基于单纯形-重心设计的菜籽粕生物改良菌株的复配研究

硫甙和中性洗涤纤维是限制菜籽粕饲用的两个重要抗营养因子。发酵法是降低菜籽粕抗营养因子的重要手段。通过初筛、复筛和混料设计,优选了混合菌发酵菌株和接种比例。在初筛中采用菜籽粕鉴定培养基,在复筛中对硫甙降解率、中性洗涤纤维降解率、生长曲线和蛋白酶酶活进行综合评价,在复筛的基础上采用单纯形-重心设计进行菌株配比的优化,拟合出因素与响应值之间的回归方程,得到优化的菌株接种比例为枯草芽孢杆菌B3 46%、纳豆芽孢杆菌N1 30%、酿酒酵母R1 24%,在此条件下进行发酵试验,硫甙、中性洗涤纤维的降解率分别为94.63%、24.17%。     

巴里坤草原西伯利亚蝗虫肠道内高产纤维素酶菌株筛选

从采集到的新疆巴里坤草原西伯利亚蝗虫活体标本肠道内分离筛选高产纤维素酶细菌菌株并对其进行初步鉴定。采用常规方法分离肠道菌；利用羧甲基纤维素钠刚果红（CMC-Na）改良培养基初筛分解纤维素菌株，选取透明水解圈较大的菌株测其纤维素酶活力进行复筛；利用VITEK-32生化鉴定仪（法国梅里埃公司）对复筛菌进行鉴定。实验结果表明以羧甲基纤维素钠刚果红（CMC-Na）培养基作为初筛培养基效果较好，初筛到30株菌，选取水解圈较大的10株菌进行复筛，复筛得到4株产纤维素酶活性较高的菌株。经初步鉴定其中一株菌可能是干燥棒杆菌；另一株菌可能是耳葡萄球菌，两株菌未鉴定出。     

甘肃传统浆水发酵过程中产双戊烯乳酸菌的分离筛选

目的:从传统发酵浆水中分离筛选产双戊烯乳酸菌株,以期为传统浆水工艺现代化改造过程增香发酵剂的开发提供菌株来源。方法:采用经典的平板分离筛选方法初筛菌株,结合发酵性能测定复筛。结果:从甘肃传统发酵浆水中初筛得到5株产双戊烯乳酸菌,通过测定其发酵产双戊烯性能,从中复筛得到1株产双戊烯乳酸菌菌株R-32,该菌在马铃薯番茄液体培养基中产双戊烯含量可达到0.171 μg/mL;通过观察其形态、测定生理生化指标及进行产乳酸的定性试验,鉴定该菌株R-32为肠膜明串珠菌属(Leuconostoc mesenteroides)。结论:本实验获得了一株可用于传统浆水发酵的产香乳酸菌株。     

黄曲霉毒素B1 降解菌株的分离鉴定、发酵条件的 优化及活性组分分析

为筛选出一株高效降解黄曲霉毒素B1（AFB1）的菌株，选取土壤为菌株来源，进行富集培养，经过以香豆素为唯一碳源的初筛和添加AFB1的复筛后，对筛选得到的各菌株进行16S rDNA鉴定，比对其测序结果，选取降解AFB1最高的菌株，探究发酵时间、发酵温度、初始pH、接种量、培养基对菌株降解AFB1的影响规律，通过正交试验优化发酵条件，并对降解方式进行初步探索。结果表明：经过初筛和复筛得到7株能够降解AFB1的菌株，经鉴定均为伯克霍尔德菌属，其中Burkholderia sp. D6的AFB1降解率最高；最优发酵条件为以LB培养基为发酵培养基、发酵时间84 h、发酵温度37 ℃、初始pH 7.0、接种量10%，在此条件下Burkholderia sp. D6对AFB1的降解率为（87.91±2.32)%；初步判断降解AFB1的活性组分是蛋白质或者酶。综上，通过筛选得到了一种能够高效降解AFB1的菌株，蛋白质或酶参与了AFB1的降解。     

黄曲霉毒素B_1降解菌的筛选及鉴定

目的:在易被黄曲霉毒素B_1(AFB_1)污染的不同环境中,筛选能够降解AFB_1的菌株。方法:以香豆素为唯一碳源和能源进行AFB_1降解菌株的初筛,得到生长良好的菌株,分别与AFB_1标品(2.5μg/m L)共同作用进行复筛。对降解率最高的菌株通过形态以及16S r DNA序列分析,进行初步鉴定;并对胞外粗提液、菌细胞、胞内裂解物降解AFB_1进行研究。结果:从腐烂朽木中筛选出的菌株XY1降解AFB_1能力达71.91%。根据XY1菌株形态、16S r DNA序列同源性分析,初步确定菌株XY1为克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)。胞外粗提液降解率为70.23%,菌细胞悬液降解率为8.26%,胞内裂解物的降解率为3.18%,表明菌株XY1的降解活性与胞外粗提液有关。结论:筛选到能高效降解AFB_1的克雷伯氏菌(Klebsiella sp.)XY1,XY1降解毒素的活性物质主要存在于胞外粗提液。     

具有转糖苷活性β-半乳糖苷酶菌株的筛选鉴定

为了获得具有较高酶活力的β-半乳糖苷酶,以乳糖为诱导剂,采用涂有x-gal的鉴别平板分离初筛得到28株生长较好的产β-半乳糖苷酶的菌株。通过摇瓶复筛测定其水解酶活,从中筛选出4株酶活力较高的菌株,并利用高效液相检测菌株的转糖基活性,确定了一株具有转糖苷活性菌株B5582Y,其初始水解酶活可达12 U/m L。根据细胞形态、生理生化数据、16S r DNA序列和rpo B功能基因序列数据多项鉴定分析,最终确定该菌B5582Y为克雷伯氏菌(Klebsiella michiganensis)。     

一株新的具有高效降低烟碱含量的短小芽孢杆菌MK21的分离筛选及作用研究

采用以烟碱作为唯一碳氮源的选择性培养基,对烟草表面的细菌进行选择性分离,建立降低烟碱含量菌库,通过富集初筛复筛等试验后,从中筛选出一株具有高效降解烟碱能力的细菌MK21。根据形态学特征和生理生化反应及16SrDNA的鉴定,鉴定其为短小芽孢杆菌。将该菌制成菌剂喷施于50 g烟丝样品上,发酵处理5 d。通过测定烟丝的总糖、还原糖、烟碱、氯、钾含量。结果表明:处理后的烟丝中烟碱含量均有下降,其中最高的达到了26.3%。通过短小芽孢杆菌MK21处理后的烟叶样品,达到刺激性降低、掩盖杂气和改善卷烟吸味的效果。     

泡菜中降解重金属铅的乳酸菌筛选及鉴定

以南充当地泡菜为材料,添加溴甲酚紫的MRS培养基进行平板涂布法初筛获得44株乳酸菌,再以降解重金属铅的能力大小为复筛指标,获得两株较高降解率的乳酸菌,并对这两株菌进行耐受铅的能力、产酸能力、耐酸和耐胆盐能力的测定。综合测定结果,最终选出降解铅的能力最强的PC12菌株作为目标菌株,并对其进行生理生化鉴定以及16SrDNA分子鉴定,确定该菌株为植物乳杆菌。     

黄曲霉毒素B_1降解菌株的筛选鉴定

黄曲霉毒素B_1(AFB_1)具有极强的毒性和致癌性,严重危害人和动物健康。通过富集培养、初筛和复筛从土壤中筛选到能降解黄曲霉毒素的菌株,鉴定降解效率最高菌株并研究其降解特征。结果表明,筛选出多株能降解AFB_1菌株,其中菌株A12降解效率最高,通过形态学、生理生化特征及16S rRNA基因系统进化分析鉴定菌株A12为枯草芽孢杆菌,命名为Bacillus subtilis subsp. InaquosorumA12。研究发现枯草芽孢杆菌A12上清液、菌悬液、胞内液能分别降解87.6%、17.3%和10.8%的AFB_1,表明菌株A12分泌至胞外活性物质主导生物降解作用。菌株A12上清液降解AFB_1的最适反应温度为37℃,最适p H为7.0。将该菌接种到AFB_1污染的花生样品,能显著降低AFB_1的含量。为枯草芽孢杆菌A12应用于AFB_1的生物脱毒奠定了基础。     

广谱抑菌物质产生菌GX-21的筛选及鉴定

本研究在广东省及其周边地区共11个采样地点采集土壤样品156份,分离得到放线菌1026株。土壤预处理采用碳酸钙富集培养法,分离采用平板稀释法,选取高氏一号合成培养基作为分离培养基,添加50 mg/L重铬酸钾作为抑制剂。初筛采用琼脂块法,选择金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希氏菌、白假丝酵母菌、黑曲霉共5种指示菌进行抑菌试验,共得到95株活性菌株。复筛选择初筛的5种指示菌加上副溶血性弧菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌共8种指示菌,分两级进行复筛:一级复筛仍采用琼脂块,得到19株活性菌株;二级复筛采用牛津杯定量扩散法,得到5株优良菌株。对优良菌株GX-21进行鉴定,通过形态特征观察、培养特性观察、生理生化试验和16S r DNA序列分析,确定菌株GX-21为多产色链霉菌(Streptomyces polychromogenes)。菌株GX-21具有抑菌谱广的特点,对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均有抑制作用。     

降烟碱细菌-烟草节杆菌K9的分离及鉴定

采用烟碱为唯一碳源的选择性培养基,对烟草、植烟土壤及烟草污水中的细菌进行选择性分离,共分离得到97株能够分解利用烟碱的细菌,其中菌株K9分解能力最强。经生理生化分析以及16SrDNA序列同源性分析,鉴定为烟草节杆菌(Arthrobacternicotianae)。为微生物降烟碱的研究及应用提供了理论依据。     

阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai)分离鉴定及其对蔬菜中甲萘威农药降解作用的研究

目的 从寒地黑土中筛选甲萘威降解菌,并对筛选得到的菌株进行形态学及16S rDNA分子鉴定,将该菌株用于蔬菜样品中甲萘威农药残留降解规律的研究。方法 从土壤样品中用含甲萘威农药的培养基进行平板稀释法初筛、96孔板法复筛,分别在37℃(1 d)、4℃(6 d)下进行培养,筛选在OD₆₀₀ nm处吸光值高的菌株,即为可利用甲萘威生长的菌株。获得OD₆₀₀ nm为0.906的菌株D7,并对该菌株进行形态学以及分子生物学鉴定。结果 菌株D7经鉴定为阿氏芽孢杆菌(Bacillus aryabhattai);菌株D7对所选5种叶菜和5种果菜中残留的甲萘威均有一定降解作用,且对生菜中甲萘威的降解率最高为58.7%。结论 筛选出阿氏芽孢杆菌D7,在低温条件生长良好。为微生物法降解甲萘威提供优良降解菌株,解决蔬菜中甲萘威残留的问题。     

黄曲霉毒素B1降解菌株的筛选及鉴定

该研究以香豆素为唯一碳源,从豆类发酵食品、土壤、动物肠道及其内容物中筛选黄曲霉毒素B1（AFB1）降解菌株;然后通过复筛,从中筛选出AFB1降解能力较好的菌株,并对其降解作用与吸附作用进行区分;最后,通过形态观察、生理生化试验及分子生物学技术对其进行鉴定。结果表明,共筛选得到9株AFB1降解菌株,其中菌株YC2的AFB1降解能力最强,AFB1降解率达到90.7%,并确定菌株YC2通过降解作用去除AFB1。最后,菌株YC2被鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。     

降解烟碱微生物的筛选及其酶在烟草中的应用

从昆明卷烟厂附近的土壤中筛选出一株具有高效降解烟碱能力的细菌。该细菌在以烟碱为惟一的碳源和氮源的培养基中能生长良好,在液体培养基中培养(发酵)78h,培养基中的烟碱分解80%以上,且发酵期间培养液呈现颜色变化:无色、蓝色、深蓝色、黑色和褐色。根据生态特征和生理生化分析结果,初步鉴定该菌为节细菌属。在100g烟丝中分别加入2mL该菌酶液(酶蛋白浓度10.15mg/mL)和菌液(109个/mL),各培养2和7d,其烟碱降低了15.2%和22.1%。     

一株降解恩诺沙星菌株的筛选鉴定及其降解条件的优化

从长期处理含恩诺沙星猪粪的黑水虻肠道中,筛选出可降解恩诺沙星的菌株,并对菌株降解过程中的环境因素进行优化,获得较优的降解条件,为研究恩诺沙星生物降解的途径提供理论基础.将黑水虻肠液加入含有恩诺沙星的培养基中培养,经过两次筛选,从若干株具有降解恩诺沙星能力的菌种中挑选降解能力最强的一株菌株,通过单因素实验确定该菌株最适降...     

可降解咖啡碱菌株的筛选与鉴定

目的：筛选能够降解咖啡碱的细菌,以期在该毒素的生物脱毒中得到应用。方法：以咖啡碱作为唯一碳源和氮源进行咖啡碱降解菌株的初筛,之后将初筛的10 株菌通过液体培养基咖啡碱降解实验最终筛选出降解能力最强的1 株菌。结果：筛选出的HZ-1 菌株在48h 即可将咖啡碱完全降解,对目标菌株细胞形态、生理生化以及16SrDNA 进行鉴定,确定该菌株为Pseudomonas lutea,属于假单胞菌属。结论：利用咖啡碱作为唯一碳源和氮源从土壤中筛选出降解咖啡碱良好的菌株,为脱除咖啡碱提供了微生物菌种,填补了国内空白。     

烟碱降解细菌528菌株的分离鉴定和降解特性

为解决我国一些烟区烤烟烟碱含量偏高问题,筛选了具有降解烟叶烟碱含量应用潜力的细菌。以烟碱为唯一的碳氮源,从云南省弥勒县的烟草栽培土壤中分离得到1株烟碱降解细菌5-28。经形态学观察和生理生化性质分析,结合16S rRNA测序和系统进化分析将该细菌鉴定为根瘤菌(Sinorhizobiumsp.)5-28。该菌能耐受2.5 g/L的烟碱,对烟碱的最适降解条件为:烟碱浓度1.5 g/L,pH 4.0,温度25℃。经过24 h培养,菌株5-28对初始浓度为1 g/L的烟碱降解率接近80%,同时,该菌的休止细胞也能有效降解烟叶中的烟碱。     

儿童肠道中乳酸菌的分离、鉴定及其降解3-甲基吲哚的功能研究

为研究从人体肠道分离、筛选的乳酸菌(lactic acid bacteria,LAB),其体外降解3-甲基吲哚的功能.采用MRS培养基从3～8岁健康儿童肠道中筛选乳酸菌,提取细菌总DNA,扩增16S rRNA序列,构建系统发育树.在以3-甲基吲哚为唯一碳源、氮源的无机盐培养基中胁迫培养乳酸菌,紫外分光光度计测定吸光度值...     

一株高效降解乳酸的原玻璃蝇节杆菌筛选与代谢动力学分析

为解决浓香型白酒发酵过程中乳酸偏高的问题，该研究基于传统培养方法，以乳酸为唯一碳源的选择培养基，从浓香型白酒窖池窖底泥中筛选可降解乳酸的微生物菌株；采用形态学、生理生化实验及分子生物学鉴定等多重鉴定技术进行菌株鉴定；进一步考察了性能优良菌株的降解乳酸性能，并建立了降解乳酸动力学模型。结果表明，获得一株乳酸降解菌WLY-B-L2，经多重鉴定为原玻璃蝇节杆菌（Arthrobacter protophormiae）。其生长、降解过程分别符合Logistic生长动力学模型（um =0.219 h-1，Xm =2.318）和一级降解动力学模型，当乳酸初始质量浓度为3 g/L、6 g/L和9 g/L时，菌株WLY-B-L2完全降解乳酸的时间分别为40 h、72 h和80 h。     

红曲霉对胆固醇降解特性的研究

研究了20株在含有胆固醇的培养基(PDAO-CHOL)中生长的红曲霉对胆固醇的降解特性,结果表明,供试的20株红曲霉均具有降解胆固醇的能力,其中M3、M16、E5、15-1、E4和M2菌株对胆固醇降解率均超过50%,且对胆固醇的降解率随培养时间的延长而增加.各菌株最佳接种量为8%,培养基最佳胆固醇浓度为0.5mg/mL,此条件下各菌株的胆固醇降解率均达到最高,其中M3菌株对胆固醇的降解率最高,达到74.93%.