牛奶中磺胺二甲基嘧啶的测定

磺胺二甲基嘧啶[简称:SM2,化学名:N1-(4、6-22甲基-2-嘧啶基)-对氨基苯磺酰胺]是应用广泛的磺胺类抗菌药,常用于预防和治疗乳牛传染病,也有饲料生产企业不顾食品的安全问题,用作饲料添加剂,以提高奶牛的抗病能力和预防病毒性疾病引起的继发感染,提高奶牛生产性能。动物机体对SM2的平均吸收率较高,牛一般需12～24h吸收完毕,吸收后的SM2主要经肾脏排泄,少量可经乳汁,胆汁排泄。经尿排泄的药物,部分以原形,部分以乙酰化物形态出现。经乳汁排泄的时间与血中维持的时间相似,且进入乳汁中的浓度较高。磺胺二甲基嘧啶在牛奶或猪肉中的残留量超过…     

胶体金免疫层析法快速检测磺胺嘧啶残留

本实验用胶体金标记磺胺嘧啶多克隆抗体包被在胺体金垫上,磺胺嘧啶与牛血清白蛋白偶联物和羊抗兔二抗抗体分别包被在硝酸纤维素膜(NC)上作为检测线(T线)和质控线(C线),制成免疫层析快速检测试剂条,用于快速检测组织等样品中的磺胺嘧啶残留量.T线与待测样品中所含磺胺嘧啶竞争结合胶体金标记的磺胺嘧啶多克隆抗体,并通过胶体金显色直接观察检测结果.检测猪肉等组织试样时,灵敏度最低值可达到20 ng/mL,只需3～5 min.本试剂条具有较高的灵敏度及特异性,操作简单,快速,结果稳定可靠,可作为磺胺嘧啶残留现场监控的有效筛检手段.     

胶体金免疫层析法半定量检测鸡肉中磺胺嘧啶残留

本研究采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金标记磺胺嘧啶单克隆抗体,磺胺嘧啶竞争物包被于硝酸纤维素膜,制成免疫层析快速检测试纸条。该试纸条可以在15min内完成对磺胺嘧啶残留的半定量检测,灵敏度为5ng/ml,与其它磺胺类药物无交叉反应,在鸡肉中的回收率为71%～95%;用试纸条与高效液相法对来自动物试验的56份鸡肉样品进行对比检测。以我国磺胺嘧啶残留限量标准(100ng/g)为标准,二者符合率为100%。该方法灵敏度高,简便快速,无需特殊仪器设备,有良好的开发应用前景。     

胶体金试纸条快速检测食品中磺胺二甲基嘧啶残留

目的：旨在建立一种快速、简便的针对磺胺二甲基嘧啶残留的检测方法。方法：应用竞争抑制免疫层析原理,研制磺胺二甲基嘧啶胶体金试纸条。结果：该试纸条检测限为10ng/mL、检测时间5min,与其他磺胺类药物交叉反应小,可用于多种食品样本的检测,且样本检测限为100μg/kg。结论：该方法操作简便、灵敏度高且特异性强,可实现对食品样品中磺胺二甲基嘧啶残留的快速检测。     

酶联免疫吸附法直接测定乳制品中雌二醇残留

建立了测定乳制品中雌二醇残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)竞争法,其重现性好、特异性强,测定线性范围0.01mg/L～1000.0mg/L,最低检出浓度为9.714mg/L,乳制品的加标实验回收率为87.2%～120.8%。     

分子印迹电化学传感器检测鸡肉、鱼肉和牛奶中磺胺二甲基嘧啶残留

目的 食品中兽药残留是造成食品安全的关键问题之一,严重危害消费者的健康,而磺胺类药物因为价格低廉,被广泛应用于动物源性食品的生产中,建立一种方便、快捷的磺胺类药物残留的检测方法对确保动物源性食品安全尤为重要。方法 以玻碳电极为基底,以导电聚合物聚3,4-乙烯二氧噻吩对其进行增敏处理并与分子印迹技术结合原位电化学聚合形成分子印迹薄膜,并对电极的修饰方法、修饰时间、聚合液中功能单体与模板分子比例进行了优化。利用扫描电镜和电化学手段对电极修饰情况进行表征,通过吸附实验对材料吸附性能进行表征。结果 电极经过修饰后11 min即可达到吸附平衡,合成的分子印迹电极对模板分子磺胺二甲基嘧啶的吸附能力远大于非印迹电极,通过选择性实验可以看出制备的分子印迹电极具有良好的选择性。将合成的磺胺二甲基嘧啶分子印迹电化学传感器用于实际样品鸡肉、鱼肉和牛奶中磺胺二甲基嘧啶残留量检测,进行线性回归分析,证实了制备的传感器具有良好的分析性能,该传感器在磺胺二甲基嘧啶浓度为5~1000 μg/L时具有良好的分析性能,R2>0.99,且在实际样品检测中得到满意的回收率（71.92%~103.72%）,与其它方法相比具有更低的检出限（0.406 μg/L）。结论 将分子印迹技术与电化学工作站结合,研制的分子印迹电化学工作站具有分子印迹的特异性选择与电化学的灵敏,检测的结果满足国标定量分析检测要求,并且为磺胺类药物检测提供了新的手段。     

液质联用法罗非鱼中磺胺嘧啶不确定度的评定

建立液质联用法测定水产品罗非鱼中磺胺嘧啶不确定度评定的数学模型,对测量过程中的不确定度来源进行分析与合成,计算出液质联用法测定水产品罗非鱼中磺胺嘧啶不确定度结果.     

酶联免疫吸附法直接测定乳制品中催乳素残留

建立了测定乳制品中催乳素残留的酶联免疫吸附分析(ELISA)竞争法,它重现性好,特异性强,测定线性范围为0.35ng/mL～200.0ng/mL,最低检出浓度为9.714ng/L,乳制品的加标实验回收率≥80.3%。     

酶联免疫吸附测定法检测淡水鱼中孔雀石绿残留

目的：了解武汉市常青花园小区在售淡水鱼产品的孔雀石绿污染情况。方法：利用酶联免疫吸附测定法对常青花园周边地区的3个菜市场和3个超市所售卖的常见淡水鱼进行检测。结果：共检测组织样本39份,其中检测出孔雀石绿的样本有21份,孔雀石绿检出率为53.8%;超出国家标准的样本有13份,不合格率为33.3%。结论：该区域在售淡水鱼中孔雀石绿的残留情况比较突出。由于试验样本的来源难以进一步追溯,确定孔雀石绿违规添加的环节难度较大,亟需市场监管部门对市售淡水鱼产品从养殖、运输到售卖全链条建立起清晰可查的溯源体系,以便更好地保障市民的食品安全。     

间接竞争酶联免疫吸附测定水产品中的组胺残留

本文通过制备特异性识别组胺衍生物的多克隆抗体,建立了针对水产品中组胺的间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA)。以组胺等为反应原料经三步化学反应合成组胺半抗原,采用活泼酯法将组胺半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联作为包被原和免疫原,用紫外扫描法进行鉴定,结果显示组胺半抗原与载体蛋白偶联成功。通过免疫新西兰大白兔制备组胺抗血清,采用辛酸-硫酸铵方法纯化血清获得了相应的特异性多克隆抗体。通过对ic ELISA系列反应条件的摸索,确定了各组分的最适工作条件。试验结果表明:该方法对于组胺的IC50为0.91 ng/mL,与组氨酸、N-酰基组氨酸、3-甲基组胺等多种类似物及其衍生物均无交叉反应,方法特异性良好;线性检测范围为0.1～8.1 ng/mL,检出限为0.10 ng/mL;按照10、20、30 ng/g的添加量添加组胺至鱼、虾和贝类样品中,测得其回收率为98.9%～130.1%。方法检测的准确性好灵敏度高,适用于实际水产样品中组胺的检测。     

酶联免疫吸附法测定乳粉中IgG含量

母乳化乳粉中添加保健功能因子人Ig G.用饱和硫酸铵法从健康人血清中制备粗Ig G,经Sephadex G-100柱制备纯Ig G;用纯人Ig G作为抗原,免疫兔子制备兔抗人Ig G抗体.建立乳制品中人Ig G含量酶联免疫吸附测定,最佳包板物浓度为5.25μg/ml,最佳血清效价为11 600,抗血清亲和力为2.40×107,回收率为88%～94%,测定Ig G浓度范围为5.0～160 ng/ml,最小检测限为3.25 ng/ml.     

酶联免疫吸附法测定水产品中甲基睾酮残留

建立了测定水产品中甲基睾酮(MT)残留的间接竞争酶联免疫吸附法(ic ELISA)。采用琥珀酸酐法衍生化制备半抗原MT17,进一步偶联钥孔血蓝蛋白(KLH)制备免疫原MT17-KLH,经动物免疫成功获取特异性识别MT的多克隆抗体(与其它结构类似物交叉反应小于1%)。优化确立了ic ELISA最佳检测条件:包被原浓度100μg/L,MT多克隆抗体稀释度1/1.2×105,抗体反应时间40 min,药物稀释液为PBS,水产样品经乙腈提取,N-丙基乙二胺吸附剂(PSA)分散固相萃取(DSPE)净化后用于ic ELISA测定。本方法的抑制中浓度IC50为3.48μg/L,检测线性范围为0.77~13.06μg/L。水产样品加标回收率为81.02~103.19%,相对标准偏差为4.46%~13.14%,测定结果与液相色谱-质谱联用法具有良好的相关性(R=0.9971)。本方法可用于水产品中甲基睾酮残留的快速测定。     

虾中硫丹残留的酶联免疫吸附检测方法的研究

目的:建立一种虾中农药硫丹残留的快速检测方法.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定农药硫丹残留.提取溶剂为丙酮.该检测方法中用阴性样品作标准曲线.结果:该方法的检出限(IC15)约为1.6 μg/L,灵敏度(IC50)约为17μg/L.线性范围1.8～60μg/L.平均回收率67.56%～99.81%.结论:该检测方法符合<日本肯定列表>中规定的水产品中硫丹的检测要求,且样品的处理过程较为简单,适用于大量样品的快速检测.     

酶联免疫法测定牛初乳中乳铁蛋白含量

应用酶联免疫法制定牛初乳中乳铁蛋白的含量,最小检出量为０．５ｎｇ／ｍｌＬＦ,浅性范围为０．８ｎｇ／ｍｌ至１００ｎｇ／ｍｌ。标准曲线性方程为Ｙ＝－２２．７２Ｘ＋２１．３８,相关系数γ为０．９９６。结果较为理想,这种对ＬＦ的检测方法在国内未见报道。     

酶联免疫吸附方法测定酱油中黄曲霉毒素B1

到目前为止,食品中黄曲霉毒素Ｂ１的测定方法主要有薄层色谱法〔１〕,气相色谱（ＧＣ）及高级液相色谱（ＨＰＬＣ）法等。国标中食品黄曲霉毒素Ｂ１的测定方法为薄层层析法,该法不仅样品处理繁琐,试剂消耗大,而且在检出阳性或假阳性样品时需在多块薄层板上经反复分离...     

食品中硫丹残留酶联免疫吸附检测方法的研究

建立了测定食品中硫丹农残的酶联免疫吸附检测法(EUSA).考察了3种提取方法并比较了添加回收率.针对不同的样品,分别采取不同的方式有效地消除了基质对ELISA分析的影响.以ELISA法进行测定得到的样品添加回收率为82.6%-112%,变异系数(CV)为3.65%-16.97%.ELISA法和气相色谱法分析结果具有较好的一致性,从而证明了本实验所建立的ELISA方法的可行性.本方法比常规方法更加简便、快捷,其最低检出限为(0.8±0.1)μg/kg     

直接竞争酶联免疫吸附法检测食品中三聚氰胺残留

采用酶标抗原建立了高效、高灵敏的三聚氰胺直接竞争的ELISA（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测方法。方法 以三聚氰胺单克隆抗体包被作为固相抗体,辣根过氧化酶（Horseradish Peroxidase,HRP）标记的抗原与标准品（或样品）中三聚氰胺竞争结合抗体,建立了直接竞争酶联免疫检测体系。结果 以三聚氰胺为标准品建立标准曲线,得到方法的IC50为8.84μg/L,灵敏度为0.65μg/L,线性范围0.9-35μg/L;检测样品的回收率为70.0%-127.9%,与三聚氰酸交叉反应率为60%,其他结构类似物基本无交叉反应。结论 本方法灵敏度高、特异性强、检测快速, 可以满足实际样品的检测需求。     

乳铁蛋白的免疫化学分析法-酶联免疫吸附测定法

应用酶联免疫法测定初乳中乳铁蛋白的含量。检测的线性范围为3.1～200ng/ml，最小检测限为1.5ng/ml，回收率为91.82%～115.56%之间，变异系数在6.20%～9.18%之间。     

水产品中恩诺沙星残留酶联免疫检测体系的简化研究

针对水产品中的恩诺沙星残留,进行了样本添加顺序、竞争反应孵育时间以及洗涤时间的简化和优化.结果表明,顺序饱和法和平衡饱和法b为较好的竞争反应方式,其反应时间可以分别缩短至30、60min;酶标板的单次洗涤时间则可以缩短为3min,重复3次进行.根据简化结果分别建立了2种改进后的检测方法,并以鳗为样本进行了加标检测实验,结果表明,10～200μg/kg添加范围内,平均回收率为65.36%～107.63%,相对标准偏差低于15%,检测时间缩短至1.5h以内.     

水产品中恩诺沙星残留酶联免疫检测体系的简化研究

针对水产品中的恩诺沙星残留,进行了样本添加顺序、竞争反应孵育时间以及洗涤时间的简化和优化。结果表明,顺序饱和法和平衡饱和法b为较好的竞争反应方式,其反应时间可以分别缩短至30、60min;酶标板的单次洗涤时间则可以缩短为3min,重复3次进行。根据简化结果分别建立了2种改进后的检测方法,并以鳗为样本进行了加标检测实验,结果表明,10～200μg/kg添加范围内,平均回收率为65·36%～107·63%,相对标准偏差低于15%,检测时间缩短至1·5h以内。