缩醛磷脂酰胆碱和缩醛磷脂酰乙醇胺的制备及其对氧自由基的清除作用

为探索猪心脏中缩醛磷脂酰胆碱（plas-PC）和缩醛磷脂酰乙醇胺（plas-PE）的制备方法并评价其对氧自由基的清除能力,以猪心脏为原料,经总磷脂提取、磷脂酰胆碱（PC）和磷脂酰乙醇胺（PE）柱层析分离、碱水解制备缩醛磷脂、硅酸柱层析等过程,研究了缩醛磷脂酰胆碱和缩醛磷脂酰乙醇胺的制备方法,并采用超氧阴离子自由基、羟自由基抑制法评价了其抗氧化活性。结果表明,在优化层析条件下,获得的PC纯度为93·5%,产率为36·3%;PE的纯度为91·6%,产率为18·5%。以硅酸为介质进行分步洗脱,获得的plas-PC和plas-PE的纯度为90·2%和92·5%,含磷量为1·67mg/mL和2·18mg/mL,基于总磷脂的产率为3·3%和4·3%。10·0mg/mLplas-PE和plas-PC对超氧阴离子自由基及羟自由基抑制率分别为46·10%、39·11%和33·39%、31·01%。      

高效液相色谱法测定磷脂软胶囊中磷脂酰胆碱、磷脂酰肌醇、磷脂酰乙醇胺的含量

目的建立高效液相色谱法同时检测磷脂软胶囊中磷脂酰胆碱(phosphatidyl cholines, PC),磷脂酰乙醇胺(phosphatidyl ethanolamine, PE),磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)3种组分的含量。方法样品用甲醇超声提取后,经Bridge?HILIC色谱柱(4.6 mm×150 mm, 5μm)分离,以0.9 mmol/L甲酸铵溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长为205 nm,外标法定量。结果磷脂酰胆碱,磷脂酰乙醇胺,磷脂酰肌醇在浓度0.025～0.250mg/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.99,检出限分为0.300～1.386 mg/g,定量限为1.002～4.624 mg/g,加标回收率分别为90%～105%,相对标准偏差为1.0%～4.0%。结论该方法高效,便捷,准确度高,适用于磷脂软胶囊中3种磷脂成分的同时检测。     

低碳醇对大豆磷脂中磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的选择性研究

研究了低碳醇对磷脂酰胆碱和磷脂酰乙醇胺的选择性 ,指出低温、低乙醇浓度有利于对磷脂酰胆碱的选择性。     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中的磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇

目的建立高效液相色谱检测法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱(phosphatidylcholines,PC)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine, PE)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol, PI)含量的方法。方法大豆磷脂类保健食品试样经正己烷:异丙醇(1:1, V:V)提取,经氨基柱(250 mm×4.6 mm, 5μm)分离,以流动相为无水乙醇-乙腈-水(50:40:10, V:V:V)为流动相等度洗脱,流速为0.4 mL/min,检测波长为205 nm,外标法定量。结果磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇在一定浓度范围内线性关系良好,相关系数大于0.999;检出限分别为1.3、5.0、1.0 mg/g,加标回收率分别为95.5%、99.5%、94.9%,精密度均为0.3%。结论本方法准确度高、重复性好,适用于保健食品中磷酯类物质含量的测定。     

HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量

该研究探讨采用HPLC–ELSD(蒸发光散射检测器)法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量。结果表明,选用硅胶色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)分别在0.5 mg/mL~8.0 mg/mL和0.4 mg/mL~6.0 mg/mL范围呈良好线性关系;PC和LPC平均回收率为99.42%和99.83%,相对标准偏差(RSD)分别为1.44%和1.21%。该法对大豆磷脂PC和LPC分析均具有良好精密度和重复性。     

高纯度磷脂酰胆碱研制

高纯度磷脂酰胆碱(PC)作为药物脂质体重要原料之一,是当今药物研究新成果及研究热点。该研究报道采用层析分离法提纯卵磷脂,并对物料浓度、填充剂、洗脱剂、及干燥等工艺参数进行研究,制备成PC含量达90%以上高纯度产品。     

水相体系酶法制备溶血磷脂酰乙醇胺研究

探索了磷脂酶A1在水相体系中酶解制备溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)的可行性,并进行了酶解条件对LPE相对含量的影响研究。得到最佳酶解条件为:磷脂酰乙醇胺(PE)的纯度为80%,液料比10∶1,酶解温度35℃,酶添加量0.04 m L/g,Ca Cl2添加量0.010 g/m L,酶解时间30 min。在最佳酶解条件下,得到酶解产物中的LPE相对含量为42.0%。     

冰岛刺参缩醛磷脂和醚磷脂对神经生长因子诱导PC12细胞的促神经分化作用

目的：分离纯化冰岛刺参（Cucumaria frondosa）中的缩醛型磷脂酰乙醇胺（plasmenylethonoamine,pPE）和烷氧型磷脂酰胆碱（plasmanylcholine,aPC）,并对其促进神经生长因子（nerve growth factor,NGF）诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma,PC12）细胞分化的神经营养作用进行探究。方法：以冰岛刺参为原料,通过柱层析分离法提取pPE和aPC,并通过液相色谱-质谱联用法测定其纯度;分析冰岛刺参pPE和aPC对PC12细胞存活率和分化率的影响,并统计分析细胞轴突长度和数目的变化;进一步通过实时荧光定量聚合酶链式反应、免疫荧光技术等方法检测PC12分化细胞中突触素和生长相关蛋白43（growth-associated protein 43,GAP-43）的表达量,明确冰岛刺参pPE和aPC对PC12细胞突触生长及分化的影响。结果：制备获得的冰岛刺参pPE和aPC纯度分别为91.0%和89.1%,两种不同结构的磷脂均可显著提高PC12细胞的分化率（P＜0.05）,通过促进突触素和GAP-43的表达促进细胞轴突生长,pPE的作用效果优于aPC。结论：体外细胞实验结果表明冰岛刺参pPE和aPC能显著促进PC12神经细胞分化及突触生长,且具有浓度依赖性和构效性。但详细的作用机制仍需进一步研究。     

冷冻结晶法纯化制备高纯度磷脂酰乙醇胺

为解决工厂低磷脂酰胆碱(PC)含量大豆粉末磷脂的积压问题,以及获得高纯度的磷脂酰乙醇胺(PE),以用碱性乙醇从低PC含量大豆粉末磷脂中提取的粗PE产品为原料,通过冷冻结晶法纯化制备高纯度PE。在单因素实验的基础上,以PE含量为指标,通过响应面实验对冷冻结晶纯化条件进行了优化。结果表明,PE的最佳冷冻结晶纯化条件为：料液比1∶40,冷冻时间21.5 h,冷冻温度-25℃,乙醇体积分数94%,乙醇碱浓度为94%乙醇与25%氨水体积比100∶8。在最佳条件下,产品PE含量为76.56%,PE回收率为81.25%。因此,冷冻结晶法纯化工艺可用于制备高纯度PE。     

磷脂及磷脂酰胆碱生物学功能

本文研究了磷脂的生物学功能及机理,认为在磷脂中,磷脂酰胆碱是最值得关注的磷脂之一。     

槲皮素-锌(Ⅱ)配合物清除自由基的活性研究

为改善槲皮素的水溶性,将其制成锌(Ⅱ)配合物,测定了槲皮素-锌(Ⅱ)配合物对四种自由基——DPPH·、·OH自由基、O-2·自由基以及烷基自由基的清除能力,并同VC、BHT进行了比较。并通过体内实验,测定其在小鼠体内的总抗氧化能力。结果表明:在实验质量浓度范围内(0.05～1.2mg/mL),槲皮素-锌(Ⅱ)配合物对DPPH·、·OH自由基、O-2·自由基的清除率可达90.51%、85.65%和79.81%;其对烷基自由基的抑制率为82.67%,且其抗氧化活性强于VC和BHT。小鼠体内的总抗氧化能力的测定结果显示,槲皮素-锌(Ⅱ)配合物在高剂量时具有最大抗氧化力,为12.7980±0.9131单位/mL血清。结果表明,槲皮素-锌(Ⅱ)配合物是一种有效的自由基清除剂。     

仙人掌多糖清除自由基的研究

本文研究了仙人掌水溶性多糖的提取及对Fenton反应产生.OH和过硫酸铵/N,N,N,,N,-四甲基乙二胺(AP-TEMED)体系产生的氧自由基的清除效果。结果表明以水为溶剂提取仙人掌多糖的得率为2.821%,纯度为24.76±1.20%。提取物经乙醇沉淀后,得到纯度为77.52%±1.19%的粗多糖。仙人掌粗多糖清除自由基的能力与其浓度呈线性关系,1000mg/L的多糖溶液对.OH和O2-.自由基的清除率分别为63.00%和57.06%。     

酰基化蓝莓花色苷的稳定性和对氧自由基清除能力

由于天然花色苷稳定性差,严重阻碍了其在食品工业中的广泛应用。为了改善花色苷的稳定性,采用分子修饰的方法,通过酰基化反应修饰蓝莓花色苷,并研究酰化后蓝莓花色苷的光、热稳定性和对氧自由基的清除能力。通过紫外吸收光谱和红外光谱表明蓝莓花色苷已经酰基化。相对未酰化的蓝莓花色苷,酰基化蓝莓花色苷的光、热稳定性显著提高,但清除羟基自由基、超氧阴离子自由基的能力略有下降,清除羟自由基、超氧阴离子自由基的IC50分别为0.74、3.14mg/mL。     

乳清蛋白肽的制备及羟自由基的清除作用

以全乳清为原料，利用碱性蛋白酶对乳清蛋白进行降解。结果表明，水解后的蛋白多肽对Fenton体系产生的羟自由基有清除能力。并通过正交试验，得出最优水解条件，即碱性蛋白酶[E／S]=1％，温度为60℃，pH=8．0，时间为1h，水解度12．46％的条件下，乳清蛋白肽的羟自由基清除能力最强．达到93．50％。     

乳酸菌对自由基清除能力的研究

研究了52株乳酸菌的细胞和无细胞提取物清除DPPH自由基的能力,从中筛选出了3株对DPPH自由基清除率较高的乳酸菌,并对它们清除超氧阴离子自由基、羟自由基的能力及其还原能力做了进一步研究。结果表明,ZS-2的无细胞提取物对DPPH的清除率最高(46.53%),对羟自由基具有较高的清除率(48.72%),但对超氧阴离子自由基没有清除作用;而FS-3和BCX-9细胞对羟自由基的清除率均高于它们的无细胞提取物,同时也具有较强的清除超氧阴离子的能力。其中,FS-3无细胞提取物对超氧阴离子自由基的清除率最高,3株菌均有一定的还原能力。研究表明,乳酸菌的细胞和无细胞提取物在体外实验中对各种自由基具有不同的清除能力。     

羊胎盘多肽的制备及其清除自由基能力的研究

利用黑曲霉、米曲霉、枯草芽孢杆菌作为发酵羊胎盘菌种,筛选出黑曲霉作为发酵羊胎盘的菌株,制备羊胎盘活性肽.通过单因素试验研究了料液pH、碳源含量、发酵时间对制备羊胎盘抗氧化肽工艺的影响,在此基础上,以DPPH自由基的清除率为指标,通过响应面法优化得到了最佳发酵工艺条件为pH值4.61、葡萄糖添加量2.79％、发酵时间76.38h,此条件下的DPPH清除率为83.78％;对发酵液进行超滤处理得到6组分,其中60％的产物分子质量均＜10 000u,不同组分的抗氧化活性大小为分子质量为3 000～10 000u的产物高于分子质量＜3 000u的产物,并得出了发酵液中不同分子质量段的多肽含量分布曲线.     

葡萄籽和葡萄皮清除自由基作用的研究

用化学发光法研究了葡萄籽和葡萄皮水提物对活性氧超氧阴离子自由基和羟自由基的清除作用,分光光度法研究了它们对１,１－二工本 基－２－苦肼基自由基的清清除作用。     

油茶总皂甙抑菌活性及清除活性氧能力初步研究

用溶剂法提取油茶饼中油茶总皂甙,经柱层析制备标准品标定有效成分含量为82.5%。以油茶皂甙为材料对枯草杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌进行抑菌试验,结果表明均有抑制作用;其中对枯草杆菌和金黄色葡萄球菌抑制作用较强,20%浓度对三种细菌均具有致死作用,抑菌圈直径大小与油茶总皂甙浓度呈正相关;且初步测定油茶总皂甙清除活性氧能力强于维生素C。     

黄芪多糖的提取及其对自由基的清除作用

用水浴浸提法提取黄芪多糖，有最高得率。其工艺条件为：固液质量比1：60，乙醇浓度80％，于90℃水浴提取3h。黄芪多糖提取液对自由基的清除作用也进行了研究。     

蜂胶中黄酮的提取及其自由基清除活性研究

以蜂胶为原料,在单因素实验的基础上,通过正交实验优化超声波提取蜂胶黄酮工艺,并对其抗氧化性进行评价。结果表明,影响黄酮提取的因素主次顺序为:料液比乙醇浓度超声时间提取温度,最佳提取工艺组合为A2B2C2D2,即料液比为1∶30、乙醇浓度为80%、超声时间为20min、提取温度为50℃,在此工艺条件下蜂胶中黄酮的提取率为9.60%。蜂胶中的黄酮对羟基自由基和超氧阴离子自由基具有较好的抑制作用且具有明显的量效关系,即随着提取物浓度的增加,对自由基的清除活性逐渐增强;当提取物添加量为0.15 mg/m L时具有较好的自由基清除作用,其抗氧化活性优于天然抗氧化剂VC。