海洋真菌Schizochytrium sp. DP-16发酵产DHA油脂过程的优化

利用一株海洋真菌Schizochytrium sp.DP-16发酵产DHA,对其发酵过程进行了优化,并利用气质联用(GC-MS)对其脂肪酸组成进行了分析。通过单因素试验确定了发酵培养基配方和培养条件,在优化条件下培养120h,细胞生物量达65.0g/L,油脂产量达30.7g/L,DHA达8.9g/L。GC-MS分析表明Schizochytrium sp.DP-16细胞中共检出8种脂肪酸,主要含有C14:0和C16:0两种饱和脂肪酸,不饱和脂肪酸主要包括DPA和DHA,其中DHA质量分数达28.784%。     

响应面法优化裂殖壶菌产DHA油脂的发酵培养基

采用响应面法对海洋真菌Schizochytrium sp.产DHA油脂的发酵培养基进行优化。通过单因素试验确定了以葡萄糖为碳源、酵母浸粉为氮源、谷氨酸钠为外源添加剂3个主要因素。根据Box-Behnken中心组合设计,以DHA油脂产量为响应值,对Schizochytrium sp. DP-16的发酵培养基进行响应面优化。优化后的培养基组成为葡萄糖83.60 g/L,酵母浸粉11.75 g/L,谷氨酸钠9.30 g/L,海水晶15 g/L,MgSO_4·7H_2O 5 g/L,KH_2PO_4·H_2O 7 g/L。优化后DHA油脂产量提高了4.5%。     

金属离子对发酵性丝孢酵母发酵产油脂的影响

通过摇瓶发酵．考察了不同浓度金属离子（Mg^2＋、Mn^2＋、Cu^2＋、Zn^2＋）对发酵性丝孢酵母（Trichosporon fermentans）发酵产油脂的影响，研究结果表明：培养基中添加适量的Mg^2＋、Cu^2＋、Zn^2＋有利于细胞积累油脂．但Mn^2＋对菌体生长及积累油脂不利。     

金属离子对发酵性丝孢酵母发酵产油脂的影响

通过摇瓶发酵,考察了不同浓度金属离子(Mg2+、Mn2+、Cu2+、Zn2+)对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)发酵产油脂的影响,研究结果表明:培养基中添加适量的Mg2+、Cu2+、Zn2+有利于细胞积累油脂,但Mn2+对菌体生长及积累油脂不利。     

菌株Eurotium sp. JW043的分离及培养基碳氮源筛选

茯茶是黑茶精加工的一种,具有消食健胃、降血压、降血脂等功效.在茯茶制备工艺过程中,通过人工接种"发酵剂",可明显提高茯茶的"发花"效率、缩短"发花"周期.从陕西泾阳茯茶中分离出一株"金花菌",具有开发为茯茶"发酵剂"的潜质.结合形态学和分子生物学方法确定其为散囊菌属真菌,命名为Eurotium sp.JW043,并对适于其菌丝生长和产孢的培养基条件进行优化.通过单因素实验筛选出蔗糖和酵母浸膏分别作为碳源和氮源.进一步通过正交试验探讨最适合该菌株菌丝生长和产孢的培养基组成.结果表明,适于该菌株孢子产生的培养基组成为每100mL培养基中含蔗糖5.0g、酵母浸膏1.5g、硫酸镁0.5g和磷酸氢二钾0.1g;适于该菌株菌丝生长的培养基为每100mL培养基中含有蔗糖7.5g、酵母浸膏1.5g、硫酸镁0.5g和磷酸氢二钾0.1g.对进一步开发菌株Eurotium sp.JW043为茯茶新型发酵剂,进而提高茯茶"发花"效率具有一定的应用价值.     

产氢菌株Clostridium sp.T7的快速筛选

取自潮间带的污泥分别在不同温度下（80、100、121,℃）进行热休克预处理,富集产氢菌群并测定其产氢量,利用变性梯度凝胶电泳（DGGE）分析混合菌群组成.结果表明：3种热处理条件下混合菌群的产氢量都要高于对照未处理菌群.DGGE图谱表明,与80、100,℃热休克处理混合菌群相比,经121,℃热休克处理富集的混合菌群,其电泳条带最少,测序结果发现该混合菌群中包括产氢菌Clostridium sp..从该混合菌群中纯化并鉴定了1株产氢菌株Clostridiumsp.T7（登录号HM104461）.培养温度对菌株T7产氢有一定影响,温度在25～55,℃范围内菌株Clostridium sp.T7都能产氢,最适产氢温度是35,℃.     

天然油脂和表面活性剂对发酵性丝孢酵母产油脂及脂肪酶的影响

通过摇瓶发酵,研究了天然油脂(大豆油、猪油)和表面活性剂(Tween80、洗洁精)对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)发酵生产油脂和胞内脂肪酶的影响。结果表明,大豆油对细胞产油和产酶的促进效果好于猪油,最适添加量为体积分数1.0%,发酵60h最大脂肪酶活力为347.5U/mL,发酵72h最大细胞油脂质量分数可达30.7%。低浓度表面活性剂对促进细胞产酶有利;Tween 80对细胞产油和产酶的提高效果好于洗洁精,最适添加量为体积分数0.5%,发酵60h最大脂肪酶活力为297U/mL,发酵72h最大细胞油脂质量分数可达30%。对于发酵性丝孢酵母,细胞内脂肪酶活力增加对油脂积累有促进作用。     

栅藻Desmodesmus sp. SNN1处理生活污水及油脂积累研究

利用生活污水培养微藻可去除污水中的氮、磷等污染物,有效缓解水体富营养化,生活污水培养微藻可以实现水质净化和生物质生产耦合。文章以前期筛选的栅藻Desmodesmus sp. SNN1为目标藻种,研究了初始pH、初始接种量等条件对生活污水处理及油脂积累的影响,并优化了培养条件。结果表明：栅藻Desmodesmus sp. SNN1处理生活污水最佳条件为初始pH=9.0、微藻初始接种量=0.6,在此条件下培养12 d后污水的化学需氧量、氨氮、总氮、总磷的去除率分别为47.98%、99.93%、97.29%和97.13%,最终生物量可达1.34 g/L;微藻生产油脂的最佳培养条件为初始pH=9.0、初始接种量=0.1,在优化条件下培养12 d后,油脂比例和油脂产量分别为29.54%、291.33 mg/L。     

响应面法优化微藻Chlorella sp.U4341油脂产率的研究

为了提高微藻Chlorella sp.U4341的油脂产率,采用响应面法对异养培养条件进行优化研究.通过单因素试验筛选出促进Chlorella sp.U4341油脂产率的最佳碳源、氮源分别为葡萄糖、Na NO3.利用Plackett-Burman试验筛选出显著影响Chlorella sp.U4341油脂产率的三个因子,通过最陡爬坡试验逼近最大油脂产率区域,运用中心组合试验及响应面分析确定了三个因子的最佳浓度:葡萄糖为24.81 g/L,Na NO3为1.68 g/L,K2HPO4·3H2O为0.58 g/L.优化后的条件培养微藻Chlorella sp.U4341的油脂产率为273.34 mg/L·d,比优化前提高了58%.     

刺孢小克银汉霉开放式固态发酵产油脂条件研究

以高产油脂菌株刺孢小克银汉霉B5为试验对象,研究了影响B5开放式固态发酵的多个因素并对其发酵过程做动力学曲线分析,刺孢小克银汉霉B5开放式固态发酵产油脂的最佳条件是:以5 g玉米秸秆为基本固体培养基,添加3.50 g的葡萄糖和0.15 g的硝酸铵,再加入0.025 g柠檬酸、0.02 g硫酸锌和8 mL水,接种量为10 mL.在此基础上,自然pH值,25℃,发酵8 d,固态发酵干基质油脂百分含量可以达到13%左右.     

碳源、氮源及碳/氮比值对发酵产氢细菌RF-9产氢性能的影响

利用间歇实验对不同碳源、氮源及碳氮质量比值对产氢细菌RF-9的发酵产氢行为影响进行了探讨.结果表明,葡萄糖和玉米浆+酵母膏复合物是产氢菌RF-9发酵产氢较理想的碳源和氮源.碳/氮(mC/mN)质量比值对菌株RF-9的生长发酵产氢行为产生很大的影响,随着mC/mN比值的逐渐加大,菌株RF-9的生长及发酵产氢性能也逐渐提高,当mC/mN为5.5时,葡萄糖利用率最大93.3%,产氢菌株RF-9的释氢量和生长量也达到最大,分别为135.9 mmol/L和0.723 g/L,发酵液相末端产物总量相应地达到最高5 850.8 mg/L,其中乙醇和乙酸是主要的可溶性代谢产物,pH降为最低3.36.当mC/mN＞5.5,随着mC/mN比值的继续增加,菌株RF-9的生长发育及代谢性能表现为下降趋势.     

一株假丝酵母Candida sp.发酵稻草水解液制取乙醇

从土壤中筛选到一株能发酵葡萄糖和戊糖制乙醇的菌种,通过形态观察初步称该菌为假丝酵母Candidasp;研究发现pH值、发酵供氧情况、总糖浓度等对该菌种发酵稻草水解液制取乙醇的效率都有一定的影响,并且实验结果发现稻草水解液经过氢氧化钙处理后,总糖的利用率与乙醇转化率都有所     

碳氮源对植物乳杆菌L69发酵羊奶产ACE抑制肽的影响

通过单因素试验,研究了在羊乳中添加酪蛋白、乳糖、葡萄糖和大豆蛋白胨等物质对LactobacillusPlantarumL69发酵羊奶过程中的酸度、pH、活菌数及产ACE抑制肽的影响,确定了4种物质的最适添加量．结果表明,酪蛋白、乳糖、葡萄糖和大豆蛋白胨的添加量分别为0．2％、0．7％、O．9％、0．5％时,发酵乳中ACE抑制肽的抑制率分别达74．5％、76．36％、89．12％、88．709／6;酸度和pH是呈负相关性,而活菌数和ACE抑制率没有相关性．     

一株分离自潮间带污泥细菌Clostridium sp. T7产氢特性分析

产氢菌株Clostridium sp. T7分离自天津海水浴场潮间带的污泥.研究起始pH、碳源、氮源、NaCl质量分数对菌株T7产氢性质的影响.结果表明：菌株T7最适产氢的起始pH是6.0,能够利用蔗糖、葡萄糖和果糖等碳源发酵产氢.菌株T7能够利用牛肉膏和酵母粉为单一氮源产氢,不能利用蛋白胨为氮源进行产氢.NaCl质量分数能影响菌株T7的产氢量,海水培养条件（NaCl质量分数为3%）下,最高产氢量是每摩尔葡萄糖（1.48,±0.05）mol,相比之下,淡水培养条件下其产氢量提高20%.NaCl质量分数在0.4%～7%时,菌株T7都能够产氢,这表明菌株T7有望应用于淡水或高盐有机废水产氢领域.     

反硝化产碱菌Alcaligenes sp.TB氧化亚氮还原酶基因的克隆表达及酶学性质研究

氧化亚氮(N2O)是一种重要的温室气体,对全球温室效应的贡献非常显著,反硝化细菌中存在氧化亚氮还原酶(nitrous oxide reductase,Nos)能将其最终还原成氮气。将生物转鼓反应器中筛选得到的一株高效反硝化产碱菌Alcaligenes denitrificans TB作为供试菌株,构建含有nosZ基因序列的原核重组表达菌株,经IPTG诱导完成在大肠杆菌中的表达,其最佳诱导条件为:诱导剂IPTG终浓度为0. 5 mmol·L-1,诱导温度为28℃,诱导时间为6 h,菌体初始浓度(OD600)为0. 67。再利用亲和层析分离纯化得到重组蛋白,通过检测显示重组菌E. coli BL21(DE3)-pET28b-nosZ酶活力是出发菌株Alcaligenes sp. TB的2. 09倍,蛋白相对含量是其10. 58倍。进而考察了反应体系pH和反应温度对酶催化反应的影响,结果显示,当pH为7. 0,温度为40℃时得到最佳酶活。     

拉乌尔菌Raoultella sp.Pan22x菌株群体感应抑制活性的培养基及发酵条件的优化

获得拉乌尔菌Raoultella sp.Pan22x最佳培养基成分和培养条件,提高粗提物产量和活性.以Pan22x菌株发酵液粗提物对紫色杆菌12472的群体感应抑制活性和粗提物质量为检测指标,对Raoultella sp.Pan22x菌株产抗菌物质培养所需的最基本培养基进行优化,并通过正交试验法对该菌株产抗菌物质的培养基配方和摇瓶发酵条件进行优化.Raoultella sp.Pan22x菌株产群体感应抑制活性物质最优培养基是LB培养基,其配方为淀粉4%,酵母浸膏0.3%,蛋白胨4%,Na Cl 1%.最优发酵条件组合为温度30℃,p H 7.5,摇床转速150 r/min,培养时间96 h,接种量为10%,装液量为100 m L/250 m L.获得了拉乌尔菌Raoultella sp.Pan22x最佳培养基成分和培养条件,提高了产物活性和产量.     

黑曲霉As．n.XEC-1液体发酵产β-葡萄糖苷酶条件及酶学性质研究

实验分离得到一株具有较高胞外分泌β-葡萄糖苷酶能力的黑曲霉（Aspergillus niger）菌株As．n．XEC-1,并对其液体发酵产伊葡萄糖苷酶的条件及酶学性质进行了研究．结果表明,发酵温度32℃,发酵周期7d,摇床震荡频率200r／min,装液量500mL的三角瓶中装量为60mL,接种量8％,伊葡萄糖苷酶的活性最高．经过发酵条件优化后酶活由原来的130u／mL提高到192u／mL．β-葡萄糖苷酶的最适作用温度为50℃,最适作用pH值为4．6,在45℃以下时酶稳定性较好,在pH3．0～6．0之间较稳定．