从发酵液中提取高纯度L-脯氨酸的工艺研究

采用膜过滤技术对L-脯氨酸发酵液进行预处理,使用孔径为1μm的陶瓷膜在30℃-60℃．膜滤压力差选择2．5bar-7．5bar的条件下得到较好的过滤除菌效果。通过树脂吸附试验,考察了pH和不同树脂对L-脯氨酸吸附情况的影响,确定了使用732#阳离子交换树脂进行吸附,上柱发酵液pH3．5,上柱流速0．6BV／h,洗脱液为0．8mol／L NH4Cl,洗脱体积流量为0．4BV／h,高流液经脱色、浓缩结晶后得到L-脯氨酸成品,总提取率为65％。     

从发酵液中提取高纯度L-脯氨酸的工艺研究

采用膜过滤技术对L-脯氨酸发酵液进行预处理,使用孔径为1 μm的陶瓷膜在30℃～60C,膜滤压力差选择2.5bar～7.5 bar的条件下得到较好的过滤除菌效果.通过树脂吸附试验,考察了pH和不同树脂对L-脯氨酸吸附情况的影响,确定了使用732#阳离子交换树脂进行吸附,上柱发酵液pH3.5,上柱流速0.6 BV/h,洗脱液为0.8 mol/L NH4C1,洗脱体积流量为0.4 BV/h,高流液经脱色、浓缩结晶后得到L-脯氨酸成品,总提取率为65％.     

代谢工程改造大肠杆菌合成反式-4-羟基-L-脯氨酸

通过比对筛选,从Micromonospora sp. CNB394中获得高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,随后利用规律成簇的间隔短回文重复-associated protein 9基因编辑方法,通过强化L-脯氨酸合成途径和引入高活性的L-脯氨酸-4-羟基化酶,构建1 株以葡萄糖为碳源合成反式-4-羟基-L-脯氨酸的大肠杆菌基因工程菌HYP15。摇瓶发酵30 h,工程菌的反式-4-羟基-L-脯氨酸产量达到13.6 g/L。5 L发酵罐分批补料发酵40 h,反式-4-羟基-L-脯氨酸产量达到48.6 g/L,糖酸转化率和平均生产强度分别达到21.6%和1.22 g/（L·h）,具有良好的工业应用前景。     

旋光法测定L—乳酸钙中L—型的含量

采用旋光法对Ｌ－乳酸钙中具有生物活性的Ｌ－型含量进行了定量测定,结果表明,对纯度较高的乳酸钙和Ｌ－型鉴定有较高的准确度。     

玉米原料生产L—乳酸的几个技术性问题探讨

乳酸是近十年来飞速发展的一种重要有机酸,随着人们物质生活水平的不断提高,其应用领域也不断拓展,世界乳酸的年需求量以15％的速度递增。其中L－乳酸以其可直接参与人体代谢,吸收完全、无副作用,并可生产聚乳酸（PLA）用于消除“白色污染”保护环境等独特的生化价值,引起了世界的关注。我国由于受技术、设备等因素的影响,至今没有形成大规模生产,仍以DL－乳酸为主体。     

酶法生产L—天冬氨酸之研究

本文对利用Ｅ．ｃｏｌｉＡＳ１．８８１细胞内之Ｌ－Ａａｐ酶，以反丁烯二酸及氨为底物转化生产Ｌ－天冬氨酸进行了系统的研究，试验结果表明该酶反应转化率高，Ｌ－Ａｓｐ收率亦较高，Ｌ－Ａｓｐ对反丁烯二酸总收率可达９０％以上。     

比色法测定明胶中的L-羟脯氨酸

本实验旨在建立明胶中L-羟脯氨酸测定的方法.采用比色法对明胶中的L-羟脯氨酸含量进行测定,结果表明,本方法的检出限为0.26 g/100g,回收率为92.59%～101.25%,RSD为1.42%,可用于明胶中L-HYP含量的测定.     

离子色谱法测定饮料中L-脯氨酸含量方法的研究

采用了离子色谱法测定了饮料中L-脯氨酸含量,并与分光光度计法结果比较,实验结果表明:该方法可准确测定饮料中的L-脯氨酸,且有很好的线性关系,相关系数大于99%,最低检出限小于0.1μmol,加标回收率在92.0%￣110.0%之间,与分光光度计法结果比较标准偏差小于5.0%,可用于饮料中L-脯氨酸的检测。     

蛋清高F值寡肽对受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响的研究

蛋清高F值寡肽就是一种由2～5个氨基酸残基所组成的混合小肽体系,已知具有辅助治疗肝性脑病,抗疲劳、耐缺氧、降血脂等生理功能。本实验主要针对蛋清高F值寡肽是否对小鼠皮肤中羟脯氨酸含量存在影响进行实验研究,综合分析了不同浓度蛋清高F值寡肽液对小鼠灌胃30d和90d的小鼠皮肤中羟脯氨酸含量的变化。研究发现:不同浓度蛋清高F值寡肽均可以明显提高受试小鼠皮肤中羟脯氨酸含量,其中浓度为10%的蛋清高F值寡肽液无论是对灌胃30d还是灌胃90d的小鼠皮肤中羟脯氨酸含量影响都是极显著。     

HPLC-MS/MS测定生乳中L-羟脯氨酸的不确定度评定

参照SN/T3929—2014《出口食品中L-羟脯氨酸的测定》,对乳制品中L-羟脯氨酸的含量不确定度进行评定。根据JJF1059.1—2012《测量不确定度评定与表示》和CNAS—GL006:2019《化学分析中不确定度的评估指南》两个现行有效的标准中不确定度评定的基本程序,建立数学模型,分析高效液相色谱串联质谱法测定乳制品中L-羟脯氨酸含量过程中引入的各测量不确定度分量,计算得到测量结果的合成标准不确定度和扩展不确定度。评定结果表明,对结果的影响最大的不确定度分量为拟合标准工作曲线,其次是测量重复性引起的不确定度,试样称量的不确定度对结果的影响最小。评定结果可以对分析检测结果的准确程度和方法的可靠性研究提供参考。     

新型改性明胶

提出酶修饰,酯化,醛修饰３种可行的改性方法,在明胶分子中引入疏水基。对己醛修饰作初步试验,效果较好。经改性后的明胶有很好的乳化性能和起泡性能,同时保持原有的优良性能。     

α-酮戊二酸对L-羟脯氨酸产量的影响

微生物合成L-羟脯氨酸时需要α-酮戊二酸的参与,而细胞内α-酮戊二酸的含量有限,限制了L-羟脯氨酸的高效合成。 因此该实 验通过在L-羟脯氨酸发酵过程中外源添加α-酮戊二酸,来考察α-酮戊二酸对发酵菌体生长、L-羟脯氨酸产量、糖酸转化率和代谢流的 影响。 结果表明,α-酮戊二酸对菌体生长有一定的抑制作用,但在一定浓度范围内,外源添加α-酮戊二酸能有效提高L-羟脯氨酸的产量和 糖酸转化率,当随糖流加5 g/L（初始发酵液）α-酮戊二酸时,L-羟脯氨酸产量能够达到最大值62.14 g/L,糖酸转化率为22.37%,与不添加 α-酮戊二酸相比,分别提高了47.85%和13.04%,同时,L-羟脯氨酸的合成代谢流提高了11.98%,副产物乙酸合成代谢流减少了29.42%。     

液相色谱-串联质谱法测定保健品中 L-羟脯氨酸含量

目的 通过优化保健品中L-羟脯氨酸的测定条件,建立保健品中L-羟脯氨酸的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）定量检测的分析方法。方法 采用酸水解的方法处理L-羟脯氨酸,色谱柱（EC-C18, 4.6 mm×50 mm, 2.7 μm,安捷伦）,流动相为水相和乙腈按一定的梯度进行洗脱,流速0.5 mL/min,采用LC-MS/MS在正离子模式下检测,外标法定量。结果LC-MS/MS法在0.00284 mg/mL~0.0284 mg/mL范围内,L-羟脯氨酸的浓度和峰面积的线性良好,相关系数R2＞0.99,方法的检出限和定量限分别为1.42 μg/g和4.7 μg/g,放置24h内L-羟脯氨酸的稳定性良好,在不同添加水平下,方法的回收率范围为95.0%~98.8%,相对标准偏差为1.7%（n=9)。结论 高效液相色谱-串联质谱法灵敏度高、准确、重现性好,适用于保健品中L-羟脯氨酸的含量测定。     

明胶与к-卡拉胶交互作用特性及机理的研究——明胶与卡拉胶共凝胶体的力学特性

本文对明胶与卡拉胶共凝胶体的力学特性进行了研究,小变形实验发现随体系卡拉胶百分数的增加,贮能模量在增加。大变形实验发现共凝胶体的破裂强度及质构随体系两种大分子的配比、体系的pH值、离子强度的变化而变化。     

乳及乳制品中动物水解蛋白L-羟脯氨酸的检测技术

介绍了检测乳及乳制品中L-羟脯氨酸的常用方法,主要包括高效液相色谱法、高效液相色谱-质谱联用法、氨基酸自动分析仪测定法,毛细管电泳-激光诱导荧光检测法和分光光度法,并对今后乳及乳制品中动物水解蛋白检测技术的发展趋势进行了分析。     

碱解法测定动物水解蛋白中L-羟脯氨酸的含量

目的 建立了使用聚四氟乙烯带盖水解管,以NaOH溶液为水解液的碱解法测定动物水解蛋白中L-羟脯氨酸(L-Hydroxyproline,L-Hyp)含量.方法 将样品置于10 ml水解管中,加入6 ml 2.5 mol/L NaOH溶液在110℃烘箱中加热2h,水解出的L-Hyp经氯胺T氧化后与对二甲氨基苯甲醛反应生成红色络合物,在(558±2) nm处测定其吸光度.结果 在优化实验条件下,该方法的线性范围0～10 μg/ml(r =0.999 3),检出限1.35 μg/g,样品测定的RSD在1.0％ ～2.3％,加标回收率为88.7％～96％(加标量为30 mg/kg).结论 相对酸解法,碱解法的水解效率和酸解法基本一致,样品前处理操作简单,缩短了测定时间,灵敏度、重复性和稳定性良好.