发酵木糖酵母菌株的选育

本文介绍了发酵木糖产酒精酵母菌种的筛选方法并利用该方法筛选出一株性能优良的发酵木糖产酒精酵母菌株Z8。该菌株性能测试结果为 :发酵木糖产乙醇能力相当于理论产量的 60 .0 % ;发酵葡萄糖浓度为 8%的发酵液 ,乙醇转化率为0 .3 88g/g;最低乙醇抑制浓度 14% (v/v) ;在温度高达 42℃的条件下仍能正常生长。并初步鉴定该菌株为奥默毕赤氏酵母(Pichiaahmeri)。     

耐高温高产酒精酵母菌的筛选鉴定及特性研究

为了筛选耐高温产酒精酵母菌,以贵州省茅台镇酱香型酒厂的第四轮次酒醅为实验材料,采用平板划线分离法筛选出37株酵母菌,从37株酵母菌中通过热致死温度、TTC染色法获得1株耐高温且高产酒精的J18菌株,对其在最高发酵温度的耐乙醇、耐酸、耐糖及发酵力进行了研究。结果表明：J18菌株的最高发酵温度为44℃,耐乙醇浓度18%vol,最适生长pH值为5.5;最适生长葡萄糖浓度为35%,最适发酵条件下发酵力为4.881 g/100 mL。对该菌株进行形态学鉴定和26S rDNA测序,确定该菌株为酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）。     

耐高温酵母的筛选鉴定及发酵性能的初步研究

为获得耐高温酵母菌,从白酒糟醅中分离筛选出1株在45℃生长良好且产乙醇能力较高的酵母菌株.经ITS和26S rDNAD1/D2区域序列分析比对,结合菌落菌体形态鉴定其为库德毕赤酵母.其最适生长温度为30℃,与安琪酵母相比较,高温条件下生长优势明显.以浓度为10％ (w/v)的葡萄糖为底物,在45℃进行静置发酵,其产乙醇浓度为18.74g/L,安琪酵母产乙醇浓度为11.40g/L,该菌株较安琪酵母表现出明显的优势.     

利用低温蒸煮工艺进行高浓度酒精发酵

本研究利用低温蒸煮工艺,探讨了玉米淀粉的高浓度酒精发酵。在80℃下对玉米粉进行蒸煮15min,同时加α—淀粉酶进行液化。经冷却后,在55℃下加糖化酶糖化30min。再度冷却到30℃,加酵母菌悬液发酵70h。并利用这一技术研究了产高浓度酒精酵母菌株的最佳发酵条件。在加糖化酶量200～300u/g原料。酵母接种量为3％(v/v),发酵温度为30℃,pH4～4.5,发酵周期为70h,原料水比为1:2条件下,所选用的菌株之一W_4可以产生17.5％(v/v)乙醇。发现该菌株在发酵速度和耐酒精能力方面明显地优于国内酒精厂常用的酵母菌株1300。在发酵结束时,成熟发酵醪的pH值为4.2。外观糖度为0(Bx),残还原糖为0.19％,残总糖为3.6％,淀粉利用率为90％。     

发酵木糖产酒精酵母菌的初步研究

采用稀释平板法及划线分离法从自然环境中筛选获得120株形态特征不尽相同的酵母菌,然后通过发酵木糖、葡萄糖试验获得6株能利用木糖为唯一碳源生长的酵母菌株,其中有1株分解木糖产乙醇能力较佳,其发酵条件为:96r/min摇瓶发酵、温度为30℃、木糖浓度为3.0%时木糖转化率最高达7.1%。     

利用木糖高产乙醇酵母菌的ARTP诱变选育

为了提高酵母菌利用木糖发酵产乙醇的能力,将分离得到的野生菌株异常威克汉姆酵母A42通过常温常压等离子体（ARTP）技术进行诱变处理,从中选育具有优良性能的高产乙醇突变菌株。结果表明：诱变处理时间120 s为最佳诱变条件,在该条件下对A42进行诱变,此时致死率达到97.53%。对该条件下ARTP诱变后的菌株进行两轮的筛选得到突变菌株A42-338,发酵60 h乙醇含量为20.78 g/L,其乙醇产量较出发菌株提高了42.59%,且传代8次各代乙醇产量变化率不超过2.50%。将异常威克汉姆酵母A42-338在油茶籽壳发酵培养基中发酵60 h乙醇含量为19.88 g/L,还原糖残糖含量为9.06 g/L,其中木糖残糖含量为1.79 g/L,葡萄糖残糖含量为7.27 g/L,木糖利用率为84.61%,葡萄糖利用率为81.05%,糖转化率为0.40 g乙醇/g糖。因此,ARTP诱变是一种高效可行的酵母菌育种方法。     

利用木糖高产乙醇酵母菌发酵条件的研究

以蒙假丝酵母JS-73为出发菌株,逐渐增加底物中木糖浓度,对该菌株利用木糖产乙醇的能力进行了驯化,并优化该菌利用木糖生产乙醇的工艺和培养基成分.结果表明,驯化后,木糖利用率为67.21％,酒精产量达到7.41 g/L.确定了发酵培养基的最优组合为:木糖60 g/L,酵母粉0.6 g/L,K2HPO41.0 g/L,MgSO4·7H2O 0.4 g/L,在该条件组合下,菌株JS-73的乙醇产量为10.27 g/L,是理论产量的37.21％.确定了发酵最优条件为:温度31℃,pH5,转速70 r/min,接种量11％,装液量120 mL/250 mL,在此条件下,乙醇产量达最高,为18.95 g/L.     

黑麦草纤维发酵产乙醇菌种的筛选及特性研究

从酒渣、土壤和酵母粉3种样品中筛选出可利用黑麦草纤维发酵生产乙醇的菌种。试验利用梯度法和划线分离法从3种样品中筛选出18株酵母菌,其中有3菌株可高效利用木糖,通过理化分析及预发酵试验,确定其中的Rr菌株最适合黑麦草纤维的发酵;并对其耐受性的研究表明,其pH值耐受范围为3.3~5.2、最佳木糖浓度为0.02g/mL、耐受NaCl浓度范围为0.00~0.04g/mL、耐受乙醇浓度为0%vol~4%vol。     

发酵木糖产乙醇菌种筛选及应用

采用传统的菌种筛选方法,对样品进行了发酵木糖生产酒精的酵母菌的筛选,得到一株能够发酵木糖生产酒精的酵母菌,经初步鉴定为假丝酵母菌.其在木糖含量2%、30℃、100r/min的条件下发酵,酒精产量达到3.10g/L,基本达到了一般野生酵母的水平.再利用其发酵麦糟水解液,乙醇产量最高为4.24g/L.结果表明,Y-4T-1具有抵抗麦糟水解液中的乙酸、糠醛、羟甲基糠醛等抑制物生长的能力,为发酵麦糟生产酒精的进一步研究提供了菌种支持,为生物质燃料生产燃料乙醇的研究提供了新的思路.     

TTC在发酵木糖高产乙醇的休哈塔假丝酵母选育中的应用

TTC可以作为筛选发酵葡萄糖产酒精能力强的酵母茵的显色剂,但发酵木糖产乙醇的酵母茵的代谢和发酵途径与之相比都有所不同,本实验用TTC作为初筛显色剂筛选发酵木糖产酒精能力较强的休哈塔假丝酵母.紫外诱变后从TTC平板上挑取显红色菌株150株进行摇瓶发酵测定乙醇产量,得到的正突变率为29%,负突变率为10%;挑取显白色菌株100株,得到的正突变率为0,负突变率为56%.将紫外诱变后产量已经有所提高的突变株S28进行氮离子注入诱变,从TTC平板上挑取显红色菌株100株进行摇瓶发酵测定乙醇产量,得到的正突变率为20.05%,负突变率为10.14%,其中的部分突变株的产量相比S28又有所提高.可见TTC能将乙醇产量较低的菌株淘汰,筛选出乙醇产量高的休哈塔假丝酵母菌.     

苹果白兰地发酵酵母菌株的筛选及其性能研究

以在云责高原上所种植的青苹果为研究对象,从其自然发酵醪中分离得到10株菌种.通过产气能力、耐性试验、产酒精试验三级筛选得到1株适合苹果白兰地发酵的酵母菌,命名为GN-1.结果表明,该酵母菌可耐受16 ％vol乙醇,可耐糖浓度为750 g/L,发酵初始糖度为14°Bx,发酵液的酒精度为8.3 ％vol;该酵母菌发酵性能的试验结果显示,其最适生长温度为34℃,最适生长pH值为4.0～6.0.     

柠檬汁和甘蔗汁混合发酵酿酒酵母的筛选

通过发酵实验从7株酵母菌中筛选出发酵J}生能较好的3株菌株（7^#，1^#，6^#），并对3株酵母菌进行抗硫性、抗酸性、耐糖、耐酒精性能和耐温性能试验，最后筛选出发酵性能优良的7^#和6^#酵母菌株。其产酒率高，具有较好的耐二氧化硫能力（80～120mg／L）；能在pH3．3～3．5，糖浓度24％～27％，酒精度12％Vol～14％Vol的范围内生长和发酵；发酵结束残糖含量低，凝聚能力好；发酵所得原酒品质好，酒的风味醇和，果香、酒香浓郁、协调；7^#和6^#两株菌可应用于柠檬、甘蔗混合发酵产酒。（孙悟）     

多样品耐高温产乙醇酵母的筛选及生长特性研究

从未经蒸煮的压滤酒糟、蒸煮酒糟、菜园土壤以及家用面头等4种样品中,经菌种富集、纯化、耐酒精和耐高温的驯化以及发酵产气和产乙醇能力的比较,选育出一株耐性优良的高产菌株LZ2.该菌株的最低乙醇致死浓度为22%(v/v),37～40℃生长良好,在10°麦汁的初步发酵研究中,40℃条件下发酵5d,最终乙醇浓度为5.21%(v/v),发酵液中残还原糖和总糖浓度分别为12.751mg/mL和32.758mg/mL.该菌的成功选育为酵母菌实际利用稻草粉的同步糖化发酵提供了菌种来源.     

张弓老酒大曲中耐高温酵母菌的分离鉴定及发酵条件优化

为筛选出耐高温的酵母菌,本实验利用传统微生物学分离培养方法,从张弓老酒中高温大曲中共初筛分离出100株酵母菌,进行复筛得到一株能在45 ℃下生长的酵母菌,编号为ZG-3,通过形态学特征观察并结合26S rDNA序列分析确定菌株ZG-3为库德里阿兹威毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)。用常规方法对其耐高温和耐乙醇性以及乙醇发酵性能进行测试。研究表明菌株ZG-3的最适生长温度为37 ℃,最高生长温度为45 ℃,乙醇耐受性可达12%,在40 ℃条件下发酵72 h,产酒精4.7% vol。对菌株ZG-3发酵条件进行响应面优化,在最佳发酵下条件,即接种量12%、发酵温度40 ℃、pH为5、葡萄糖浓度140 g/L,发酵72 h,酒精度为5.2% vol。由此可见ZG-3是一株很有应用开发潜力的耐高温耐乙醇的酵母菌。     

桑葚果酒酵母菌的筛选及其发酵性能研究

为筛选出适宜桑葚果酒酿造的酵母菌株,以从自然发酵桑葚果酒中分离到的12株酵母菌为出发菌株,采用YPD液体培养基,通过杜氏管发酵法初筛选性能优良的酵母菌株,并进一步检测该菌株在桑葚汁中的发酵性能。结果显示,菌株SG3-2产气效果好,耐酸、耐酒精、耐SO_2能力强。该菌株的最适发酵条件为:温度为28℃,pH值为4.0~4.5,SO_2浓度为100 mg/L,酒精浓度为14%。     

生物转化γ-氨基丁酸酿酒酵母的筛选及其在桑葚酒酿造中的应用

为获得产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric,GABA)并酿造桑葚酒性能良好的酵母菌,采用纸色谱定性分析从四川泡菜中分离筛选出3株产GABA酵母菌,经生理生化和18S r RNA测序分析,菌株JM009和JM037被鉴定为酿酒酵母(S.cerevisiae),菌株JM024被鉴定为C.tanzawaensis。通过高效液相色谱对酵母菌GABA表达能力评估发现,酿酒酵母JM037发酵产GABA的能力较强,达670 mg/L。进一步对其进行耐受性和桑葚发酵性能分析,结果表明,酿酒酵母JM037对酒精、SO2、葡萄糖和pH的综合耐受性良好,并在发酵桑葚果汁后,乙醇产量在168 h达到38.36 g/L,残糖质量浓度在216 h降至3.06 g/L,GABA质量浓度在144 h提高到1 145 mg/L,以安琪酵母为参考,乙醇产量和残糖质量浓度差异不大,但酿酒酵母JM037具有独特的产GABA能力。因此,酿酒酵母JM037具有酿制富含GABA桑葚酒的潜力。     

青海东部野生酵母菌株抗性及发酵特性研究

以分离自青海的97株野生酵母菌株为材料,通过杜氏管发酵法初筛出35株发酵力强、有香味的酵母菌株,对其抗性和发酵特性进行研究.结果表明,35株酵母菌对SO2具有高度的抗性,大部分菌株在SO2浓度为600 mg/L时仍可正常生长并发酵;有7株耐NaCl高达120.0g/L,菌株QXN2在160.0 g/L的浓度下仍可正常生长并发酵;但大多数菌株的酒精耐受力弱,仅有6株可耐12%vol的乙醇,但已不能发酵产气;部分酵母菌株的耐温性较高,如菌株QHL4、QXS1、QJD12可耐受55℃高温;pH耐受范围在2.5～12.0之间,大部分菌株可在600 g/L的葡萄糖溶液中生长,其中9株仍可发酵产气.这9株发酵力较好且产香酵母的酒精发酵结果表明,4株产酒精度为0,具有浓郁的芳香;4株产酒度在2.1%vol～2.4%vol之间,且残糖较低,有浓郁果香.优良酵母菌株有望应用于面包生产、无醇饮料的开发、工业废水处理等领域.     

柑橘及桑葚中优质酵母菌的筛选及鉴定

该研究以南充本地的柑橘和桑葚自然发酵果肉汁为材料,采用孟加拉红固体培养基分离酵母菌,通过产酒精和产酯能力测定、生长性能及耐受性分析筛选能够发酵柑橘、桑葚复合果酒的高效优质酵母菌株,并通过生理生化试验及分子生物学技术对其进行菌种鉴定。结果表明,共分离得到32株酵母菌菌株（编号为S1～S30）,其中菌株S4、S15、S18和S24产酒精和产酯能力较高,且菌株S24生长性能和耐受性较好,其产酒精度为10.74%vol,总酯产量为2.05 g/L,生长适应性强,可耐受70%的葡萄糖含量、pH值2.0的强酸环境和体积分数22%的乙醇。菌株S24被鉴定为克鲁维毕赤酵母（Pichia kluyveri）。     

多耐性酒精酵母菌的选育及特性研究

以酿酒酵母spc1,Y14,S16为出发菌株,经紫外线诱变和筛选,获得了3株对温度、乙醇浓度、pH耐性有所提高的正向突变株UVs,UV14,UV16;以这些菌株为出发菌株,进行三轮原生质体融合,最终获得了能耐受48℃,19%vol乙醇浓度和耐酸(pH 2.6)的酵母菌TY33.该突变株对温度和耐酒精能力分别提高了17.1%和58.3%.该菌株在35℃下发酵72h酒精产量为101.58g/L,比出发菌株spc1在35℃发酵液中最高乙醇浓度83.82g/L提高了21.1%.     

佛手果醋乙醇发酵优良酵母菌的选育及鉴定

佛手汁酿制果醋的过程需要优先利用酵母菌将糖发酵为酒精,但佛手汁中的柠檬苦素会抑制酵母生长。为避免其对酵母酒精发酵能力的影响,作者利用佛手为原料,结合醋酸发酵的选育方式,筛选适合佛手果醋乙醇发酵的酵母菌株。从自然发酵的佛手汁中,分离得到85株酵母菌株。经过杜氏小管初筛,以产乙醇能力、起酵速度、有机酸生产能力为指标进行复筛和醋酸发酵试验,最终得到优良菌株FS-ZJQ。经18S r DNA序列鉴定该酵母菌株为酿酒酵母。其在糖度18°Bx的佛手汁中,25℃发酵7 d可产乙醇8.49%,发酵液中萜烯类化合物、酯类化合物质量分数高,分别占挥发性风味成分的58.83%、16.44%;经醋酸发酵后,非挥发酸质量浓度可达5.06mg/mL。菌株FS-ZJQ对糖度、pH、乙醇的耐受性较好。