果表明,超声波均质和GOD脱糖均能有效降低蛋清的粘度,从而得到低粘度的均匀料液. 但随着超声波功率的增加和超声处理时间的延长,溶菌酶的浓度及活力呈下降趋势. 而经GOD脱糖处理后的料液溶菌酶活力随GOD加入量的增大而降低,浓度则先升高后下降. 将两种处理方法结合使用,料液粘度可以降至4.0 mPa×s,此时溶菌酶损失19.48%,酶活降低19.13%.     

BPADA-ODA非对称聚酰亚胺膜制备及CPD/MCPD分离性能研究

渗透汽化膜技术替代传统精馏工艺分离环戊二烯/甲基环戊二烯碳五馏分同系物。以丙酮为非极性成膜添加剂,水为凝胶介质,采用溶胶-凝胶二步法合成BPADA-ODA非对称聚酰亚胺膜,利用FT-IR表征聚酰胺酸和非对称膜组成,SEM表征膜表面和断面结构形貌,并探讨膜厚、原料液流量等膜工艺参数对分离性能的影响。结果表明:BPADA与ODA化学亚胺化完全,膜表面无孔致密,膜断面为致密皮层和指状多孔支撑层构成,膜厚增加,膜分离因子增大而渗透通量减小,最优膜厚为110μm,原料流量为30 m L·min-1。膜分离性能长期稳定,32 h渗透通量可达236.6 mg·m-2·h-1,CPD分离因子达1.61,原料液可分离提纯96.2%(wt)的甲基环戊二烯。     

人初乳中溶菌酶的理化特性及其抗菌活性

目的分析人初乳中溶菌酶(Lysozyme,LYZ)的理化特性及其抗菌活性。方法取产后3d内的产妇乳汁,根据人LYZ标准曲线,求得其中的LYZ活性。将人初乳分别置于60、72、85和100℃水浴中孵育0、1、3、5、10、15、20和30min后取样,检测其中LYZ的活性,分析其热稳定性;将经稀释的人初乳分别调pH值至2.0、4.0、5.0、7.4、9.0和10.0,37℃孵育30min,检测其中LYZ的活性,分析其对pH值的敏感性;将不同的金属离子加入人初乳中,使其终浓度为10mmol/L,测定不同金属离子对人初乳中LYZ活性的影响;采用平板扩散法检测人初乳中LYZ的抑菌谱,并挑选敏感菌株进行定量抑菌试验。结果人初乳中LYZ的活性为(9650±236)U/ml,在60℃～85℃和pH2.0～10.0的条件下均可保持较强的活性,对多种金属离子具有一定的耐受性。人初乳中LYZ对多种革兰阳性及阴性细菌具有不同程度的抑菌作用,但对白色念珠菌无抑制作用。结论人初乳中的LYZ稳定性强,抗菌谱广,具有广泛的应用价值。     

纳米白炭黑填充硅橡胶复合膜的制备与渗透汽化分离性能

制备以聚酯(PET)为支撑层,白炭黑填充的聚二甲基硅氧烷(PDMS107)为皮层的硅橡胶复合膜,并以乙醇水物系为料液,对比分析白炭黑增强硅橡胶复合膜的渗透蒸发分离性能,分离因子比空白膜有所提高,在乙醇浓度为3%～5%时,分离因子可达16.09,渗透通量为75.39 g/m2·h;测定填充白炭黑硅橡胶复合膜的拉伸强度,结果表明:拉伸强度可达1.828 MPa,相当于空白膜(0.368 MPa)的5倍.     

聚醚共聚酰胺复合膜制备及其在渗透汽化膜法脱盐中的应用研究

以亲水性聚醚共聚酰胺PEBA为分离层膜材料,采用浸渍涂覆法制备了具有较薄致密皮层的PEBA复合膜,并对其渗透汽化膜法脱盐性能进行了研究。在操作条件下,PEBA复合膜可获得5.6～51.3 L/（m2/h）的渗透液流量,盐截留率可达99%以上。随着原料液氯化钠质量浓度（0～70 g/L）的增大,渗透液流量减小,氯化钠截留率基本保持不变;随着操作温度的升高（30～70℃）,渗透液流量呈指数增大,渗透液流量和温度的关系满足阿伦尼乌斯方程,通过拟合计算得到纯水的表观活化能为26.8 kJ/mol,原料液中加入盐后,水的表观活化能略微升高,在27.5～29.8 kJ/mol。     

旋流流化床结晶特性实验研究

以磷酸二氢钾为结晶体系,研究了旋流流化床的添加晶种结晶特性,考察了结晶料液的温度、过饱和度、流量及晶种特性对结晶速率及产品平均粒径的影响,并与搅拌结晶过程进行了对比。研究结果表明,晶种的粒度分布对产品粒度分布有较大影响。相比搅拌结晶,旋流流化床结晶时间短,结晶产品粒径大、粒度均匀一致、晶形规则整齐。采用晶种1结晶,在料液温度为40℃,过饱和度为20 g/L,流量为84.26 L/h时,单位质量晶种的结晶速率可达2.15 mg/(g·s),在此条件下结晶0.5 h,产品的平均粒径可达1.27 mm。     

电渗析技术回收树脂脱附液中盐分中试研究

自制电渗析中试装置,用于某饮用水领域树脂脱附液盐分回收,在原有研究的基础上,对电渗析系统的运行条件和参数进行进一步优化。结果表明:电渗析中试浓缩室和淡化室的最佳运行流量为2.5 m~3/h;浓缩室和淡化室体积比取3∶1～4∶1为宜;饮用水脱附液的主要有机成分是腐殖质类荧光组分,电渗析运行前后料液的CODMn、三维荧光强度、UV-vis强度表现出相似的变化规律,即二级淡化液一级淡化液脱附液原液一级浓缩液二级浓缩液。     

藜麦蛋白泡沫分离工艺的优化及其功能特性分析

在单因素试验的基础上,采用 Box-Behnken 设计对藜麦蛋白的泡沫分离工艺条件进行优化,考察了料液比、装液量、温度和 pH值对藜麦蛋白回收率和富集度的影响,并对藜麦蛋白的亚基分布和功能特性进行了研究。结果表明：优化的工艺条件为: 温度35℃,pH值4.0,装料量260 mL,料液比0.3 mg·mL-1,在此条件下泡沫分离藜麦蛋白,藜麦蛋白的回收率为95.68% ,富集度为7.89;分离得到的藜麦蛋白具有分子量分别为50、32~39、22~23和8~9 kDa 的基本亚基,在60℃条件下,藜麦蛋白的最高持水量为9.733 g/g,最高持油量为5.848 g/g;随着原料与溶剂比例的增加,藜麦蛋白的乳化能力(EC)、乳化稳定性(ES)、起泡能力(FC)和泡沫稳定性(FS)均呈先增大后减小的趋势;其DPPH自由基清除率与剂量呈正相关,在藜麦蛋白浓度为2.5 mg/mL时,对3 mL 0.2 mmol·L-1的DPPH溶液中的DPPH自由基清除率达到(56.01±1.34)%。     

CS@CAU-10复合膜的制备及其对乙醇/水的分离性能

利用原位生长法在氧化铝载体上制备金属有机骨架CAU-10膜，并在其表面覆盖一层壳聚糖(CS)得到CS@CAU-10复合膜。考察了CAU-10膜合成液浓度、CS醋酸水溶液浓度以及操作温度对膜层的结构和性能的影响。结果表明，在合成液浓度为0.06 mol/L、CS质量分数为3%时获得的膜层性能最好；升高温度，该膜通量增大、分离因子下降；在30℃时，原料的水质量分数从5%增大到20%,总通量由91 g/(m²·h)增加至450 g/(m²·h),分离因子从497降低至92。该膜与其他乙醇脱水膜相比具有一定的优势。     

响应面法优化荞麦茎中芦丁的提取工艺

以荞麦茎为原料,研究芦丁的最佳提取工艺。通过单因素实验及响应面法实验考察了料液比、提取温度、乙醇体积分数、提取时间4个因素对芦丁提取量的影响。结果表明,各因素对芦丁提取量的影响大小依次为:料液比提取温度乙醇体积分数提取时间;荞麦茎中芦丁的最佳提取工艺条件为:料液比1∶22(g∶mL)、提取温度65℃、乙醇体积分数60%、提取时间2.0h,在该条件下,芦丁提取量达到6.752mg·(100g)~(-1)。     

高温多效膜蒸馏用于处理高盐溶液的实验研究

膜蒸馏通常在温度低于90℃的条件下操作,而对于高盐溶液,由于浓差极化和饱和蒸气压下降比较明显,在通常操作温度下膜通量和热利用率都很低。采用具有内部潜热回收功能的多效膜蒸馏组件在高温操作条件下对以氯化钠为代表的无机盐浓溶液的深度浓缩进行了研究,着重考察了冷进料温度T1,加热后料液温度T3、浓度、流量等操作参数对膜通量、造水比和截留率的影响。结果表明,当料液质量分数为5%,热料液温度T3为100℃时,膜通量和造水比的值分别为3.1 L/(m2·h)和15.2;虽然膜通量和造水比均随料液浓度增大而下降,但是当料液质量浓度为25%,T3为105℃时,膜通量和造水比值仍可达1.53 L/(m2·h)和5.8;且截留率达到99.95%以上。在60 d的连续运行中,膜组件保持了良好的性能稳定性。结果表明高温多效膜蒸馏技术能够有效用于高盐溶液的深度浓缩。