细胞骨架系统的立体电镜观察

从两个角度拍摄同一物体,可得到具有“强烈”立体感的一对“体视”照片。细胞骨架具有复杂的空间排布。本文应用体视技术,用透射电镜、扫描电镜和扫描透射电镜对体外培养细胞的骨架系统进行了观察,描述了生长在载网上,并经triton x—100消化的小儿包皮成纤维细胞的骨架纤维,特别是张力纤维的空间分布及其与核的关系,并观察了细胞松驰素 B(Cytochalasin B.简称CB)所引起的骨架系统的改变。CB破坏含actin的非张力纤维的微丝结构,所造成的较大的不定形团块可连在张力纤维上。而多数团块是被微管和中等纤维互相牵拉而悬浮在细胞质各处。同时,这些纤维也因为团块的形成而变得互相靠拢,往往局部平行成束。与此同时,细胞骨架网状结构中出现空洞。在不同高度上,这些空洞的位置常常是一致的。本文还对样品制备和显微照相时的有关问题进行了讨论。     

一种观察细胞骨架的简易整装电镜制样方法

本文介绍一种显示细胞骨架的简易有效的整装电镜制样方法。24孔培养板上钻以直径为2.5mm的圆孔,覆上0.25%的Formvar膜后,成为培养细胞的良好支撑物,然后在原位对培养的细胞进行抽提、固定和二氧化碳临界点干燥,相差显微镜下观察、选择和定位,再以浸湿的单目铜网置于圆孔上,自然干燥后取上已覆有Formvar膜的铜网,即可进行标本的观察。该方法材料来源容易、经济,操作简便,成功率较高,并可减少盲目的电镜观察及人工假象,所得的细胞骨架图像清晰。     

应用电镜研究病毒与细胞骨架关系的几种简单方法

本文介绍了研究病毒与细胞骨架关系的几种简便的电镜方法。同时应用这些方法从多种角度对样品进行观察,不仅可以互相印证,而且能获得更多的信息。观察到了病毒感染的细胞骨架的某些变化。本文还报告了这些方法在研究动物病毒与细胞骨架关系方面的应用,并讨论了其优缺点。     

微量培养整装提取观察细胞骨架的方法

细胞骨架在细胞的组成中占有重要地位。它是活细胞的支撑物质,维持细胞及核的形态,决定各细胞器及某些大分子的空间位置,並参与其位移活动;参与细胞内的物质转运,细胞的收缩及伪足的运动,与细胞分裂活动有密切关系。自60年代发现细胞骨架结构汇来,国内外对其研究十分活跃,本文介绍一种微量培养整装提取观察细胞骨架的方法,其特点在于节省细胞用量、血清、培养液及某些昂贵试剂,同时使细胞便于在覆膜镍网上生长。用此法制备样品效果满意。制备Formvar膜,置镍网于膜上,再于网上放一小片中央有孔(φ2.5mm)的100目不锈钢网,用载片将此漂浮物整体捞出,晾干备用。形用器具均需灭菌处理。取φ6～8 mm口径的小玻管套住载网。基部外     

整装培养细胞内的内质网的透射电镜观察

我们曾报导采用萤光染料对培养细胞的内质网进行的定位研究以及适用于透射电子显微镜观察整装培养细胞内质网系统的高锰酸钾固定技术。本文以高锰酸钾为固定剂,固定整装培养细胞,并用透射电子显微镜在60kV电压条件下;观察分布于细胞内的内质网系统。将覆以Formvor膜的镍网放入培养皿内,把细胞接种于镍网上,并以含有5％小牛血清的Bulcco改良的Ea-     

一种观察体内细胞骨架的电镜方法

迄今为止对细胞骨架的形态与分布的研究,几乎全部是在组织培养细胞中进行的。这主要是由于研究活体组织中细胞时要进行切片,而引入的包埋介质限制了去垢剂进行提取等重要而有效的技术手段的应用。然而,有关的研究结果已充分显示出体外人工培养条件,特别是对固体基质表面的附着,造成了骨架系统的一系列显著改变。本文试用新鲜活体组织为材料,在Bright5030型低温切片机上快速冷冻并切成2—8μ厚切片,用盖玻片条或电镜载网取下切片,立即放入37℃的含有非离子型去垢剂TritonX—100(浓度为0.5％)和戊二醛(浓度为2％)的微管稳定性缓冲液中进行处理,或先行提取随之进行固定。用系列提高浓度的乙醇脱水后,临界点干燥,喷镀金膜,用扫描电镜观察,或在固定后用醋酸双氧铀染色。再经脱水和临界点干燥,以透射电镜观察。从而提供了一     

心肌细胞内SOD定位的电镜观察

利用心肌组织缺氧再灌注方法，已获得心肌细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性定位的证据，是通过Ｂｒｉｇｇｓ等人介绍的铈方法，用电子组化来研究的。羟基过氧化铈的形成作为ＳＯＤ活性的一种指示剂，其结果表明：（１）ＳＯＤ活性位置存在于心肌细胞浆基质及一些线粒体内，而细胞核及其它细胞器内未见同类标记物。（２）羟基过氧化铈可作为心肌细胞内ＳＯＤ的一种定位指示剂。     

甜菜黑色焦枯病毒电镜与免疫电镜观察

甜菜黑色焦枯病毒电镜与免疫电镜观察孙晓陆王钫肖英王建梅（新疆农科院中心实验室，乌鲁木齐８３００００）甜菜黑色焦枯病是世界范围的甜菜种植中的毁灭性病害。本文报告了甜菜黑色焦枯型病原病毒（ＢＢＳＶ）的电镜与免疫电镜观察结果。寄主鉴别在防虫网室中以常规摩擦...     

蚕豆末期染色体的立体电镜观察

关于染色体的高层次结构,迄今尚无统一意见。对染色体进行立体电镜观察有助于阐明染色体的结构。我们按常规固定、包埋蚕豆根端分生组织,用LKB-5型切片机切片,经醋酸铀和柠檬酸铅染色,在Hitachi600B型电镜下进行观察,倾斜角为±7°。我们发现,末期染色体横切面中央和周边部位存在着电子密度很低的区域,其中有纤维和颗粒结构(图1,白箭头)。从立体对(图1和2)中可以看出,这些纤维和颗粒分布在低电子密度区中不同平面上,染色体与染色体间物质(黑箭头)也不在一个平面上。末期时染色体中央低电子密度区增大;有的染色体切面是“O”形,其中央低电子密度区是封闭的;     

貂细小病毒的电镜和免疫电镜观察

1949年,Schofield于加拿大发现细小病毒引起的貂急性传染性肠炎,此后,美国、日本及欧洲等养貂国家也有发病报导。在我国,姜廷秀等81年报导了我国发生“疑似水貂病毒性肠炎”。我们对辽、鲁、冀、青、内蒙等养貂密集地区进行了流行病学调查,发现1983年冬至84年春局部地区曾出现四次暴发,种貂发病率为83.4％,死亡率为15.1％。为了确诊本病,对采集的自然感染病貂粪样品用氯仿处理后负染观察,发现了典型的细小病毒粒子。病毒粒子直径约20mμ,有实心、空心、内有类核三种形态(图1)。     

澄江县烟草病毒的电镜观察

澄江县烟草病毒的电镜观察＊木崇俊龙华刘宇君周庆和积鉴白光启（云南大学物理系，昆明６５００９１）自１９９１年以来，我们在澄江县凤麓镇郊采集受病毒感染的烟叶标本，从中提取病毒，制成电镜样品，进行透射电镜观察。我们的做法是到受病毒害的烟田按常用分类方法［１...     

草鱼出血病病毒的电镜观察

草鱼出血病是我国淡水渔业的一大病害,我所与长江水产所协作开展对草鱼出血病病毒的分离,防治和分子生物学的研究。本文侧重介绍利用电子显微镜对草鱼出血病病毒的形态和超微结构的研究。材料与方法病毒制备成悬液,滴于火棉胶炭膜铜网上待干后,2％磷钨酸负染。取病鱼的肝、脾、肾组织和病变细胞,用2％戍二醛和1％锇酸双固定,苯二甲酸二丙烯酯包埋,LKB—8800型超薄切片,于JEM—100C电子显微镜观察。     

一种拟病毒在辣椒细胞内复制的电镜观察

病毒的基本结构都是由蛋白质衣壳和衣壳包裹着的核酸所构成。91年我们曾用电镜负染技术在辣核上发现一种新的10nm左右含RNA的等轴对称核蛋白病原体。虽然它已具备病毒的基本结构特征,但我们还未及做病毒学上的全面鉴定,故暂且称它为“拟病毒”。本文就其在辣椒叶肉细胞中的复制作一初步探讨。     

印度黄麂细胞骨架系统的电镜研究

细胞骨架决定细胞的形态与运动,并参与多种细胞生理活动。在已研究的多种体外培养的细胞系(株)中,细胞骨架具有很大共性。印度黄麂(Indian Muntjac)转化细胞系是一种在生物学研究上很有应用价值的成纤维细胞,而我们的初步研究表明其骨架纤维在组织及排布上都与已知模式有很大区别。为了更好地在电镜观察中显示细胞骨架系统的空间排布及其纤维的成分和走向,我们主要采取了下述样品制备技术:①对生长于载网及盖片上的细胞用非离子型去垢剂Triton×-100整体提取,在扫描、透射电镜下进行观察,并变换拍摄角度,拍成立体象对。②对生长于塑料培养碟中的细胞经原位包埋后,连同塑料基质一起进行水平的和垂直的定向切片。观察表     

用SEM观察植物细胞骨架的三维结构

用SEM研究植物细胞骨架三维结构迄今人们为了研究植物细胞骨架的三维结构,主要采用连续切片进行三维重构或厚切片方法以及免疫荧光技术。利用扫描电子显微术来研究植物细胞骨架的报道极少,其主要原因在于样品制备的困难。我们根据Blackmore等(1984)方法利用快速冷冻固定保存细胞结构及其微管系统,并结合Tanaka等(1981)的用低浓度OsO_4     

应用电镜及电镜原位杂交法观察和分析SARS-CoV在人体细胞内的定位

本文通过电镜及电镜原位杂交方法,观察和分析SARS患者外周血淋巴细胞和SARS尸体解剖肺组织内的SARS CoV病毒颗粒的分布,并对SARS CoV病毒颗粒进行定性鉴定。在SARS患者外周血淋巴细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞内均发现了SARS CoV病毒样颗粒,直径大小80～120nm,圆形或椭圆     

乙型病毒性肝炎LAL的流式细胞检测与电镜观察

肝脏相关淋巴细胞 ( Liver- associated lymphocytes,LAL)是指一类不参与血液循环 ,粘附于肝窦壁的淋巴细胞群。在肝内诸多因素影响下 ,它的形态 ,表型均有特异表现 ,作为肝脏的第四类非实质细胞 ,广泛地参与肝脏疾病的始终。本文运用流式细胞术和电镜方法从形态、表型角度来分析 LAL在乙型病毒性肝炎中的表现。材料与方法　参照第五次全国会议修定的肝炎临床诊断标准 ,选择乙肝患者 2 3例。 ( 1 )流式细胞检测方法 :将新鲜肝穿标本 1 mm3制备成实体肝细胞悬液 ,加入鼠抗人 CD3FITC/CD5 5 +1 6 PE单克隆抗体进行免疫标记后 ,使用 FA…     

水生动物病毒的电镜和荧光显微镜观察

应用透射电镜和荧光显微镜对三种水生动物病毒粒子形态、病毒感染细胞的超微结构变化及亚细胞定位进行比较和研究。负染电镜观察显示:鳜鱼弹状病毒(SCRV)粒子呈典型的子弹状形态,长约76～118 nm,直径约29～52 nm;鲈鱼呼肠孤病毒(LJRV)粒子呈正二十面体结构,具有双层衣壳,直径约70～80 nm;蛙虹彩病毒(RGV)粒子呈正二十面体结构,具有囊膜,直径大小约150 nm。超薄切片观察表明,宿主细胞的基本结构遭到不同程度的破坏,成熟病毒粒子分布在胞质中或以出芽的方式释放到胞外,且RGV增殖后在胞质中聚集形成晶格状结构。免疫荧光观察进一步显示,RGV感染细胞后能产生多个直径大小不一的包涵体。本研究结果有助于了解和认识水生动物病毒的超微形态特征、复制过程及致病机理。     

文昌鱼生殖细胞与辅助细胞关系的电镜观察

文昌鱼是无脊椎向脊椎动物进化的一个重要过渡类型,对它的研究具有理论意义和经济价值。弄清生殖细胞与辅助细胞的关系,有助于对泡生长和卵子成熟控制因子的了解,亦可进一步了解卵巢发育的神经内分泌调控,为人工养殖这种濒临灭绝的珍贵动物提供依据。实验用的文昌鱼(Branchiostoma Belcheri Gray)产于厦门琼头海域,取原始卵巢,用戊二醛和O_sO_4双固定,环氧树脂618包埋,铀、铅双染色,JEM—100CXⅡ电镜观察。在电镜下可见卵巢中有三种细胞:营养细胞、滤泡细胞和各级生殖细胞,前两者统称辅助细胞。营养细胞外形变化颇大,不规整,核较大常有分叶、核仁多个,胞质中含丰富内质网,高尔基复合体     

感染细胞内Q热立克次氏体增殖的电镜观察

Q热是一种人畜共患疾病,其病原体为伯纳特氏立克次氏体(Coxiella burneri),通称Q热立克次氏体Q-R。本文报告应用电镜观察感染细胞内Q-R的增殖过程及细胞超微结构改变。小白鼠腹腔内接种从人体分离的Q-R。动物发病后取脾脏组织按常规制作超薄切片,透射电镜观察。部分动物接种减毒株Q-R。电镜下,感染毒力强Q-R小鼠脾网状内皮细胞和中性粒细胞胞浆内含数目不等的Q-R剖面。有的仅单个Q-R被吞食与溶酶体融合形成吞噬体,其中Q-R超微结构完好,细胞壁外薄内厚的双层脂质膜和质膜均清晰可辨,胞体或为