牦牛血胰蛋白酶水解液中抗菌肽的筛选研究

以牦牛血的胰蛋白酶水解液为原料,用Sephadex G-15凝胶柱,在以10 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)为洗脱液,流速为0.4 mL/min的洗脱条件下,利用抗菌肽与细菌细胞膜的吸附结合特性,分离出两个含抗菌肽组分的洗脱峰。研究显示抑菌活性大的洗脱峰再经过RP-HPLC反复纯化,收集组分并检测抑菌活性,得到两个色谱纯的抗菌肽YakB-1和YakB-2。抑菌实验表明,抗菌肽YakB-1/2对细菌和真菌都具有广谱抗菌活性;抗菌肽YakB-2无论对G^-菌还是G⁺菌的抗菌活性都比YakB-1强,但YakB-1对真菌的抑菌活性更强。研究结果可为牦牛血资源开发与利用提供参考依据。     

杂色鲍组织蛋白酶L的分离纯化与性质研究

通过硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose阳离子交换层析、Sephacryl S-200HR凝胶过滤和Hydroxyapatite羟基磷灰石层析,从杂色鲍（Haliotis diversicolor）内脏中分离纯化了组织蛋白酶L。SDS-PAGE结果显示,纯化蛋白的分子量约为28ku。该酶最适温度37℃,最适pH5.5。当温度低于40℃,pH在5.0～6.5范围内该酶较稳定。底物特异性实验与抑制剂实验结果表明,该酶属于半胱氨酸蛋白酶。金属离子Mn2＋、Ba2＋和Mg2＋对该酶有不同程度的激活作用,而Co2＋、Cu2＋、Zn2＋、Fe2＋和Ca2＋等对该酶起抑制作用。     

抗菌肽对热应激肉鸡血液学及血氧自由基的影响

了解猪小肠抗菌肽在热应激条件下对肉鸡血液学及血氧自由基的影响。方法 选用30只两周龄健康华都AA+肉鸡,称重后随机分为3组:常温对照组、单纯热应激组和抗菌肽+热应激组,每组10只,热应激10天。结果 抗菌肽+热应激组与单纯热应激组比较全血黏度、血浆黏度、红细胞压积明显降低(P＜0.01);抗菌肽+热应激组血清中总蛋白(TP)、球蛋白(GLO)、葡萄糖(GLU)及谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)与单纯热应激组比较均升高;总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素(UREA)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)与单纯热应激组比较明显降低;抗菌肽+热应激组SOD、GSH-Px活性与单纯热应激组比较明显升高(P＜0.01);MDA含量与单纯热应激组比较差异有统计学意义(P＜0.01)。结论 热应激条件下口服抗菌肽可以调节肉鸡血液成份及流变状态、增强体液免疫、平衡氧自由基、降低氧化应激反应,使机体有效抵抗热应激。     

南美白对虾血淋巴脂肪氧合酶的分离纯化及其生化特性研究

用羟基磷灰石柱层析法分离纯化南美白对虾血淋巴脂肪氧合酶,同时进行酶学性质及其反应产物研究,为南美白对虾资源的综合利用、虾风味形成机制的研究提供依据。结果显示:以亚油酸为底物,南美白对虾血淋巴脂肪氧合酶最适温度为25℃,最适pH9.6,最适底物浓度0.25mmol/L,Vmax值为1.67×103U/mg蛋白·min,Km值为0.5mmol/L,1mmol/L的谷胱苷肽能有效提高酶液稳定性;该酶对3种不饱和脂肪酸的亲和力依次为C20∶4>C18∶2>C18∶3;利用正相高效液相色谱分析,南美白对虾血淋巴脂肪氧合酶催化亚油酸甲酯只形成13-氢过氧化物。     

抗菌肽的研究进展

抗菌肽是指具有抵制外界微生物侵害、消除体内突变细胞的一类小分子多肽。研究表明它除了具有抗菌作用以外,还具有抗肿瘤,抗病毒和抗真菌的作用。文章对抗菌肽的分类、生物活性、作用机理、分离提取等进行了系统的分析,并阐述了抗菌肽的应用及存在的问题,为抗菌肽更深层次的研究提供参考。     

抗菌肽抗菌机理的研究现状及趋势

抗菌肽广泛存在于从原核生物到人类的各个物种有机体和机体组织中，一般都具有广谱抗菌活性，其抗菌机理近年来成为国内外研究的热点。本文综述了抗菌肽及其抗菌机理研究的最新进展，阐述了先天免疫在哺乳动物来源抗菌肽发挥抗菌活性时的重要作用，并对抗菌肽的开发应用前景进行了展望。     

柞蚕抗菌肽的防腐机理研究

报道了不同浓度的柞蚕抗菌肽对大肠杆菌Ｋ１２Ｄ３１的杀灭作用。当浓度在２％以上时，杀菌速度大细菌的增殖速度，通过蚕抗菌肽对大肠杆菌作用的电镜照片，及与山梨酸钾进行初步比较，证明抗菌肽的防腐机理为杀灭细菌。     

抗菌肽饲喂肉鸡的应用研究

研究应用抗茵肽饲喂肉鸡的效果.分别以抗菌肽、中草药和抗生素饲喂小鸡,调查各组的存活率、周净体重和周料肉比等指标,观察饲喂效果.结果表明抗菌肽发挥了预防与治疗疾病效果,抗菌肽通过促进小鸡生长,增加鸡体重及减少死淘率而提高饲料经济效率.可见抗菌肽可作为鸡的抗生素类饲料添加剂代替物进行研究开发.     

Spinigerin α抗菌肽的理化特性研究

本研究在对Spinigerin α抗菌肽成功的进行了克隆及表达的基础上,对Spinigerin α抗菌肽的理化性质,包括抑菌特性、温度、pH稳定性等外界条件对其抗菌活性的影响进行了进一步研究。研究结果表明:Spinigerin α抗菌肽的自身浓度、温度、及pH对其抑菌活性均有重要影响,对金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、大肠杆菌的最小抑菌浓度分别为1.52%、3.13%、12.5%。当抗菌肽加热至60-100℃时,抗菌肽抑菌效果依然明显,当加热至121℃时,其抑菌效果开始有下降趋势。当处于pH值6.0-8.0的近中性环境中,Spinigerin α抗菌肽的抗菌活性最强。     

天然生物防腐剂—柞蚕抗菌肽的研究

柞蚕抗菌肽是由柞蚕体内诱导产生的一类由35个氨基酸组成的具有广谱杀菌活性的多肽化合物。人畜食用后易被体内蛋白酶水解消化而对人体无毒副作用。实验表明;柞蚕菌肽对与食品腐败有关的多种革兰氏阳性及阴性细菌均有较强的杀灭作用。在酸性条件下,其抗菌活性很强,适于大多数酸性食品的防腐,其溶解性及稳定性较好。尤其是在高温条件下仍能保持很高的活性。其作用机理不同于一般化学防腐剂的抑菌作用,而是杀菌作用,是一种对人畜无毒副作用的极有前途的新型食品防腐剂。     

不同检测方法在抗菌肽抑菌效果评价的比较研究

目的:比较5种抗菌肽活性测定方法。方法:以金黄色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为实验菌株,研究牛津杯法、打孔法、滤纸片法、酶标比浊法和活菌计数法对不同质量浓度的抗菌肽抑菌活性评价的比较。结果:3种琼脂扩散定性抑菌实验中,打孔法灵敏度高,抑菌圈清晰规则,效果最好;2种定量抑菌实验中,活菌计数法结果判定更直观,灵敏度高,效果最好。结论:抗菌肽抑菌活性研究过程中,选用打孔法定性与活菌计数法定量相结合的方法,能够更全面、准确地反应其抑菌活性。     

抗菌肽的结构特征、分类、生物活性及运用前景

抗菌肽是在多种生物体中表达的具有抗菌活性的肽类物质的总称。由于抗菌肽具有普通抗生素所不具有的一系列优点,抗菌肽的研究已经成了现代学术和应用研究的一个热点。文中简要介绍了抗菌肽的发现过程,对抗菌肽的结构、分类、来源、抗菌活性等方面的研究进展进行了综述,并展望了抗菌肽研究进展及存在问题。     

酶法制备乳铁蛋白抗菌肽的工艺

乳铁蛋白具有抗菌活性,胃蛋白酶酶解乳铁蛋白时得到的乳铁蛋白多肽的抗菌活性远高于其自身。通过响应面回归分析,得到了胃蛋白酶酶解乳铁蛋白的优化条件为:底物浓度30 mg/mL、水解时间2 h、温度45℃、加酶量1%(w/w)、pH 2.5。在优化酶解条件下,水解度约为11%,抑菌率为98.8%。高效液相排阻色谱分析表明,多肽的分子质量主要分布在200～6 000 u。     

一株溶藻弧菌的分离鉴定及其对九孔鲍苗的致病性

为找到导致2002年以来中国南部沿海鲍鱼养殖大量死亡的原因,利用胰蛋白培养基或硫代硫酸盐-柠檬酸盐-胆盐-蔗糖培养基从2003年汕尾发生病害的鲍鱼中分离得到了一株具有致病性的细菌.经生理生化特性试验及与特征溶藻弧菌ATCC17749比较,此菌株为溶藻弧菌.经感染试验证明其对鲍苗的半致死量为1.58x 104 CFU/m...     

抗菌肽的定量构效关系研究进展

抗菌肽在医药、食品、农业及水产等领域具有潜在的应用价值,定量构效关系（quantitative structureactivityrelationships,QSAR）研究对于指导抗菌肽的优化设计具有重要意义。本文介绍抗菌肽在分子表征及建模等方面取得的研究进展,比较抗菌肽与其他小肽在QSAR研究中的异同,指出其中存在的问题及今后的研究发展方向。     

蛭弧菌对九孔鲍非特异性免疫力和抗病力的影响

本试验以生产的养殖池作为参照(A组),以采用15d的换水周期并往水体中添加不同浓度(分别为10<'1>pfu/mL、10<'3>pfu/mL、10<'5>pfu/mL和10<'7>pfu/mL)的蛭弧菌的养殖池为蛭弧菌添加组(分别为B组、C组、D组和E组),以溶菌酶活力、超氧化物歧化酶(SOD)活力,酸性磷酸酶(ACP...     

牛骨胶原蛋白抗菌肽的制备及其抑菌活性

以牛骨胶原蛋白为原料,采用胃蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、动物复合蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对其进行水解,确定最佳的酶解时间和酶用量,并比较酶解效果.酶解液经离心过滤和真空冷冻干燥后,测定其对金黄色葡萄球菌和肠炎沙门氏菌的抑制活性.结果表明:动物复合蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白得到的酶解液的水解度最高,其最佳的酶解时间为4h,最适宜的酶添加量(占骨质量的百分比)为1.25%;风味蛋白酶和中性蛋白酶的酶解液对金黄色葡萄球菌具有抑菌效果,其抑菌圈直径分别为6.03mm和7.97mm;动物复合蛋白酶、风味蛋白酶和胰蛋白酶对肠炎沙门氏菌具有抑菌效果,其抑菌圈直径分别为8.67、9.10、9.03mm.     

抗菌肽多靶点作用抑菌机理研究进展

病原微生物引起的感染性疾病严重威胁人类公共安全,特别是多重耐药性细菌。抗菌肽可使细菌不产生耐药性或降低耐药性,而且具有热稳定性好、抑菌活性高、特异性强、对哺乳动物细胞毒副作用少等优势,具有主动防御和免疫等生理功能,有望成为抗菌药物最理想替代品。抗菌肽对细胞具有多靶点单独或协同抑菌作用,因此研究抗菌肽多作用靶点抑菌机制对抗菌肽应用研究具有重要指导意义。作者从细胞壁损伤机制、细胞膜损伤机制、胞内生物大分子合成影响机制、物质与能量代谢关键酶活性影响机制、线粒体损伤机制和免疫调节机制等多作用抑菌靶点视角对抗菌肽抑菌机理进行了系统综述,并对抗菌肽抑菌机理研究进行了展望,以期为抗菌肽抑菌机理研究提供参考。     

植物抗菌肽的研究进展及其应用

抗菌肽是生物体先天免疫系统的重要组成部分,它们从广泛的生物体中分离得到,包括细菌、植物和动物。在过去的20年里,随着抗菌肽的不断被发现,抗菌肽的数量在快速的增长,它们的广谱抗菌活性也在被深入的研究。植物抗菌肽是从植物中分离得到的,与其他生命形式的抗菌肽存在许多不同点。常见的植物抗菌肽类型包括硫堇、植物防御素、橡胶蛋白、Knottins、脂转移蛋白和Snakins。由于病原微生物对抗生素的耐药性不断增强,因此迫切需要找到可以替代传统抗生素的药剂。植物抗菌肽具有广泛的生物活性,包括抗细菌、抗真菌、抗病毒、杀虫和抗癌,所以它们有希望成为治疗由病原体引起动物和人类感染的药物的候选者。植物抗菌肽发挥生物活性的机制是我们研究的重要方向,有助于找到治疗疾病的新疗法。本文主要阐述了植物抗菌肽的分类、分布、功能和作用机制;微生物对植物抗菌肽的抵抗机制;植物抗菌肽的发展前景。