啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖的水解条件的优化

对啤酒酵母中β-(1,3)-D-葡聚糖(用碱-酶法从啤酒废酵母中提取)的水解条件进行了优化.研究表明影响β-(1,3)-D-葡聚糖水解条件的因素顺序依次为:预水解硫酸浓度>水解温度>水解硫酸浓度>水解时间;水解参数为:预水解硫酸浓度12mol/L、水解硫酸浓度2mol/L、水解温度100℃、水解时间24h.此条件下用苯酚-硫酸法测得的β-(1,3)-D-葡聚糖含量为83.1%.     

酶解法增溶酵母(1→3)-β-D-葡聚糖的研究

以实验室制备的酵母(1→3)-β-D-葡聚糖为原料,通过酶解法制备水溶性酵母(1→3)-β-D-葡聚糖,并对其结构和生物活性进行了研究。以水溶性酵母葡聚糖得率为指标,通过单因素和正交实验,确定了酵母(1→3)-β-D-葡聚糖酶解的工艺条件。优化后的酶解条件为:酶活浓度0.15 U/mL,底物质量浓度0.5 g/100 mL,酶解温度40℃,pH3.5,酶解时间0.5 h,该酶解条件下水溶性酵母葡聚糖得率为80.3%。红外光谱分析表明,水溶性葡聚糖仍具有(1→3)-β-D-葡聚糖分子构型,刚果红实验表明其具有三螺旋结构。活性实验表明,水溶性葡聚糖能有效提高E.coli诱导的患腹膜炎小鼠的存活率。     

啤酒废酵母酶促自溶胞壁残渣中葡聚糖的提取

啤洒废酵母酶促自溶制备酵母抽提物后,其残存的胞壁残渣中还存有大量的碱不溶性β-1,3-D-葡聚糖.采用碱一酶法制备碱不溶性β-1,3-D-葡聚糖,以多糖干重和多糖纯度为主要指标,研究了影响葡聚糖提取的外加碱液浓度、作用时间、作用温度、碱性蛋白酶添加量因素,并进行正交试验,同时对中和用酸及洗脱工艺进行优化,使杂多糖干重降低了7.27%,而多糖纯度提高,19.04%,多糖提取率提高了10.41%.     

酵母β-1,3-D-葡聚糖提取酶解工艺的研究

采用酶-碱法提取酵母β-1,3-D-葡聚糖,着重研究了提取的酶解工艺,并通过正交实验得出最佳酶解工艺条件为:酶添加量为1600IU/g,酶解时间3h,pH8,温度60℃。沉淀物用2%氢氧化钠在75℃恒温处理6h,即可得到成品葡聚糖,经紫外光谱法和纸层析法进行糖分分析,成品为高纯度的酵母β-1,3-D-葡聚糖。     

β-1,3-1,4-葡聚糖酶在毕赤酵母中的克隆与表达

β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶是一类专一性降解β-1,3-1,4-葡糖苷键中的β-1,4-糖苷键,产生小分子还原糖的水解酶,广泛应用于啤酒工业和饲料工业中。本研究根据毕赤酵母密码子偏好性优化β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因序列,采用PCR法将其插入毕赤酵母表达载体pPICZαA,经SacI线性化后电击整合入毕赤酵母X-33基因组,构建重组酵母;经菌落PCR验证和摇瓶筛选,获得一株X-33/pPICZαA-bgl,甲醇诱导96h后,酶活力达308.5U/mL,经SDS-PAGE电泳,实际蛋白分子量约为33ku。β-1,3-1,4-D-葡聚糖酶最适反应pH为5.0,最适反应温度为50℃。      

硫酸化酵母多糖制备工艺及其鉴定

以废弃酵母泥为原料,用自溶-酶-碱法提取细胞壁多糖,Sevage法脱蛋白、凝胶层析、冷冻干燥得到纯度较高的酵母多糖,采用三氧化硫-吡啶法对所得多糖进行硫酸化修饰,通过单因素和正交试验确定硫酸化酵母多糖的最佳工艺,并用硫酸钡比浊法测定产物硫含量以及红外光谱分析其结构与硫酸根取代度。结果表明:多糖硫酸化的最佳条件为:三氧化硫和酵母多糖质量比3.0︰1,温度50℃,时间2.5 h,其硫酸化产物中硫含量为15.1%,硫酸化取代度为1.47,红外光谱分析提取的多糖为β-(1,3)-D-葡聚糖,经硫酸化后的多糖在833 cm-1和1203 cm-1处出现了两个吸收峰,其中833 cm-1为C-O-S的伸缩振动的特征峰,1203 cm-1为S=O拉伸特征峰,从而说明试验成功引入硫酸根。     

酵母葡聚糖硫酸酯的制备及抗凝血活性

利用浓硫酸-正丁醇法对酵母葡聚糖进行硫酸酯化修饰,制得多种酵母葡聚糖硫酸酯,其取代度在0.232~0.418之间。选择取代度为0.418的产物进行结构和抗凝血活性分析,该产物相对分子量为1.68×105,IR和1H NMR图谱显示该产物引入了硫酸基团;抗凝血活性测试结构表明,一定浓度的酵母葡聚糖硫酸酯可显著延长全血凝血时间和血浆凝结时间。     

新型功能性食品原料——酵母葡聚糖

酵母葡聚糖是一种源自面包酵母细胞壁的功能性多糖,以β-1,3-D-葡聚糖为主链,β-1,6-D-葡聚糖为支链,其相对分子质量约为240万,约有1万多个葡萄糖分子连接而成。酵母葡聚糖在酵母细胞壁中形成严密的网状结构,对于维持酵母细胞的结构完整、保持细胞形状具有重要的作用。     

新型功能性食品原料——酵母葡聚糖

酵母葡聚糖是一种源自面包酵母细胞壁的功能性多糖,以β-1,3-D-葡聚糖为主链,β-1,6-D-葡聚糖为支链,其相对分子质量约为240万,约有1万多个葡萄糖分子连接而成。酵母葡聚糖在酵母细胞壁中形成严密的网状结构,对于维持酵母细胞的结构完整、保持细胞形状具有重要的作用。     

酵母β-葡聚糖水解酶的表达及应用

酵母β-葡聚糖是一种具有多种生物功能的细胞壁结构多糖,但天然的酵母β-葡聚糖水溶性较差,影响了其在医疗、保健食品和化妆品行业中的应用。作者通过β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖水解酶BT3312水解酵母β-葡聚糖制备小分子酵母葡聚糖,提高其水溶性。以大肠杆菌为宿主,异源表达β-1,3-葡聚糖水解酶Gly5m和β-1,6-葡聚糖水解酶BT3312。在25℃条件下,添加0.2 mmol/L IPTG诱导后,Gly5m和BT3312的最高酶活分别为1 086 U/mL和2 355 U/mL。酵母β-葡聚糖经过Gly5m和BT3312水解后,溶解率分别提高了2.6倍和2.4倍。采用Gly5m和BT3312共同水解,酵母β-葡聚糖溶解率提高了3.2倍(水溶性酵母葡聚糖的质量浓度为12.5 g/L)。因此,Gly5m和BT3312在提高酵母葡聚糖的水溶性和制备小分子酵母葡聚糖领域具有重要的应用价值。     

啤酒废酵母泥综合利用的研究

研究了利用啤酒废酵母泥制备酵母抽提物和β-葡聚糖的相关工艺条件。结果表明,自溶-酶联法是制备啤酒酵母抽提物的理想方法,用该法制备啤酒酵母抽提物的抽提率达68.6%、蛋白质利用率达87.3%,抽提物中蛋白质、游离氨基酸态氮和复合核苷酸的含量分别达10.6%、4.2%和3.9%,远高于普通自溶工艺的技术指标;将自溶后的酵母残渣进一步制备成β-1,3-葡聚糖,通过正交试验获得了其优化的工艺条件:酵母浓度10%、碱浓度2%、反应温度80℃、反应时间4 h、碱处理次数4次。在优化的工艺条件下,β-1,3-葡聚糖得率达26.8%、成品中杂蛋白含量仅0.4%、β-葡聚糖分子质量为158ku。实现了啤酒废酵母泥的综合利用和高值化。     

新资源食品——酵母葡聚糖应用前景广阔

β-1,3-D-葡聚糖是在微生物、蘑菇和植物中广泛存在的一种多糖,它是组成高等植物、酵母菌和真菌细胞壁的结构大分子之一.具有较强生物活性的β-1,3-D-葡聚糖的重要来源之一是酵母细胞壁.酵母细胞壁由三种主要的多糖组成,其中包括甘露糖蛋白(约占40%)、葡聚糖(约占50%)和几丁质(约含2%).     

啤酒酵母细胞壁中β-(1，3)-D-葡聚糖提取与应用

该文叙述啤酒酵母细胞壁中β-(1,3)-D-葡聚糖结构特点与理化性质,比较5种对β-(1,3) -D-葡聚糖提取方法,并介绍β-(1,3)-D-葡聚糖生物活性及其应用。     

酵母葡聚糖的制备及其理化性质研究

采用酶-碱法从酵母自溶残渣中提取β-1,3-D-葡聚糖,研究了提取工艺,并通过正交试验得出理想的酶处理工艺条件为:酶添加量为1600 IU/g,酶解3 h,pH8,温度60℃。碱处理工艺条件为:用60 mL 2%NaOH溶液在75℃处理酶解后的沉淀物6 h。冷冻干燥后得到成品葡聚糖,成品得率21.38%,其中多糖含量为92.17%,蛋白质含量为1.32%,水分含量为5.53%,该工艺具有得率高、蛋白质含量低的特点。应用红外光谱对糖分进行分析,成品为高纯度的酵母葡聚糖。     

响应曲面法优化酵母β-葡聚糖酶解工艺及产物分析

采用β-葡聚糖酶对酵母β-葡聚糖进行酶解,利用单因素和响应面实验,以水溶性酵母β-葡聚糖得率为指标优化酶解工艺,并对水溶性酵母β-葡聚糖与原酵母β-葡聚糖的结构和热稳定性进行了研究。最佳酶解条件:底物质量浓度1.14 g/100 mL,酶活浓度0.16 U/mL,温度44℃,pH 4.2,水溶性酵母β-葡聚糖得率为39.89%。红外光谱分析结果表明,水溶性酵母β-葡聚糖与原酵母β-葡聚糖的糖苷键型均为β构型,分子构象相同。热稳定性分析表明,水溶性酵母β-葡聚糖和原酵母β-葡聚糖的特征分解温度分别为356℃和360℃,终止分解温度分别为740℃和780℃,热稳定性差异不大。     

酸酶水解-HPLC法检测香菇多糖中β-D-葡聚糖含量

为了更有效地监控食品和医药行业中香菇多糖制品的质量,建立了一种香菇多糖中主要活性成分β-D-葡聚糖含量测定的新方法:香菇多糖样品经酸部分水解后用β-1,3-葡聚糖外切酶和β-葡糖苷酶进一步完全水解以测定总葡聚糖含量;另用淀粉葡萄糖苷酶水解样品中α-葡聚糖;根据HPLC测定的总葡聚糖与α-葡聚糖含量之差计得β-D-葡聚糖含量。分别用该方法和苯酚硫酸法及刚果红法测定已知含量的β-D-葡聚糖对照样品的结果表明:该方法最接近于对照品标示值,且重复性好,可用作为香菇多糖产品中β-D-葡聚糖含量测定的专属方法。     

水溶性β-1,3-葡聚糖制备及应用研究的进展

水溶性β-1,3-葡聚糖具有独特、优越的生理及药理活性。现将以水不溶性酵母β-1,3-葡聚糖和可得然胶为原料,通过降解法和化学修饰法制备水溶性β-1,3-葡聚糖的研究及其应用进展怍一综述。     

酶-碱法提取酵母β-1,3-葡聚糖的研究

采用酶-碱法从酵母自溶残渣中提取β-1,3-D-葡聚糖,通过正交试验得出最佳碱处理工艺条件为酶解后的沉淀物用60mL2%氢氧化钠溶液75℃处理6h,经冷冻干燥后,成品葡聚糖的得率为21.38%,其中多糖含量为92.17%,蛋白质含量为1.32%,水分含量为5.53%,酶-碱法处理工艺具有葡聚糖得率高、蛋白质含量低的特点。     

酶处理纯化啤酒酵母β-1，3-葡聚糖的研究

采用酶处理对酵母残渣中β-1,3-葡聚糖进行纯化,研究了酶处理纯化的最佳工艺.结果表明:酵母残渣中添加208U/g底物的木瓜蛋白酶,在50℃、pH6.0条件下酶解8h,蛋白质去除率可达到62.82%,β-1.3-葡聚糖最终纯度为90.50%,得率为11.00%,经紫外光谱、薄层层析和性质分析为高纯度的β-1,3-葡聚糖,且回收到0.348g/L多肽、氨基酸含量丰富的蛋白水解液.     

酵母残渣中β-(1,3)葡聚糖的提取及性质表征

正交试验结果表明碱法是从提取酵母抽提物后的酵母残渣中提取β-(1,3)葡聚糖的最佳方法;纸上层析试验结果表明该方法提取的β-(1,3)葡聚糖不含甘露聚糖;元素分析认为β-(1,3)葡聚糖的分子通式为(C6H10O5)n.