肿瘤抗原MUC1抑制骨髓来源抑制细胞产生的机制

目的探讨肿瘤抗原MUC1抑制骨髓来源抑制细胞(myeloid-derived suppressor cell,MDSC)产生的机制。方法分离C57BL/6小鼠股骨骨髓细胞,分别与稳定表达含22个串联重复序列的全长人MUC1 cDNA片段的B16细胞(B16-MUC1)和空质粒对照B16细胞(B16-neo)培养上清共培养,流式细胞术分析MUC1对MDSC产生及MDSC表达MUC1蛋白的影响;瑞氏姬姆萨染色观察MUC1对骨髓细胞生长形态的影响;流式细胞术检测共培养的骨髓细胞中单核细胞和巨噬细胞标志物CD14和F4/80的表达及成熟单核-巨噬细胞标志物CD11b和CD68的表达。结果正常C57BL/6小鼠骨髓细胞分别与B16-neo和B16-MUC1细胞培养上清共培养24和48 h后,BM+B16-MUC1组骨髓细胞中CD11b+Gr-1+MDSC数量较BM+B16-neo组均明显减少(P<0.05),共培养48 h后,BM+B16-MUC1组的CD11b+Gr-1+MDSC中MUC1蛋白的表达较BM+B16-neo组明显增多(P<0.01);BM+B16-MUC1组骨髓细胞中单核-巨噬细胞数量增多;与BM+B16-neo组相比,BM+B16-MUC1组CD14+、F4/80+和CD68+细胞表达数量明显增高(分别为P<0.01、P<0.01、P<0.05),CD11b+平均荧光强度明显增高(P<0.01)。结论 MUC1通过诱导骨髓细胞向单核-巨噬细胞分化,从而抑制MDSC的产生。     

穴位注射治疗中风失语的临床观察

目的 观察穴位注射治疗中风失语的临床疗效.方法 将48例中风失语患者随机分为治疗组24例和对照组24例进行比较,治疗组采用穴位注射治疗,对照组选用中药地黄饮子加战治疗.结果 治疗组有效率为95.83%,对照组有效率为58.33%,两组差异有显著性.结论 穴位注射治疗中风失语的疗效显著.     

典型有机溶剂对乙酰胆碱酯酶活性抑制的影响

[方法]主要研究了丙酮、无水乙醇、二甲基亚砜3种有机溶剂及其与缓冲溶液不同比例混配对乙酰胆碱酯酶活性抑制的影响.[结果]3种有机溶剂对乙酰胆碱酯酶的抑制率为二甲基亚砜＞丙酮＞无水乙醇;并借助专业软件ChemOffice对实验结果进行了机理分析.[结论]可为农药残留检测提供理论支撑.     

无机盐对生物硝化功能的影响

为确定不同的无机盐对硝化菌群的抑制作用,采用批量实验研究了氯化钠、硫酸钠和氯化钙3种无机盐在不同浓度下的生物硝化过程。研究结果表明:3种无机盐质量浓度均为10 g/L时,硫酸钠对硝化菌群的抑制作用最小,氯化钠对硝化菌群的抑制作用最大。3种无机盐质量浓度均为20 g/L时,硫酸钠对硝化菌群的抑制作用最小,氯化钙对硝化菌群的抑制作用最大。无机盐对硝化菌群的抑制作用除了与渗透压有关以外,还与处理系统p H有关。     

骨髓基质干细胞对大鼠肝纤维化细胞凋亡的影响

目的探讨骨髓基质干细胞(BMSCs)对大鼠肝纤维化细胞(CFSCs)凋亡的影响。方法常规培养BMSCs、CFSCs和大鼠肝细胞系BRL,并双层共培养CFSCs与BMSCs。用ELISA方法检测BMSCs培养上清中NGF、HGF和TGF-β1的浓度;RT-PCR检测与BMSCs共培养的CFSCs及BRL的p75表达;TUNEL法检测BMSCs分泌的细胞因子封闭后对CFSCs凋亡的影响。结果BMSCs可分泌NGF、HGF、TGF-β1等细胞因子,且随着培养时间的延长,其分泌量逐渐增多;BRL不表达p75,CFSCs表达p75,且与BMSCs共培养后,其表达量增高;分别用p75的阻断剂TAT-Pep5、HGF的中和抗体和JNK的阻滞剂sp600125作用后,BMSCs诱导CFSCs凋亡的比例均明显降低;封闭TGF-β1后,BMSCs诱导CFSCs凋亡的比例增高。结论BMSCs能够通过分泌NGF和HGF促进CFSCs的凋亡,这种凋亡诱导作用依赖于JNK的活性,并且在封闭TGF-β1后增强。     

小鼠骨髓间充质干细胞对异基因肝移植大鼠淋巴细胞增殖的抑制作用

目的观察小鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)移植后,在异基因肝移植模型大鼠胸腺、脾脏及骨髓中的迁徙、定居情况及对淋巴细胞增殖的抑制作用,以探讨MSCs诱导异基因移植免疫耐受的可能性。方法体外分离、纯化并培养小鼠MSCs;将小鼠肝组织块埋入大鼠肝脏切口,建立异基因肝移植大鼠模型;经尾静脉移植DAPI标记的小鼠MSCs,通过激光共聚焦显微镜观察24 h及5 d时,MSCs在模型大鼠胸腺、脾脏及骨髓内的迁徙及定居;采用体外淋巴细胞增殖实验检测小鼠MSCs对异基因肝移植大鼠淋巴细胞增殖的抑制作用。结果MSCs移植后,24 h即散在分布于胸腺、脾脏及骨髓内,5 d时集中在血管周围;经MSCs治疗后,大鼠胸腺和脾脏淋巴细胞增殖均受到抑制,与未经治疗的模型大鼠相比,差异有显著意义。结论小鼠MSCs可迁徙至异基因肝移植大鼠免疫器官内,并具有抑制淋巴细胞增殖的作用。     

人参皂苷对骨髓间充质干细胞分泌干细胞因子的影响

目的探讨人参皂苷对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)分泌干细胞因子的影响。方法通过密度梯度离心法从健康志愿者抗凝骨髓中分离、培养BMSC,传代3代后,采用流式细胞术鉴定其细胞表型;MTT法检测不同浓度人参皂苷(50、100、150、200、300、400 mg/ml)作用不同时间(24、48、72、96 h)对BMSC增殖活性的影响;ELISA检测200 mg/ml人参皂甙作用不同时间(24、48、72 h)对BMSC分泌干细胞因子SCF-1和干细胞衍生因子SDF-1α水平的影响;RT-PCR法检测200 mg/ml人参皂甙作用24 h对BMSCSCF-1和SDF-1αmRNA转录水平的影响。结果第3代BMSC的CD44、CD29和CD105表达阳性,而CD34、CD45和HLA-DR表达阴性,BMSC的纯度为90%;BMSC与不同浓度的人参皂苷共培养不同时间,细胞的增殖活性均明显增强(P<0.05),200 mg/ml人参皂苷作用96 h细胞的增殖活性最高(P<0.05),但无明显的时间和剂量依赖性;人参皂苷对BMSC SCF-1和SDF-1α的分泌及mRNA的转录具有明显的促进作用。结论人参皂苷能增强BMSC分泌干细胞因子,有望应用于辅助干细胞治疗。     

碱含量对粉煤灰抑制ASR效果的影响

采用粉煤友部分等量替代水泥,用砂浆棒快速法和混凝土棱柱体法分别进行了不同掺量的粉煤灰抑制集料ASR的试验研究。结果表明：随着混凝土砂浆中的总碱含量的增加,粉煤灰对集抖ASR膨胀的抑制效果减弱。在同等条件下,用粉煤灰部分取代高碱水泥比取代低碱水泥抑制集料的ASR膨胀更有效。     

基因工程人红细胞生成素对骨髓增生异常综合征患者体内外治疗作用的研究

EPO体外对26例MDS患者CFU－E的作用及体内用于13例患者的治疗结果显示：（1）EPO对MDS患者CFU－E的作用明显低于对照组；（2）EPO可促进患者CFU－E增殖，这种增殖为剂量依赖型，EPO100u／ml时最强；（3）EPO对CFU－E作用与患者自身CFU－E明显相关。自身CFU－E越接近正常者对EPO反应越好；（4）EPO治疗13例MDS有效3例（23％）。以上结果证明，EPO对于部分MDS患者有效，可作为选择治疗MDS药物。     

有机物对厌氧氨氧化的双向影响及抑制解除

以改进型UASB为反应器,采用连续试验方法,研究了不同浓度有机物对厌氧氨氧化反应的影响,并制定了通过调节亚硝态氮浓度解除厌氧氨氧化有机物抑制的方法。结果表明,当COD≤120 mg/L时,有机物对厌氧氨氧化反应产生促进作用,反之则产生抑制作用;NO2-能有效解除由于有机物引起的竞争性抑制,使厌氧氨氧化菌不受反硝化菌竞争性抑制影响的COD、NH4+-N、NO2--N投加质量比为1.6∶1∶1.92。     

细胞传代对骨髓间充质干细胞成软骨细胞分化的影响

目的 观察在成软骨诱导培养条件下,细胞传代对骨髓间充质干细胞(MSCs)体外成软骨能力的影响.方法 不同代MSCs成软骨诱导后,观察细胞生物学特性以及通过免疫荧光,RT-PCR测定特异性软骨细胞外基质aggrecan的表达情况.结果 经成软骨诱导后,第2、4代MSCs表达aggrecan明显较第6、8代细胞高.结论 MSCs很可能由多种形态功能接近,分化潜能有略有差异的细胞组成;在成软骨诱导培养条件下,对此传代后成软骨能力减弱.     

COD对反硝化抑制硫酸盐还原的影响

通过间歇试验探讨了COD对反硝化抑制硫酸盐还原系统的影响。结果表明,COD是反硝化抑制硫酸盐还原系统的一个重要因素,直接影响着系统中NO3-和SO42-的代谢以及S2-和NO2-的产生状况;当COD为120mg/L时,系统内碳源不足,存在着SRB和DNB对碳源的竞争,竞争中后者占优势,硫酸盐还原程度很小;当碳源充足时,由于受反硝化抑制,S2-呈现出先增加后减少再增加的变化趋势,分为碳源充足、反硝化控制和硫酸盐重新还原三个阶段,各阶段的作用时间随COD含量的不同而变化;系统中出现了不同程度的NO2-积累,其峰值和出现位置随COD不同而不同;NO2-是对SRB产生抑制的主要原因,当系统中NO2--N浓度大于2mg/L时,S2-产生呈下降趋势,SRB活性开始受到抑制。     

骨髓间充质干细胞对胰腺损伤模型大鼠血清生化指标的影响

目的观察大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对胰腺损伤模型大鼠血清生化指标的影响。方法胰腺结扎建立大鼠胰腺损伤模型;体外分离纯化及培养大鼠的MSCs,流式细胞术检测细胞周期及细胞表面标志,经尾静脉回输治疗胰腺损伤,逐日观察,并于回输后24h、48h、7d和15d,分别采血,分离血清,检测血淀粉酶与脂肪酶含量。结果分离纯化的MSCs细胞周期中,86.67%处于G0/G1期,表达MSCs表面标志CD44,不表达造血干细胞表面标志CD34。治疗组在回输MSCs15d后,肉眼可见坏死的胰腺组织外观基本恢复正常,24h、48h和7d,血清淀粉酶含量均低于模型组,且差异有统计学意义,在15d时接近于模型组,差异无统计学意义;在24h、48h、7d和15d时,治疗组血清中脂肪酶含量均低于模型组,且差异有统计学意义;24h、48h、7d和15d,治疗组血清中血淀粉酶和脂肪酶含量仍高于正常对照组,且差异有统计学意义。结论骨髓间充质干细胞对胰腺组织损伤的模型大鼠具有治疗作用。     

游离亚硝酸对垃圾渗滤液NO2-还原过程的抑制影响

采用UASB-SBR组合工艺处理实际垃圾渗滤液,在获得稳定短程生物脱氮的前提下,以SBR系统内短程污泥为研究对象,通过设定不同的NO2-质量浓度和pH梯度考察NO2-质量浓度和pH与NO2-还原速率的相关性,并在此基础上进一步研究游离亚硝酸(FNA)质量浓度对反硝化菌的抑制影响.试验结果表明,当NO2-质量浓度和温度一定时,相同pH条件下,不控制pH时NO2-还原速率较恒定pH时NO2-还原速率高;且恒定pH在6.5～8.0范围内,NO2-还原速率随着pH的升高逐渐升高.当pH和温度一定时,NO2-还原速率随着NO2-质量浓度的增加呈现先升高后降低或不变的趋势.由此可知,pH和NO2-质量浓度对NO2-还原速率有较为重要的影响.FNA是NO2-质量浓度、pH和温度三者的函数,试验发现FNA质量浓度在0.005～0.01 mg ·L-1范围时对NO2-还原过程有明显的抑制作用.     

体外诱导微环境对骨髓间充质干细胞成神经分化的影响及分化后的自发逆转现象

目的体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)成神经分化,并探讨诱导微环境对其分化的影响及分化后的自发逆转现象。方法体外分离培养大鼠MSCs,流式细胞仪检测细胞表面标志。采用改良神经元诱导液[Modified neuronal induction media(MNM)]定向诱导MSCs,免疫荧光检测神经细胞表面标志。观察胎牛血清(FBS)浓度、细胞密度、MNM剂量、新鲜与使用过的MNM等不同诱导微环境对MSCs成神经分化的影响。结果 MSCs经MNM诱导后,6h即可见尼氏体,表达神经元特异性表面标志神经元特异性烯醇化酶(NSE)、巢蛋白(Nestin)和微管相关蛋白-2(MAP-2)。随着诱导微环境的改变,MSCs成神经分化率及神经元表面标志表达亦发生改变,且分化后的神经元样细胞可自发逆转。结论 MSCs能够在MNM微环境中定向成神经分化,但诱导微环境的改变可以从量和质两个层面影响MSCs定向分化。     

G-CSF和GM-CSF体外对骨髓增生异常综合征患者CFU-GM和CFU-E的作用

用造血祖细胞体外培养方法观察G－CSF和GM－CSF对36例MDS患者造血相细胞的作用，结果发现：①MDS患者CFU－E、CFU－GM明显低于非血液病对照患者；②RA型患者CFU－GM数量明显低于RAEB、RAEB－T型；③G－CSF和GM－CSF体外可明显刺激非血液病对照患者和MDS患者CFU－GM数量增加，在一定范围内作用与剂量呈正相关；④患者自身的CFU－GM增殖能力愈差，对小剂量G－CSF或GM－CSF的反应愈差，但大剂量时这种差异不明显。以上结果提示G－CSF和GM－CSF可成为治疗MDS伴粒细胞减少的有效药物。     

强化胰岛素对脓毒症患者治疗的临床观察

目的探讨脓毒症患者应用强化胰岛素治疗的效果。方法收集140例脓毒症患者,分为观察组与对照组,观察组(80例)应用常规治疗及强化胰岛素治疗,对照组(60例)应用常规治疗。结果观察组患者呼吸机支持时间及住院时间明显短于对照组,观察组患者死亡率明显低于对照组。结论脓毒症患者及早应用强化胰岛素治疗,疗效明显,适合临床应用。     

早期康复护理对脑卒中患者功能恢复的影响

目的探讨早期康复护理对脑卒中患者功能恢复的影响。方法将108例脑卒中患者随机分成早期康复组和对照组,早期康复组早期在常规治疗和护理的基础上,进行有针对性的康复护理。结果早期康复组入院4周和出院4月时,Barthel指数和Fegl-Meyer运动功能积分均显著优于对照组(P<0.05)。结论早期康复护理能促进脑卒中患者的运动功能和日常生活能力的恢复,提高老年患者的生活质量。     

人核糖核苷酸酶抑制因子表达下调对膀胱癌T24细胞在体内外发生上皮间质转化的影响

目的探讨人核糖核苷酸酶抑制因子(human ribonuclease inhibitor,hRI)表达下调对膀胱癌T24细胞在体内外发生上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。方法干涉质粒pGensil-1-RI稳定转染T24细胞,经G418筛选阳性克隆,并设实验组、空质粒对照组及未转染对照组,RT-PCR检测各组细胞中RI基因mRNA的转录水平、细胞免疫荧光和Western blot检测RI蛋白的表达水平;HE染色检测细胞形态的变化;Western blot检测各组细胞中E-cadherin、Twist、Slug和Vimentin等相关蛋白表达水平;将3组细胞注入BALB/c裸鼠皮下,35 d后取瘤并称重;免疫组织化学检测瘤组织中RI、E-cadherin和Vimentin蛋白的表达水平。结果荧光显微镜下观察可见,干涉质粒pGensil-1-RI转染成功;实验组RI基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平较两对照组分别降低了63.31%和64.11%、49.6%和49.5%(P<0.001);实验组细胞呈梭形,核质比增大;与实验相比,两对照组E-cadhein蛋白表达水平分别增加52.76%和46.93%(P<0.001),而Twist、Slug和Vimentin蛋白分别降低了50.49%和54.63%、43.74%和51.55%、60.35%和53.77%(P<0.001);两对照组的瘤重明显低于实验组,分别低84.91%和80.89%(P<0.01),其RI和E-cadherin蛋白表达水平降低,而Vimentin蛋白表达水平则增加。结论沉默RI基因能明显增加T24细胞的转移、侵袭及EMT的能力。