豆渣及金针菇菌糠混合发酵制备凝乳酶的研究

将干燥后的豆渣和干金针菇菌糠以1:1(m/m)比例混合,再以固液比1:1(m/m)加水混合,接种微小毛霉,于30℃、相对湿度75%下固体发酵3 d,获得微小毛霉凝乳酶,最高酶活力达到9412 SU/g,略高于对照麦麸固体9081 SU/g的发酵水平。此外,本文还考察了发酵时间、发酵温度、培养料水分、无机盐、碳源、氮源以及接种量等参数对豆渣和金针菇菌糠混合固体发酵产凝乳酶的影响。     

豆渣菌糠浅盘发酵制备微小毛霉凝乳酶的研究

为考察将豆渣和金针菇菌糠这两种废弃资源应用于微小毛霉凝乳酶固态浅盘发酵的效果,以医用托盘作为发酵容器,以干燥后的豆渣菌糠1∶1(质量比)混合物为培养基,以固液比1∶1(质量比)加水润湿培养基,121℃灭菌冷却后接种微小毛霉进行发酵.发酵72 h时,加水提取酶,将酶液进行浓缩、盐析、透析以及冷冻干燥后获得凝乳酶粉末.结果显示,以豆渣和菌糠混合物为发酵培养基时,其单位发酵面积最大产酶量可达到1 860 SU/cm2,略高于对照麦麸1 618 SU/cm2的发酵水平,这表明豆渣和菌糠混合物能够替代麦麸用于微小毛霉凝乳酶的固体浅盘发酵.此外,酶提取液经初步分离纯化,可获得凝乳活力为7 497 SU/mg、水解酶活为0.22 Ucas/mg、纯度大于50％的凝乳酶粉末制剂.     

响应面法优化微小毛霉固态发酵生产凝乳酶工艺研究

采用麦麸培养基进行固态发酵,以研究发酵条件对产酶活力的影响,在此基础上应用Plackett-Burman、最陡爬坡实验和Box-Behnken实验设计,对微小毛霉的固态发酵培养基进化以达到最佳产酶量。实验结果表明,最佳发酵条件为:发酵时间5d,发酵温度30℃,固液比值0.75,接种量为3份,测得凝乳酶酶活为828U/mL。并且当麸皮质量为15.50g、(NH4)2SO4质量为0.15g、KH2PO4质量为0.08g时,微小毛霉产凝乳酶活力达到1200U/mL。较未优化前活力提高了66.67%。     

重组毕赤酵母产凝乳酶发酵参数优化的研究

以重组毕赤酵母GS115PJ5(含微小毛霉凝乳酶基因)为研究对象,通过单因素实验确定其最佳生长条件:培养温度30℃、培养基pH值5.2、摇床转速280r/min、培养基装瓶量5%(12.5mL/250mL)。在单因素实验的基础上通过Plackett-Burman实验筛选出培养基装瓶量、甲醇添加量、培养基pH值等3个影响重组毕赤酵母产凝乳酶的主要因素,并通过响应面实验确定三者有利于产酶的最佳值分别为13.06%、1.52%、6.15,在此条件下,凝乳酶活力达到最大值即491.7SU/mL,验证实验证明模型预测值准确、可靠。     

根霉产凝乳酶的固态发酵条件优化

对根霉产凝乳酶固体发酵条件进行研究。通过单因素分析和响应面试验设计,确定根霉产凝乳酶的发酵条件及发酵培养基的最佳组成为:24℃发酵7d;麸皮与江米质量比为0.96:1、培养基固液比(m/V)为0.99:1、奶粉添加质量分数为0.81%,所产的凝乳酶活力达到72.92SU/mL。     

根霉产凝乳酶发酵条件的研究

对根霉经发酵产凝乳酶的发酵条件进行研究。结果表明,发酵培养基的最佳组成为4.5%的米粉麸皮（按2：3的比例）水解液、4.0%的黄豆粉水解液、0.3%的CaCl2、0.5%的KCl。摇瓶培养中培养基起始pH值为4.5,培养时间、温度分别为60h、34℃时,所产凝乳酶活力达161.14SU/mL且凝乳酶活力与蛋白酶活力的比值最大为27.88。     

绿色木霉固态发酵工艺及诱导条件研究

探讨绿色木霉固态发酵产生纤维素酶的诱导促进条件。通过初始培养基、表面活性剂、诱导物、缓冲pH体系等对绿色木霉固态发酵产酶的诱导情况进行分析,获得产酶时间曲线和最大产酶量。不同条件下绿色木霉产纤维素酶活力存在显著差异(P0.05),麸皮∶秸秆粉=1.5∶1(质量比),培养基固液比1∶2.5(g/m L),硫酸铵按培养基干基的2%加入,初始pH=6为最佳条件,采用缓冲pH体系对产酶有促进作用,添加表面活性剂和适当种类的诱导物可以提高产酶量,而过高浓度的诱导物则降低产酶量。该研究为绿色木霉对秸秆的转化应用提供了理论依据。     

米曲霉固态发酵麻疯树籽饼产中性蛋白酶条件的研究

以实验室筛选出的米曲霉(Aspergillus oryzae)Asp-1为菌种,麻疯树籽饼为发酵主料,采用固态发酵法生产中性蛋白酶.考察了固态发酵培养基液固比、初始pH、接种量等发酵条件,以及麻疯树籽饼中添加麸皮、碳源、氮源对该菌株产酶能力的影响.经单因素和正交实验获得最佳发酵条件为:培养基液固比1:1,初始pH 6,接种量每10 g培养基含有1×108个孢子,培养基中麸皮添加量10%、葡萄糖添加量0.5%、蛋白胨添加量1%.最佳条件下发酵2 d酶活可达3 759.8 U/g.     

印度毛霉MJ229固态发酵产凝乳酶的研究

由于从小牛皱胃中提取的皱胃酶已无法满足干酪生产的需要,因而不得不寻找其他凝乳酶来替代小牛皱胃酶.本研究在前期小试实验基础上,研究毛霉MJ229固态发酵产凝乳酶的中试制备条件.确定其固态发酵培养基配方为:大米、麸皮和稻草的质量比为5:4:1,吐温-80为0.3％(w/w);加入自来水使液固比为1:1,最佳载曲量为每盘3kg.分别在自然状态与调控水分和温度状态下进行曲盘固态发酵试验,结果表明,毛霉MJ229在调节状态下发酵48h后获得凝乳酶活力可达5333Su/g,与自然发酵条件相比提高了25％.     

微小毛霉发酵制取凝乳酶的培养基优化研究

利用响应面分析法优化微小毛霉的发酵培养基,提高微小毛霉凝乳酶的凝乳活力。在单因素实验的基础上,用Design-Expert软件对实验数据进行多元回归分析,建立了3种因素与凝乳酶活力之间的函数关系,得出在基础发酵培养基中加入的氯化钙、乳清粉和葡萄糖的最佳浓度分别为0.58%、0.64%和1.13%,此时,微小毛霉凝乳酶的凝乳活力的理论值为1150.81SU/mL,验证平均值为1109.7SU/mL,与预测值基本一致。