黑曲霉(Aspergillue niger)产菊粉酶发酵条件的研究

以菊粉为唯一碳源,对样土进行产菊粉酶黑曲霉菌株的初筛,得到17株菌株.用跟踪测酶活的方法进行复筛,获得3株高产菊粉酶菌株,最高酶活达到25.41U·mL-1.然后探讨了不同碳源和氮源对黑曲霉产菊粉酶活力的影响,结果表明,最佳碳源为菊粉,氮源为酵母膏.通过正交实验,得到了优化的产菊粉酶黑曲霉液体发酵条件:菊粉用量为2%.pH5.0,50mL三角瓶中装培养基量为50mL,发酵温度为30℃.     

天山一号冰川沉积层低温脂肪酶产生菌的筛选及初步鉴定

从新疆天山一号冰川西支尾部的底部沉积层中分离筛选出高产低温脂肪酶菌株,进行初步鉴定及产酶探讨。使用罗丹明-B、吐温80、维多利亚蓝选择培养基以及三丁酸甘油酯酶活检测板,结合棕榈酸对硝基苯酯(p-NPP)比色法,筛选出产低温脂肪酶酶活较高的菌株,研究其生长特性及常规生理生化实验,并根据16S rRNA基因序列初步确定其所属菌属。共分离筛选到5株产低温脂肪酶酶活较高的菌株,经初步鉴定其中4株为假单胞菌属(Pseudomonas sp.),1株为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。该芽孢杆菌属产脂肪酶的能力略高于其余菌株。分离得到的5株菌均属于耐冷菌,有较好的耐盐性,能在低温条件下发酵产酶,其中4株在36h左右达到产酶高峰,为开发冰川环境下丰富的低温酶资源奠定了基础。     

椰纤果发酵液中降解细菌纤维素酵母菌株的分离及鉴定

从被微生物污染的椰纤果发酵液中分离筛选出13株能够降解细菌纤维素的酵母菌株,并对这些菌株产生的纤维素酶粗酶液进行了酶活测定。选择羧甲基纤维素酶活(CMCA)和滤纸酶活(FPA)较高的酵母菌株3-1进行了鉴定,鉴定酵母菌株3-1为东方伊萨酵母(Issatchenkiaorientalis),菌株培养液CMCA为71.48IU,FPA为81.07IU。     

产木聚糖酶和纤维素酶真菌的酶学性质分析

红树林土壤微生物资源丰富,从深圳福田红树林土壤中分离了80株真菌,经过产酶发酵复筛,获得2株同时具有较高木聚糖酶和纤维素酶活的真菌。通过菌株形态观察和分子鉴定,确定菌株1为草酸青霉(Penicillium oxalicum),菌株2为曲霉属的Aspergillus piperis。菌株1的木聚糖酶和纤维素酶酶活分别为42.16 IU和3.05 IU,菌株2的木聚糖酶和纤维素酶酶活分别为39.01 IU和0.87 IU。同时,对其进行酶学性质研究表明,2菌株木聚糖酶的最适温度均为50℃;菌株1纤维素酶的最适温度是60℃,菌株2纤维素酶的最适温度是70℃,具有一定的耐热性。两菌株纤维素酶的最适pH均为3.0;菌株1木聚糖酶的最适pH为5.0,菌株2木聚糖酶的最适pH为4.0。     

贝壳状革耳菌诱变提高产漆酶能力及其生物漂白的研究

本研究从贝壳状革耳菌（Parus conduaus，是一株具有选择性降解木素的白腐菌）菌株出发，通过原生质体融合和紫外诱变技术处理，获得产漆酶酶活较高的诱变融合菌株，诱变株28-7的漆酶酶活高峰达17290IU／L，比原始菌的酶活高峰2318IU／L提高约7.5倍。诱变菌株分泌的漆酶预处理荻苇浆、麦草浆和芦苇浆，LOP浆和OLQP浆的白度较未经处理的高，卡伯值下降，黏度变化不大。经过漆酶／介体生物处理可提高纸浆的可漂性。对后续漂白有促进作用。实验结果初步证明，原生质体融合和紫外诱变技术可以作为改良白腐菌Parus conduaus的手段。     

β-葡萄糖苷酶产生菌原生质体的诱变研究

以β-葡萄糖苷酶产生菌——无花果曲霉CN67为原始菌株，经溶菌酶、蜗牛酶和纤维素酶的混合酶系酶解获得原生质体，用紫外线照射诱变，获得产β-葡萄糖苷酶活相对较高的菌株UV-29，其酶活稳定在20．48IU／mL，比出发菌株提高了3．49IU／mL。再经传代实验，该菌株具有较好的遗传稳定性。     

酱香型大曲中具产酶功能霉菌的分离筛选

目的:从酱香型大曲中筛选功能菌。方法:从贵州省某酒厂的酱香大曲中分离到19株霉菌,测定了各菌株的液化酶、糖化酶和蛋白酶活力。结果:筛选到两株同时产液化酶、糖化酶和蛋白酶三种酶活都相对较高的菌株,对两株菌进行鉴定,并构建系统进化树,经鉴定两株菌分别为谢瓦散囊菌FBKL3.0004和阿姆斯特丹散囊菌FBKL3.0013。结论:筛选的两株菌能够应用于白酒酿造。     

产耐酸性α-淀粉酶菌株的筛选及其固态发酵条件的优化

以酒糟为原料,应用锥虫蓝法,通过比较透明圈直径与菌落直径的比值,能较快选出目的菌株,经筛选得到1株产耐酸性-α淀粉酶的野生AS-Y菌株,其酶活达到64.3U/g。通过鉴定为曲霉AS-Y菌株,并对AS-Y菌株的固态发酵条件进行了优化。     

高产β-葡萄糖苷酶药用真菌菌株的筛选

从30个属61株药用真菌中筛选能高产β-葡萄糖苷酶的菌株,经α-纤维素平板法快速初筛和固体发酵复筛,采用对硝基酚-β-葡萄糖苷(pNPG)法对复筛菌株进行酶活测定.结果表明,菌株Schino-phyllum commune.01产β-葡萄糖苷酶能力最强,且其酶活在第9天时能达到39.03 IU/g,灵芝属(Ganoderma sp.)和香菇属(Lenttinus sp.)担子菌也存在产β-葡萄糖苷酶的能力,其余菌株产β-葡萄糖苷酶能力很低.     

盐酸羟胺和紫外线复合诱变选育纳豆激酶高产菌株

以从日本纳豆中分离出的1株枯草芽孢杆菌纳豆亚种(Bacillus subtlis natto,简称纳豆菌)NT-6为出发菌株,通过盐酸羟胺和紫外线复合诱变处理,采用利福平抗性平板筛选和发酵筛选相结合的方法,获得了1株突变株NT207,其产酶能力比诱变前提高了68%,在未经优化的液态发酵条件下,纳豆激酶的酶活力达到了648.72IU/mL。     

菜蚜体内产芥子酶微生物的分离

芥子酶能分解底物硫代葡萄糖苷产生萝卜硫素等抗癌物质。本研究拟从十字花科植物寄生菜蚜体内分离产芥子酶微生物。通过RSM培养基富集培养,氯化钯-硫苷降解率法初筛,葡萄糖产量法复筛。分离获得9株产芥子酶菌株,其中DS12菌株的酶活最高,为1.486 IU;并且在VC浓度为0.28μg/uL时,酶活最大;在发酵42 h,生长量最大。DS12可作为生产芥子酶的潜力菌株。     

抗性筛选纤溶激酶菌株

以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为出发菌株经紫外线诱变处理，采用抗性筛选法，立接在梯度平根上挑取抗药性菌株进行初筛，然后经旋转式摇床300r／min、37℃发酵3d天，测定纤溶激酶产酶活力，再复筛，获得一株生产性能比出发菌株显著提高的突变株SS72，纤溶激酶酶活最高达到87lu／ml。     

纤维素降解菌的筛选和鉴定

从石油勘探采取的土样中,初筛分离出了9株能够降解纤维素的真菌,然后利用滤纸条降解实验和cellulose-azure降解实验进行复筛,筛选出了2株降解纤维素效果比较好的真菌,命名为f1和f2。经酶活测定f1的CMCase酶活和FPase酶活分别为1.06IU、0.7IU;f2的CMCase酶活和FPase酶活分别为1.06IU、0.7IU。并对这2株真菌纤维素酶的酶学性质进行了探索。最后经过分子生物学对其鉴定、比对,这2株菌为产紫青霉菌和烟曲霉。     

Marinococcus sp·PS-1产几丁质酶发酵条件研究

筛选得到一株产碱性几丁质酶较强菌株,经鉴定为海球菌属(Marinococcus),编号PS-1。该菌产酶最适碳源体积分数为20%胶体几丁质,氮源为0·3%大豆粉,胶体几丁质对产酶有诱导作用。5L发酵罐实验表明,溶解氧是影响该菌株产酶的重要因素。通过提高通气量和改变搅拌速度,该菌株可在发酵72h内达到产酶高峰,酶活力最高达到0·56U/mL。     

产耐热蛋白酶乳酸菌的筛选、产酶条件及其酶学性质的研究

从内蒙古部分传统发酵乳样品以及酸菜汤中分离到105株乳酸菌,用检测蛋白酶产生水解圈和福林酚蛋白酶活性测定相结合的方法,从中筛选出一株耐热蛋白酶产生菌株WH29-3-1,该菌株经初步鉴定为Enterococcus faecium.同时,对其产酶条件及酶学性质进行研究.结果表明,菌株WH29-3-1是在以葡萄糖为碳源、蛋白胨 牛肉膏 酵母粉为氮源、碳氮比为0.8、pH7.0的最适产酶培养基中45℃、接种量为4%的条件下发酵培养30h,具有最大产酶量13.13U/ml.且K2HPO4、MgSO4有促进蛋白酶产生的作用.由菌株WH29-3-1产生的耐热蛋白酶的最适作用pH值为7,最适作用温度为50℃.结果表明,该菌是一株具有进一步改造利用价值的产蛋白酶菌株.     

产碱性木聚糖酶菌株的选育及其酶解产物鉴定

以实验室保藏的1株产碱性木聚糖酶的坎皮纳斯类芽孢杆菌(P.campinasensis)xy-7为出发菌株,经紫外线、硫酸二乙酯单一及复合诱变处理,选育获得1株遗传性能稳定的高产突变株DU-36,酶活达到322IU/mL,比出发菌株提高了1倍。采用纸层析法分析,结果表明不同反应时间下酶解产物均为木二糖,推断该木聚糖酶为外切型木聚糖酶。     

棉秆的微生物降解及糖化工艺研究

用2株放线菌J71、J74对经一定预处理的棉秆进行降解,首先检测了2株菌降解棉秆纤维的酶活动力学,结果表明,一定检测周期内,2株菌对棉秆有较强的降解作用,其酶活高峰期均出现在第6 d。以棉秆作为唯一碳源,研究了不同氮源:(NH4)2SO40.1%、0.2%、0.5%,尿素0.1%、0.2%、0.5%,10%麸皮汁对菌株产酶能力的影响。结果显示,以10%麸皮汁为氮源时,J71和J74降解棉秆的CMC酶活、FPA酶活及糖化率最高。通过正交试验检测了发酵影响因子棉秆粒径、发酵液起始pH、发酵温度和发酵时间对菌株J71和J74降解棉秆糖化率的影响,得出了棉秆糖化较优的工艺参数,即将棉秆制成10目粒径的颗粒,维持发酵液在pH 5.0～6.0,于37℃发酵9 d,能获得较高的糖化率。     

产纤溶酶海洋枯草芽孢杆菌的发酵工艺研究

对一株产纤溶酶的海洋枯草芽孢杆菌LJ-22的固、液体发酵条件分别进行了优化,确定该菌株的最佳液体发酵条件为温度31℃,初始pH7.0,转速180r/min,接种量4%,培养时间72h,最佳固体发酵条件为温度34℃,初始pH7.0,接种量10%,装样量10g,静置培养时间72h。在上述条件下,菌株LJ-22的液体发酵产纤溶酶酶活为(830±12.5)IU/mL,是优化前的1.69倍,固体发酵产纤溶酶酶活为(4300±12.8)IU/g,是优化前的1.56倍。通过比较固、液体发酵条件及产酶酶活,得出该菌株更适合液体发酵,便于大规模工业生产。     

香蕉及茶叶中纤维素酶产生菌的筛选

本实验从香蕉茎叶、茶叶及香蕉土壤、茶土壤环境中经初筛和复筛分离纯化出16株产纤维素酶的菌株,对其菌株的外在特性和产酶活力进行了研究和测定。结果从培养基来看,产酶菌株以从牛肉膏蛋白胨中性培养基里分离出来的为最多（5株）;体原料来源,以从土壤环境中分离出的菌株居多（10株）。菌株多为乳黄色（8株）和蓝绿色霉菌（3株）。水解圈以半透明的居多（12株）,且16株菌株的水解圈与菌落直径比在1.0-2．0之间居多（10株）。产酶菌株的酶活和水解圈的透明状态基,树目符,即水解圈为透明状态的菌株酶活值较大,而水解圈为半透明状态的菌株酶活值相对较小;其中以查中香土10^-2-2-1的酶活值最大,为4．5。     

香蕉及茶叶中单宁降解菌株的筛选

本实验从香蕉茎叶、茶叶及香蕉土壤、茶土壤环境中经初筛和复筛分离纯化出16株产单宁酸酶的菌株,对其菌株的外在特性和产酶活力进行了研究和测定。结果表明,从培养基来看,产酶菌株以从牛肉膏蛋白胨中性培养基里分离出来的居多（11株）;从原料来源看,以从茎叶分离出的菌株居多（14株）;菌株多为棕或绿色霉菌（15株）;水解圈以透明的居多（10株）,且16株菌株的水解圈与菌落直径比均在1．0．2．0之间。产酶菌株的酶活和水解圈的透明状态基本相符;其中以牛中香茎处10^0-1、牛中香茎处10^0-2、牛中香茎处10^0-6等3株的酶活值最大,为3．4。