顶空气相色谱法测定帕瑞昔布钠中有机溶剂残留量

目的:采用顶空气相色谱法测定帕瑞昔布钠原料药中5种残留溶剂的含量。方法:顶空进样,顶空平衡温度80℃,顶空平衡时间25 min,顶空瓶中溶剂体积3 mL。以安捷伦DB-624(30 m×0.32 mm,1.8μm)为色谱柱,程序升温,进样口温度200℃,载气为氮气,检测器为氢离子火焰检测器,测定帕瑞昔布钠中的乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、三乙胺的含量。结果:乙醇、二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、三乙胺分离度良好,在各自的范围内线性关系良好,定量限在0.06296～2.1696μg/mL之间,检测限在0.03148～1.1884μg/mL之间,平均回收率在97.45%～103.56%之间。结论:本方法专属性强,灵敏度高,可用于准确测定帕瑞昔布钠原料药中有机溶剂残留量。     

塞来昔布增溶技术研究进展

塞来昔布作为第一款环氧化酶-2选择性非甾体抗炎药，具有抗炎、抗风湿、抗肿瘤等广泛的药理作用。然而，其低水溶性与低溶出速率极大的限制了塞来昔布的临床应用。如何改善塞来昔布的溶解度，提高其口服生物利用度是目前该领域研究的重点。综述了纳米晶体、固体分散体、包合物、蛋白载药系统和脂质体技术在塞来昔布增溶方面的研究现状，以期为塞来昔布增溶技术的工艺放大与临床应用提供一定的理论基础与参考依据。     

塞来昔布合成工艺研究

目的:研究塞来昔布,即4-[5-(4-甲基苯基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯磺酰胺的合成工艺。方法:以对甲基苯乙酮、三氟乙酸乙酯、对磺酰胺苯肼盐酸盐为主要反应原料,经Claisen缩合和环化反应合成选择性COX-2抑制剂塞来昔布。结果:在缩合反应中,用正己烷为反应溶剂,环化反应以乙醇溶液为反应溶剂,控制反应条件,这两步的摩尔收率分别为0.95左右和0.85左右;然后再用乙醇水溶液进行精制,总收率80.7%。结论:该工艺操作简便,反应时间短,收率比文献大大提高,适合工业化生产。     

UPLC法测定卡格列净原料药的有关物质

目的：建立一种超高效液相色谱法(UPLC),用于测定卡格列净原料药中的有关物质。方法：采用Waters Acquity BEH C₁₈(3.0 mm×150 mm, 1.7μm)色谱柱，以0.1%磷酸溶液为流动相A,乙腈-甲醇(体积比80︰20)为流动相B;采用梯度洗脱方式进行洗脱；流速为0.4 mL/min;检测波长为225 nm;柱温为30℃。结果：卡格列净及其已知杂质(KGL-A、KGL-C、KGL-D、KGL-G)在定量限～0.90μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系；KGL-A、KGL-C、KGL-D、KGL-G的平均回收率为91.1%～103.0%。结论：该方法专属性强、灵敏度高、重现性好、操作简便、分析速度快，检测结果准确可靠，适用于测定卡格列净原料药的有关物质。     

离子色谱分析齐拉西酮原料药中甲磺酸根离子

建立了一种用于齐拉西酮原料药中微量甲磺酸根离子分析的离子色谱方法。采用Ionpac@AS9-HC阴离子分析柱（250 mm×4.0 mm, 5μm）,以3.2 mmol·L^-1碳酸钠和1.0 mmol·L^-1碳酸氢钠作为流动相（V∶V=1∶1）,流速1.0 mL·min^-1等度洗脱,进样体积10μL。该方法的线性范围为0.2～200μg·mL^-1,线性系数（R²）>0.999,检测限（LOD）为0.06μg·mL^-1,定量限（LOQ）为0.20μg·mL^-1。该方法具有操作简便、灵敏度高、选择性好等显著优点,适合原料药中甲磺酸根离子定性/定量分析。     

高效液相色谱法测定CBZ-伐昔洛韦对映异构体杂质

建立CBZ-伐昔洛韦中对映异构体的高效液相色谱(HPLC)测定方法。采用CHIRALCEL-OD-RH-CH(4.6 mm×150 mm, 5μm)色谱柱,高氯酸钠水溶液:90%乙腈(70:30)为流动相,检测波长251 nm,柱温35℃,流速0.7 mL/min。CBZ-伐昔洛韦异构体检测,主峰与相邻杂质峰及各已知杂质峰之间分离度均1.5,信噪比S/N≥3,响应因子基本一致,定量限均为0.012%,检测限为0.004%。该方法简便,灵敏度高,重复性好,结果准确,适合CBZ-伐昔洛韦中异构体杂质的测定。     

塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用

目的探讨塞来昔布促进顺铂诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡的作用。方法将人骨肉瘤细胞分为塞来昔布组、顺铂组和联合组,分别加入不同浓度的塞来昔布、顺铂和塞来昔布+顺铂,采用MTT法检测细胞活性;流式细胞术检测细胞凋亡比例;吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)双染色观察细胞并计算凋亡率。结果塞来昔布单独作用于MG-63细胞后,细胞抑制率随药物浓度的升高而升高;联合组细胞抑制率均较顺铂组明显升高;FCM分析联合组细胞凋亡比例明显上升;AO/EB染色结果显示,联合组的细胞凋亡率明显高于塞来昔布组和顺铂组。结论塞来昔布和顺铂均可引起人骨肉瘤细胞的凋亡,两者联合使用可明显增强对人骨肉瘤细胞的凋亡作用。     

COX-2特异性抑制剂塞来昔布的合成研究进展

塞来昔布（西乐葆）作为首个选择性COX-2抑制剂类非甾体类抗炎药,主要通过抑制环氧合酶（COX）中的2型酶蛋白阻断前列腺素生物合成过程来实现抗炎作用,对胃肠道副作用较于传统抗炎药要小得多,其镇痛抗炎活性具有很大的研究价值和广阔的应用前景。西乐葆上市以来,一直是全球畅销药物。近年来,国内对西乐葆的需求日益增长,其较好的开发前景也备受关注。其化合物专利2015年（补发延期）到期。国内外对塞来昔布的合成报道较多,本文综述了通过脱水环合、环加成、偶联、Michael加成、催化作用、芳基化等不同反应机理合成塞来昔布的方法。着重分析了传统的酯缩合和脱水环合两步过程制备塞来昔布的工艺优化过程。得出传统的脱水环合的方法反应缓和稳定,适合工业化生产,其区域异构体杂质可以通过合适的重结晶溶剂去除。制得的塞来昔布可达国家药品标准。     

HPLC法测定来那度胺原料药的有关物质

目的:采用HPLC法测定来那度胺原料药的有关物质。方法:采用加校正因子主成分自身对照法,选用色谱柱Agilent Zorbax SB-AQ(5μm,4.6×250 mm),流动相A为10 mmol/L磷酸二氢钾(磷酸调节pH至2.5),流动相B为乙腈,梯度洗脱;检测波长为210 nm;流速为1.0 m L·min-1;柱温为35℃。结果:来那度胺及其已知杂质(杂质A、杂质B、杂质C、杂质D)的线性范围0.125~30μg·m L1;平均回收率分别为99.9%、101.5%、98.9%、100.4%、101.1%。结论:该方法简单、有效,适合来那度胺原料药的有关物质测定。     

高效液相色谱-质谱法测定盐酸厄洛替尼中潜在致突变杂质0419

目的：建立盐酸厄洛替尼中潜在致突变杂质0419的测定方法。方法：采用高效液相色谱-质谱法，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(Agilent Poroshell 120 EC-C₁₈,4.6 mm×50 mm, 2.7μm);以0.05%甲酸水溶液为流动相A,乙腈溶液为流动相B;柱温30℃;样品控温10℃;流速0.4 mL/min,进样体积10μL。结果：致突变杂质0419在0.61～121.58 ng/mL线性范围良好，定量限为0.61 ng/mL,检测限为0.12 ng/mL,回收率为92.6%,溶液稳定性良好。结论：该方法可以准确检测盐酸厄洛替尼中杂质0419的含量。     

医药中间体4,6-二氯-2-甲基嘧啶的杂质分析

目的：通过高效液相色谱法和气相色谱法全面分析4,6-二氯-2-甲基嘧啶中的有机杂质情况。方法：(1)高效液相色谱法(控制3个杂质):采用Waters Atlantis T3(250 mm×4.6 mm, 5μm)色谱柱，以0.1%磷酸溶液为流动相A,乙腈为流动相B,进行线性梯度洗脱；流速为1.0 mL/min;双波长：(1)260 nm,(2)205 nm;柱温为30℃;进样量10μL。经验证，本方法专属性良好，各杂质分离度均符合要求，检测限分别为0.11,0.10,0.10μg/mL;定量限为0.23,0.20,0.20μg/mL。供试品溶液在室温条件下放置24 h稳定。(2)气相色谱法(控制丙二酸二乙酯):采用DB-1701(30 m×0.32 mm×1.0μm)色谱柱，柱温：起始温度为40℃,维持5 min,以20℃/min的速率升温至140℃,维持10 min,再以30℃/min的速率升温至220℃,维持5 min;进样口温度：200℃;检测器(FID)温度：250℃;载气：氮气；柱流速：2.0 mL/min;分流比：10∶1。经验证，溶剂不干扰测定，检测限为0.42μg/mL...     

更昔洛韦眼用在体凝胶剂的制备及其含量测定

试验制备了更昔洛韦眼用在体凝胶剂并测定更昔洛韦的含量。采用RP-HPLC法,色谱柱：Dikma C 18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）;流动相：V（甲醇）∶V（水）=10∶90;检测波长：254 nm;柱温：室温;流速：1.0 mL/min。更昔洛韦在10.0～60.0μg/mL范围内线性关系良好（r2=0.999 5）;更昔洛韦的平均回收率为99.9%,RSD为0.23%。该方法简单、快捷,回收率和重复性良好,可作为更昔洛韦在体凝胶剂质量评价的方法。     

LC-MS/MS测定沙卡布曲缬沙坦钠中的基因毒性杂质

建立高效液相色谱-质谱联用测定沙卡布曲缬沙坦钠中遗传毒性杂质5-(4'-叠氮甲基-[1,1'-二苯基]-2-基)-1H-四氮唑的方法。方法:选用C18色谱柱(Agilent Poroshell120 EC-C18 50×4.6mm,2.7μm),以0.01mol/L乙酸铵为流动相A,甲醇-乙腈(20∶80)为流动相B,流速为每分钟0.3mL,进行梯度洗脱分离,柱温25℃。对照品溶液选用TSQ Quantum Ultra质谱仪的SRM模式扫描方式进行检测。结果:该方法在4.51～90.24ng/mL范围内线性良好(0.9997),定量限和检出限分别为1.1ng/mL和0.4 ng/mL,方法回收率94.3%,稳定性较好。结论:本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强,适用于沙卡布曲缬沙坦钠中基因毒性杂质5-(4'-叠氮甲基-[1,1'-二苯基]-2-基)-1H-四氮唑的测定。     

高效液相色谱法测定碘海醇原料药中的杂质含量

建立了碘海醇API中杂质G和杂质S（同分异构体杂质）的HPLC分析方法。方法：色谱柱为Agilent ZORBAX SB-Aq型C18柱（4.6×250mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（4:96）,柱温为25℃,检测波长为254nm,流速为1.0mL/min,进样量为10μL,进样时间为60min。结果：碘海醇杂质G在0.0692～2.799μg/mL的范围内呈线性,碘海醇杂质S在0.0188～3.852μg/mL的范围内呈线性,线性相关系数均大于0.995,检测下限均不高于0.05μg/mL。准确度实验表明,两种杂质的平均回收率分别为98.4%和116.4%。供试品溶液在室温放置49h内,两种杂质均十分稳定。不同柱温、流动相、流速及色谱柱条件下,测定结果未见明显差异。结论：本文所建立的高效液相色谱测试方法简单准确、重复性好、灵敏度高,可用于碘海醇原料药中的杂质G和异构体杂质S含量测定。     

HPLC法测定阿戈美拉汀原料药的有关物质

目的:采用HPLC法测定阿戈美拉汀原料药的有关物质。方法:采用Symmtry C18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;流动相A为乙腈:10 mmol磷酸氢二钠(磷酸调节pH至3.5)=30∶70;流动相B为乙腈,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;检测波长为230 nm;柱温为35℃。结果:阿戈美拉汀及其已知杂质(杂质1、杂质2、杂质3和杂质4)的线性范围分别为0.05～1.2μg;平均回收率分别为104.6%、101.3%、104.9%、99.6%;结论:本法简便、准确、适合于阿戈美拉汀原料药有关物质测定。     

亲水作用色谱用于西妥昔单抗的N端糖链分析

单克隆抗体的糖链对其功能活性具有重要的影响,因此开展糖链分析技术的研究具有十分重要的意义。采用亲水作用色谱荧光检测方法建立了N端糖链的定量分析技术。对于常见的3种N端糖链G0F、G1F、G2F,其线性范围分别为7.5×10^-11～1.5×10^-8、4.5×10^-11～9.0×10^-9以及7.5×10^-11～4.5×10^-9 mol/L;检测下限分别为2.8×10^-11、2.5×10^-11、2.6×10^-11 mol/L;保留时间和峰面积的RSD值均小于3%,方法的回收率均大于95%。采用酶切N端糖链和2-氨基苯甲酰胺标记法可以实现西妥昔单抗的这3种N端糖链的含量分析,分别为86.0、85.1、16.6μg/g。除了上述3种糖链,还利用超高效液相色谱-电喷雾离子化串联质谱联用技术进一步对西妥昔单抗其他6种相对丰度较高的N端糖链的种类进行解析。这些研究不仅可以应用于单抗药物的N端糖链的质控分析,...     

高效液相色谱法测定非那雄胺中5β-非那雄胺

目的：建立高效液相色谱方法用于测定非那雄胺原料药中的5β-非那雄胺。方法：采用Welch Xtimate C18(4.6×150 mm,3.5μm色谱柱,以8%的四氢呋喃水溶液为流动相A,以8%的四氢呋喃乙腈溶液为流动相B,梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,检测波长为210nm,柱温25℃,对非那雄胺原料药中的5β-非那雄胺进行定量分析。结果：该液相色谱方法中5β-非那雄胺与非那雄胺及相邻杂质分离良好,且非那雄胺原料药在各强制破坏条件下均未产生干扰5β-非那雄胺的杂质,方法专属性良好;5β-非那雄胺与非那雄胺分别在0.27～2.17和0.28～2.23μg·mL^-1浓度范围内线性良好(r≥0.990);5β-非那雄胺的加样回收率为108.2%;进样精密度和重复性良好;系统适用性溶液和供试品溶液室温条件放置94小时和82小时稳定;各耐用性条件下5β-非那雄胺与非那雄胺的分离度均在4.10～4.80之间,方法耐用性良好。结论：本文所建立的分析方法专属性好、准确度高,简便耐用,可用于非那雄胺原料药中5β-非那雄胺的定量分析。     

塞来昔布对鼻咽癌细胞株HNE-1增殖与侵袭能力、VEGF表达及放疗敏感性的影响

目的探讨环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂塞来昔布(Celecoxib)对鼻咽癌细胞株HNE-1增殖与侵袭能力、血管内皮生长因子(VEGF)表达及放疗敏感性的影响。方法HNE-1细胞经不同浓度塞来昔布处理后,采用MTT法检测各组细胞的增殖水平,细胞侵袭试验检测细胞的侵袭转移能力,RT-PCR及ELISA分别检测细胞VEGF mRNA的转录水平及蛋白的表达水平,克隆形成试验检测细胞对放疗的敏感性。结果不同浓度的塞来昔布均可显著抑制HNE-1细胞的增殖与侵袭能力,并显著下调HNE-1细胞VEGF在mRNA及蛋白水平的表达,且均呈剂量依赖性,差异具有统计学意义。克隆形成试验结果表明,125μmol/L的塞来昔布与放疗联用对HNE-1细胞有明显的协同抗肿瘤效应。结论塞来昔布对HNE-1细胞的增殖与侵袭能力及VEGF的表达均有明显的抑制作用;经塞来昔布处理可增强HNE-1细胞对放疗的敏感性。     

塞来昔布Ⅲ晶型的制备及表征

以不同溶剂精制塞来昔布粗品，HPLC法检测产品纯度。考察了不同结晶溶剂对产品晶型的影响，产品晶型经X射线粉末衍射表征。     

HPLC法测定伐地昔布的有关物质

建立高效液相色谱法检测伐地昔布的有关物质.采用α-酸性糖蛋白键合硅胶的手性色谱柱,以乙腈-醋酸铵缓冲液(0.01 mol/L,pH4.0)作为流动相进行梯度洗脱,检测波长215 nm.伐地昔布与5个已知杂质均可达到基线分离,在各自浓度范围内线性关系良好,平均回收率95.13％～99.77％,RSD1.10％～1.77％...