机体脂质过氧化及抗脂质过氧化剂的研究

采用改良TBA法测定了不同情况下动物和人的血清与组织中LPO含量,观察了三种制剂对机体受照射所致脂质过氧化作用的影响。其内容包括:(1)大鼠及成人血清LPO正常值;(2)大鼠某些组织中LPO正常值;(3)某些精神病患者及某些恶性肿瘤患者接受放疗前后血清LPO含量的变化;(4)γ射线整体照射后大鼠某些组织中LPO含量的变化;     

几种制剂对辐射所致脂质过氧化作用的影响

本文报道了γ射线照射对小鼠肝、脾、肾中脂质过氧化物（ＬＰ０）含量的影响，以及照后服用知母宁、单宁酸和鲨烯等制剂的抗脂质过氧化作用。制剂均灌胃给药，ＬＰＯ用改良的ＴＢＡ分光光度法测定。结果表明，γ射线整体照射小鼠后７２ｈ，其组织中ＬＰＯ含量增高，在０－４Ｇｙ范围内辐射剂量与ＬＰＯ含量呈线性关系；三种制剂均有降低小鼠肝、脾、肾中ＬＰＯ的作用，其中知母宁（０．３５ｍｇ／ｄ）的抗脂质过氧化作用显著优于单宁酸（１５ｍｇ／ｄ）和鲨烯（０．６ｍｇ／ｇ）。     

辐射对小鼠组织中脂质过氧化物和蛋白质的影响及单宁酸与鲨烯的抗脂质过氧化作用

采用改良的TBA比色法测定组织中的脂质过氧化物(LPO)。结果表明:(1)Th(NO_3)_4内照射后第15d时,小鼠肝、脾、肾和骨髓中的LPO含量明显升高,而组织中的蛋白质却明显降低,两者呈负相关;(2)γ线整体照射(2—4Gy)后72h,小鼠肝、脾和肾中的LPO含量随着剂量的增加而升高。辐射剂量与LPO含量之间呈现显著线性关系;(3)单宁酸与鲨烯有抗脂质过氧化作用。     

某些中药活性成分抗氧化和清除自由基作用的研究(英文)

采用改良的TBA分光光度法研究知母宁、槲皮素与单宁酸对辐射所致小鼠组织中LPO含量升高的抑制作用。用ESR方法研究了上述三种制剂对辐照所致自由基的清除作用。结果显示,知母宁、槲皮素的抗氧化作用优于单宁酸,而清除自由基作用三者相仿。     

抗氧化剂减轻辐射脂质过氧化损伤的实验研究

自由基在辐射损伤中起着重要作用。应用抗氧化剂可在一定程度上清除自由基,从而减轻辐射损伤。该研究应用荧光分光光度法测定了照后小鼠组织和血清中脂质过氧化代谢产物MDA的含量变化,以此来研究其剂量效应关系,以及抗氧化剂Vit E和DMSO对照后小鼠的保护作用,探讨抗氧化剂在临床方面的应用。结果表明:(1)3.0Gy照后12～24小时,MDA含量最高,然后逐渐下降;(2)MDA随照射剂量的增大而增高,即MDA可很好地反映机体损伤情况;(3)Vit E和DMSO都能明显地降低照后小鼠体内MDA的水平,DMSO的作用大于Vit E,两者的最佳用量分别为:10mg/g体重和0.25mg/g体重;(4)DMSO和Vit E联合应用,其防护效果优于单独使用的效果。     

组织对辐射脂质过氧化应激反应的特点

为了探讨不同组织对辐射脂质过氧化应激反应的特点,测定了不同剂量(500、1000和2000rad)照射和照后不同时间小鼠红细胞(RBC),血浆、小肠等的SeGSH-Px活性。实验结果说明,各组织的反应类型各不相同,可以归纳为四类:(1)不能合成SeGSHPx的组织,如成熟RBC。它的变化特点是,照后酶活性降低,降低的程度随着照射剂量的增加而增加,大剂量(2000 rad)照射还随着照后时间的延长而增加;(2)能合成SeGSHPx的非辐射敏感组织如肝,它能对脂质过氧化损伤产生反应,但当剂量大到足以损伤肝细胞时,SeGSHPx活性的增加程度就小,严重损伤时(2000 rad照射)酶活力相反地降低;(3)辐射敏感组织如脾,由于照射脾细胞的大量坏死,它的SeGSHPx活性变化似乎受网状细胞相对含量的影响,反映的不完全是淋巴细胞SeGSHPx活性。辐射敏感组织小肠在2000 rad照射时,由于肠粘膜的广泛脱落表现为酶活性的降低。但当受损的敏感组织新生时(1000 rad照射)可以显示酶活性增加,(4)血浆SeGSHPx活性的变化主要是照后降低,一个时期的升高主要是由于大量脾细胞破坏而致的酶的释放。     

二甲亚砜和维生素E对照剂小鼠脂质过氧化的影响

二甲亚砜（ＤＭＳＯ）和维生素Ｅ（Ｖｉｔ Ｅ）都是自由基清除剂，可抑制或阻断由自由基引发的脂质过氧化反应，减轻组织损伤和细胞的破坏。本研究应用荧光分光光度法，通过测定小鼠血清中脂质过氧化代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）的含量来研究不同浓度的ＤＭＳＯ和维生素Ｅ对γ射线照射后小鼠的保护作用，以及两者联合应用的效果。结果表明：ＤＭＳＯ的保护作用优于Ｖｉｔ Ｅ，最大脂质过氧化抑制率（４．０Ｇｙ）分别为５５．１％和５     

低水平电离辐射对雄性大鼠 LRH-LH-睾丸酮系统功能影响的研究

本文报道了小剂量 X 射线分次全身照射和低剂量率~(60)Coγ射线持续全身照射对雄性大鼠下丘脑组织中 LRH 含量,血清及尿中 LH 和睾丸酮含量影响的实验结果。接受 X 射线照射的大鼠,全身累积吸收剂量为1.5Gy 和3.0Gy,下丘脑组织中 LRH 含量均于停照后1周显著高于对照组;血清 LH含量在3.0Gy 组于停照后4周高于对照组;尿中睾丸酮含量1.5Gy 组在停照后2和4周及3.0Gy 组在停照后2周均显著高于对照组。接受~(60)Coγ射线照射的大鼠,于照射结束后24小时血清 LH 含量在全身累积吸收剂量为1.76Gy 组显著低于对照组;血清中睾丸酮含量在1.37和1。76Gy 组、尿中睾丸酮含量在0.98Gy 组均显著高于相应对照组。     

二甲亚砜和维生素E对照射小鼠脂质过氧化的影响

二甲亚砜（ＤＭＳＯ）和维生素Ｅ（ＶｉｔＥ）都是自由基清除剂，可抑制或阻断由自由基引发的脂质过氧化反应，减轻组织损伤和细胞的破坏。本研究应用荧光分光光度法，通过测定小鼠血清中脂质过氧化代谢产物丙二醛（ＭＤＡ）的含量来研究不同浓度的ＤＭＳＯ和维生素Ｅ对γ射线照射后小鼠的保护作用，以及两者联合应用的效果。结果表明：ＤＭＳＯ的保护作用优于ＶｉｔＥ，最大脂质过氧化抑制率（４．０Ｇｙ）分别为５５．１％和５３．６％，两者的最佳用量分别为１０ｍｇ／ｇ体重和０．２５ｍｇ／ｇ体重，联合用药的作用效果（最大脂质过氧化抑制率为６０．１％）大于单独使用时的效果。     

SOD对肿瘤细胞凋亡影响和抗氧化损伤的研究:Ⅲ.SOD对受分次照射的荷瘤小鼠肿瘤细胞脂质过氧化影响及分子机制

以荷瘤小鼠为动物模型,研究了全身照射下注射超氧化物歧化酶(SOD)对肿瘤细胞脂质过氧化、肿瘤组织端粒酶活性、肿瘤原癌基因c-Jun蛋白表达的影响。研究发现,SOD能增加S180肉瘤及Lewis肺癌组氧化产物丙二醛(MDA)含量,降低S180肉瘤谷胱甘肽(GSH)含量及血清超氧化物歧化酶总活力(T-SOD)、匀浆谷胱甘肽过氧化物酶(GPX-Px)活力;降低Lewis肺癌组GPX-Px及T-SOD活力,不影响GSH含量;降低H22肝癌组GPX-Px的活力,不影响MDA、GSH含量及T-SOD活力。SOD明显降低接受电离辐射的S180肉瘤及H22肝癌荷瘤小鼠肿瘤组织中端粒酶的阳性表达率,减少原癌基因c-Jun蛋白在S180肉瘤、Lewis肺癌荷瘤鼠中的表达。这一辐射增敏作用因肿瘤的种类而不同,可能与SOD在不同肿瘤中对癌基因c-Jun蛋白表达和端粒酶活性影响及药物在不同器官的代谢差异有关。     

应用鲁米诺化学发光法测定脂质过氧化

建立了一个测定脂质过氧化（Lipid peroxidation,LPO）的化学发光体系，测试某些抗氧化剂清除脂自由基的活性。取含有不饱和脂肪酸的脂质加入到测量管中，再加入鲁米诺及双重蒸馏水，放入预恒温箱中37℃预温育0.5h，取出并加入启动剂AAPH｛2,2'-axobis(2-amidinopropane)dihydrochloride｝，立即放入预先温度设至38－39℃的生化发光测量仪中，用T－2程序测定每6s钏的脉冲数（CP6s），连续测定，观察化学发光（chemiluminescence,CL）的动力学变化和是否产生脂质过氧化，随后加入各类抗氧化剂，根据实际需要，选其某一次的CL强度作为评判指标。建立了一个应用鲁米诺化学发光法测定脂质过氧化的体系并对比了多种抗氧化剂的活性。结果发现，Vit.C、茶多酚（EGCG）、还原型谷胱甘肽（GSH）皆有抑制L，即抗脂质过氧化的作用。该方法是一种快速、灵敏、简便的测定脂质过氧化及筛选抗氧化剂的新方法。     

血清受体酪氨酸激酶AXL可作为电离辐射剂量估算的生物指标

为探讨血清AXL是否可作为电离辐射剂量估算的生物指标,本文研究了急性照射后不同时间点血清AXL浓度变化与电离吸收剂量的相关性,并分析了不同时间点AXL基线表达的稳定性。采用雄性C57BL/6小鼠为辐照对象,分3个时间点采样,每个时间点随机选取100只小鼠,再随机分为5组,每组20只:其中对照组1组,辐照组4组。辐照组小鼠接受60Co一次性照射,受照剂量分别为1、3、5和7 Gy,于照射前和照射后24、48、72 h留存血清样本,血清AXL浓度经定量细胞因子芯片检测与分析。结果表明,未照射小鼠AXL表达基线稳定,正常值范围为(186.6±44.20)pg/m L;辐照后24、48和72 h,血清AXL含量随吸收剂量增大而减少,且血清AXL含量ln值与吸收剂量呈线性相关,血清可作为电离辐射剂量估算的生物指标。     

软X射线同步辐射对小麦细胞膜脂质过氧化产物及相关酶活性的影响

采用不同剂量的软X射线辐照处理小麦种子，研究了种子的萌发率、幼苗组织细胞的脂质过氧化作用的产物及其相关酶活性变化等生物效应。同时，还对其作用机理进行了初步探讨。结果表明：在剂量为72—216J／cm^2范围内，小麦种子萌发率随剂量的增加而增加，但随后急剧下降；在剂量为72—216J／cm^2范围内，脂质过氧化作用产物丙二醛(MDA)的含量随剂量增加而增加；其相关的过氧化保护酶：过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)等并不随MDA增加而稳定增加，并且三种酶之间的活性变化不表现出明显的同步性，存在相互协调的关系；叶绿体中叶绿素含量及抗坏血酸过氧化物酶(APX)的活性始终低于对照组。     

N-乙酰半胱氨酸对碳离子照射小鼠急性损伤的保护效应

探讨了N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine,NAC)对12C6+离子照射小鼠损伤的保护效应及可能的作用机制.预先给予昆明小鼠NAC(200mg/kg),后进行12C6+离子束4Gy的单次全身照射.照射后2h处死小鼠,取肝、肺组织,用化学法检测组织中超氧化物岐化酶(Superoxide dismutase,SOD)的活性,谷胱甘肽(Glutathione,GSH)含量及脂质过氧化产物丙二醛(Malondialdehydc,MDA)水平;用碱性单细胞凝胶电泳法检测DNA单链断裂;用流式细胞术检测组织细胞凋亡率.与照射对照组相比,提前给予NAC可极显著地减轻12C6+离子导致的肝、肺组织中DNA断裂(p<0.001)和细胞凋亡(p<0.001),并显著地提高组织中GSH的含量;NAC还明显地抑制了肺组织中碳离子辐照所致的MDA水平增高(p<0.01)并显著地诱导了组织中SOD活性的升高(p<0.01).提示NAC可通过抵御组织内的氧化作用,合成、补充GSH的含量,阻止DNA链的断裂和细胞的凋亡,实现对碳离子辐照损伤的保护效应.     

12C6+照射对小鼠睾丸组织脂质过氧化、SOD活性及细胞周期的影响

为评估重离子照射的生殖毒性,探讨其损伤的可能机制,用0、0.5、1、2或3Gy剂量12C6 离子对性成熟昆明雄鼠下腹部进行局部照射,6h后处死小鼠,取睾丸组织,用流式细胞术检测睾丸细胞凋亡率和细胞周期,用化学试剂盒检测组织中超氧化物岐化酶(SOD)的活性以及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)水平.结果表明,与对照组(0Gy)相比,低剂量照射(0.5Gy)组中睾丸组织SOD活性增加(P>0.05),但SOD活力随剂量增加而下降,在2Gy和3Gy照射组中呈显著抑制作用(P<0.05);睾丸组织中MDA含量随剂量增加,2Gy和3Gy照射组呈显著性差异(P<0.05).流式细胞术检测结果显示,1～3Gy 12C6 照射可导致睾丸组织中单倍体、二倍体及四倍体细胞数量显著减少(p<0.01),凋亡率明显增加(p<0.01)以及G2/M期阻滞(p<0.01).提示12C6 照射可能通过自由基损伤途径,诱发细胞凋亡和细胞周期异常,从而造成睾丸组织损伤,生殖能力下降.本实验结果为抗氧化剂和自由基清除剂用于临床重离子治疗中对性腺的防护提供了理论依据.     

铁皮枫斗晶对小鼠辐射损伤的防护作用

研究了铁皮枫斗晶对6 0 Coγ射线一次性全身照射后小鼠主要脏器中脂质过氧化物 (LPO)和外周血中白细胞和血小板的变化以及不同剂量的铁皮枫斗晶对小鼠 3 0天存活率的影响。结果显示 ,铁皮枫斗晶能使受照后小鼠主要脏器中LPO含量明显下降 (p <0 .0 1 ) ,外周血中血小板显著升高 (p<0 .0 5 ) ;白细胞也有增高趋势 ;不同剂量的铁皮枫斗晶都能不同程度地提高受照鼠 3 0天存活率 ,说明铁皮枫斗晶具有较好的抗辐射作用。其作用原理与清除自由基和促进造血功能恢复有关     

蜂花粉对急性放射病治疗作用的研究

通过观察受照大鼠口服蜂花粉后外周血白细胞(PWBC)总数,血清超氧化物歧化酶(SOD)总活性及脂质过氧化物(LPO)水平的变化来评价蜂花粉对中度骨髓型急性放射病的疗效程度。实验结果表明,蜂花粉具有显著促进受照大鼠辐射损伤的恢复作用:(1)刺激机体PWBC的增殖。口服蜂花粉的大鼠30d后,与正常对照组相比无显著差异(P>0.05);(2)增强机体消除活性自由基的抗氧化效应。服用蜂花粉的大鼠30d后,血清SOD总活性增高率为6.48％,血清LPO(MDA/POV)的水平降低率为54.73％/21.60％。提示在急性放射病及其放疗肿瘤病人的临床治疗中,将蜂花粉作为抗放保健剂使用可能具有一定的实用价值。     

辐射诱发肿瘤小鼠脏器中微量元素的变化

生物体中微量元素 Zn、Cu 等的正常浓度虽然范围较广,但在某些疾病中可显示异常。接受~(60)Coγ射线照射的幼年猎犬,照射初期可见血清中 Cu 浓度下降,Zn 浓度上升。照后200天的一只猎犬血清 Cu 浓度明显上升 Zn 浓度下降,至死亡前 Cu 浓度异常升高,这与人类白血病所观察到的结果相似。γ射线也可使家兔血清中 Cu、Zn 浓度发生改变以及大鼠脏器中 Cu、Zn 浓度发生变化。为从微量元素角度探讨辐射诱发小鼠胸腺瘤过程中某些生物学特性,选择615小鼠,观察其接受丙种射线后脏器中微量元素的动态变化.     

甘草甜素镁对小鼠辐射损伤的防护作用

考察甘草甜素镁(Glycyrrhizin magnesium,Gly-Mg)的抗氧化活性及其对DNA损伤的防护作用。将小鼠分为空白对照组(生理盐水)、照射对照组(抗氧化实验:生理盐水+6.0 Gy;彗星实验:生理盐水+7.2 Gy)和照射给药组(抗氧化实验:50 mg/kg Gly-Mg+6.0 Gy、75 mg/kg Gly-Mg+6.0 Gy;彗星实验:50 mg/kg Gly-Mg+7.2 Gy、75 mg/kg Gly-Mg+7.2 Gy)。采用抗氧化试剂盒检测小鼠血清、肝组织和肺组织中超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)的活性和谷胱甘肽(Glutathione,GSH)、脂质过氧化物丙二醛(Methylene dioxyamphetamine,MDA)的含量。结果表明:Gly-Mg能够提高小鼠血清和组织中SOD、CAT的活性;增加抗氧化低分子清除剂GSH含量,并降低MDA的含量。彗星实验结果表明,与照射对照组相比,照射给药组小鼠的彗星尾长、彗星尾矩、Olive尾矩、尾部DNA含量和尾部DNA含量百分比均显著降低(p0.01)。实验结果提示,目标化合物Gly-Mg对辐照导致的氧化损伤有一定的防护作用,而对小鼠外周血淋巴细胞的DNA损伤则具有显著的防护作用。     

凝溶胶蛋白在C57BL／6小鼠急性放射肺损伤中的表达

为研究小鼠辐射诱导肺损伤后凝溶胶蛋白（Gelsolin,GSN）在血浆和肺组织中的表达,分别采用4Gy和20Gy剂量的X射线对C57BL／6小鼠进行全身及胸部单次照射。且在照射后取不同时间点ELISAKit检测小鼠血浆型Gelsolin（Plasma GSN,pGSN）蛋白含量和Westernblot法检测小鼠肺组织胞浆型Gelsolin（Cytoplasmic GSN,cGSN）蛋白含量。同时,检测20GyX射线胸部照射后不同时间点小鼠右肺肺泡灌洗液（Bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中的细胞总数和总蛋白的含量。结果表明,全身照射组小鼠在照射后24h时,pGSN水平降低,而胸部照射组pGSN水平在24—48h持续降低,下降速度慢于全身照射组,之后两组pGSN均逐渐上升。在照射后24h时小鼠肺组织cGSN含量低于正常水平,照射后48h时则高于正常水平,48-96h持续下降。但在照射后96h时全身照射组cGSN含量恢复到正常,胸部照射组仍高于正常水平。小鼠胸部照射后在24h时,右肺BALF中细胞总数和总蛋白浓度显著高于正常水平,约达正常值的16倍,24—96h持续下降,与肺组织cGSN含量变化存在一定程度的负相关。推测GSN可能促进急性放射肺损伤的修复。