膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响

目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响.方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9 mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氧酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羟化酶(17α-hydroxylase,CYP17A)、17β-羟基类固醇脱氢酶X型(17β-HSD10)mRNA表达的改变,并用蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测蛋白表达水平的变化.结果:与对照组相比,在mRNA水平上,annexin 5处理细胞12 h后,只有17β-HSD10的表达升高了26%(P＜0.05),其他差异均无统计学意义,而处理24 h后,StAR、P450scc和3β-HSD 的表达分别升高55%、69%和59%(P＜0.05),17β-HSD10升高了104%(P＜0.01),17α-hydroxylase表达则无显著差异;在蛋白水平上,annexin 5处理细胞12 h后,17β-HSD的表达升高了39%(P＜0.05),而处理24 h后发现,除StAR表达无显著变化外,P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达分别升高了35%、88%(P＜0.05)和47%(P＜0.01).结论:Annexin 5对睾酮合成具有调节作用,这种作用是通过在基因水平和蛋白水平上影响P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达而实现的.     

低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸中细胞色素c和caspase-3表达的变化

目的:研究低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸中细胞色素c(Cyt c)和caspase-3表达的变化,阐明二者对低剂量电离辐射诱导小鼠睾丸细胞凋亡的作用.方法:实验小鼠分为不同剂量(0、0.050、0.075、0.100和0.200 Gy)组与不同时程(0、6、12和24 h)组.采用实时PCR和Western blotting分别检测不同剂量X射线照射后不同时间小鼠睾丸组织中细胞色素c(Cyt c)和caspase-3 mRNA和蛋白表达的变化.结果:实时PCR结果显示,不同剂量X射线照射后12 h,Cyt c和caspase-3 mRNA表达随剂量增加而增加,Cyt c mRNA在0.100 Gy照射时表达最多,而caspase-3则在0.075 Gy照射时表达最多;在0.075 Gy照射时二者蛋白表达最多.0.075 Gy照射后Cyt c和caspase-3 mRNA表达随着时间延长表达增多,24 h时达到最高;二者蛋白表达在12 h时最高.结论:低剂量电离辐射能够诱导小鼠睾丸生精细胞中Cyt c和caspase-3 mRNA和蛋白表达的增加,并且具有剂量和时程规律性.     

不同剂量电离辐射对小鼠脾脏调节性T细胞及TGF-β1表达的影响

目的:观察不同剂量X射线照射后小鼠脾脏调节性T细胞(Treg)和转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的变化,探讨X射线对Treg阳性率及TGF-β1表达水平的影响.方法:雄性ICR小鼠,用X.S.S.205(FZ)型固定式X射线深部治疗机进行不同剂量的全身照射(低剂量组为0.050、0.075、0.100和0.200 Gy;高剂量组为0.500、1.000、2.000、4.000 和6.000 Gy),同时设立假照组,于照射后16 h处死小鼠,取脾脏,分别采用流式细胞术、RT-PCR及Western blotting法检测Treg和TGF-β1的表达水平.结果:与假照组比较,低剂量照射组小鼠脾脏Treg阳性率无明显变化(P>0.05);高剂量照射组,1.000 Gy照射后开始脾脏Treg阳性率明显高于假照组(P<0.05,P<0.01),并呈剂量依赖性升高.与假照组比较,小鼠脾脏细胞TGF-β1 mRNA表达水平从0.500 Gy剂量组开始升高,2.000 Gy组达到假照组的2倍以上,但随后略有下降;在低剂量照射范围时,0.100 Gy组小鼠TGF-β1蛋白表达水平明显高于假照组(P<0.05),而在大剂量组呈递增趋势,4.000 Gy和6.000 Gy组与假照组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:在高剂量X射线诱导下小鼠脾脏Treg阳性率增高,同时TGF-β1分泌增加,这种变化可能是高、低剂量X射线诱导不同免疫效应的又一原因.     

单宁酸对糖尿病大鼠肾组织炎症因子表达的抑制作用

目的:观察单宁酸(TA)对链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病(DM)大鼠肾脏组织炎症因子表达的抑制作用,探讨其作用机制.方法:70只雄性Wistar大鼠随机分为对照组、DM组、氨基胍(AG)组、TA低剂量组和TA高剂量组.处理10周后检测各组大鼠肾脏功能指标[血清肌酐(Cre)、尿素氮(BUN)及24 h尿蛋白排泄量],PAS染色观察肾脏病理改变,免疫组织化学染色观察肾组织细胞间黏附分子1(ICAM-1)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的表达,RT-PCR方法检测肾组织ICAM-1 mRNA的表达.结果:与模型组比较,TA组大鼠血清Cre、BUN及24 h尿蛋白排泄量降低(P<0.05或P<0.01),大鼠肾小球系膜区PAS阳性物质减少,肾组织ICAM-1及TNF-α蛋白表达水平降低,肾组织ICAM-1 mRNA表达水平降低(P<0.05).结论:TA能降低糖尿病大鼠肾组织ICAM-1及TNF-α的表达,对糖尿病大鼠肾脏有保护作用.     

Bcl-2参与SCID小鼠体内齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡的调控作用

目的:观察齐墩果酸(OA)对白细胞移植模型小鼠脾脏浸润白血病细胞凋亡数量和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨OA对白血病模型鼠的治疗作用机制.方法:取浓度为2×107mL-1体外培养的人早幼粒系白血病HL-60细胞0.5 mL,腹腔注射重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠,构建SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;模型成功后小鼠分为用药组、白血病模型对照组,并设正常对照组.用药组以200 mg·kg-1OA皮下注射,用药2周后观察各组小鼠的一般状态、外周血象及骨髓象白细胞分类情况,病理学检查脾白血病细胞浸润程度,TUNEL方法测定脾浸润白血病细胞凋亡率,免疫组织化学检测HL-60细胞凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达率.结果:成功建立SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;用药组小鼠体质量[(15.0±0.8) g]明显高于模型组小鼠[(13.9±0.9) g](P<0.01),小鼠生存期[(50.3±5.5) d]明显高于模型组小鼠[(37.1±4.4) d](P<0.01);与模型组比较,用药组外周血白血病细胞有向正常白细胞分化趋势,可见分叶的白血病细胞,骨髓象中幼稚细胞减少,脾浸润情况改善;用药组小鼠脾浸润白血病细胞凋亡率高于模型组(P<0.01),Bcl-2蛋白表达阳性细胞百分率低于模型组(P<0.01).结论:成功建立白血病移植瘤鼠模型;OA可改变白血病移植瘤模型鼠的一般状态,延长生存期;OA通过降低Bcl-2表达可诱导白血病细胞凋亡.     

人参三七提取物抗疲劳作用的研究

[目的]研究人参三七提取物缓解体力疲劳的作用,为进一步开发利用人参三七提供试验依据.[方法]将小鼠分为4批,每批48只,随机分为4组,分别为对照组和50、100、300 mg/kg 3个给药组,各组小鼠经口灌胃给药30 d后,分别测定其负重游泳时间及血清尿素氮、血乳酸、肝糖原含量.[结果]100和300 mg/kg 剂量组人参三七提取物小鼠负重游泳时间显著长于对照组(P<0.01),血清中尿素氮含量显著低于对照组(P<0.01;P<0.05),小鼠肝糖原水平明显高于对照组(P<0.01;P<0.05);小鼠游泳后血乳酸含量显著低于对照组(P<0.01;P<0.05).[结论]人参三七提取物具有缓解体力疲劳的作用.     

不同运动负荷对大鼠海马组织NGF和nNOS表达的影响及其意义

目的:探讨不同运动负荷对大鼠海马组织神经生长因子(NGF)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)表达的影响及机制,为运动干预脑健康及预防脑老化研究奠定基础.方法:40只Wistar雄性大鼠随机分为不进行运动干预的对照组和每天进行15、30和60 min的小、中、大游泳运动负荷的实验组,实验8周后取大鼠脑组织,免疫组织化学S-P法检测大鼠海马组织NGF和nNOS表达水平及形态学表现.结果:与对照组比较,小、中、大运动负荷组大鼠海马组织NGF阳性表达水平均明显升高(P<0.05,P<0.01);与小运动负荷组比较,中、大运动负荷组大鼠海马组织NGF阳性表达水平升高(P<0.01),但中等运动负荷组大鼠与大运动负荷组比较差异无统计学意义(P>0.05).与对照组比较,中、大运动负荷组大鼠海马组织nNOS阳性表达水平升高(P<0.01);与小运动负荷组比较,中、大运动负荷组大鼠海马组织nNOS阳性表达水平升高(P<0.05,P<0.01),大运动负荷组大鼠海马组织nNOS阳性表达水平高于中运动负荷组(P<0.01).免疫组织化学染色:大鼠海马组织NGF阳性神经元主要表达在神经细胞胞浆,呈棕色;nNDS阳性神经元呈棕褐色,着色主要位于胞浆.结论:大脑海马组织NGF和nNOS的表达水平在一定范围内随着运动负荷的增加而升高,提示在不同的运动负荷阶段NGF和nNOS对海马神经的生长和损伤的修复具有重要作用.     

海藻色素糖蛋白对小鼠H22肝癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:研究麒麟菜海藻色素糖蛋白(seaweed pigment glycoprotein,SPG)对小鼠H22肝癌细胞增殖与凋亡的影响.方法:将不同浓度SPG与小鼠H22肝癌细胞共同培养,用MTT法测定癌细胞增殖活性.建立H22移植瘤小鼠肝癌模型,随机分为SPG高、中、低剂量组,对照组及环磷酰胺组.实验组小鼠每天分别给予不同剂量(100、50、10 mg/kg)的SPG灌胃,连续10 d,对照组同法给予等量生理盐水,环磷酰胺组小鼠腹腔注射20 mg/kg环磷酰胺,隔日一次.各组小鼠均于末次给受试物后24 h处死,取肿瘤组织用免疫组化法检测各组Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:SPG高剂量组瘤细胞增殖活性(0.545±0.002)明显高于对照组(0.404±0.008)(P<0.05);SPG高剂量组Bcl-2和Bax蛋白阳性表达率分别为16.78%和38.1%,对照组分别为65.16%和4.68%,两组间的差异具有统计学意义(P<0.05).结论:SPG具有抑制小鼠H22肝癌细胞增殖、促进其凋亡的作用.     

康复路径应用于老年股骨颈骨折行髋关节置换术后的效果评价

目的 探讨康复路径在老年股骨颈骨折行髋关节置换术后的应用效果.方法 选取本院骨科股骨颈骨折行髋关节置换患者62例,分为对照组和观察组,对照组给予常规功能锻炼指导,观察组则依据康复路径给予指导,观察和比较2组康复效果.结果 达到标准住院天数,观察组(27例)优于对照组(20例),χ2=6.38,P<0.05;在第10天能够下地行走的例数,观察组(27例)优于对照组(18例),χ2=8.86,P<0.01;关节僵硬的发生率,观察组(0例)优于对照组(6例),χ2=4.89,P<0.05.结论 股骨颈骨折行髋关节置换术后,按照康复路径给予正确、科学、有效的康复训练,可促进患者康复,降低并发症的发生率.     

北五味子对小鼠学习记忆及脑SOD和MDA的影响

[目的]了解北五味子醇提取物对小鼠学习记忆能力及脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量的影响.[方法]将健康昆明小鼠随机分为对照组和北五味子醇提取物低、中、高剂量组,连续灌胃28 d,通过Morris水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力的变化;并测定小鼠脑组织SOD、MDA含量.[结果]北五味子提取物灌胃后经Morris水迷宫定位航行试验检测发现,第7、14、21天各组小鼠逃避潜伏期无显著差异(P>0.05),第28天高剂量组小鼠逃避潜伏期较对照组显著延长(P<0.05).各组小鼠脑组织SOD活力较对照组出现不同程度降低(P<0.05),MDA含量无显著差异(P>0.05).[结论]北五味子提取物对小鼠学习记忆能力可能没有明显影响,但可能影响脑组织中SOD含量.