Blakeslea trisporaH1^-原生质体制备与再生条件研究

以β-胡萝卜素生产菌株Blakeslea trispora H1^-为研究对象,对其原生质体形成及再生条件进行了研究。得知最佳形成与再生条件为：以摇瓶方式培养菌丝体,培养菌龄为56h,酶解温度为30℃,酶质量分数2．0％,混合酶组成为m（蜗牛酶）：m（纤维素酶）=6：4,酶解时间为120min,渗稳剂为0．6mol／LMgSO4·7H2O。Blakeslea trisporaH1^-原生质体形成数为7．9×10^6个／mL,再生率为3．9％。     

纤维素酶Celluclast 1．5 L在酵母菌原生质体制备及再生中的应用

比较了在不同的酶浓度、处理时间、渗透剂和pH值下纤维素酶Celluclast 1．5L和蜗牛酶在酵母菌原生质体的形成和再生中的应用．在最佳条件下，单独使用纤维素酶的原生质体的形成率可达60％左右，原生质体的再生率可达10％以上，与蜗牛酶类似。     

酿酒酵母与糖化酵母原生质体的形成与再生

对影响酿酒酵母及糖化酵母形成与再生的因素——菌龄、酶浓度、温度、酶解时间、预处理剂的浓度和作用时间及渗透压稳定剂的选择做了初步的研究，确定了原生质体形成与再生的最佳条件：菌龄为13～15h，0．1％β-巯基乙醇作用10min；在30℃下，2．0％的蜗牛酶酿酒酵母、糖化酵母酶解1．0h；配制酶解液时渗透压稳定剂采用0．8mol／LKCl，而在稀释及配制再生培养基时则采用0．53mol／L蔗糖。     

黑曲霉与酿酒酵母原生质体的形成和再生的研究

对黑曲霉与酿酒酵母原生质体的形成和再生条件进行了研究，得出黑曲霉原生质体形成和再生的较优条件为：混合酶浓度０．８％，酶解时间２小时，酶解温度３４％。酿酒酵母原生质体形成和再生的较优条件为：蜗牛酶浓度２％，酶解时间９０分钟，酶解温度３０℃。     

复合酶法提取蛹虫草类胡萝卜素工艺优化及其抗氧化能力测定

为确定蛹虫草类胡萝卜素的最佳提取工艺条件,通过单因素实验和响应面实验设计分析探究复合酶法提取蛹虫草类胡萝卜素的最佳工艺条件并采用紫外光谱法测定其体外抗氧化活性并与传统酸热提取法下得到类胡萝卜素的抗氧化能力进行比较.结果显示:纤维素酶:果胶酶(2:1)时,酶解温度50℃、酶解时间45 min、pH=4、酶浓度为0.5％,...     

杭白菊生物复合酶解的优化工艺研究

以杭白菊酶解失重率为指标,分别研究酶解温度、酶解时间、果胶酶量、纤维素酶量对杭白菊的酶解效果。在此基础上设计正交试验优化酶解条件,获得杭白菊的优化生物复合酶解工艺：时间3．0 h、温度60℃、4 mg／g纤维素酶＋2 mg／g果胶酶,优化条件下杭白菊酶解率为52％。     

虎皮香菇（Lentinus tigrinus）菌丝原生质体的分离,培养与再生

以虎皮香菇为材料，以酶解法分离原生质体，进行培养，获得再生菌丝。本研究主要结论是：（１）适合于分离原生质体的菌丝菌龄以２４－４８ｈ为佳，以１００目筛过滤得到的菌丝片段进行继代培养较不处理的菌丝体为好；（２）酶解温度确定在３３℃左右情况下，采用１％Ｌｙｗａｌｌｚｙｍｅ和１％Ｃｅｌｌｕｌａｓｅ，以０－．６５ｍｏｌ／ＬＭｇＳＯ４为稳渗剂，酶解４ｈ，采用４００目不锈钢网除去未被酶解的菌丝片段。     

适合膜片钳电流测定的金铁锁原生质体制备技术

以金铁锁愈伤组织为材料,利用传统酶解法和快速酶解法,对金铁锁原生质体的制备分离技术进行比较和研究,记录全细胞电流,获得高质量的原生质体材料.结果表明,采用传统酶解法,2％纤维素酶R-10+1％果胶酶Y-23的混合酶液酶解7h,可以获得大量原生质体;采用快速酶解法,1.2％纤维素酶RS+0.5％果胶酶Y-23的混合酶液酶...     

K氏酵母与清酒酵母产孢率的研究及原生质体制备

本文考察了Ｋ氏酿酒酵母（ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅＫ）与清酒酵母ＳａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｓａｋｅＹａｂｅ的最适产孢前培养条件与最适产孢培养条件，以及二者原生质体的制备条件，并对二者的融合进行了初步的研究，试验表明：二供试菌经产孢前培养基Ⅱ和１号产孢培养基培养可获得较高产孢率；并且最适产孢温度为２８℃；用２％蜗牛酶于３１℃酶解３ｈｒ，可除去子囊壁，收集原生质体；用４％蜗牛酶，３３℃酶解２－３ｈｒ，制备原生质体；进一步试验表明，Ｋ氏酿酒酵母与清洒酵母可以进行原生质体融合，且得到一融合子Ｆ＿１．     

酿酒酵母原生质体菌株的筛选

实验研究酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae) 原生质体的分离再生及再生菌株的构建 ,以蜗牛酶、纤维素酶、溶壁酶的去壁效果最好 ,而新生酶、几丁质酶的去壁效果较差。 2种以上的酶液混合使用能提高去壁效果。酶解液浓度在 0 .1 %～ 2 %内原生质体释放量随酶解液的浓度升高而上升。酶解液 pH值在 5 .0～ 7.0时原生质体的产量较高 ,渗透压稳定剂以柠檬酸 -磷酸缓冲液( pH6.0 ,内含 0 .8mol/L山梨糖醇 )处理原生质体释放量最高。而培养基对原生质体释放量的影响不明显。通过原生质体融合技术 ,获得融合子HG112 ,对HG112 进行以葡萄糖为基质的发酵试验 ,结果显示该融合子乙醇含量达 7.9% (体积比 ) ,比亲本QT提高 4 9.7% ,该技术可用于筛选优良菌株     

几种虫草无性型菌株深层发酵菌丝体的有效成分分析

以冬虫夏草生药为对照样品,对蝙蝠蛾拟青霉、蝉拟青霉、古尼拟青霉和细脚拟青霉4种虫草无性型菌株深层发酵菌丝体中的主要有效成分进行了分析,并发现4种样品中细脚拟青霉菌丝体中的甘露醇和氨基酸总含量最高,分别为9.12%和36.44%;古尼拟青霉菌丝体中的多糖含量最高,为10.14%;4种拟青霉菌丝体中均含有丰富的Zn、Fe、Ca等重要的微量元素;古尼拟青霉菌丝体中腺苷的含量最高,达1.97m g/g.分析结果表明此4种拟青霉菌株菌丝体中均含有丰富的活性成分,具有良好的开发利用前景.     

北虫草液体培养基的研究

为选取北虫草的最适液体培养基,以三因素三水平的正交试验设计培养北虫草的液体培养条件,北虫草菌种的接种量为5%(体积分数)。培养条件为18℃,pH为6.5,转速为120r/min,培养时间为72h。通过对培养所得的北虫草菌丝体干质量的测定分析可以得出培养北虫草的碳源最优水平为葡萄糖,氮源最优水平为NH4NO3,无机离子最优水平为K2HPO4。从而得到该菌种的最适液体培养基的配方(质量浓度)葡萄糖,NH4NO3,K2HPO4分别为20,1,1g/L。根据数据分析的R值和F值均可以确定:碳源为最重要的因素,应将其控制在最优水平,所以培养北虫草应该选取最优葡萄糖水平。实验结果为进一步大规模培养北虫草提供了重要的依据。     

超声波协同酶法提取牛蒡膳食纤维工艺

以等外牛蒡根为原料,通过单因素和正交试验研究了加酶量、pH值、酶解温度、酶解时间以及超声波功率等因素对超声波协同木瓜蛋白酶和糖化酶酶解牛蒡根提取膳食纤维工艺的影响,确定了最佳的酶解工艺条件：牛蒡粉按液料比25∶1加纯水,调节至pH 6,加入4%的木瓜蛋白酶,50℃水浴,超声波功率150 W,协同酶解60 min;再调节至pH 5,加入1%糖化酶,50℃水浴,超声波功率200 W,协同酶解40 min,牛蒡膳食纤维提取率为62.17%.超声波技术协同酶法提取牛蒡膳食纤维具有快速、高效、简单等优点.     

无性型虫草菌株qsun-1的生长特性

利用组织分离法,从青藏高原野外采集的新鲜的冬虫夏草子座中分离得到无性型虫草菌株qsun-1,并研究了该菌株的菌落形态及显微结构.确定无性型虫草菌株qsun-1最佳培养条件为:生长温度15～18℃;培养基的构成为蔗糖2％,蛋白胨2％,MgSO4 0.1％,KH2 PO4 0.2％.     

富锗蛹虫草无性型乙醇分级多糖抗氧化能力研究

为了探讨不同浓度乙醇分级蛹虫草富锗多糖的抗氧化能力,以蛹虫草为材料通过液态深层发酵获得发酵液和菌丝体,以不同浓度的乙醇沉淀来获得蛹虫草胞外多糖,测定了不同浓度的乙醇分级蛹虫草胞外多糖的抗氧化能力.实验结果表明,30%醇沉富锗胞外多糖清除羟基自由基和DPPH的能力最强,其IC50分别为59.82mg/L和260.92mg/L;70%醇沉富锗胞外多糖清除氧自由基能力最强,其IC50为112.66mg/L.蛹虫草富锗胞外多糖具有显著清除自由基的能力.     

蛹虫草胞外多糖的提取和纯化

对蛹虫草液体深层发酵液的胞外多糖提取进行研究,确定了提取的工艺条件,并对所提取的粗多糖进行分子筛分,对主要多糖组分的糖成分进行测定。其结果为：蛹虫草液体深层发液的胞外粗多糖的提取率为10.0g／L;其粗多糖主要由4种蛹虫草多糖组成;而第4个组分占总粗多糖的32.14%,由葡萄糖构成。     

细脚拟青霉发酵液中核苷类物质的HPLC分析及脂肪酸成分含量测定

以冬虫夏草生药做对比,采用RP—HPLC、GC法对一株细脚拟青霉菌株发酵液冻干粉中核苷类物质、脂肪酸成分进行分析测定．结果表明,细脚拟青霉发酵液冻干粉中主要含有尿苷、鸟苷、腺苷、肌苷和胸苷5种核苷,其含量分别为3．6306mg／g、5．5472mg／g、0．8643mg／g、0．4628mg／g和0．2316mg／g;不饱和脂肪酸是优势脂肪酸,以亚麻油酸、油酸为主,其相对含量分别为38．42％、27．66％．与冬虫夏草生药相比,细脚拟青霉发酵液冻干粉中核苷类物质的含量明显高于后者,不饱和脂肪酸含量略低于冬虫夏草生药．     

胰蛋白酶酶解法制备海参肽的工艺条件

以海参肽得率为指标,分别考察了酶解加酶量、时间、pH、温度、底物浓度对胰蛋白酶酶解海参蛋白质反应的影响。通过正交实验确定了胰蛋白酶酶解海参蛋白的最佳工艺条件:酶加量6 000 U/g,水解反应时间3 h,温度55℃,pH 8.0,底物浓度1.0%,在此条件下,海参肽得率可达32.93%。     

沙门氏菌产草酸盐降解酶的性质及其酶作用条件

沙门氏菌产草酸盐降解酶,能够降解草酸或草酸钙。对草酸盐降解酶性质作了分析,结果表明,酶作用的最适温度为40℃,最适pH值为7.0,最适底物浓度为30%,金属离子Na+、Mg2+、K+、Cu2+、NH4+对酶无明显的激活抑制作用。