葛根黄酮对DNA氧化损伤的保护研究

本文使用不同方法提取葛根黄酮，并在CuSO4-Phen-VC-H2O2-DNA化学发光体系中测定其对DNA氧化损伤的保护作用。实验结果表明黄酮作为天然抗氧化剂能够明显抑制DNA损伤发光，并通过量效关系的研究确定在0．02～1000μg/ml范围内能有效抑制自由基对DNA的损伤。     

芹菜素对自由基致DNA损伤的保护作用及机制

运用DPPH自由基和 ·OH反应模型和酶标仪观察芹菜素(apigenin,API)对自由基的淬灭效应,以CuSO4-Phen-VC-H2O2-DNA化学发光体系测定API对 ·OH致DNA损伤的抑制作用,以探讨低剂量API对自由基致DNA损伤的保护效果及可能的作用机制,为以API为基础的膳食干预研究提供依据。结果表明：在30min时间内,API质量浓度为25、50、100、200μg/mL时,对DPPH自由基清除率分别为8.80%、28.4%、37.4%和62.8%。当质量浓度为200、100、50μg/mL时,API对 ·OH清除率分别为50.2%、35.4%和25.4%。在DNA化学发光体系中,25～100μg/mL API对DNA损伤产物发光抑制率为5.6%～16.9%,并使其受损时间延长35～50min。低剂量的API能有效清除DPPH自由基和 ·OH,抑制 ·OH引发的DNA损伤程度,并延迟其受损伤的时间。API清除自由基的效果及保护DNA损伤的能力与其质量浓度有关。     

加杨雄花序提取物体外抗氧化及对 DNA损伤的保护作用研究

利用比色法、化学发光法,研究了加杨雄花序提取物体在体外对O2-·,·OH,H2O2活性氧自由基的清除作用,以及通过Cu2 -Phen-H2O2-Vit.C-DNA发光体系研究加杨雄花序提取物对·OH引起的DNA氧化损伤的保护作用。实验结果表明加杨雄花序提取物对O2-·,·OH,H2O2自由基均有明显的清除作用,其50%抑制浓度(IC50)分别为0.69、1.73、0.23mg/ml,并能显著抑制·OH对DNA氧化损伤。     

牡丹花提取物清除活性氧及对·OH引发的DNA损伤的保护作用

利用比色法、化学发光法 ,研究了牡丹花提取物体对O·2 -、·OH、H2 O2 活性氧自由基的清除作用 ,以及通过Cu2 + Phen H2 O2 VC DNA发光体系研究牡丹花提取物对·OH引起的DNA氧化损伤的保护作用。试验结果表明 ,牡丹花提取物对O·2 -、·OH、H2 O2 自由基均有明显的清除作用 ,其 5 0 %抑制浓度 (IC50 )分别为 1 99 0、1 93 1 8、5 0 85 μg/mL ,并能保护·OH引发的DNA氧化损伤。     

化学发光法对花生多肽的体外抗氧化活性和对DNA损伤的保护作用的研究

采用多个化学发光体系系统地研究了花生多肽的体外抗氧化活性及其对DNA损伤的保护作用。运用邻苯三酚-鲁米诺化学发光体系测定了花生多肽对超氧阴离子的清除作用,硫酸铜-邻菲哕啉-抗坏血酸-双氧水、硫酸亚铁-鲁米诺-双氧水和硫酸亚铁-鲁米诺3个体系测定了花生多肽对羟基自由基的清除作用,双氧水-鲁米诺体系测定了花生多肽对体外双氧水的清除作用,采用硫酸铜-邻菲哆啉-抗坏血酸-双氧水-脱氧核糖核酸测定了花生多肽对体外DNA损伤的保护作用。试验结果表明花生多肽具有较好的体外清除活性氧和保护DNA损伤的活性。花生多肽可作为开发抗氧化产品的新资源。     

荔枝皮原花青素的体外抗氧化活性和对DNA损伤的保护作用

分别采用邻苯三酚- 鲁米诺化学发光体系、硫酸亚铁- 鲁米诺- 过氧化氢化学发光体系和过氧化氢- 鲁米诺化学发光体系测定白腊、妃子笑、糯米糍和怀枝4 个品种的荔枝皮原花青素(procyanidins of litchi pericarp,LPPC)体外清除超氧阴离子自由基、羟自由基和过氧化氢的能力。同时运用硫酸铜- 邻菲啰啉- 抗坏血酸- 过氧化氢-DNA体系测定不同LPPC 对诱导体系DNA 损伤的保护作用。实验结果表明：白腊LPPC 具有较好的体外清除超氧阴离子自由基和过氧化氢的能力;妃子笑呈现出较显著的羟自由基清除能力和保护DNA 损伤的效果。不同品种的LPPC在不同化学发光体系中的抗氧化活性呈现较大差异。     

艾蒿黄酮体外抗氧化活性及对DNA氧化损伤的保护研究

采用四种化学发光体系研究艾蒿黄酮(flavonoids of Artemisia argyi Lé v1.et Vant,简称FAA)的体外抗氧化活性,及对DNA氧化损伤的保护作用.结果表明,艾蒿黄酮能有效地清除O2·、·OH、H2O2、减轻或消除·OH对DNA的氧化损伤.艾蒿黄酮50%抑制浓度(IC50)分别为151.17、15.34、0.23、15.46mg/L.实验同时还比较了艾蒿黄酮和VC的抗氧化作用,结果表明,艾蒿黄酮抗氧化效应远远高于VC的.艾蒿黄酮是有效的、多功能的天然抗氧化剂和自由基清除剂,是值得进一步开发利用的天然产物.     

石榴籽油自由基清除能力及对H_2O_2诱导PC12细胞损伤的保护作用

以吩嗪硫酸甲酯-还原型辅酶I-氮蓝四唑(PMS-NADH-NBT)系统产生超氧阴离子自由基和羟基自由基诱导DNA及蛋白质氧化损伤为模型,考察石榴籽油对超氧阴离子自由基的清除能力以及对DNA和蛋白质氧化损伤的保护作用。通过建立H2O2诱导PC12细胞损伤氧化应激损伤模型,采用甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率和细胞损伤程度,硫代巴比妥酸法测定MDA含量,超氧化物歧化酶(SOD)及过氧化氢酶(CAT)试剂盒测定细胞的氧化应激变化,研究不同浓度石榴籽油对H2O2刺激的PC12细胞中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力及丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明:石榴籽油清除自由基的能力以及对DNA和蛋白质损伤的保护作用随着石榴籽油浓度的升高而增强。石榴籽油在0.5~4 mg/m L质量浓度范围能显著提高H2O2损伤的PC12细胞存活率,显著减少H2O2刺激的PC12细胞中MDA的生成,提高SOD活力及CAT活性。石榴籽油在体外具有清除自由基,减轻羟基自由基诱导DNA及蛋白质氧化损伤以及保护PC12细胞对抗氧化损伤的作用。     

流动注射化学发光测定苹果多酚抗氧化活性

用流动注射化学发光法测定苹果多酚的体外抗氧化作用。将苹果多酚提取液加入3种化学发光体系,测量其发光强度,根据系统化学发光被抑制的程度评价苹果多酚对活性氧自由基的清除能力,并以抗坏血酸(VC)为阳性对照。结果表明,苹果多酚对三种活性氧自由基(O2-·、·OH、H2O2)的清除能力远强于VC;对H2O2和·OH的清除能力相当,强于对O2-·的清除能力。结果显示苹果多酚具有很好的抗氧化能力。     

血根碱清除自由基及抑制生物大分子氧化的作用

目的：评价血根碱的体外抗氧化活性,为血根碱作为天然抗氧化剂的应用提供理论依据。方法：采用DPPH自由基清除法测定血根碱的体外抗氧化能力;采用Cu2+/H2O2和AAPH体系诱导牛血清白蛋白（bovine serum albumin,BSA）氧化损伤和羰基化损伤模型,研究血根碱对上述损伤的保护作用;采用TBA法分别测定血根碱对FeSO4诱导的大豆卵磷脂氧化损伤的抑制作用,及AAPH诱导的鲱鱼精DNA氧化损伤的抑制作用。结果：血根碱可有效清除DPPH自由基,且呈浓度依赖性,在100 μmol/L时清除率为85.94%;1～100 μmol/L的血根碱可显著保护Cu2+/H2O2及AAPH体系诱导的BSA损伤;10～100 μmol/L的血根碱可显著保护由Cu2+/H2O2体系诱导的BSA蛋白羰基化,当浓度为0.1～100 μmol/L时可显著保护由AAPH诱导的BSA蛋白羰基化;血根碱浓度在6.25～100 μmol/L范围内均可显著抑制由FeSO4及AAPH诱导的大豆卵磷脂及鲱鱼精DNA的氧化损伤。结论：血根碱可有效清除自由基及保护蛋白氧化损伤和羰基化损伤,亦可显著抑制脂质及DNA氧化损伤。     

黄酮解离常数与活性氧清除效果的关系

在体外条件下,对9种常见黄酮(槲皮素、杨梅素、高良姜素、大豆苷元、染料木素、柚皮素、橙皮素、芹菜素、木犀草素)清除活性氧基团(过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子自由基(O2－ ·)、过氧亚硝基阴离子(ONOO－ ·))的效果和黄酮的解离常数进行研究。结果表明：黄酮醇类化合物清除这3种活性氧基团的能力最强,黄烷酮和异黄酮类清除能力不明显。黄酮的一级解离常数与其清除活力存在相关性,与其清除O2－ ·和 ONOO－ · 具有显著相关性。黄酮的一级解离常数值越低,其清除活性氧基团的能力越强。     

咖啡酸衍生物对自由基致DNA氧化损伤的联合保护作用

目的:探讨咖啡酸衍生物（CADs）:绿原酸（Chlorogenic acid,ChA）、阿魏酸（Ferulic acid,FeA）、迷迭香酸（Rosmarinic acid,RoA）对自由基致DNA损伤的联合抑制保护效果。方法:运用DPPH自由基及羟自由基反应模型观察不同组成的CADs对自由基的淬灭效应,以CuSO₄-Phen-VitC-H₂O₂-DNA化学发光体系测定不同成分的多酚类物质对·OH致DNA损伤的抑制作用。结果:在30min时间内,三种CADs联合组在浓度为25、50、100、200μg/mL时,对DPPH·清除率分别为28.93%、58.39%、83.93%和84.09%;对·OH清除率分别为33.43%、55.27%、71.23%、77.49%。在DNA化学发光体系中,在25～200μg/mL范围内,三种CADs联合组对DNA损伤产物发光抑制率为12.49%～81.09%。结论:CADs能有效清除DPPH自由基和羟自由基,抑制羟自由基引发的DNA损伤程度,并延迟其受损伤的时间。在各实验组中三种CADs联用组在对DPPH自由基清除率、DNA损伤产物发光抑制率以及保护DNA损伤的能力均最强,体现出协同作用。      

刺参多糖清除活性氧保护线粒体的研究

本文采用酶解法(胃蛋白酶与胰蛋白酶)提取刺参多糖(Stichopus japonicus polysaccharides,SJP),以硫酸苯酚法测定多糖含量并研究其清除活性氧保护线粒体的作用机制。以Fe~(2+)-Vit C系统诱发肝线粒体脂质过氧化,以丙二醛(MDA)为指标测定SJP对脂质过氧化的影响;测定SJP的还原力及其对Fe~(2+)的螯合作用;以H_2O_2-Fe~(2+)体系为羟自由基(·OH)生成系统,测定SJP清除·OH的能力;用滴定法测定SJP清除过氧化氢(H_2O_2)的能力;用氮蓝四唑(NBT)法测定SJP清除超氧阴离子(O_2·~-)的能力。研究表明:SJP可抑制MDA生成;SJP具有一定的还原力和较弱的Fe~(2+)螯合作用;另外,SJP能在一定浓度范围内明显清除·OH、H_2O_2和O_2·~-。SJP能通过抗氧化、清除活性氧(ROS)来保护线粒体,具有保护机体的功效,这是SJP保护线粒体的可能机制。     

在线抗氧化分析和超滤亲和液质联用技术快速筛选桂花抗氧化及抑制酪氨酸酶的活性成分

目的:研究桂花水提物的抗氧化活性及酪氨酸酶抑制活性,并初步研究其活性化学成分.方法:以DPPH·清除能力、ABTS+·清除能力和FRAP这3种抗氧化活性评价指标来衡量桂花水提物及其化合物的抗氧化能力;采用超高效液相-ABTS+·-质谱(UPLC-PDA-QDa-ABTS+·)在线法对桂花中的抗氧化活性成分进行定性鉴别,...     

金银花叶黄酮体外抗氧化能力及对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用

目的：研究金银花叶黄酮的体外抗氧化能力和对H2O2诱导RAW264.7巨噬细胞损伤的保护作用。方法：金 银花叶粉经提取纯化后得到金银花叶黄酮粉,以抗坏血酸为阳性对照,测定金银花叶黄酮的总还原力,对羟自由 基、超氧阴离子自由基及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基的清除能力。体外培养RAW264.7巨噬细胞,实验分为空 白组、模型组、对照组和金银花叶黄酮低、中、高剂量组,用H2O2诱导损伤RAW264.7细胞,噻唑蓝法测定细胞存 活率,试剂盒法测定细胞和细胞培养液中丙二醛、谷胱甘肽含量及超氧化物歧化酶、乳酸脱氢酶活力。结果：金银 花叶黄酮的总还原力及对各自由基的清除能力较强,并在足够质量浓度下等同于对照品抗坏血酸。金银花叶黄酮呈 剂量依赖性保护H2O2引起的RAW264.7细胞的损伤,降低细胞及细胞培养液中丙二醛含量,提高超氧化物歧化酶活力 及谷胱甘肽含量,提高细胞内乳酸脱氢酶活力。结论：金银花叶黄酮抗氧化能力较强,可修复H2O2诱导的RAW264.7 巨噬细胞的损伤,其作用可能与调节细胞氧化还原系统、清除自由基、提高细胞内抗氧化酶系的活力有关。     

芡实多糖的提取、抗氧化活性及对质粒DNA氧化损伤防护作用的研究

采用纤维素酶超声辅助法提取芡实多糖,由正交实验获得芡实多糖的最佳提取条件,并探究其体外抗氧化活性及对H2O2光解反应诱导质粒p BR322 DNA损伤的保护作用。结果表明芡实多糖的最佳提取条件为:料液比1∶20(g/m L)、p H3、纤维素酶用量为原料质量的2.0%、超声时间5min、提取时间3h、提取温度40℃,多糖得率为17.04%。芡实多糖清除DPPH·、羟基自由基的能力较好,IC50分别为1.78、6.96mg/m L,清除过氧化氢、超氧阴离子自由基的能力较弱,浓度为10mg/m L时,清除率分别为48.00%、20.32%。芡实多糖对抑制DNA损伤具有显著作用,在多糖水溶液质量浓度为0.08mg/m L时,具有最佳保护作用;在质量浓度大于1.0mg/m L时,对质粒DNA没有保护作用,甚至促进了DNA的损伤。综上所述,芡实多糖具有抗氧化及抑制DNA氧化损伤的能力。      

海菜花结合酚的组成、抗氧化活性及其对DNA损伤的保护作用

采用福林-酚法、亚硝酸钠-氯化铝法分别测定海菜花花、茎、叶中结合酚总酚及黄酮含量,采用高效液相色谱(HPLC)分析结合酚的组成,并研究其抗氧化活性及其对过氧自由基(ROO·)介导的DNA损伤保护作用.结果表明,海菜花结合酚总酚含量为209.72～366.35 mg GAE/g提取物(Extract),黄酮含量为156....