响应面法优化超声强化黑曲霉发酵产柚苷酶的工艺

为研究超声对黑曲霉发酵产柚苷酶的影响,在单因素试验基础上,以超声时期、超声功率、超声时长、超声次数和超声时间间隔为因变量,柚苷酶活力为响应值,进行五因素三水平的Box-Behnken设计,采用响应面法优化并获得了超声处理提高柚苷酶发酵活性的最佳工艺条件.结果表明,在超声时期27 h、超声功率160 W、超声时长14 m...     

响应面法优化黑曲霉固态发酵产木聚糖酶工艺

采用固体发酵法探索了黑曲霉(Aspergillus niger FIP-09-24)作用于基质麸皮和大麦渣生产木聚糖酶的最佳工艺条件。通过单因素试验和Plackett-Burman试验确定了碳源、含水量和氮源3个主要因素对固体发酵合成木聚糖酶的影响,根据中心组合设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,获得了黑曲霉固体发酵产木聚糖酶的最佳工艺条件。结果表明,麸皮和大麦渣质量比为3.8∶1、含水质量分数55.7%、含氮质量分数2.0%、28℃培养60h,发酵曲的木聚糖酶活力最高,为66 002U/g。     

黑曲霉液体发酵产纤维素酶酶系均衡性研究

采用pH值和温度两因素用正交实验法分析出黑曲霉710712纤维素酶系各组分最适酶解条件，其组合分别为：C1酶(pH5．0,45℃)，Cx酶(pH4．0，60℃)，βG(pH5．0，65℃)。在液体发酵条件下，探讨缓冲系统以及CaCl2及吐温-80对产酶的影响；分析了不同碳源以及碳源与碳源的配比对黑曲霉产纤维素酶系均衡性的相关性。结果表明碳源的种类和配比对最大酶活及其形成时间、比酶活和分泌变化规律均有不同影响效应。纤维素粉和麦麸浓度配比为1．09，6和2．0％时可明显改善所产纤维素酶系的均衡性；用0．1M柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液和添加适量CaCl2(0．3％)和吐温-80(0．3％)对产酶有正向影响。     

微生物柚苷酶的研究进展

柚苷酶是一种具有α-L-鼠李糖苷酶和β-D-葡萄糖苷酶两种酶学活性的酶,在柑橘类产品脱苦、鼠李糖和普鲁宁制备及类固醇的生物转化等方面具有广泛的应用前景。柚苷酶来源广泛,其主要来源为微生物。不同来源柚苷酶的酶学性质往往会存在差异,从而影响其应用领域。系统地从柚苷酶来源、微生物产酶、活力测定、分离纯化与性质、克隆表达、结构、固定化及应用等方面对柚苷酶进行了综述,有助于指导其更好地科学研究和工业化应用。     

响应面法优化黑曲霉产木聚糖酶发酵条件的研究

从实验室保藏的10株黑曲霉菌株中经过筛选,得到一株产木聚糖酶活性较高的菌株黑曲霉F-3.利用响应面分析方法,对该菌株发酵产木聚糖酶的发酵温度、发酵时间和pH性值进行了优化研究,得到了产木聚糖酶的最优条件:发酵温度为30.8℃、发酵时间为98.7 h、起始pH为4.85,在该优化条件下,木聚糖酶的最高酶活可达到266.41 U/mL,较优化前提高了64.25％.     

黑曲霉产纤维素酶液体发酵条件的研究

以黑曲霉(Aspergillus niger)菌株为实验材料,采用液体深层发酵方法,研究了其所产纤维素酶各组分的条件.结果表明:纤维素粉3%、硝酸钾3%、聚乙二醇0.1%,初始pH6.5,250mL三角瓶装25 mL液体培养基、接种种龄为1d的种子培养液10%、32℃培养5 d,纤维素酶各组分活力达到最高.经过对液体发酵培养基及发酵条件的优化,黑曲霉达到产酶高峰的时间由6 d缩短为5 d,在最佳培养条件下,黑曲霉所产纤维素酶各组分酶活力分别为:羧甲基纤维素酶活力为24.52 u/mL,滤纸分解酶(FPA)活力为6.89 u/mL,β-葡萄糖苷酶活力为20.63u/mL.     

黑曲霉液体发酵生产β-葡聚糖酶的工艺条件研究

探讨了黑曲霉-(Aspergillus niger)液体发酵的最适工艺条件，在250mL三角瓶中装液量50mL，摇瓶转数为200r／min，发酵培养基起始pH为5．0，发酵温度为32℃，发酵周期为50h，酶活达到86U／mL。     

产木聚糖酶黑曲霉LN0601的液体发酵

利用黑曲霉LN0601 菌株液体发酵生产木聚糖酶。分别考察培养基碳源、培养基氮源、培养时间、培养温度、培养起始pH 及孢子悬液接种体积分数等因素对该菌株产木聚糖酶性能的影响。确立了黑曲霉LN0601 产木聚糖酶的最优条件, 即以质量分数为5 %的玉米芯粉作为培养基碳源;质量分数为1 %的NaNO₃ 作为培养基氮源;培养时间为2 d ;培养温度为28 ℃;培养起始pH 为6.5;孢子悬液接种量体积分数为20 %, 接入装有100 mL 液体发酵培养基的250 m L 三角瓶内, 150 r/ min 振荡培养。此条件下黑曲霉LN0601 的木聚糖酶活力可达2 000 U/m L 以上。     

MgCl2对黑曲霉柠檬酸发酵影响

黑曲霉柠檬酸发酵培养基中添加０．０８－０．１５ｍｇ／Ｌ的ＭｇＣｌ２,对菌体浓度没显著性影响,但可使柠檬酸产率提高４％－７％,发酵旺盛期断氧３０ｍｉｎ的实验结果与正常发酵结果对照表明,添加０．１ｍｇ／Ｌ ＭｇＣｌ２的摇瓶产酸率下降１６．２％;空白对照摇瓶产酸率则下降５６．８％,通过对柠檬酸合成酶「ＥＢ４．１．３．７」酶活测定及活体染色计数,我们认为,断氧条件下,０．１ｍｇ／Ｌ ＭｇＣｌ２使黑曲霉存活     

高产柚苷酶菌株的筛选研究

以桔皮粉为诱导底物,采用富集培养的方式从堆积腐烂桔皮的泥土中筛选出一株高产柚苷酶（Nnring—inase）的生产菌株WP-108,其摇瓶发酵培养测定其酶活力达910．1U／mL,同时其继代培养稳定性良好．通过对菌株的培养特征,形态特征的观察,初步鉴定该菌株为黑曲霉（Aspergillusniger）．     

米曲霉发酵产纤溶酶培养基的优化

通过单因素实验确定米曲霉NA-25产纤溶酶的最佳碳源为麸皮,最佳氮源为蛋白胨和NaNO3.利用SAS软件的Placket-Burman设计法对米曲霉NA-25产纤溶酶的培养基组成进行筛选,筛选出3个影响较大的重要因素,即蛋白胨、NaNO3、CaCl2,然后用中心组合实验设计进一步优化,经优化后,在上述因素分别为NaNO318.5 g/L,蛋白胨4.97 g/L,CaCl21.63 g/L时发酵液的酶活为98.13 U/mL,比原来提高了55.8%.     

红曲霉发酵产胞多糖工艺的优化

研究了碳源、氮源和无机盐对红曲霉Y－7产多糖的影响，优化并确定了产胞外多糖的培养基组成：麦芽糖60g/L，蛋白胨2．5g/L，磷酸二氢钾4g/L，硫酸镁0．5g/L，氯化钙0．6g/L。研究了油脂对胞外多糖的影响，并确定棕榈油的添加量为0．2g/dL。在500mL的三角瓶装培养基75mL，接种量15％，种子液种龄24h，培养温度33℃，摇床转速220r/min，培养96h。在上述条件下生物量干重为1．42g/dL，发酵液胞外多糖产量可达3．24g/L，比初始条件高出2．5倍。     

发酵产柴胡皂苷酶的研究

研究了用酶水解柴胡皂苷分子上的部分糖基，使皂苷部分水解生成低糖、高活性皂苷的方法．探讨了3种菌株对柴胡皂苷糖基的水解能力，得到1种具有较高活性的菌株SP．以2，用于水解柴胡皂苷.通过TLC法分析得到柴胡皂苷酶解最佳反应条件为40℃、24h,pH=5．0，在此基础上的酶反应回收率为118.8％.     

黑曲霉As．n.XEC-1液体发酵产β-葡萄糖苷酶条件及酶学性质研究

实验分离得到一株具有较高胞外分泌β-葡萄糖苷酶能力的黑曲霉（Aspergillus niger）菌株As．n．XEC-1,并对其液体发酵产伊葡萄糖苷酶的条件及酶学性质进行了研究．结果表明,发酵温度32℃,发酵周期7d,摇床震荡频率200r／min,装液量500mL的三角瓶中装量为60mL,接种量8％,伊葡萄糖苷酶的活性最高．经过发酵条件优化后酶活由原来的130u／mL提高到192u／mL．β-葡萄糖苷酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH值为4．6,在45℃以下时酶稳定性较好,在pH3．0～6．0之间较稳定．     

黑曲霉发酵豆粕转化大豆异黄酮苷元的研究

对黑曲霉发酵豆粕产大豆异黄酮苷元的条件进行了研究.结果表明,最适发酵条件为：豆粕粒度40目,基质含水量75%,黑曲霉接种量8%,30℃下发酵48h.在此条件下发酵基质中苷元含量可达425.0mg/100g豆粕,比发酵前提高10倍.     

毛木耳5.584产漆酶发酵条件优化及降解麦麸的研究

漆酶在木质素分解过程中起着重要作用,毛木耳5.584产漆酶的能力较强且产生的漆酶具有较强的稳定性。为了深入了解该菌株发酵产漆酶的水平以及对麸皮的降解作用,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合原理设计四因素三水平响应面试验,以麸皮质量浓度、Cu2+质量浓度、培养基初始pH值、摇瓶转速为自变量,漆酶活性为响应值,确定最优的液态发酵工艺参数:麸皮质量浓度41.50 g/L、Cu2+质量浓度1.30 g/L、培养基初始p H 5.18、摇瓶转速182 r/min,优化后发酵液的漆酶活性达到188.54 U/m L。对菌株降解麸皮的效率进行了测定,优化后菌株对小麦麸皮木质素的降解率达到68.72%,是优化前的1.9倍。毛木耳5.584的液态发酵条件优化后,不但提高了产漆酶的活性,也提高了对麸皮的降解效率,表明该菌株在麸皮综合应用方面具有良好的前景。     

发酵产柴胡皂苷酶的研究

研究了用酶水解柴胡皂苷分子上的部分糖基,使皂苷部分水解生成低糖、高活性皂苷的方法.探讨了3种菌株对柴胡皂苷糖基的水解能力,得到1种具有较高活性的菌株SP.c42,用于水解柴胡皂苷.通过TLC法分析得到柴胡皂苷酶解最佳反应条件为40℃2、4 h、pH=5.0,在此基础上的酶反应回收率为118.8%.     

产黄芪甲苷酶的酶反应条件

为提高黄芪甲苷产率,研究了微生物所产的黄芪甲苷糖苷酶将3个糖基黄芪皂苷转化为黄芪甲苷的酶性质。该酶的最佳反应条件为：反应温度为35℃,底物质量浓度为30mg／mL,pH5．0,酶反应时间28h,K^＋、Na^＋对提纯酶有激活作用,Zn^2＋、Fe^3＋对酶有抑制作用,其中Fe^3＋抑制作用显著。在20～60℃、pH4．0～7．0时,酶活力相对稳定。在最佳酶反应条件下,黄芪甲苷的产率为8．7％。     

白腐菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化

在静置和振荡两种培养条件下研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(1igninperoxidase，LiP)的影响。静置培养时，LiP在碳氮比(C／N)低的培养基中显示较高的酶活力，碳源以葡萄糖(0．02％)和糊精(0．18％)同时存在及分段加入要比单一葡萄糖作为碳源时获得更高的酶活；振荡培养时，在碳氮比高的培养基中LiP酶活最高，而类似于静置培养的氮源组合及分段模式却明显地抑制了LiP的合成。优化后，静置培养在第6天可获得7560U／L的酶活；振荡培养在第8天获得6500U／L的酶活。发酵液中LiP酶活力与菌体分泌的其同功酶的数量成一定的对应关系。