芜菁精制多糖的提取、鉴别及含量测定

目的提取芜菁精制多糖并且对分离得到的精制多糖进行鉴别与含量测定。方法采用水提醇沉法提取粗多糖后,采用DEAE-650纤维素柱对芜菁粗多糖洗脱,从而得到芜菁精制多糖;对分离得到的精制多糖进行理化鉴别;采用紫外-可见分光光度法测定芜菁精制多糖含量。结果分离得到的精制多糖由Molish反应的结果可知组分为糖类物质;由斐林反应结果可知多糖组分中含具有还原性的基团;由三氯化铁反应结果可知多糖组分中不含酚类化合物,且醋酐-浓硫酸反应结果可知不含皂苷类化合物;精制多糖的平均含量为581mg/g。结论该提取工艺经济,简单,稳定,可作为芜菁精制多糖的提取分离方法,而且得到的精制多糖含量高,为后续进一步利用提供基础。     

响应面法优化新疆芜菁多糖提取工艺及体外抗氧化活性研究

在单因素实验结果上,采用响应面法(RSM)的Box-Behnken design(BBD)实验对新疆芜菁多糖的提取工艺进行优化,并利用DPPH自由基清除能力和还原力评价其体外抗氧化能力。结果表明:最优的提取条件为提取温度93℃,液料比为75 mL/g,提取时间4.3 h,提取次数3次,在该最优提取条件下进行验证实验,测得的新疆芜菁多糖得率为23.72%±0.33%。此外,体外抗氧化实验表明:新疆芜菁多糖的DPPH自由基清除能力和还原力具有量效依存关系,其在两种体系中的EC₅₀值分别是8.55和2.25 mg/mL,表明新疆芜菁多糖具有较强的体外抗氧化能力,可以作为天然抗氧化剂应用于功能食品或者制药工业。     

甘肃河西沙区锁阳多糖提取工艺优化及含量测定

采用水提醇沉法,利用L9(33)正交试验优选锁阳多糖的提取工艺,用硫酸苯酚比色法对甘肃河西沙区不同地区锁阳中多糖含量进行测定。结果表明：提取最佳工艺条件为料液比1:15(g/mL)、提取时间90min、提取次数为2次;甘肃河西沙区不同地区锁阳多糖含量差别显著。锁阳多糖可作为控制锁阳质量的一项指标性成分。     

锁阳多糖超声提取工艺及含量测定研究

目的:筛选优化得到锁阳多糖最佳超声提取工艺,研究锁阳多糖含量测定方法,测定比较锁阳样品中多糖含量情况。方法:以多糖得率为考察指标,苯酚-硫酸法为含量测定方法,采用单因素和（L9（34））正交实验考察锁阳多糖超声提取工艺,并在含量测定方法学研究的基础上测定比较各样品多糖含量。结果:锁阳多糖超声提取最佳工艺为:超声功率420W,料液比1∶35,提取温度80℃,超声提取时间60min,提取2次。在此条件下,锁阳多糖平均得率可达4.51%（n=5,RSD=1.98%）。瓜州锁阳多糖含量明显较新疆和内蒙高,且瓜州三九锁阳多糖含量最高。结论:实验得到的超声提取工艺能明显提高锁阳多糖得率,实验采用的含量测定方法快速、简便,结果可靠,研究结果可为锁阳资源的合理开发及其产品的质量控制提供科学的参考依据。      

甘薯叶多糖提取工艺优化及结构测定

本文研究并优化了甘著叶多糖热水提取和乙醇沉降等分离工艺条件,提取工艺优化结果为加水倍数100、温度80℃、时间2.5h、提取1次;最佳沉降工艺条件是提取液浓缩比为5、乙醇加入量为5倍,在此条件下甘薯叶多糖沉降率达97.34%.采用红外光谱、紫外光谱法等对甘薯叶多糖进行了结构测定.     

超声波技术优化姬松茸水溶性粗多糖的提取工艺及含量测定

采用超声波技术对姬松茸中水溶性粗多糖提取工艺进行了优化,并用硫酸-蒽酮法测定了姬松茸多糖的含量。结果表明在超声功率140W、超声时间15min、提取温度80℃的条件下进行提取,多糖提取率最高,并且粗多糖中多糖纯含量为91.87%。     

超声波提取北芪菇多糖工艺的优化及含量测定

研究超声波辅助提取法从北芪菇中提取粗多糖的工艺。通过单因素试验确定了影响多糖类化合物的主要因素及较优水平,用正交试验优化提取工艺条件。结果表明：在超声波功率350W、提取温度80℃、料液比1g：60mL、提取时间50min的工艺条件下,北芪菇粗多糖最大提取率为8．71g／100g。用分光光度法测定其含量,以葡萄糖为标准品,苯酚一硫酸体系显色,在波长490nm处对样品中的粗多糖进行含量测定。结果表明,粗多糖在0．1mg／mL～2．0mg／mL范围内线性关系良好,相关系数为0．9991,平均回收率为97．38％,RSD=1．29％。该方法测定北芪菇中粗多糖含量,操作简便、准确,具有良好的稳定性和重现性。     

多糖提取分离及含量测定的研究进展

多糖的生物活性备受关注,其提取分离方法目前已成为研究焦点之一。常规的提取方法有:溶剂提取法、超声波法、微波法、酶提取法、超高压提取法;含量测定有比色法、HPLC法和薄层扫描法。本文就多糖在提取分离方面不同的技术和方法进行综述,以期为该领域的生产和研究工作者提供参考。     

芜菁多糖提取工艺及清除自由基活性的研究

在单因素实验的基础上,应用响应面法对芜菁多糖的提取工艺进行优化。测定了芜菁多糖清除自由基的活性。结果表明:芜菁多糖的最佳提取工艺为,浸提温度80℃,浸提时间2.5 h,液料比(30∶1)(mL∶g)。此条件下芜菁多糖的得率为8.858%,接近于理论值。芜菁多糖的体外清除自由基活性实验证明,芜菁多糖(WJc)对羟自由基的清除活性较好。     

树花多糖的提取及含量测定

目的 从树花（schizophyllum Commune)中分离、提取多糖。方法，树花水煎煮3次后去渣，提取液用95％乙醇沉淀，Saveg法去脂、去蛋白、色素，再经过透析、提纯，真空干燥得粗多糖。硫酸－苯酚法（Dubios法）进行定性、定量测定。结果 树花中粗多糖含量为35.3%，多糖的含量为0.51%。测定树花多糖的最佳波长为490nm，硫酸与总体积的比例为2:2.8标准曲线呈良好的线性关系，样品在3h内的测定结果基本稳定，重现性好（RSD=0.1％)，回收率为98.1%。结论 水煮醇沉法提取树花多糖较为稳定，不需特殊设备和试剂，简便易行。     

新疆芜菁酸性多糖分离纯化、抗氧化活性研究及红外表征

目的 检测分离纯化的芜菁酸性多糖(Brassica rapaL.acidic polysaccharide,BRAP)的含量和纯度,并对其进行抗氧化能力检测和红外表征。方法 (1)经阴离子交换柱DEAE-650M、HW-55F色谱柱以及Sephacryl S-300色谱柱洗脱分离纯化芜菁多糖;(2)采取紫外-可见分光光度法及苯酚-硫酸法测定芜菁酸性多糖的含量;(3)经由测定芜菁酸性多糖羟基自由基(·OH)清除能力,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(·DPPH)清除能力、金属Cu²⁺还原能力来评价其抗氧化活性,并与VC抗氧化能力进行对比;(4)应用红外光谱分析芜菁酸性多糖的化学键或官能团信息,通过高效凝胶渗透色谱法对芜菁酸性多糖的均一性分析。结果 芜菁酸性多糖的含量为55.47%;芜菁酸性多糖对·DPPH和·OH有一定清除能力,对金属Cu²⁺也有还原能力,但均比VC弱,红外光谱分析显示,芜菁酸性多糖中有多羟基醛糖的特征吸收峰以及与抗氧化活性相关的羟基。高效凝胶渗透色谱图显示芜菁酸性多糖为高纯度多糖。结论 新疆芜菁中有含量较为丰富且纯度较高的酸性多糖组分,且该成分具有较好的抗氧化活性。     

芜菁中性多糖降血糖作用研究的初步探讨

目的 初步探讨芜菁中性多糖对糖尿病大鼠的降血糖作用。方法 选取造模成功的SD大鼠,随机分为6组,分别为空白组、模型组、阳性对照组(0.20 g/kg)以及芜菁中性多糖高剂量组(0.20 g/kg)、中剂量组 (0.10 g/kg)、低剂量组(0.05 g/kg)。连续灌胃4周, 空白组喂养普通饲料, 其余组喂养高脂高糖饲料, 每周测一次体重与空腹血糖, 测定各组大鼠口服葡萄糖0、30、60、120 min后的血糖值, 计算曲线下面积(area under curve, AUC), 测定肝糖原含量。结果 芜菁中性多糖高、中、低剂量可明显改善STZ与高糖饲料所致糖尿病大鼠的糖代谢功能(P<0.05或P<0.01), 显著降低模型大鼠血糖(P<0.05), 多饮多尿症状明显改善, 可显著增加大鼠的糖耐量(oral glucose tolemnce, OGT) (P<0.01)。结论 芜菁中性多糖对糖尿病模型有降血糖作用, 高剂量组降血糖效果略强于中、低剂量组。     

响应面法优化芫根皂苷超声提取工艺

目的采用响应面法优化芫根总皂苷超声提取工艺。方法以芫根皂苷提取率为指标,在单因素实验基础上运用Box-Behnken响应面法设计以超声时间、提取温度、液料比3因素3水平的提取实验方案,按方案进行芫根皂苷提取实验,以响应面分析法(response surface methodology,RSM)对实验数据进行拟合分析,建立相应的数学回归模型,并进行方差分析,分析推导出芫根皂苷超声辅助提取最佳提取条件。结果超声提取芫根皂苷的最优工艺条件为:提取温度61.4℃,液料比22.82:1(m:V),提取时间35.96min,皂苷提取率为0.3691%。为简化操作,按提取温度61℃,液料比22:1(m:V),提取时间36min进行3次平行实验,芫根皂苷提取率为0.3635%,与模型预测值0.3691%相差较小。结论实验所确定的最优条件方便、可行。     

芜菁多糖除蛋白及抑制RAW264.7巨噬细胞焦亡作用研究

目的 考察芜菁多糖两种方法除蛋白效果,并探讨其对RAW264.7巨噬细胞焦亡的抑制作用。方法 采用AB-8大孔吸附树脂法、Savage法去除蛋白,苯酚-硫酸法测定多糖含量,采用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)及三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)建立细胞焦亡模型,细胞毒性检测试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)检测芜菁多糖对RAW264.7细胞增殖率的影响,免疫印迹实验(Western-Blot,WB)检测消皮素D (gasdermin D,GSDMD)相对表达量,酶联免疫吸附测定法检测白细胞介素-18 (interleukin18,IL-18)、IL-1β、肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、IL-6水平。结果 AB-8大孔吸附树脂除蛋白,多糖保留率为85.9%,蛋白去除率为91.0%;Savage法多糖保留率为77.6%,蛋白去除率为72.8%,精密度、稳定性、重复性和加样回收率的相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)均小于...     

芜菁中性多糖对A549荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的 探究芜菁中性多糖对A549小鼠移植瘤模型肿瘤微环境及凋亡相关蛋白、细胞因子水平的影响。方法 实验采用酶联免疫法、HE染色法、免疫组化法,检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,caspase-3)、白细胞介素2(interleukin-2,IL-2)、IL-6、IL-12和肿瘤坏死因子α (tumor necrosis factor,TNF-α)含量及B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax)相对表达水平,计算免疫器官指数、抑瘤率。结果 芜菁中性多糖能使A549荷瘤小鼠肿瘤组织caspase-3蛋白含量显著增加(P<0.01);使小鼠血清中IL-2、IL-6、IL-12、TNF-α含量升高(P<0.01);Bcl-2蛋白表达水平降低,Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 芜菁中性多糖对人肺腺癌细胞A549生长具有抑制作用,可提高A549荷瘤小鼠的脾脏指数和胸腺指数,下调Bcl-2蛋白,上调Bax蛋白的表达,减轻荷瘤小鼠脏器病理损伤。     

芜菁总多酚的提取工艺优化研究

目的 响应面法优化新疆芜菁中总多酚的提取工艺。方法 采用紫外分光光度法测定芜菁中总多酚的含量, 分别考察了乙醇浓度、料液比、超声时间、以及超声功率对芜菁总多酚得率的影响, 单因素的基础上进行了4因素3水平的设计, 以总多酚的得率为响应值, 分析数据, 优化新疆芜菁中总多酚的提取条件。结果 超声波提取新疆芜菁中总多酚的最佳工艺: 乙醇体积分数40%、固液比1: 30、时间30 min、功率 105 W时, 验证试验得出芜菁多酚的含量13.09 mg/g, 该值与预测值13.62 mg/g接近, 表明响应面法得到的工艺参数准确和可靠。结论 该方法提取时间短, 溶剂用量少, 提取效率高的优点, 可作为芜菁多酚提取工艺的一种有效手段。     

恰玛古多糖的抗氧化功能及其片剂的制备工艺

目的研究恰玛古多糖的抗氧化能力和片剂制备的加工工艺。方法使用水提醇沉法提取恰玛古粗多糖,并用Savege法除蛋白,活性炭脱色精制多糖。用提取的恰玛古多糖进行2组抗氧化实验,并使用单因素法筛选制备恰玛古多糖片剂所需的粘合剂、填充剂、崩解剂和润滑剂来确定最佳成型工艺。结果恰玛古多糖具有较好的抗氧化活性;80%乙醇做粘合剂、乳糖作为填充剂、5%用量的CMS-Na作为崩解剂和硬脂酸镁作为润滑剂为恰玛古多糖片剂的最佳成型工艺。结论恰玛古多糖具有较好的抗氧化活性,将多糖制成片剂为进一步利用这一传统维吾尔药食两用药物、开发天然的免疫调节剂奠定基础。     

芜菁子挥发油、多糖的组成及挥发油抗菌活性的研究

目的用3种方法提取芜菁子挥发油,对挥发油的抗菌作用进行定性和定量分析,并对芜菁子挥发油及多糖的组成进行分析。方法采用水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法和同时蒸馏萃取法提取芜菁子挥发油,气相色谱-质谱联用法分析挥发油的组成。运用滤纸片扩散法和二倍稀释法检验芜菁子挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的抑菌作用。利用水提醇沉法提取残渣中的多糖,酸水解后进行薄层分析。结果 3种方法提取的挥发油分别鉴别出21、7、14种成分。水蒸气蒸馏法提取挥发油中异硫氰酸酯类化合物占45.95%,同时蒸馏萃取法的为31.35%,溶剂萃取法提取挥发油无异硫氰酸酯类化合物。定性定量的抑菌实验结果显示,3种方法所得的挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌均有良好的抑制作用,水蒸气蒸馏法提取的挥发油的抑菌效果最好。在高效G板上,以乙酸乙酯:异丙醇:水=26:14:7(V:V:V)为展开剂,芜菁子多糖的分离效果较好,可鉴别出芜菁子多糖中的果糖和半乳糖。结论芜菁子挥发油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌均有一定的抑制作用,可能与其中含有异硫氰酸酯类和腈类化合物有关。