变色圈法筛选高产氨基酰化酶米曲霉菌株

将变色圈法用于筛选高产氨基酰化酶的米曲霉菌株,减少了筛选过程的工作量、缩短了筛选周期。通过实验验证了该方法在筛选高产氨基酰化酶米曲霉菌株时的可行性,并将其用于筛选经紫外线和硫酸二乙酯复合诱变的米曲霉。从突变株中获得了一株高产氨基酰化酶菌株W53,对其生长特性和产酶特性进行了研究。结果表明,米曲霉的氨基酰化酶是生长偶联型,菌体生物量和氨基酰化酶活力同时达到最高;突变株W53和出发菌株W19的产酶过程基本一致;W53拆分N-乙酰-DL-蛋氨酸的酶活力最高可达2569 U/g,比出发菌株W19提高了14.9%。     

常压室温等离子体诱变选育高产曲酸米曲霉

以米曲霉KA2308作为出发菌株,首次利用常压室温等离子体诱变技术选育高产曲酸菌株,通过96孔板高通量筛选获得一株曲酸生产菌KA1515,曲酸产量提高到47.28g·L-1,比出发菌株提高了31.48%,经过多次传代,曲酸产量仍比较稳定。表明采用常压室温等离子体诱变能有效提高米曲霉曲酸产量。     

从液相培养米曲霉体中提取氨基酰化酶

液相培养米曲霉茵体具有生长速度快;茵体和培养基易分离等优点,培养得到的氨基酰化酶主要存在于细胞内,而α-淀粉酶则主要存在于发酵液中.通过细胞破碎、抽提和(NH4)2SO4分步盐析,再经聚乙二醇浓缩后得到的氨基酰化酶液的酶活为1 067 U·ml-1,纯化了1.99倍,总收率为77.86%;用丙酮沉淀法从发酵液中沉淀分离得到的口α-淀粉酶粉的酶活可达1 195.3U·g-1,纯化了2.6倍,最终收率为89.8%.从米曲霉的液相培养发酵物中同时提取两种工业用酶,工艺简单,酶活收率高,无需复杂的精制过程.     

培养基组成对米曲霉产氨基酰化酶的影响

氨基酰化酶是一类能够水解N-酰基-DL-氨基酸上酰胺键的酶。通过单因素实验和正交实验,对米曲霉产氨基酰化酶的培养基组成进行了优化,以提高其产量。确定较优培养基组成为:麸皮2%、尿素1.5%、磷酸二氢钠0.3%、硫酸镁0.35%、Tween-80 0.1%,在此培养基上得到的氨基酰化酶单位酶活可提高到440.51μmol.g-1.h-1。     

粪产碱杆菌D-氨基酰化酶的分离纯化及发酵条件优化

采用热激法将含粪产碱杆菌D-氨基酰化酶基因载体的质粒导入大肠杆菌,筛选重组子,对该工程菌产生的D-氨基酰化酶用Ni 2+柱进行分离纯化;通过单因素实验优化D-氨基酰化酶的发酵条件。结果表明,纯化后的D-氨基酰化酶比活力为456.71U·mg-1,纯化回收率为50%,纯化倍数为12.4倍;最佳发酵条件为:37℃通气培养至菌体浓度OD600值为0.6时,加入0.5mmol·L-1诱导剂IPTG诱导5h,在此条件下,D-氨基酰化酶酶活力为90.9U·mL-1。     

产D-氨基酰化酶菌株的筛选及活性菌株A55的初步研究

从氨基酸类化工厂附近土样中筛选产D-氨基酰化酶的菌株,并对活性较高的菌株进行了菌种鉴定及培养条件的初步优化。利用N-乙酰基甲硫氨酸作为分离培养基中的唯一碳氮源,从8份土样中筛选了约500株菌,其中菌株A55酶活力及稳定性均较高。通过形态学观察、生理生化特征测定及16SrDNA系统发育分析对菌株A55进行菌种鉴定,并采用单因素法考察了影响D-氨基酰化酶合成的因素。结果表明,菌株A55属于耐寒短杆菌,其最佳产酶发酵条件为:培养温度30℃,培养基初始pH值7,摇床转速200r·min-1,摇瓶装样量15%,培养时间48h。另外,碳氮源的添加虽然有利于菌体的生长,但是不利于D-氨基酰化酶的合成。     

米曲霉氨基酰化酶拆分DL茶氨酸

DL-茶氨酸经乙酰化可生成N-乙酰-DL-茶氨酸，然后利用米曲霉氨基酰化酶拆分N-乙酰-DL-茶氨酸可以获得L-茶氨酸。本文对氨基酰化酶酶促反应也进行了初步研究，考察了反应温度、反应时间、pH值和底物浓度等因素对酶促反应的影响。实验表明，转化温度40℃、转化时间30h、pH为7．0和底物浓度0．2mol／L时，目的产物L-茶氨酸的产率最高。     

原生质体复合诱变选育刺芹侧耳木质素降解酶高产菌株

通过对刺芹侧耳(Pleurotus eryngiiGIM5.280)原生质体开展复合诱变及传代培养,以期得到遗传稳定的木质素降解酶高产菌株。结果表明,通过25s紫外诱变刺芹侧耳原生质体,正突变率达16%。对紫外诱变正突变株进行60Coγ二次复合诱变再生,获得五株正突变突出菌株。经过摇瓶发酵实验,发现这五株菌株产木质素降解酶能力较出发菌株明显提高。同时开展高产菌株的传代培养,检验其传代稳定性。连续传代四代测试结果表明,007号和167号菌株遗传的稳定性表现突出,发酵液中木质素降解酶产量稳定。尤其是007号菌株产酶可达到110U·mL-1,比出发菌株的酶活表达量提高54.3%。复合诱变能明显提高刺芹侧耳产木质素降解酶能力。     

复合诱变选育纤维素酶高产菌株

以绿色木霉为原始菌株,以纤维素酶酶活为考察指标,进行纤维素酶高产菌株的筛选。首先进行紫外诱变,筛选得到一株纤维素酶高产菌株A4,其羧甲基纤维素酶酶活和滤纸酶活为35.36 U/mL和25.30 U/mL,较出发菌株提高了26.37%和16.00%。继续用A4进行亚硝酸钠诱变,得到纤维素酶高产菌株F1,其羧甲基纤维素酶酶活和滤纸酶活为44.29 U/mL和29.00 U/mL,较出发菌株提高了24.90%和14.62%。     

亚硝基胍-紫外复合诱变选育高产衣康酸菌株

为提高土曲霉KYK-031发酵生产衣康酸能力,对出发菌株开展诱变育种和高产能力选育研究。采用亚硝基胍（NTG）和紫外（UV）复合诱变方法,通过平板初筛和摇瓶复筛,筛选衣康酸高产突变株。结果表明,亚硝基胍在500μg/mL浓度下的最佳诱变时间为40 min,15 W紫外诱变的最佳诱变时间为2 min,亚硝基胍-紫外复合诱变后筛选得到一株衣康酸高产菌株KYK-1035,摇瓶发酵产量为73.7 g/L,比出发菌株（41.8 g/L）提高了76.3%,糖酸转化率为63.4%。采用亚硝基胍-紫外复合诱变,提高了出发菌株诱变的正突变率,为衣康酸发酵继续放大和工业化生产奠定了基础。     

Lint on cottonseed by analysis and by nature

The quantative analysis for lint on cotton-seed is successful in the laboratory, in that reproducible results can be obtained. The percentage of lint found cannot be translated to reliable predictions of actual yield values because of the effect on delinting efficiency of variations in seed size and shape, and the proportionate distribution of long and short fibers. Analysis for residual lint on delinted seed does not indicate the cellulose content of second cut linters.     

Mesoporous Silica by Solution-Combustion Synthesis Followed by Etching

Mesoporous silica was synthesized through the solution-combustion process followed by etching with aqueous solution of sodium dodecyl sulfate (SDS). Combustion products were characterized by XRD, FTIR, SEM, TEM, HRTEM, and BET analysis. After etching, the specific surface, mean pore size, and volume of porous space in silica increased up to 390 m²/g, 15 nm, and 1.6 cm³/g, respectively. The synthesized mesoporous silica exhibited good performance in the tests on elimination of methylene blue from aqueous solution.     

钼系催化丁二烯溶液聚合原位包覆硅藻土

以辛醇取代的MoCl5和Al(i-Bu)3催化丁二烯在硅藻土微孔中进行原位聚合,再用此聚丁二烯同丁苯橡胶(SBR)共混。结果表明,反应具有较好的活性,聚丁二烯能够很好地包覆硅藻土,改善了硅藻土和SBR基体的相容性,提高了硅藻土与SBR共混复合材料的力学性能。     

氨吸收制冷工艺与压缩制冷工艺的比较

介绍了氨吸收制冷工艺和压缩制冷工艺,并进行了两种工艺的比较,大型煤气化和液化生产企业中采用氨吸收制冷工艺,既回收了余热,又节省了电能,具有很好的经济效益。     

Hydrogen adsorption by nanostructured carbons synthesized by chemical activation

In this work several samples of Quercus agrifolia activated carbon, the porous structure of which was nanostructured by chemical activation with NaOH and KOH, were evaluated for hydrogen adsorption at 77 K and atmospheric pressure. Hydrogen adsorption reached values in the order of 2.7 wt.% for KOH activated carbon. The mechanism of formation of the porous nanostructures was found to be the key factor in controlling the hydrogen adsorption capacity of chemically activated carbon.     

计算机辅助不同溶剂系统两次展开最优化分离

用计算机辅助 ,在两组不同溶剂系统中用两次展开技术与计算机扫描技术相结合来优化展开条件 ,取得了比较满意的结果。