解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质特性研究与初步分离纯化

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amylolique aciens)BW-13发酵滤液对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)和植物病原真菌灰霉(Botrytis cinerea)均具有显著的抑制活性,并具有热稳定性好、对紫外线照射和蛋白酶处理不敏感、在pH 3～9范围内稳定,尤其在酸性条件下基本不丧失活性的特点.通过发酵液预处理,活性炭吸附,D293强碱性季铵型阴离子交换树脂柱层析,对解淀粉芽孢杆菌BW-13产生的抗真菌物质进行了初步分离纯化.高效液相色谱(HPLC)分析显示分离得到的抗真菌物质在220 nm处有单一的活性峰.     

解淀粉芽孢杆菌IMAUB1034抗真菌活性物质的初步研究

对解淀粉芽孢杆菌（Bacillusamyloliuefaciens）IMAUB1034活性物质的理化性质和盆栽实验中对甜瓜疫霉菌引起的病害的防治效果进行研究．结果显示,解淀粉芽孢杆菌发酵液对由甜瓜疫霉菌引起的病害具有一定防病效果,病情指数为40．22,生防效果达到35．9％．另外,其发酵液还能抑制甜瓜枯萎病菌（Fusariumoxysporum）、灰葡萄孢霉菌（Botrytiscinerea）、番茄早疫病菌ternariasolani）、甜瓜疫霉菌（PhytophthoradrechsleriTucker）、苹果炭疽病菌（Glomerellacingulate）的生长．无菌上清液中的活性物质能碱高温、耐酸碱,在pH2～10仍然能检测到很高的抑菌活性．但经过酶处理后抑菌活性降低程度不同．     

鸟苷产生菌解淀粉芽孢杆菌的选育

出发菌GR001通过形态观察、生理生化实验、16SrDNA同源性序列分析及部分特异性基因序列分析鉴定为解淀粉芽孢杆菌．以GR001为出发菌,通过化学诱变选育出一株遗传标记为腺嘌呤营养缺陷、6-巯基嘌呤抗性以及蛋氨酸亚砜抗性（Ade^-＋MSO^r＋6-MP^r）的突变株GR600．以GR600为受体菌,采用原生质体转化法获得转化子GR607（Ade^-＋MSO^r＋6-MP^r＋km^r）,鸟苷产量高达20．82gm．     

解淀粉芽孢杆菌BI_2的鉴定及其对黄曲霉的抑制作用

菌株BI2是从青贮玉米秸秆饲料中分离得到的一株革兰氏阳性芽孢杆菌.经16S rDNA序列分析,发现该菌株与解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefaciens（NC_009725）的相似性达到99.6%;进一步结合Biolog及生理生化分析,将该菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌.以番茄叶霉病菌、黄瓜枯萎病菌等12种植物病原菌及部分霉菌、酵母、食品乳酸菌和人类致病细菌为指示菌进行抑菌实验.结果表明：BI2主要抑制丝状真菌,而对细菌无拮抗作用;BI2菌株生长36 h的上清液能明显抑制黄曲霉孢子萌发及其菌丝生长,抑制率分别达到67.4%和74.8%;而且该上清液经120℃高温处理20 min后对黄曲霉的抑制效果基本没有影响.     

解淀粉芽孢杆菌对非洲菊切花保鲜效应的研究

以从花卉中分离得到的解淀粉芽孢杆菌液为保鲜材料,研究其对非洲菊的生物保鲜效果.通过非洲菊形态指标的测定,选取最佳保鲜液的浓度为解淀粉芽孢杆菌发酵液2d的质量百分比0.6%;并对非洲菊的生理指标中花青素含量、可溶性蛋白含量、MDA、POD进行了测量.结果表明:此保鲜液能显著增加非洲菊花瓣花青素的含量与可溶性蛋白含量,同时有效抑制MDA含量增加与POD活性降低.此保鲜液提高了非洲菊的观赏价值,具有良好的生物保鲜作用.     

酪酸梭状芽孢杆菌发酵培养基的优化

验证了高层半固体琼脂试管法比固体琼脂平板法更具有良好的厌氧性能,能准确地对酪酸梭状芽孢杆菌进行活菌计数．通过对发酵培养基中不同碳源、氮源、生长因子进行单因素研究,L9（3^3）正交实验进一步优化得到最佳培养基组成为（g／L）：胰蛋白胨10,葡萄糖8,酵母膏4．用此培养基在37℃培养24h,活菌数可达4．1×10^8mL^-1．培养基中添加K2HPO45g／L、MgSO4-7H2O0．2g／L、MnSO4·H2O0．2g／L、CaCO31g／L培养32h时,酪酸梭状芽孢杆菌芽孢转化率可达95％．     

枯草芽孢杆菌发酵产耐酸耐高温α-淀粉酶培养基优化

耐酸耐高温α-淀粉酶具有耐酸和耐高温的双重特性,可以进一步提高淀粉糖和相关行业生产效率、降低成本,近来其研究和应用受到广泛重视。采用单因素和正交试验对枯草芽孢杆菌液体发酵产酶的培养基组分进行优化,包含碳源、氮源、金属离子和产酶促进剂等。经过优化后的主要培养基组成为:麦芽糖10%、玉米淀粉2%;胰蛋白胨1%、尿素2%;0.4%的硫酸锰;0.1%的吐温80。经优化后的耐酸耐高温酶α-淀粉酶酶活由43.13 U/m L提高到了89.15 U/m L,发酵酶活提高了一倍左右。     

地衣芽孢杆菌XY—2的筛选及其培养基的优化

从土壤中筛选出3株具有较强抑菌活性的菌株,其中XY-2菌株对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、灰霉葡萄孢菌、变形链球菌和大肠杆菌的抑制作用最强。根据对XY-2菌株形态特征、培养特征、生理生化特征的分析,初步鉴定为地衣芽孢杆菌。最后通过正交实验对地衣芽孢杆菌XY-2的发酵培养基成分配比进行了选择和优化,为以后工业化生产提供依据。结果表明当培养基质量浓度配比为:ρ(玉米淀粉)20 g/L、ρ(豆饼粉)90 g/L、ρ(玉米浆)7 g/L时菌体的培养效果最好。在最佳配比下培养基中活菌浓度可以达到9.67×10~8 cfu/mL。     

蜡状芽孢杆菌S—1菌株抗真菌物质的分离纯化

蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus)S-1菌株具有强烈的广谱抗真功活性。本文作者报道该菌株产生的抗菌物质的分离纯化方法。该菌株的发酵液经酸化沉淀，有机溶剂萃取，Sephades G100和DEAE52纤维素层析等步骤后，所得样品经硅胶薄层层析显色为单点，表明抗菌物质得到纯化。     

新型抗真菌代谢产物发酵条件的响应面优化

从浙江东海土壤中筛选获得1株菌株(ZS09-33)能产生抑制白色念珠菌的代谢产物,经16S rRNA序列测定和Genbank数据库搜索,确定其属于Bacillus amyloliquefaciens. Plackett Burman实验发现,影响抗真菌效价的主要因素为：黄豆饼粉、可溶性淀粉以及(NH4)2SO4.最陡爬坡实验和Box-Behnken实验得到响应面（RSM）优化的最佳培养基质量浓度为：黄豆饼粉2.72 g/L,可溶性淀粉 26.67 g/L,(NH4)2SO4 3.95 g/L,K2HPO4 1.8 g/L,NaCl 2 g/L,MgSO4 0.5 g/L,CaCO3 0.72 g/L,CuSO4 0.02 g/L,FeSO4 0.02 g/L,MnSO4 0.02 g/L,初始pH 6.5.在此条件下发酵液抗真菌效价达16 806.48 U/mL,与模型值相符.与单因素优化结果相比,效价提高了239%.产物经ESI/MS、¹H-NMR及¹³C-NMR确定为相对分子质量为402的大环内脂类物质.     

透性化酒精酵母细胞产海藻糖发酵培养基的优化

为提高酒精酵母细胞发酵液中海藻糖的含量,在制备出透性化酒精酵母细胞的基础上,用单因素实验和响应面分析法,优化了酒精酵母的发酵培养基,确定了最适培养基组成。实验结果表明,酵母膏、蔗糖及氯化钠的添加量对海藻糖积累影响显著,影响程度依次为:酵母膏>蔗糖>氯化钠。优化后的培养基组成为:酵母膏14.7g/L,蔗糖32.5g/L,氯化钠27.4g/L,此时海藻糖产量达到0.931 9g/L。     

透性化酒精酵母细胞产海藻糖发酵培养基的优化

为提高酒精酵母细胞发酵液中海藻糖的含量,在制备出透性化酒精酵母细胞的基础上,用单因素实验和响应面分析法,优化了酒精酵母的发酵培养基,确定了最适培养基组成.实验结果表明,酵母膏、蔗糖及氯化钠的添加量对海藻糖积累影响显著,影响程度依次为:酵母膏＞蔗糖＞氯化钠.优化后的培养基组成为:酵母膏14.7 g/L,蔗糖32.5 g/...     

A marked enhancement in production of amylase by Bacillus amyloliquefaciens in flask fermentation using statistical methods

A total of 126 bacterial strains were isolated from soil samples.Among them,11 isolates were found positive for amylase production.Strain YL produced the largest zone of clearance on plate assay.The isolate YL was identified as Bacillus sp.based on morphological and physiochemical characterization.According to 16S rRNA gene sequencing data,the closest phylogenetic neighbor of strain YL was Bacillus amyloliquefaciens(99.54%).After that,an optimization of culture conditions was carried out for the improvement...     

响应面法优化芽孢杆菌LJ-7发酵产酯酶条件

为了获得海洋芽孢杆菌LJ-7发酵产酯酶的最佳条件,采用响应面法对其发酵条件进行了优化。首先,通过单因素试验选出对酯酶产量影响较显著的3个因素,即发酵温度、初始pH和发酵时间。在单因素试验的基础上,采用Box-Benhnken中心组合方法进行三因素三水平的试验设计,以酶活为响应值,利用响应面分析法进行进一步优化,确定最佳发酵条件为:发酵时间42.81h,发酵温度29.40℃,pH为6.21,此时预测的酯酶酶活为24.91 U/mL。在此最佳条件下,平行试验测得实际酶活为24.63U/mL,达到理论预测值的95%以上。该模型较好地预测了实际发酵情况,得到的优化条件具有实际应用价值。     

统计学分析方法应用于蛹虫草发酵培养基的优化

应用Plackett-Burman设计法对影响蛹虫草发酵的培养基组分进行了筛选,选取的8个相关因素为蛋白胨、酵母浸粉、蔗糖、MgSO4.7H2O、KH2PO4、ZnCl2、VB1和(NH4)2SO4。确定了影响蛹虫草腺苷得率的关键因素为酵母浸粉、蔗糖和VB1。在此基础上,采用响应面法对影响蛹虫草腺苷得率的关键因素最佳水平范围进一步研究,通过二次方程回归求解得知,当酵母浸粉、蔗糖和VB1的用量分别为18.970、18.8500、.235 g/L时,模型预测值蛹虫草腺苷得率为5.176 mg/g,验证值为5.093 mg/g,预测值与验证值吻合较好。     

米曲霉固态发酵苹果渣与棉粕生产中性蛋白酶的工艺优化研究

为降低中性蛋白酶的生产成本,以苹果渣与棉粕为原料,采用响应面法对其生产工艺进行了优化.实验结果表明,培养基中棉粕与苹果渣的最佳质量比为6∶4,培养基初始含水量、（NH4）2SO4与KH2PO4对产酶影响显著,其最佳质量分数分别为62.19%、2.56%与0.10%.ZnSO4与MgCl2是非显著性因素,其最适质量分数分别为0.10%与0.05%.采用上述培养基于30℃恒温培养24 h,干曲蛋白酶活力可达到4096.9 U/g,比优化前提高了54.7%,与采用豆粕与麸皮为原料时的产酶水平相当.     

嗜酸乳杆菌产细菌素培养条件的优化

为了提高嗜酸乳杆菌产细菌素的产量,通过单因素和正交试验优化了嗜酸乳杆菌产细菌素的培养条件。采用琼脂扩散法测定含有细菌素的发酵上清液对大肠杆菌的抑菌活性,根据抑菌圈的大小,确定最适培养基成分和发酵条件。试验结果表明,嗜酸乳杆菌产细菌素最佳培养基组分为:蛋白胨10g/L,牛肉膏12.5g/L,酵母膏5g/L,葡萄糖15g/L,柠檬酸氢三铵2g/L,无水乙酸钠5g/L,碳酸钙1g/L,K2HPO4·3H2O 2.62g/L,MgSO4·7H2O 0.58g/L,MnSO4·H2O 0.25g/L,Tween-80 3mL/L。最佳发酵条件为初始pH 6.3、37℃、接种量3%、培养时间22h。此条件下,抑菌圈直径可达22.4mm。