基于液相色谱-质谱联用技术定性定量分析黑豆种皮中可溶型和结合型花青素

以超声波辅助有机溶剂提取法获得黑豆种皮可溶型花青素提取物,再进一步对不含可溶型花青素的黑豆种皮残渣使用酸水解和碱水解以及酸碱/碱酸轮提水解,获得黑豆种皮结合型花青素提取物。采用超高效液相色谱-电喷雾-四极杆飞行时间质谱联用仪分析鉴定各黑豆种皮提取物中所含有的共17 种花青素成分,包括11 种花青素糖苷类：飞燕草素-3-O-葡萄糖苷、飞燕草素-3-O-半乳糖苷、矮牵牛花素-3-O-葡萄糖苷、矮牵牛花素-3-O-半乳糖苷、天竺葵素-3-O-芸香糖苷、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷、矢车菊素-3-O-半乳糖苷、天竺葵素-3-O-己糖苷、芍药花素-3-O-己糖苷、天竺葵素-3-O-(6”-丙二酰葡萄糖苷)和芹菜定-3-O-(6”-丙二酰葡萄糖苷);6 种花青素苷元：飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛花素、天竺葵素、芹菜定和芍药花素。采用高效液相色谱-电喷雾-三重四极杆质谱联用仪精确定量各类黑豆种皮提取物中的花青素含量,结果表明,酸性结合型花青素提取物中结合型花青素的总含量最高。此外,在黑豆种皮的可溶型花青素提取物中,花青素主要以花青素糖苷类形式存在,苷元含量相对极少;而在结合型花青素提取物中,则主要以花青素苷元为主,糖苷类化合物相对少见。     

基于LC-MS/MS分析‘塔罗科’血橙优系果实花青素组分特征

以‘塔罗科’血橙优系为研究对象，运用液相色谱-串联质谱技术检测其与对照品种‘塔罗科’血橙果实花青素的组分及相对含量，筛选优系差异花青素代谢物。结果表明，‘塔罗科’血橙优系果实中共鉴定出矢车菊素、飞燕草素、芍药花素、天竺葵素、矮牵牛素、锦葵素以及花青素合成前体物质黄酮7 类33 种花青素相关代谢物，其内膛和外围果实花青素代谢物数量和种类一致，无差异代谢物；而对照品种内膛和外围果实分别检测出27 种和30 种花青素代谢物，其中内外差异代谢物达9 种，分属矢车菊素、飞燕草素、芍药花色素和黄酮4 类物质。‘塔罗科’血橙优系和对照品种花青素主要成分均为矢车菊素-3-O-丙二酰葡萄糖苷和矢车菊素-3-O-葡萄糖苷，两者在优系内膛和外围果实中分别约占总花青素含量的42.3%、41.0%和40.6%、41.4%，在对照品种内膛和外围果实中分别约占39.5%、41.0%和36.8%、40.6%。相比对照，‘塔罗科’血橙优系果实中矢车菊素类物质绝对含量和总花青素占比均显著提高，其内膛和外围果实矢车菊素类花青素总量分别为48.68 μg/g（91.90%）和62.16 μg/g（92.28%），此外，飞燕草素、芍药花素以及黄酮3 类代谢物占各自花青素总量的百分比也相近，推测‘塔罗科’血橙优系果实花青素合成可能受温度的影响较小。研究发现‘塔罗科’血橙优系较对照品种花青素含量高且代谢物种类多，综合品质优良，可为血橙品种遗传改良及利用提供一定的理论依据。     

采用高效液相色谱串联质谱法分析黑粒小麦麸皮中的花色苷组成

以黒粒小麦麸皮为原料,应用高效液相色谱配以串联质谱和二极管阵列检测技术对黒粒小麦中麸皮中的花色苷的组成进行了分析。结果显示:从黒粒小麦麸皮中分离鉴定出9种不同的花色苷类化合物———矢车菊素-己糖苷、矢车菊素-芦丁苷、芍药素-己糖苷、矢车菊素-丙二酰葡萄糖苷、飞燕草素-己糖苷、飞燕草色素-芦丁苷、锦葵色素-芦丁苷、芍药素-芦丁苷及牵牛花素-芦丁苷,其中飞燕草类花色苷和矢车菊素类花色苷是主要花色苷,分别占全部花色苷含量的50.27%和30.04%。     

高效液相色谱-电喷雾串联质谱法鉴定芍药花色苷

目的建立高效液相色谱-二极管阵列检测器/电喷雾质谱联用技术研究芍药花中的花色苷类化合物的成分和含量的方法。方法首先用含0.1%盐酸的甲醇溶液提取芍药中的花色苷,经XDA-7大孔树脂纯化后,用高效液相色谱-电喷雾串联质谱(HPLC-DAD-ESI-MS2)进行紫外-可见光谱和质谱分析。结果与结论鉴定出4种花色苷,经紫外-可见光谱、质谱和文献报道综合分析,确定了芍药花中的主要花色苷是芍药素-3,5-二葡糖苷,含量为77.14%。含量较低的三种花色苷为矢车菊素-3,5-二葡糖苷,芍药素-3,5-乙酸酰二葡糖苷,飞燕草素-3-葡糖苷,含量分别为2.68%,9.78%,9.07%。     

基于广泛靶向代谢组学的不同产地红茶代谢产物比较分析

为探究红茶代谢产物的产地差异,本实验采用感官审评方法及超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）的广泛靶向代谢组测定方法,对福建省福安市和尤溪县产红茶中的代谢产物进行比较分析。结果表明:福安红茶以“醇和”的滋味特征为主,尤溪红茶以“甘醇”的滋味特征为主。利用代谢组学方法在两地的红茶中鉴定出黄酮、酚酸类、脂质、有机酸、氨基酸及其衍生物等共937种代谢物,通过主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘判别分析（OPLS-DA）可以显著区分不同产地红茶,并鉴定出410种具有显著差异的代谢物。尤溪红茶中有291种差异代谢物的相对含量高于福安红茶,其中紫云英苷、表儿茶素（EC）、L-谷氨酰胺、L-天冬氨酸、L-赖氨酸、L-色氨酸、L-谷氨酸、绿原酸、苯乙胺和牡荆素-2'-O-鼠李糖苷等差异代谢产物对于两地红茶的不同滋味品质形成可能具有重要贡献。代谢通路分析发现,两地红茶的氨基酸和黄酮类物质代谢水平具有显著差异,可能是形成两地红茶滋味品质差异的原因。研究为茶叶产地鉴别提供理论依据。     

蓝莓成熟过程中花色苷组分的变化

通过分析研究不同成熟度蓝莓果实的总花色苷含量及其花色苷组分的动态变化规律,以期为蓝莓采收和加工提供参考。采用p H示差法测得不同成熟度蓝莓的总花色苷含量,高效液相色谱质谱联用（HPLC-MS/MS）确定单个花色苷结构,用HPLC定量分析单个花色苷含量。结果表明:随着蓝莓果成熟度的增加,花色苷合成速率不断加快,花色苷含量逐渐积累,紫黑期含量达到最大值2827 mg/kg;蓝莓成熟过程中共有15种花色苷,分别为飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛花色素、芍药色素、锦葵色素这5种花色苷元所连接的半乳糖、葡萄糖和阿拉伯糖3种糖残基;在蓝莓发育过程中,飞燕草素类、矮牵牛花素类、芍药素类、锦葵素类均呈显著增长趋势,而矢车菊素类增长至成熟后期开始明显减少。      

基于广泛靶向代谢组学的浅黄色和紫色核桃内种皮成分差异分析

为了解核桃内种皮的主要代谢成分,同时比较不同颜色内种皮的成分差异。利用超高效液相色谱-串联质谱广泛靶向代谢组学的方法,通过聚类分析、样本相关性分析和正交偏最小二乘判别分析等方法,测定并比较相同生境下浅黄色和紫色核桃内种皮的代谢物质成分。结果表明：2 种核桃内种皮共检测出23 类680 种代谢物,其中658 种为两者共有,浅黄色有670 种,紫色668 种;2 种核桃内种皮筛选得到差异代谢物244 种,占共有代谢物的37.08%;其中,紫色内种皮相对浅黄色内种皮有93 种代谢物含量较高,占比为38.11%,151 种成分含量较低,占比为61.89%;244 种显著差异的代谢物主要分布在20 条代谢途径中,前5 条通路分别是次生代谢产物生物合成通路、黄酮类生物合成通路、黄酮和黄酮醇生物合成通路、环境微生物相关代谢通路和苯丙烷生物合成通路,分别包括代谢物90 种（36.89%）、48 种（19.67%）、37 种（15.16%）、30 种（12.30%）和23 种（9.43%）;紫色核桃内种皮花青素差异代谢物数量较多且含量较高,可能是造成内种皮颜色差异的因素之一。     

贵定云雾茶本地种和引进种次生代谢产物差异分析

为了研究贵定云雾茶本地种和引进种次生代谢产物差异,基于超高效液相色谱-四级杆串联飞行时间质谱（ultra performance liquid chromatography-quadrupole time-of-flight mass spectrometry, UPLC-QTOF-MS）对贵定云雾茶本地种和引进种的次生代谢产物进行了定性、定量分析。结果鉴定出361种代谢物。采用主成分分析（principal component analysis, PCA）和正交偏最小二乘判别分析（orthogonal least squares discriminant analysis, OPLS-DA）筛选出14种显著差异代谢物,包括4种黄酮醇类物质、4种酚酸类物质、3种黄酮糖苷类物质、2种儿茶素和1种原花青素B1。通路富集分析显示这些差异代谢物主要分布于苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸代谢途径（phenylalanine, tyrosine and tryptophan biosynthesis）、黄酮和黄酮醇代谢途径（flavone and flavonol biosynthesis）以及类黄酮代谢途径中（flavonoid biosynthesis）。此外,儿茶素和原花青素B1在云雾茶本地种中含量较高,而黄酮醇和黄酮糖苷类物质在引进种中含量较高,这表明云雾茶本地种更适合绿茶的加工,而引进种更适合白茶的加工。     

不同种植地区蓝莓果中花色苷的分布

目的:探究不同种植地区的蓝莓果实中花色苷含量与海拔高度、纬度等环境因素之间的关系。方法:选取不同海拔高度和纬度的10个种植地区“灿烂”品种的兔眼蓝莓果实为研究对象,采用高效液相色谱法(HPLC)和高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)定性和定量分析蓝莓果中花色苷的组成成分,比较不同种植地区的蓝莓果中花色苷苷元、糖基组成与含量的差异。结果:从蓝莓果中检测到5类花青素苷元,共13种花色苷,苷元含量组成由高到低为锦葵色素>矢车菊素>飞燕草素>矮牵牛素>芍药素;糖基组成由高到低为半乳糖苷>阿拉伯糖苷>葡萄糖苷,其中从芍药素中仅检测到半乳糖苷。蓝莓果中锦葵色素-3-O-半乳糖苷和矢车菊素-3-O-半乳糖苷的含量最高,而飞燕草素-3-O-葡萄糖苷和矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷含量低,在部分地区的蓝莓果中缺失或未检测到。不同种植地区蓝莓果中花色苷组成虽基本一致但含量存在差异。云南龙朋代表的低纬度、高海拔地区种植的蓝莓果中花色苷总含量最高,高纬度、低海拔地区的浙江草塔的蓝莓果中花色苷总含量最低。结论:不同种植地区的地理环境影响蓝莓果中花色苷的分布,高海拔地区的环境条件更利于蓝莓果实中花色苷的合成和积累。     

云南丽江和吉林靖宇11种越橘果实花色苷组分的分析

采用高效液相色谱法对云南丽江、吉林靖宇11种越橘果实花色苷组分进行测定。通过标准品的分析,建立了飞燕草素-3-半乳糖苷、飞燕草素-3-葡萄糖苷、矢车菊素-3-半乳糖苷、矢车菊素-3-葡萄糖苷、锦葵色素-3-半乳糖苷、锦葵色素-3-葡萄糖苷的回归方程,相关系数为0.9939~0.9968,精密度RSD为2.00%~3.73%,回收率在98.90%~100.99%,方法准确可行。通过6种标准品的对比,供试的15个样品中,所有越橘品种均有飞燕草素-3-半乳糖苷、矢车菊素-3-半乳糖苷、锦葵色素-3-半乳糖苷3种花色苷,飞燕草素-3-半乳糖苷平均含量为223.99 μg/g、锦葵色素-3-半乳糖苷平均含量为153.34 μg/g,二者占总花色苷的65%。采用欧氏距离聚类分析表明,集群1为飞燕草素-3-半乳糖苷含量较高的三种越橘,代表品种为丽江雷戈西、丽江奥尼尔、靖宇杜克;集群2为6种花色苷总含量较高的越橘品种,代表品种为丽江北陆与靖宇早蓝,说明飞燕草素-3-半乳糖苷含量与花色苷总含量是评价越橘花色苷特点的重要因子。     

湛江地区不同桑葚品种的品质比较

本研究对17份桑葚种质资源的花青素、糖组分、可溶性总糖、可滴定酸、维生素C、总黄酮及总酚等品质性状进行了测定分析,并采用主成分、聚类分析对其进行综合评价。结果表明,在17个桑葚品种中共检测到飞叶草素、矢车菊素、天竺葵素、矮牵牛素、芍药色素和锦葵色素6种花青苷组分,其中矢车菊素的含量最高,其次为飞叶草素。果糖和葡萄糖是桑葚主要的糖组分。通过主成分分析得出飞叶草素、矢车菊素、天竺葵素、矮牵牛素、锦葵色素、总黄酮和总酚的含量可作为其营养价值评价的重要指标;基于花青素含量等指标聚类分析可将本研究的17个桑葚品种分为3类。     

高效液相色谱法测定8 个彩色马铃薯品种中花青素种类和含量

采用高效液相色谱法,以表皮和薯肉为研究对象,定量分析8 个彩色马铃薯品种块茎中花青素的种类和含量。研究发现,彩色马铃薯块茎中最多含有6 种花青素,即飞燕草色素、矢车菊色素、矮牵牛色素、天竺葵色素、芍药色素和锦葵色素。紫色马铃薯块茎中主要花青素为矮牵牛色素、芍药色素和锦葵色素,红色马铃薯块茎中主要花青素是天竺葵色素和芍药色素。飞燕草色素和芍药色素广泛存在于彩色马铃薯（紫色和红色）块茎的表皮中,而红色马铃薯块茎中未检测到锦葵色素。品种之间差异显著（P＜0.05）,其中紫云1号的总花青素含量最高。块茎表皮的花青素含量约是薯肉的6～176 倍,且大部分品种的表皮花青素种类比薯肉多。彩色马铃薯块茎的表皮富含丰富的花青素,是天然色素和抗氧化剂的重要来源。     

Berry anthocyanins: isolation,identification and antioxidant activities

Anthocyanins from bilberry, blackcurrant and cowberry were isolated for antioxidant evaluation. Individual compounds were identified and quantified using HPLC and HPLC/ESI–MS techniques. Antioxidant and radical‐scavenging capacities of the isolates were studied in emulsified methyl linoleate and human low‐density lipoprotein (LDL) in vitro and in the 2,2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl (DPPH) test. The total anthocyanin contents in the phenolic extracts of bilberry, blackcurrant and cowberry were 6000, 2360 and 680 mg kg^?1 fresh weight respectively. There were four dominant compounds in blackcurrant (glucosides and rutinosides of cyanidin and delphinidin), three in cowberry (monoglycosides of cyanidin) and 15 in bilberry (monoglycosides of cyanidin, delphinidin, malvidin, peonidin and petunidin). Quantification as cyanidin‐3‐glucoside equivalents gave markedly lower results regarding the total anthocyanin concentration and the content of individual delphinidin and malvidin compounds compared with quantification based on corresponding standard compounds. Berry anthocyanins were highly active radical scavengers in the DPPH test and effective antioxidants in emulsion and human LDL. Copyright © 2003 Society of Chemical Industry     

Anthocyanins of Crowberry, Empetrum nigrum coll.

Anthocyanins of northern crowberry (Empetrum nigrum ssp. hermaphroditum (Hagerup) Böcker) were extracted from the berry with acidified ethanol and purified with solvent extractions and ion exchange chromatography. Separation of anthocyanins and analysis of aglycones were carried out with HPLC. Glycosidic units were analyzed with GLC-MS. Twelve nonacylated monosides were found: glucoside, galactoside and arabinoside of delphinidin and petunidin, and galactoside and arabinoside of cyanidin, peonidin and malvidin. Three main anthocyanins were galactosides of cyanidin, dolphinidin and malvidin which formed about 60% of total anthocyanins.     

桑葚花色苷超高压提取工艺优化及其组分分析

以桑葚为原料采用超高压法提取花色苷,通过响应面优化提取工艺,并用高效液相色谱法分析桑葚提取液中花色苷种类和含量。结果表明:超高压提取桑葚花色苷的最佳工艺条件为:压力270 MPa、保压时间6 min、料液比1:35 g/mL、乙醇浓度62%,在此条件下桑葚花色苷得率为(4.93±0.12)mg/g,较热回流提取和超声波提取得率分别提高了25.93%和18.26%。从桑葚提取液中鉴定出4种花色苷单体分别为飞燕草色素、矢车菊色素、牵牛花色素、芍药色素,其含量分别为1.32、2.05、0.27、0.25 mg/g。高效液相色谱分析花色苷组分为桑葚花色苷进一步开发利用提供理论依据。     

山葡萄花青素超高压提取工艺优化及其组分分析

以‘双红’山葡萄为原料采用超高压法提取花青素,通过响应面法优化提取工艺,并应用高效液相色谱法分析‘双红’山葡萄水解液中花青素的种类及含量。结果表明:‘双红’山葡萄花青素最佳提取工艺参数为液料比8.5∶1(mL/g)、压力200 MPa、保压时间2 min,在此条件下,花青素得率最高为(0.304±0.007)g/100 g,较传统热浸提法(0.24±0.005)g/100 g提高了26.7%;‘双红’山葡萄花青素主要包括飞燕草素、矢车菊素、矮牵牛素、芍药素、锦葵素,含量分别为51.03、19.30、13.54、3.00、99.91 mg/100 g。高效液相色谱法分析花青素组分为‘双红’山葡萄色素的进一步开发利用提供理论依据。     

Original article: Anthocyanin profile in Monastrell grapes in six different areas from Denomination of Origen Jumilla during ripening stage

The aim of our research has been to investigate the pattern of accumulation of anthocyanins in the skin of Monastrell variety and to establish if the fingerprint of this cultivar changed in six different areas from Denomination of Origen Jumilla during ripening stage in two consecutive seasons (2007 and 2008). The results show that the anthocyanin profile for Monastrell variety is maintained: it could be observed a higher proportion of non‐acylated anthocyanins, a higher proportion of coumarylated than acetyl derivatives and a higher proportion of trihydroxylated than dihydroxylated anthocyanins. During ripening period, in all zones studied, we observed the same trends: increasing of cyanidin, peonidin and malvidin‐3‐glucoside and decreasing of the other two monoglucosides (delphinidin and petunidin). Slightly quantitative differences were observed for the different zones in the 2 years studied, leading to the conclusion that edaphoclimatic factors also influence the accumulation of anthocyanin compounds.