采用木瓜蛋白酶制备乌鸡蛋白肽的研究

探讨了各单因子对木瓜蛋白酶酶解乌鸡蛋白质的影响及水解度与肽得率、总氮得率之间的关系。结果表明,pH变化对肽得率影响很小;随着时间延长,水解度和总氮得率不断升高,肽得率3h后达到平衡阶段;温度<70℃,随着温度的提高、酶用量的增加,水解度、肽得率和总氮得率均增加,但总氮得率增加明显;随着底物浓度的减少,水解度几乎不变,而肽得率和总氮得率均增加。综合考虑,最佳水解条件为温度70℃,酶用量E/S4000U/g,底物浓度7%。酶解3h后,酶解液中必需氨基酸37.41%,氨基酸总量61.01mg/mL,其中游离氨基酸9.89%,肽含量90.11%。      

固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽的研究

采用固定化木瓜蛋白酶水解大豆分离蛋白,对大豆分离蛋白的最佳预处理温度进行了探讨,并对制备大豆肽的工艺条件进行了正交实验.结果表明:大豆蛋白的最佳预处理温度为90℃;在底物浓度2.7 mg/mL、温度55℃、pH7.8、流速0.6 mL/min的条件下,利用固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽,酶解液中的可溶性蛋白含量为1.384 mg/mL,水解度43.65%;影响酶水解反应的因素主次顺序为:pH＞温度＞底物浓度＞流速.     

应用固定化木瓜蛋白酶制备大豆肽的研究

以壳聚糖为载体,用戊二醛交联将木瓜蛋白酶固定化,研究水解大豆分离蛋白制备大豆肽的工艺条件,结果表明:固定化木瓜蛋白酶的表观米氏常数为8.9 mg/mL.固定化木瓜蛋白酶的最适温度为55℃,最适pH为7.8,最佳底物浓度为2.0～3.0 mg/mL,大豆分离蛋白的最佳流速为0.2 mL/min,大豆分离蛋白的水解率达到42.6%,酶解液中大豆肽含量为1.453 mg/mL.酶解液多肽分子质量大部分在10 ku以下.     

木瓜蛋白酶水解绿豆蛋白制备可溶性肽的研究

通过研究木瓜蛋白酶对绿豆蛋白的水解作用,分析了酶浓度、底物浓度、温度、pH、水解时间等因素对水解度的影响,从而确定木瓜蛋白酶水解绿豆蛋白制备绿豆多肽的最佳水解条件,并利用葡聚糖凝胶（SephadexG-15）柱层析测定绿豆多肽分子量。实验结果表明,当水解度为30%时,绿豆多肽分子量绝大多数在1000Da以下。      

木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的工艺优化研究

以大豆蛋白水解度为指标,通过单因素和正交试验研究了温度、pH、底物浓度和酶浓度四因素对木瓜蛋白酶水解大豆蛋白工艺的影响,并优化了工艺条件。试验结果表明,影响木瓜蛋白酶水解大豆蛋白的主次因素为温度、pH、酶浓度、底物浓度。最佳工艺参数组合为:温度60℃,pH7.5,酶浓度3.5%,底物浓度5%。在此工艺条件下,木瓜蛋白酶水解大豆蛋白40 min,水解度达到6.58%,大豆肽的氨基酸平均数目为15,平均分子量为1875。     

酶法水解制备鲅鱼可溶性肽的工艺研究

为确定木瓜蛋白酶水解鲅鱼的最佳条件,为低值小鲅鱼的开发利用奠定基础。采用木瓜蛋白酶水解脱脂后的鲅鱼粉,以蛋白质水解度为评价指标,通过正交试验考查了酶浓度、底物浓度、水解温度和水解时间对水解效果的影响。确定最佳水解条件为：酶浓度5 000U/g,底物浓度5%,水解温度50℃和水解时间6h,在该条件下水解,水解度可以达到33.21%。在此工艺条件下,鲅鱼蛋白水解效果较好,且水解液色泽较浅,有浓郁的鱼香味。     

木瓜蛋白酶制备大豆抗癌活性肽的研究

以大豆分离蛋白为原料,以细胞生长抑制率为指标,用木瓜蛋白酶对其进行酶解,得到大豆抗癌活性肽。木瓜蛋白酶的最佳作用条件为:温度55℃、酶添加量7 000 U/g、反应pH 7.5、底物质量分数6%、酶解时间4 h。在抗癌活性肽制备过程中,对水解度和肽活性之间的关系进行了研究。结果表明,水解度与大豆肽的抗癌活性不呈线性关系。用10 000 u和5 000 u的超滤膜处理木瓜蛋白酶的酶解产物,在不同分子质量的超滤组分中,分子质量小于5 000 u组分的癌细胞生长抑制率最高,达32.58%。     

木瓜蛋白酶在乌鸡肉蛋白质分步酶解中的应用研究

对乌鸡肉蛋白质的分步酶水解工艺及其水解液的澄清方法进行了研究,结果表明：将乌鸡肉破碎、预煮后,用Ａｌｃａｌａｓｅ和木瓜蛋白酶分步水解鸡肉蛋白质,瑞经灭酶、硅藻土过滤等处理,可制得香味良好且澄清和乌鸡肉蛋白质水解液,水解产物的水解度和总的氮收率分别为３１．９９８和７７．１５８。     

双酶水解法制备羊胎盘活性肽

采用现代生物酶解技术制备羊胎盘生物活性肽 ,以水解度 (DH)和酸溶性肽得率(YASP)为指标 ,在单酶水解的基础上探索更加有效的新工艺———双酶水解工艺。实验确定了木瓜蛋白酶 (Papain)与胰蛋白酶 (Trypsin)的等活力混合酶为水解羊胎盘的最佳双酶组合 ,其最佳酶解工艺条件为 :pH7 0、温度 5 2℃、酶活添加量 3 0 0 0u/ g(料 )、底物浓度 10 %、水解时间 3h ,酶解前最佳热处理条件为沸水浴 15min。     

木瓜蛋白酶制备广昌白莲降血压活性肽的研究

为探讨木瓜蛋白酶对广昌白莲蛋白的水解特性及所获多肽的降血压活性,以广昌白莲蛋白为原料,以水解度（hydrolysis degree,DH）为指标,选用木瓜蛋白酶水解白莲蛋白获得多肽,通过测定多肽对血管紧张素转换酶（angiotensin converting enzyme,ACE）的抑制活性,得到广昌白莲ACE抑制活性肽。通过正交实验L₁₂（3⁴）因素水平实验法确定木瓜蛋白酶水解白莲的最优条件为pH6.5,温度55℃,底物浓度5%,酶浓度8%。由极差值R可知各因素的主次关系是温度>pH>底物浓度>酶浓度。对不同水解度下的多肽进行了降血压活性的研究,结果表明,ACE抑制率与水解度呈正相关。对多肽进行大孔吸附树脂静态乙醇分级洗脱后测定降血压活性,结果表明,经25%乙醇洗脱后,多肽降血压活性最高,为55.78%,其IC₅₀为0.045mg/mL。      

木瓜蛋白酶酶解黑豆制备多肽

以黑豆豆粕粉为主要原料,经木瓜蛋白酶水解成多肽.通过一系列单因素和正交实验,确定黑豆多肽的最佳水解工艺条件,根据四肽标准曲线得出多肽转化率.结果表明:最优实验方案为豆粕粉浓度为0.01 g/mL,酶解温度为60℃,酶活为40000U/g,酶解7h,此时黑豆蛋白水解度最大,黑豆多肽转化率为63.53％.各因素对实验的影响主次依次为温度、时间、豆粕粉含量、酶活.     

木瓜蛋白酶酶解黑豆制备多肽

以黑豆豆粕粉为主要原料,经木瓜蛋白酶水解成多肽。通过一系列单因素和正交实验,确定黑豆多肽的最佳水解工艺条件,根据四肽标准曲线得出多肽转化率。结果表明:最优实验方案为豆粕粉浓度为0.01g/mL,酶解温度为60℃,酶活为40000U/g,酶解7h,此时黑豆蛋白水解度最大,黑豆多肽转化率为63.53%。各因素对实验的影响主次依次为温度、时间、豆粕粉含量、酶活。      

固定化胰蛋白酶制备大豆肽正交实验的研究

采用固定化胰蛋白酶水解大豆蛋白,对大豆蛋白的最佳预处理温度进行了探讨,并对制备大豆肽的工艺条件进行了正交实验。结果表明:大豆蛋白的最佳预处理温度为90℃;固定化胰蛋白酶的表观米氏常数为12.5mg/mL。影响酶水解反应显著性的顺序为:温度,pH值,底物浓度,流速;在底物浓度2.7 mg/mL、温度60℃、pH8.7、流速0.6mL/min的条件下,利用固定化胰蛋白酶制备大豆肽,酶解液中的可溶性蛋白含量最大为1.414mg/mL,水解度41.51%。     

木瓜蛋白酶水解珠蚌制备肽钙及其红外光谱分析

以木瓜蛋白酶酶解珠蚌肉制备的活性肽为原料,研究珠蚌活性肽与钙离子的螯合新工艺,并对螯合产物进行红外光谱分析。研究表明:珠蚌活性肽与钙离子的最佳螯合工艺为螯合时间45min、温度35℃、肽钙比4.5:1、pH9.5、固液比1:30,此条件下,肽钙螯合率为31.47%。红外光谱扫描显示,肽的螯合产物在1418.7cm-1出现了羧酸盐的特征峰,在3386.8cm-1处出现了铵盐的特征峰,表明珠蚌活性肽与钙离子螯合物的生成。     

木瓜蛋白酶结合滚揉处理对马肉嫩度的影响

以系水力、蒸煮损失和剪切力为评价指标,结合滚揉处理,研究了木瓜蛋白酶在不同的添加量、p H值、处理温度和处理时间下对马肉嫩度的影响,并利用正交试验优化出了木瓜蛋白酶最佳嫩化条件。实验结果表明:木瓜蛋白酶的添加量、p H值、处理温度和处理时间对马肉的系水力、蒸煮损失和剪切力均有显著的影响;在木瓜蛋白酶的添加量15 U/g,处理温度50℃,p H 6.0,处理时间1 h;或者木瓜蛋白酶添加量为10 U/g,处理温度50℃,p H 6.0,处理时间1.5 h的条件下,添加木瓜蛋白酶均能达到理想的嫩化效果。     

Determination of papain in raw meat by immunoassay

An antibody raised to papain, a meat tenderising proteolytic enzyme obtained from papaya (Carica papaya), has been used in the development of an enzyme-linked immunoabsorbent assay (ELISA) for the determination of papain in raw meat. Quantitative determinations of papain up to 4 mg/kg of raw meat have been obtained using standard extracts prepared by the exogeneous addition of papain to raw beef. A sample of commercially treated 'tenderised beef' was shown to contain papain at the level of 0·40 mg/kg. In collaboration with a Public Analyst, a papain immunoassay kit has been used to assay 50 samples of beef bought from retail outlets, with a view to monitoring the use of this tenderiser by the meat industry.     

金枪鱼红肉抗氧化肽制备及功能性肽饮料配方优化

目的 制备金枪鱼红肉抗氧化肽,并以此抗氧化肽为原料开发一款功能性肽饮料。方法 以金枪鱼红肉为原料,选用复合蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶5种蛋白酶对其进行水解,以水解度为指标筛选适合的蛋白酶,对水解度最高的酶解产物进行抗氧化活性分析,并使用还原糖、柠檬酸、乙基麦芽酚、β-环状糊精对金枪鱼酶解液进行风味调配,并通过正交优化其配方。结果 复合蛋白酶酶解物的水解度最高为16.73%,酶解液具有良好的抗氧化活性。通过正交实验获得的金枪鱼肽饮料最佳配方为还原糖添加量10%、柠檬酸添加量0.6%、β-环状糊精添加量0.5 mg/mL、乙基麦芽酚添加量0.06%,该饮料理化指标和微生物指标符合国家标准,饮料总氨基酸含量为5.264 g/100 g,必需氨基酸/总氨基酸和必需氨基酸/非必需氨基酸均接近蛋白质理想模式,抗氧化氨基酸占总氨基酸含量的50.03%,表明产品具有良好的抗氧化能力。结论 本研究通过复合蛋白酶酶解获得了金枪鱼红肉抗氧化肽,并以此为原料开发了一款抗氧化功能肽饮料,可为金枪鱼红肉功能肽的制备及功能肽产品的开发提供参考。     

木瓜蛋白酶水解提取米蛋白的功能特性以及在肉得率中的应用

测定木瓜蛋白酶提取的米蛋白功能特性,包括保水性、乳化性和乳化稳定性、起泡性与泡沫稳定性、蛋白凝胶形成性、米蛋白吸油性,然后将蛋白添加到火腿肠中,测定得率。     

采用响应面优化法研究木瓜蛋白酶嫩化牦牛肉的条件

以牦牛肉为对象,以剪切力为考察指标,研究木瓜蛋白酶对牦牛肉的嫩化效果,在单因素实验的基础上,采用响应面中心旋转组合实验对影响木瓜蛋白酶嫩化牦牛肉效果的酶液pH、酶浓度和嫩化时间3个因子进行了优化,建立并分析了各因子与响应值的数学模型。结果表明,各因素对剪切力的影响大小顺序依次为酶浓度、酶液pH、嫩化时间;最佳嫩化参数为酶液pH5.1、酶浓度9.63mg/L、嫩化时间14.5h,在此条件下剪切力为4.76kg·f,与未嫩化的牦牛肉相比剪切力降低了2.19kg·f。电镜扫描显示:与对照相比,木瓜蛋白酶处理过的牦牛肉肌肉纤维结构具有明显的断裂痕迹。