人参山羊奶粉缓解体力疲劳作用及其标志性成分含量测定

以人参山羊奶粉为研究对象,采用高分辨液质联用技术检测人参山羊奶粉中标志性成分人参皂苷含量,对干、湿法制备的人参山羊奶粉中6种主要的皂苷类活性成分-人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rc和Rd的含量进行比较;同时采用皮下注射氢化可的松(50 mg/kg)的方法造肾虚小鼠模型,对小鼠负重游泳时间、累计爬杆时间、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和血乳酸(lactic acid,LA)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力6个指标进行检测;以确定制备方法并评价相应剂型的缓解体力疲劳的功效。结果表明,干法制备的人参山羊奶粉中标志性成分Rg1、Re、Rb1、Rb2、Rc和Rd的含量较高于湿法制备奶粉,为0.09±0.03、0.24±0.05、0.16±0.04、0.08±0.01、0.10±0.02和0.14±0.06 mg/g。体内研究结果表明干法制备人参山羊奶粉低、中、高剂量均具有一定的缓解体力疲劳的作用,在灌胃给予人参山羊奶粉后,低(1.580 g/kg)、中(3.167 g/kg)、高剂量(6.333 g/kg)三个剂量组小鼠负重游泳及爬杆时间均显著优于模型对照组(P<0.05或P<0.01);给予中、高剂量的人参山羊奶粉可显著降低小鼠血清的丙二醛含量及小鼠游泳10 min后全血乳酸含量(P<0.05),其中高剂量人参山羊奶粉能显著降低小鼠游泳休息20 min后全血乳酸含量(P<0.05);中、高剂量组均能显著降低小鼠的血清尿素氮含量,提高小鼠的超氧化物歧化酶活力(P<0.05或P<0.01)。干法制备的人参山羊奶粉具有增强机体对运动负荷的适应能力,可后续开发成抗疲劳的保健食品。     

西洋参保健食品中7种人参皂苷的高效液相色谱法测定

目的建立同时测定西洋参保健食品中7种主要皂苷成分(人参皂苷Rg1、Rg2、Re、Rb1、Rb2、Rc和Rd)含量的高效液相色谱测定法(HPLC)。方法应用HPLC-梯度洗脱法,采用Kromasil C18(4.6 mm×250mm,5μm)色谱柱,以0.1%磷酸为流动相A,乙腈为流动相B进行梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长203 nm。结果人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rg2、Rc、Rb2和Rd的检测浓度线性范围分别为0.056~0.56,0.203~2.03,0.324~3.24,0.105~1.05,0.048~0.48,0.104~1.04和0.152~1.52 mg/m L,r值均大于0.999;平均加样回收率均大于98.7%,相对标准偏差(RSD)均小于1.9%(n=6)。结论此法能快速、准确地测定西洋参保健食品中7种主要皂苷的含量。     

地道云南知竹酒活性成分含量测定

建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)法同时测定地道云南知竹酒中9种活性成分(甜菜碱、没食子酸、芦丁、人参皂苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rd、黄芪...     

高效液相色谱法测定农田人参中9种人参皂苷单体含量

为评价农田人参质量,建立同时测定农田人参中9种人参皂苷单体含量的方法。采用反相高效液相色谱法(reversed phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC)对农田人参与伐林人参中9种人参皂苷单体含量进行比较分析,色谱条件:色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱[0min(18%A)→24min(22%A)→26min(26%A)→30min(32%A)→50min(33.5%A)→55min(38%A)],流速为1.0mL/min,检测波长203 nm,柱温35℃。结果表明:农田人参含有与伐林人参相同种类的9种人参皂苷Rg 1、Re、Rf、Rg2、Rb1、Rc、Rb2、Rb3、Rd;6年生农田人参9种皂苷含量均高于6年生伐林人参,但除Rg1含量差异显著外(P<0.05),其他8种皂苷含量均不显著(P>0.05);4年生农田人参除Rg1、Rf显著高于4年生伐林人参(P<0.05)外,其他7种皂苷含量与4年生伐林人参差异均不显著(P>0.05)。农田人参中Rgl、Rb1的含量、Rgl和Re含量之和、Rgl和Re含量之和均超过中国药典、欧洲药典与美国药典的要求。     

基于UPLC一测多评法测定西洋参及其保健食品中人参皂苷的含量

目的基于超高效液相色谱法(UPLC)建立西洋参药材及其保健食品中皂苷类成分的一测多评法(QAMS),对人参皂苷的含量进行快速、准确的测定,并比较一测多评法与外标法实测值的差异,进而判断一测多评法的适用性。方法采用UPLC,色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相A为乙腈,流动性B为水,梯度洗脱:流速为0.3 ml/min;柱温30℃;检测波长203 nm;以人参皂苷Rb1为内参物,建立该成分与人参皂苷Re、Rg1、Rb2、Rb3、Rc、Rd的相对校正因子,进而测定样品中各人参皂苷的含量。结果以Rb1为内参物,人参皂苷Rg1、Re、Rc、Rb2、Rb3、Rd的相对校正因子分别为1.084,0.869,0.972,1.044,1.010,1.261。在测定范围内各成分呈良好的线性关系(r≥0.999),平均回收率位于87.6%~99.7%之间,RSD均小于3.0%,并在不同的耐用性条件下方法适用性良好。对21批西洋参药材、饮片及5批西洋参类保健食品同时采用QAMS和外标法测定皂苷成分的含量,结果表明两种方法无显著性差异。结论本文建立的基于UPLC的一测多评法具有较高的选择性,分析时间短,耐用性较强,适用于西洋参药材及其保健食品中7种人参皂苷成分的含量测定。     

超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法测定米炒人参炮制前后皂苷成分及其裂解规律的研究

目的 建立超高效液相色谱-四极杆静电场轨道阱高分辨质谱法（ultra performance liquid chromatography-quadrupole-orbitrap-mass spectrometry, UPLC-Q-Orbitrap-MS）检测分析方法。方法 采用Supelco C18色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,应用电喷雾离子源（ESI electro-spray ionization）,负离子全扫描模式采集一、二级质谱数据,扫描范围为150~2000 m/z。结合质谱数据库及相关文献信息,运用X Calibur2.2软件对米炒人参中皂苷类成分进行鉴定。以6种人参皂苷Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rb3进行模拟炮制,确定皂苷类成分裂解产物,明确皂苷成分的裂解规律。结果 从人参中检测出14个成分,鉴定出13种人参皂苷成分;米炒人参中检测出23个成分,鉴定出20种人参皂苷成分。通过比较人参米炒前后的皂苷类成分,发现米炒人参中存在人参中未检测到的8种稀有人参皂苷20(S)-Rg2、20(S)-Rh1、20(R)-Rh1、F2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、20(S)-Rs3、20(R)-Rs3。模拟炮制结果表明,人参皂苷Re脱去C-20糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rg2;人参皂苷Rg1脱去C-20位糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rh1、20(R)-Rh1;人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc脱去C-20或C-3位糖基,转化为稀有人参皂苷20(S)-Rg3、20(R)-Rg3或F2。结论 人参经米炒后,稀有人参皂苷成分增加,产生的稀有皂苷为原型皂苷发生苷键裂解而获得,模拟炮制可作为其裂解规律研究的有效方法。     

[1]保加利亚乳杆菌发酵转化人参皂苷工艺研究

摘 要: 目的 以人参为原料, 通过保加利亚乳杆菌发酵提高人参皂苷含量。方法 利用单因素试验和响应面法优化发酵工艺, 并对发酵过程中原型人参皂苷生物转化可能途径进行分析。结果 在发酵培养基为MRS液体培养基的前提下, 最适发酵条件为发酵温度40℃, 发酵时间3 d, 接种量3%, 转化稀有人参皂苷含量在150 μg/mL。经对比发现, 原参中检测出Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rd、Rh1 7种皂苷, 经过发酵后的人参中检测出Re、Rg1、Rb1、Rc、Rb2、Rh1、Rd、R-rg3、CK 9种皂苷。同时原参中的常规皂苷含量经发酵后有所下降, 稀有皂苷含量有所增加, 且多酚、黄酮含量增加, 总糖含量减少, 发酵过程中人参皂苷生物转化的可能途径与人参皂苷含量变化趋势一致。结论 保加利亚乳杆菌发酵人参能够有效将原型皂苷转化成稀有人参皂苷, 为人参的深加工奠定基础, 为人参发酵产品的开发和利用提供参考。     

RP-HPLC法测定三七养血胶囊中人参皂苷Rg_1、Re、Rb_1、Rd及三七皂苷R_1的含量

建立测定三七养血胶囊中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及三七皂苷R1的含量测定方法。方法为:色谱柱为InertsilC8-3柱(5μm,4.6×250mm),流动相为乙腈-水,梯度洗脱,检测波长为203nm。结果表明:人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd及三七皂苷R1的进样量分别在1.74～69.61μg(r=0.9997)、0.23～9.59μg(r=0.9998)、1.47～59.17μg(r=0.9998)、0.20～8.05μg(r=0.9997)、0.45～18.35μg(r=0.9999)范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率(n=6)分别为0.57%、0.78%、1.08%、0.43%、1.24%。该方法灵敏准确、重复性好,专属性强,可用于本制剂的质量控制和评价。     

超高效液相色谱法检测6种人参皂苷含量

采用超声提取药食同源植物(人参、西洋参、三七)中原人参三醇皂苷(Rg1、Re、Rf)和原人参二醇皂苷(Rb1、Rc、Rd),建立了超高效液相色谱(UPLC)检测方法。以50%甲醇溶液为提取剂,料液比1∶80(g∶m L),超声时间30 min。采用乙腈和0.05%磷酸水为流动相,梯度洗脱,检测波长为203 nm。该方法在质量浓度5~1 000μg/m L范围内线性良好,6种皂苷的最低检出限在22.5~51.0 mg/kg之间,平均回收率98.1%~105.5%。该方法准确、灵敏度高、重现性好、省时快捷,适合日常、大批量样品的检测。用此方法测定市售人参、西洋参及三七样品,结果表明3类样品中原人参二醇类皂苷含量高于三醇类皂苷,三七样品中Rg1的含量比人参和西洋参高,西洋参中Re含量高于人参和三七样品,而Rf仅在人参样品中检测到。     

高效液相色谱法同时测定人参制剂中20 种人参皂苷方法的建立

为了更加有效评价人参制剂生产质量,建立了一种同时测定人参制剂中20 种人参皂苷的高效液相色谱方法。结果表明,20 种人参皂苷Rg1、Re、Rg2、Rg3、Rg5、Rf、F1、F2、Rc、Rd、Rb1、Rb2、Rb3、Rh2、compound K、20（R）-Rh1、Rk3、Rh4、原人参二醇及原人参三醇均得到良好分离,线性关系良好（R≥0.999 2）。该方法快捷简便、稳定可靠,能够精确全面检测分析人参皂苷含量,对于人参加工品及其制剂的质量控制更为全面准确可行。     

Ultra high pressure extraction (UHPE) of ginsenosides from Korean Panax ginseng powder

To elucidate the potential of ultra high pressure (UHP) processing on ginseng, effect of UHP on extraction yield, crude saponin content, and ginsenoside contents of ginseng powder was investigated. Ginseng slurries (70, 80, and 90% moisture content) were put into a retortable pouch then hermetically sealed. These mixtures were pressurized at room temperature up to 600 MPa for 5–15 min. UHP ginseng showed relatively higher extraction yield (312.2–387.1 mg) and amounts of crude saponins (19.3–32.6 mg/g ginseng) than control ginseng (189.9 and 17.5 mg/g ginseng, respectively). Correlation coefficient between extraction yield and crude saponin content was relatively low (R²=0.2908). In high performance liquid chromatography (HPLC) analysis, amounts of measured total ginsenosides (Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re, and Rg1) increased with UHP processing but pressure level and pressing time did not proportionally influence the ginsenosides content. This work shows a potential of UHP processing on extraction of ginseng powder and provides basic information on UHP extraction of ginseng powder.     

同时测定不同人参加工产品中20 种人参皂苷的UPLC-PDA方法开发和验证

建立一种简单、有效、精密和准确的超高效液相色谱方法评价不同人参加工产品的质量,同时快速测定20 种人参皂苷Rg1、Re、Rf、20(S)-Rg2、20(R)-Rg2、Rb1、Rc、Ra1、Rb2、Rb3、Rd、Rk3、F2、20(S)-Rg3、20(R)-Rg3、Compound K（CK）、Rg5、20(S)-Rh2、20(R)-Rh2和protopanaxadiol（PPD）。采用二极管阵列检测器和ACQUITY UPLC BEH-C18（2.1 mm×50 mm,1.7 μm）色谱柱,以乙腈-水为流动相,流速0.3 mL/min,柱温30 ℃,梯度洗脱。20 种人参皂苷在31 min内可达到良好的分离,考察方法的线性范围、回收率、日内和日间精密度。在本方法条件下,线性关系良好,相关系数R2均大于0.998,日内相对标准偏差不大于4.65%,日间相对标准偏差不大于4.88%,回收率为85.71%～108.50%。方法检出限为0.81～3.10 μg/mL,方法定量限为2.88～10.00 μg/mL。本方法快速、可靠,已成功用于不同人参加工产品包括保鲜参、红参和白参中20 种人参皂苷的分析检测,有效揭示不同人参加工产品中人参皂苷含量水平的显著变化,可用于鲜人参及其加工产品中活性化合物的分析和质量控制。     

高效液相色谱法分析中国人参不同部位中多酚类化合物

目的：建立一种同时测定中国人参不同部位中18 种多酚类化合物含量的分析方法,明确多酚类化合物在中国人参不同部位中的分布和含量,为吉林长白山人参资源的深度开发和综合利用提供一定依据。方法：利用高效液相色谱技术,分别对红参根、生晒参根、人参茎、人参叶、人参花和人参须中原儿茶酸、龙胆酸、对羟基苯甲酸、丁香酸、绿原酸、对香豆酸、阿魏酸、间香豆酸、邻香豆酸、肉桂酸、柚皮苷、儿茶素、柚皮素、芒柄花黄素、麦芽酚、橙皮素、甲基香兰素、白藜芦醇18 种多酚化合物和总多酚的含量进行测定分析。结果表明：色谱条件为Symmetry?C18色谱柱（4.6 mm×150 mm,5 μm）,流动相为0.1%磷酸（A）和乙腈（B）,检测波长为230 nm,在此条件下人参样品中18 种多酚化合物可在35 min内得到较好分离,且重复性好（相对标准偏差（relative standard deviation,RSD）≤3.49%）、精密度高（RSD≤3.02%）、稳定性好（RSD≤2.58%）、加标回收结果准确可靠（平均回收率84%～99%,RSD≤5%）。18 种多酚化合物在人参不同部位中的含量差异较大（P＜0.05）,但均呈现出麦芽酚和儿茶素的含量较高。人参不同部位中总多酚含量差异较大（P＜0.05）,红参根、生晒参根、人参茎、人参叶、人参花、人参须中的总多酚含量分别为（69.47±3.25）、（95.04±5.03）、（175.19±3.26）、（256.91±2.81）、（174.40±6.26）、（99.31±2.90） mg/100 g。其中人参叶中的总多酚含量最高（P＜0.05）,红参根中总多酚含量最低。结论：该方法操作简单、高效、准确、可靠,可用于人参多酚的质量控制。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中氯酸盐和高氯酸盐

目的:建立超高效液相色谱-串联质谱法(Ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定婴幼儿配方乳粉中氯酸盐和高氯酸盐。方法:样品经过提取、离心、固相萃取柱净化和过滤,净化后滤液经负离子模式测定,并用内标法进行定量。结果:氯酸盐和高氯酸盐分别在2～500 μg/kg和1～250 μg/kg线性关系良好(R²>0.999),检出限均为4.5 μg/kg,定量限分别为15 μg/kg和7.5 μg/kg。对于方法正确度(n=9),在15.0、30.0 μg/kg和150 μg/kg 3个加标水平下,氯酸盐回收率为90.4%～104.3%;在7.5、15 μg/kg和75 μg/kg 3个加标水平下,高氯酸盐回收率为80.2%～106.2%。对于方法精密度(n=7),氯酸盐RSD为4.74%,高氯酸盐RSD为8.31%。结论:该方法线性、精密度和正确度数据均满足GB/T 27417—2017《化学分析方法确认和验证指南》的要求,适用于婴幼儿配方乳粉中氯酸...     

气相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中的OPO含量

建立气相色谱法测定婴幼儿配方乳粉中OPO的含量。乳粉中的油脂经乙醚与石油醚萃取后,通过旋转蒸发浓缩,以十七烷酸甘油三酯为内标物。利用带有FID检测器的气相色谱仪对其中的OPO含量进行测定分析,并对色谱条件优化。优化后OPO的线性范围为0.1~0.5 g/100 g,相关性R^2为0.9998。检出限为0.04 g/100 g,定量限为0.14g/100 g。当加标浓度为2.4~4.4 g时,加标回收率为92.97%±5%,相对标准偏差RSD为2.57%(N=6)。该方法可靠、简便,可准确测定婴幼儿配方乳粉中OPO含量。     

雨生红球藻虾青素纳米颗粒的制备及稳定性研究

为改善雨生红球藻虾青素的稳定性和水溶性,本文使用蜗牛酶进行雨生红球藻虾青素的破壁提取,并以阿拉伯胶和乳清蛋白粉（富含乳脂肪球膜）为壁材,利用复合凝聚法制备虾青素纳米颗粒,此外对纳米颗粒的稳定性进行研究。结果表明:虾青素纳米颗粒的最佳制备条件为:pH4.0,乳清蛋白与阿拉伯胶质量比为2:1,虾青素浓度为60 μmol/L,此工艺条件下虾青素的包封率为92.93%±0.19%。该纳米颗粒平均粒径为265.71±0.55 nm,Zeta电位为?13.44±0.14 mV,并具备良好的贮藏稳定性,在4 ℃条件下贮藏15 d,粒径增幅仅为6.1%,虾青素保留率为90.78%±0.25%,DPPH清除率为79.31%±0.18%。本研究改善了雨生红球藻虾青素的稳定性和水溶性,为虾青素的高效利用提供了技术支持。     

Chemical conversion of ginsenosides in puffed red ginseng

The effects of puffing process on chemical conversion of ginsenosides, extraction yields and crude saponin contents in red ginseng were investigated. To reach a maximum extraction yield, puffed red ginseng took only 8 h, while non-puffed red ginseng required at least 20 h showing extraction yields of 45.7 g solid extract/100 g sample and 44.5 g solid extract/100 g sample, respectively. Extraction yield increased slightly with increasing puffing pressure. Puffed red ginseng showed higher crude saponin contents (201.0-219.0 mg/g extract) than non-puffed one (161.7-189.0 mg/g extract). As the puffing pressure increased, minor ginsenosides (Rg3, F2, Rk1 and Rg5) increased but the contents of major ginsenosides (Rb1, Rb2, Rc, Rd, Re and Rg1) decreased. These results indicated that a puffing process may provide an effective method to reduce the extraction time, improve the extraction yield and increase the crude saponin content of red ginseng.     

Determination of melamine in milk and dairy products by high performance liquid chromatography

A simple, precise, accurate, and validated reverse-phase HPLC method was developed for the determination of melamine in milk (pasteurized and UHT milk) and dairy products (powdered infant formula, fruit yogurt, soft cheese, and milk powder). Following extraction with acetonitrile:water (50:50, vol/vol), samples were purified by filter (0.45 μm), separated on a Nucleosil C8 column (4.6 mm × 250 mm, 3 μm) with acetonitrile:10 mmol/L sodium L-octane sulfonate (pH 3.1; 15:85, vol/vol) as mobile phase at a flow rate of 1 mL/min, and determined by a photodiode array detector. A linear calibration curve was obtained in the concentration range from 0.05 to 5 mg/kg. Milk and dairy products were fortified with melamine at 4 levels producing average recovery yields of 95 to 109%. The limits of detection and quantification of melamine were 35 to 110 and 105 to 340 μg/kg, respectively. The method was then used to analyze 300 samples of milk and dairy products purchased from major retailers in Turkey. Melamine was not found in infant formulas and pasteurized UHT milk, whereas 2% of cheese, 8% of milk powder, and 44% of yogurt samples contained melamine at the 121, 694±146, and 294±98 μg/kg levels, respectively. These findings were below the limits set by the Codex Alimentarius Commission and European Union legislation. This is the first study to confirm the existence of melamine in milk and dairy products in Turkey. Consumption of foods containing these low levels of melamine does not constitute a health risk for consumers.     

气相色谱-氢火焰离子化检测器测定婴幼儿乳粉中37种脂肪酸含量

目的：建立气相色谱-氢火焰离子化检测器测定乳粉中37种脂肪酸含量的分析方法。方法：婴幼儿乳粉样品运用乙酰氯-甲醇法（10%乙酰氯甲醇溶液于80℃±1℃水浴2 h）甲酯化,离心取上清液过0.22μm的有机滤膜后经SP-2560(100 m×250μm×0.2μm)分离,气相色谱法检测,外标法定量。结果：37种脂肪酸甲酯在0.002～0.2 mg/mL浓度范围内线性良好,相关系数均大于0.999,回收率低梯度在85.5%～100.0%之间,中梯度在91.2%～104.2%之间,高梯度在86.8%～103.8%之间,精密度在0.88%～3.81%之间,实际样品测定结果符合相关标准要求。结论：该方法是在国标基础上建立了一种更为快速、分离度更好的脂肪酸检测技术,有很好的实用价值,方法稳定性好,成本低,重现性好,准确度高,适用于婴幼儿乳粉中37种脂肪酸含量的测定。