脱乙酰壳聚糖固定碱性蛋白酶的研究

以脱乙酰壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂制备固定化碱性蛋白酶。研究了戊二醛的浓度、给酶量、固定化温度、时间、pH对固定碱性蛋白酶的影响。结果表明：碱性蛋白酶最佳固定化条件是戊二醛浓度为0．2％：给酶量11000U／g；pH为10；在温度为50℃交联时间12h。     

粉煤灰固定化碱性蛋白酶特性的研究

以经甲烷磺酸活化和γ-氨丙基三乙氧基硅烷偶连的粉煤灰为载体,戊二醛为交联剂,采用载体交联法制备固定化碱性蛋白酶,同时对固定化条件进行了研究。实验结果表明,碱性蛋白酶的最佳固定化条件为:给酶量4mL,戊二醛浓度0.2%,固定化温度25℃、交联3h。在此条件下得到的固定化碱性蛋白酶活回收率可达63.8%。该固定化碱性蛋白酶的稳定性较理想,连续使用6次后,其剩余酶活仍保持在29.4%。     

固定化酸性蛋白酶载体的选择及其性质

选用海藻酸钠（sodium alginate,SA）分别与3 种天然高分子材料制作复合凝胶载体,以酶活回收率为评价指标,采用单因素试验和正交试验确定最佳载体材料及最佳固定化条件。结果表明,SA-黄原胶复合凝胶为最佳载体,其最佳工艺条件为：SA与黄原胶质量比例为6∶1,CaCl2质量浓度为5.0 g/100 mL,固定化时间为2.5 h,在此条件下固定化酶活回收率为74.12%。对固定化酸性蛋白酶酶学性质进行研究,结果表明,其最适pH值为3.0、最适反应温度为45 ℃,均与游离酶相同,热稳定性优于游离酶,动力学参数Km值高于游离酶,操作半衰期为17.28 d。     

壳聚糖微球固定碱性蛋白酶的研究

利用乳化交联法制得壳聚糖微球并用于碱性蛋白酶的固定,借助正交试验设计优化酶固定化条件,结果表明：常温条件下,戊二醛浓度为1％,以给酶量240U／g载体加酶,在pH10缓冲液中,交联20h时,固定化碱性蛋白酶的活力和活力回收率可达到119U／g和49．6％;固定化碱性蛋白酶耐热性较游离碱性蛋白酶较强,4℃的半衰期可达14d。     

固定化蛋白酶在羊毛织物防毡缩整理中的应用

以甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯共聚物(Eudragit L100)作为载体,实现蛋白酶的固定化并用于羊毛的防毡缩整理。研究采用红外光谱证明了聚合物Eudragit L100的羧基与蛋白酶氨基通过酰胺键键合实现蛋白酶的固定化;SDS-PAGE凝胶电泳结果表明蛋白酶的分子质量从4.1~6.5 k Da增大至固定化后45 k Da以上;固定化蛋白酶的比活性为13.69 U/mg。同时,分析了固定化蛋白酶整理前后羊毛织物的差热扫描量热(DSC)曲线,电子扫描电镜(SEM)照片和织物的抗毡缩性能和力学性能等结果。结果表明,固定化蛋白酶整理羊毛织物减少了羊毛纤维的α-结晶度;固定化蛋白酶对纤维的水解作用控制在纤维表面,减少了对纤维的损伤;织物的面积毡缩率从原毛织物的21.52%降至0.89%;失重率较蛋白酶整理羊毛织物降低21.90%;拉伸断裂强力较蛋白酶整理羊毛织提高13.10%,证明固定化蛋白酶整理羊毛织物不仅赋予织物良好的防毡缩性能,而且保持了良好的服用性能。     

磁性复合载体固定生姜蛋白酶的酶学性质研究

文章采用海藻酸钠与明胶为载体,对磁性Fe 3 O 4进行包埋,使其形成磁性复合载体凝胶微球,经戊二醛交联后,固定生姜蛋白酶,得到磁性复合载体固定生姜蛋白酶;在预实验的基础上,确定影响制备固定化生姜蛋白酶的主要因素;并研究在最优条件下,固定化生姜蛋白酶与其游离酶的酶学性质。结果表明:磁性复合载体固定化生姜蛋白酶的酸碱稳定性范围为pH 3.0~7.0,在20~60℃内具有较好的抗热性,其最适pH为4.0,温度为50℃,表观米氏常数Kmapp为3.162 mg/mL;在此条件下固定60 min,制备的固定化生姜蛋白酶剩余酶活力可达78.69%。重复使用10次后,酶活力剩余53%;在4℃下储存10 d,酶活力仍保留50.66%。说明在最优工艺条件下所制备的固定化酶机械强度大,弹性好,操作稳定性强,酶活力回收率高。     

固定化碱性蛋白酶生产CPP的研究

以ＧＭ２０１大孔树脂和壳聚糖为载体,以戊二醛为交联剂,对碱性蛋白酶２７０９的固定化条件,固定化酶的性质以及利用固定化酶制备ＣＰＰ进行研究。考察了交联剂的浓度,载体与酶的比例,温度以及ＰＨ等对碱性蛋白酶固空化的影响。     

壳聚糖微球固定化蛋白酶的制备及其在羊毛织物抗起毛起球整理中的应用

以壳聚糖微球为载体、戊二醛为交联剂,制备纺织用固定化蛋白酶.考察固定化蛋白酶的最佳制备条件及其稳定性,并将其应用于毛织物抗起毛起球整理中.结果表明:戊二醛用量为1.0%,交联时间为5 h,反应温度30℃,每g载体固定20 mL酶(稀释后),制备的固定化蛋白酶的固载率为84.4%,酶活回收率可达57.2%.与游离蛋白酶相比,固定化蛋白酶的耐酸碱稳定性、耐热稳定性与储存稳定性均有所提高,且可循环使用.将制备的固定化蛋白酶用于羊毛织物的抗起毛起球整理中,其抗起毛起球等级提高1.5级.     

接枝淀粉作为固定化酶载体研究进展

该文综述接枝淀粉用作固定化酶载体应用情况,通过接枝不同类型单体,淀粉将具有不同理化性质。以接枝淀粉为固定化酶载体主要方法有:共价结合法、物理吸附法或包埋法;以接枝淀粉为载体固定化酶主要有:糖化酶、葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶、α-淀粉酶、α-胰凝乳蛋白酶和脲酶等。     

酶固定化载体材料的研究进展

酶固定化的载体材料必须与酶的非催化活性基团发生有效结合方能使固定化酶发挥其催化酶解作用,载体材料的确定是酶的固定化技术关键。随着化学工业的不断进步,研发出众多具有特殊结构且功能各异的新材料,推动了载体固定化酶技术的发展。结合目前固定化酶技术的研究现状和应用情况,本文介绍了酶的固定化载体常用的高分子材料、磁性材料、纳米材料和介孔材料的研究现状,比较了上述材料与酶的结合机制。简述了固定化酶的制备方法和应用形式,并对固定化酶载体材料的研究进展进行了总结,以期对酶的固定化材料研究提供参考。     

壳聚糖-铜(Ⅱ)配合物固定化青霉素G酰化酶

目的壳聚糖与CuSO4络合为壳聚糖铜后以高分子配位键法固定化青霉素G酰化酶,考察固定化酶的性质。方法单因素优化固定化条件,对Cu^2＋浓度、络合时间、pH、温度、加酶量进行L16（4^5）的正交试验,获得最佳固定化条件,并研究固定化酶的最适反应温度、pH及批次稳定性。结果最佳固定化条件为：壳聚糖直接与Cu^2＋络合制备壳聚糖铜载体,Cu^2＋浓度／0．1g·mL^-1,络合时间16h;载体0．3g,酶量1mL,pH4．9,温度30℃,固定化25h。最高固定化酶活性为65U／g湿载体,固定化酶最适反应温度60℃,最适pH9．0,固定化酶具有较好的保存稳定性。结论壳聚糖-铜（Ⅱ）配合物固定化青霉素G酰化酶的活性高,具有一定的应用潜力。     

固定化中性蛋白酶水解啤酒废酵母的研究

以离子交换树脂为载体,以成二醛为交联剂,固定化中性蛋白酶,再利用固定化的酶来水解啤酒废酵母。本文研究了不同水解时间和温度、不同的酶量对啤酒酵母水解的影响。通过研究发现,树脂styene—DVB D392对中性蛋白酶的固定化效果及固定化之后对酵母的水解效果比较好。     

海藻酸钠-阿拉伯胶固定化酸性蛋白酶及其性质的研究

以海藻酸钠（SA）与阿拉伯胶（GA）为载体固定化酸性蛋白酶,以酶活回收率为评价指标,在单因素试验基础上,通过正交试验优化固定化条件。得到以SA-AG复合凝胶为载体制备固定化酸性蛋白酶的最佳工艺条件为：复合凝胶质量浓度3.5 g/100 mL,SA与AG质量比2∶1,氯化钙质量浓度7.0 g/100 mL,固定化时间1.0 h,给酶量1 540 U/g,吸附时间2.0 h,酶液pH值为3.0。此最佳条件下,固定化酸性蛋白酶酶活回收率为67.34%,酶活力为1 380 U/g。固定化酶酶学性质的研究结果表明,固定化酸性蛋白酶的最适作用温度（45 ℃）和最适反应pH值（pH=3）均与游离酶相同,但其热稳定性优于游离酶,且随着温度的升高这种优势越明显。     

铬鞣革屑固定化1398中性蛋白酶的制备和应用

以铬鞣革屑为载体、戊二醛为交联剂,探讨了影响1398中性蛋白酶固定的因素。确定了制备固定化1398中性蛋白酶的最佳条件:温度35℃,pH值7.0,戊二醛与载体反应的时间4 h,酶与载体反应的时间8 h,戊二醛用量0.11%,酶用量3.1%。用铬鞣革屑固定化1398蛋白酶催化水解明胶,采用串连柱型反应器,可方便的控制水解明胶相对分子质量的大小。     

酶固定化研究进展

由于酶催化的特异性、高效性和温和性,酶的工业化利用一直是酶工程领域的研究热点。酶固定化是酶工程发展的必然趋势。固定化酶已在众多工业生产中发挥越来越重要的作用,围绕酶固定的载体材料开发与固定技术研究进展很快。传统酶固定化主要包括吸附、包埋、结合或化学交联等技术,然而固定化酶的稳定性、牢固性及催化效率等与工业实际应用仍具有很大差距。近年来,随着纳米技术、高分子材料化学、表面化学、蛋白质结构分析及分子生物学等学科的快速发展,新型载体材料和固定化技术不断涌现。以纳米载体材料、纳米磁性材料、金属有机骨架复合材料为代表的新型固定载体以及以定向化学修饰研究为代表的固定化技术取得了显著进展。本文重点对酶固定的纳米载体、金属有机骨架材料以及定向修饰固定技术进行了简要综述,同时对研究前景作了简要展望。     

壳聚糖固定瑞士乳杆菌蛋白酶的条件研究

以壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂,采用交联-吸附法对瑞士乳杆菌蛋白酶的固定化条件进行研究。在单因素试验基础上,以固定化酶活力为主要指标,研究凝结液、壳聚糖质量浓度、酶用量、交联时间、戊二醛质量浓度对瑞士乳杆菌蛋白酶固定化的影响。运用响应面对固定化条件进行优化,确定瑞士乳杆菌蛋白酶的最优固定条件：凝结液为4g/100mL NaOH-甲醇(体积比3:1)、壳聚糖质量浓度2.89g/100mL、酶用量2.95mg、交联时间1h、戊二醛质量浓度0.40g/100mL,此时固定化酶活力为28.67U。     

固定化碱性蛋白酶制备麦胚降血压肽研究

采用中空壳聚糖作为载体,通过双功能试剂戊二醛作偶联剂,将碱性蛋白酶连接到中空壳聚糖,制备固定化碱性蛋白酶。研究固定化碱性蛋白酶的部分性质及水解麦胚蛋白质条件。实验结果显示,1.5% 戊二醛溶液活化的壳聚糖偶联1mg 碱性蛋白酶,酶催化相对活性可达90%;固定化酶最适pH 值为9.5,最适反应温度约65℃,催化水解麦胚蛋白质的水解率达16.5% 约需10min;固定化酶与麦胚蛋白质的比达到1:5 时,一次性获取含降血压肽水解物质的得率为15.6%。     

酶固定化研究进展

主要从吸附法、交联法、共价结合法、包埋法四个方面介绍了固定化酶的研究进展情况，并提及其他固定化方法，指出了今后酶固定化研究的主要方向是开发利用天然高分子载体，研制新型、高效的固定化酶反应器。     

蛋白酶固定化条件优化及在酱醪发酵中的应用

本文以海藻酸钠浓度、氯化钙浓度、酶液与载体溶液体积比及固定时间为因素,优化中性蛋白酶固定化工艺,并将固定化中性蛋白酶凝胶颗粒应用于传统高盐稀态酱醪发酵,以缓解高渗透压环境对酶的胁迫作用,提高蛋白质利用率,缩短酿造周期。结果显示:当采用0.007 M海藻酸钠、0.27 M氯化钙,酶液与载体溶液体积比为12:30,固定2 h,固定化凝胶颗粒最稳定,相对酶活力最高;另外,酱醪发酵数据显示,酱醪总重17.5 kg,添加总酶量5.80 g(1000 U/g酶粉)时,外源游离蛋白酶和固定化蛋白酶试验组均能显著改善发酵过程各指标含量,平均缩短发酵时间20 d左右;与外源游离组相比,固定化试验组效果更加显著,蛋白质转化率较空白对照组与游离组分别提高达6.08%和1.88%。因此,在酱醪发酵过程添加固定化外源蛋白酶能有效提高高盐稀态酱油发酵蛋白质转化率,同时缩短发酵周期。     

固定化Neutrase中性蛋白酶的研究

以壳聚糖为载体、戊二醛为交联剂固定化Neutrase中性蛋白酶。通过单因素实验，分析了壳聚糖浓度、戊二醛浓度、交联时间对微球制备的影响及戊二醛加入量对酶固定的影响。由正交实验确定制备固定化酶的最佳工艺参数为：壳聚糖浓度为3％、戊二醛与葡胺糖残基摩尔比为1：2、制备微球交联时间为1h，微球与酶振荡吸附12h，再加入2．5％戊二醛交联，使戊二醛最终浓度达到0．9％，制备得固定化中性蛋白酶活力为112．69U／g。固定化蛋白酶的热稳定性和对酸碱的稳定性均较游离中性蛋白酶有所提高。