壳聚糖酶高产菌株的筛选及其发酵产酶条件的研究

采用透明圈法,通过大量筛选从土样中分离得到4株产壳聚糖酶的菌株,经摇瓶复筛培养,发现菌株KD03产酶能力最强。对其产酶条件进行优化研究,结果显示其产酶最适培养基组分为(c/0,w/v):蛋白胨0.3,K2HP04 0.1,KCl 0.5,MgSO4.7H2O 0.1025,FeSO.47H2O 0.00183,壳聚糖2.0,pH 5.5。最适产酶培养条件为:装液量为100 mL/500 mL三角瓶,摇床转速160r.min-1,40℃培养48 h,酶活可达0.127 U·mL-1。     

耻垢分枝杆菌产乳酸氧化酶条件的研究

以1株耻垢分枝杆菌(Mycobacterium smegmatis)为出发菌株,对其产乳酸氧化酶的培养基和发酵条件进行研究。结果表明,培养基中添加3%甘油,0.4%蛋白胨,1%DL-乳酸,0.005%VB1,0.05%KH2PO4.H2O,0.05%MgSO4.7H2O,0.01%硫酸亚铁胺有助于产酶;优化培养条件为:250 mL三角瓶中装液量50 mL,起始pH7.2,培养温度37℃,静置培养4 d,乳酸氧化酶平均酶活为65.4 U/mL。     

天山冰川假单胞菌产低温脂肪酶发酵条件优化及酶学性质研究

针对一株从天山一号冰川沉积层中得到的假单胞菌T1-39,优化其产低温脂肪酶发酵条件,研究低温脂肪酶部分酶学性质,采用p-NPP法测定酶活力,设计产酶培养基成分及培养条件。确定产酶培养基成分为:葡萄糖5 g/L、胰蛋白胨5 g/L、(NH4)2SO4 5 g/L、K2HPO4 2 g/L、橄榄油乳化液50 mL/L、MgSO4·7H2O 0.5 g/L。优化后培养条件为250 mL摇瓶装液量为20 mL,培养温度15℃,初始pH为9。在优化发酵条件下,菌株发酵液低温脂肪酶酶活力可达到9.77 U/mL,较优化前(3.14 U/mL)提高了3.11倍。粗酶液最适反应温度为30℃,在60℃处理30 min后仍有40%的酶活,最适pH值为9,Mg2+、Zn2+、Ni2+、Ba2+对粗酶液有激活作用,而Sn2+、Cu2+对酶活均有不同的抑制作用。     

产过氧化氢酶菌株培养条件的优化

通过对溶壁微球菌培养基优化,确定最佳发酵培养基,并对发酵工艺条件进行了初步的优化.最适碳源是麦芽糖,最适氮源是蛋白胨和酵母膏,最近无机盐是MnSO4;该菌株产酶的最佳培养基配方为:60 g麦芽糖,13 g蛋白胨,8 g酵母膏,1 g MnSO4,5 g NaCl,2 g NaH2 PO4·2H2O,2 g K2HPO4·3H2O,0.5 g MgSO4·7H2O,0.5 g CaCl2,1 000 mL水.从该菌株发酵过程曲线发现,该菌株大量产酶期在12-14 h.摇瓶发酵最适初始pH值为7.0,250 mL三角瓶装液量为25mL,接种体积分数为5%,培养温度为37℃.     

嗜盐嗜碱菌Alkalibacterium sp. F26产碱性果胶酶发酵条件的优化

对Alkalibacteriumsp.F26发酵产碱性果胶酶的培养基和培养条件进行了优化.考察了碳源、氮源、无机盐、表面活性剂及起始pH、发酵时间、温度等发酵条件的影响.经单因素和响应面分析试验得到适宜的发酵培养基为(组分g/dL):葡萄糖0.95,蛋白胨1,NaCl 6.3,MgSO4.7H2O0.02,K2HPO4.3H2O 0.1,NaCO31,吐温-80 1;培养条件为:250 mL三角瓶装液量25 mL,35℃,起始pH值11.25,培养24 h.在此优化条件下培养,酶活达1 015 U/mL.     

几丁质酶菌株L012的产酶条件研究

在前期实验的基础上,进一步对优良菌株L012的产酶条件进行了研究.结合单因素实验和正交实验结果,确定了该菌株的最佳产酶培养基组成(g/L):细粉几丁质10,淀粉3,玉米浆3,NaNO3 1.0,K2HPO4 1.05,KH2PO4 0.45,NaCl 0.1,MgSO4·7H2O 0.3,FeSO4·7 H2O 0.03,pH 7.0;最佳培养条件:起始pH 7.0,培养温度30 ℃,摇瓶装液量30 mL,摇床转速180 r/min,接种菌龄24h,接种量10％,发酵时程48 h.条件优化后,菌株L012产酶水平从原来的0.75 IU/mL提高到2.31 IU/mL.     

嗜热β-葡聚糖酶产生菌的筛选及其培养基优化研究

以大麦β-葡聚糖为唯一碳源,从吐鲁番地区采集的土样中筛选到1株热稳定性β-葡聚糖酶产生菌株XTP-5,经初步鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。对该菌株产酶培养基优化实验结果表明:最佳培养基配方:麦糟粉20g/L、酵母粉4/L、K2HPO41.0g/L、NaCl0.5g/L、FeSO·47H2O0.01g/L、MgSO·47H2O0.5g/L、(NH4)2SO42.0g/L、Tween-800.06%。接种上述液体培养基(pH7.0)中,于37℃、180r/min摇瓶培养60h达到产酶高峰,酶活力可达9.52U/mL。     

响应面法优化假单胞菌TS1138的产酶条件(英文)

以假单胞菌(Pseudomonas sp.)TS1138为供试菌株,运用响应面法对酶法合成L-半胱氨酸所用酶的生产条件进行优化。首先利用Plackett-Burman设计从影响TS1138菌株产酶的众多因素中筛选出影响较大的四个因素:DL-ATC 、玉米浆、转速和装液量。在此基础上再利用二次响应面分析法进行优化,得出了最佳的实验条件。最佳产酶培养基配方为(g/L):葡萄糖 30、DL-ATC·3H2O 3.0、玉米浆 3.1、尿素 3、MnSO4·H2O 1、K2HPO4·3H2O 3、FeSO4·7H2O 0.01、MgSO4·7H2O 0.5、NaCl 3;最佳产酶培养条件为:摇床转速 190r/min、500ml摇瓶装液量 42ml、接种量 10%、产酶培养基初始 pH7.5、培养温度 29℃。在优化条件下进行产酶培养,细胞酶活力达 2255U/ml,比未优化前的 2053U/ml 提高了 9.8%。     

解纤维热酸菌产L-阿拉伯糖异构酶的培养条件优化

解纤维热酸茵SKI.009发酵产生合成塔格糖所需的L-阿拉伯糖异构酶,通过单因素与正交实验优化确定产酶培养基条件.结果表明,发酵最佳条件(g/L):可溶性淀粉8、蛋白胨鱼粉1、L-阿拉伯糖1.5、NH、CI 1、KH2PO4 1、Na2HPO4·12H2O 0.135、MgSO4·7H200.2、CaCi2 0.15,发酵初始pH4.5,培养温度55℃,接种量4%,培养时间60h.在该最佳培养基下发酵产生酶活为0.184U/mL.     

响应面法优化桔青霉产核酸酶P1培养基

采用响应面方法对桔青霉产核酸酶P1的发酵培养基进行优化。首先通过Plackett-Burman实验,筛选出3个主要的影响因素:葡萄糖、CaCl2和ZnSO4.7H2O。然后运用爬坡路径法对这3种因子进行实验,获得这3种重要因子的最适质量浓度范围。最后通过响应面分析法,得出3种重要影响因子的交互作用及最佳条件。确定桔青霉产核酸酶P1的最佳发酵培养基为:葡萄糖51.82g/L,蛋白胨3g/L,KH2PO4和K2HPO4各0.3g/L,CaCl20.52g/L,MgSO4·7H2O0.6g/L,ZnSO4·7H2O0.34g/L,吐温-802mL/L,在此最佳培养基下发酵酶活可达419.7U/mL,比优化前提高了31.8%。     

3-苯氧基苯甲酸降解酶产生条件的优化

采用Plackett-Burman法考察了K2HPO4、KH2PC4、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、3-苯氧基苯甲酸浓度和初始pH、装液量及接种量8个因素对产酸克雷伯氏菌生成3-苯氧基苯甲酸降解酶的影响,并利用Box-Behnken实验设计及响应面分析对其产酶条件进行了优化.结果表明,培养基中(NH4)2SO4浓度、培养基装液量和接种量对菌体产生3-苯氧基苯甲酸降解酶的影响具有显著性;当培养基中K2HPO4浓度为2.0g/L、KH2PO4浓度为0.5g/L、MgSO4·7H2O浓度为0.2g/L、(NH4)2SO4浓度为0.9g/L、3-苯氧基苯甲酸浓度为200mg/L、初始pH为7.2、250mL锥形瓶装液量为56.6mL、接种量(种子液OD600为1.000)为5.9%(v/v)时,3-苯氧基苯甲酸降解酶的活力可达25.72U/mL.     

褶皱假丝酵母产脂肪酶条件及酶学性质研究

对一株来源于海洋有产脂肪酶能力的褶皱假丝酵母产酶条件进行研究,探讨了碳源、氮源、pH、培养温度对该菌产脂肪酶的影响。结果显示:在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:蔗糖5 g/L,橄榄油5 g/L,MgSO4·7H2O1 g/L,K2HPO41 g/L,(NH4)2SO410 g/L,起始pH为7.0,接种量10%,在30℃、200 r/min下培养36 h,产酶能力达到4 351.6 U/mL。该菌所产脂肪酶的最适反应pH为7.0,最适反应温度为37℃,Ca2+、Mg2+对酶活有一定的促进作用。     

多粘类芽孢杆菌20185液态发酵产碱性果胶酶发酵条件的研究

对多粘类芽孢杆菌20185发酵产碱性果胶酶的培养基和发酵培养条件进行了优化.经单因素和正交试验得到最优发酵培养基组成为(g/L):果胶10.0,蛋白胨20.0,K2HPO4·3H2O 6.0,KH2PO4 3.0,NaCl 10.0,MgSO4·7H2O 0.2,SDS 1.0.发酵最佳培养条件为:250mL三角瓶装液量为50mL,种龄24h,接种量9％,初始pH值9.0,温度35℃,培养36h.在此优化条件下,酶活为311U/mL.     

漆酶高产菌的筛选及产酶优化

采用愈创木酚初筛平板从干枯的木头中筛选得到一株产漆酶活力较高的菌株SYBC-L3(以下简称L3),在含有愈创木酚的PDA平板上生长时菌落周边出现明显的铁红色变色圈.通过对L3发酵产漆酶的单因素试验及L9(34)正交试验,确定了最适发酵条件,优化后的培养基为:麦芽糖 12 g/L, 豆粕 6 g/L,CuSO4 0.5 g/L,KH2PO4 1 g/L,Na2HPO4 0.2 g/L,MgSO4 ·7H2O 0.5 g/L,MnSO4 0.034 g/L, 愈创木酚0.8 mmol/L,吐温-80 0.5g/L;优化后的培养条件为:接种量10%(V/V),装液量80 mL/250 mL, 起始pH 4,转速200 r/min,温度30 ℃,以DMP为底物在第8天时酶活可达60 130 U/L,比优化前提高42倍.     

弹性蛋白酶高产菌株摇瓶发酵条件优化研究

对假单胞菌属B菌种发酵条件进行了优化,B菌株生产弹性蛋白酶的最适发酵条件为:0.5%葡萄糖、3%干酪素、1%酵母膏、0.2%K2HPO4、0.01%MgSO4·7H2O;起始pH为7;最适发酵温度为28℃;装液量为20mL;接种3%、种龄为12h的种子培养液;B菌株在24h左右产弹性蛋白酶的量达到最高,为23.3U/mL。     

产β-甘露聚糖酶菌株的筛选及其产酶培养基的优化

从土壤中分离筛选出5株产胞外β-甘露聚糖酶的菌株,其中XB2菌株的摇瓶培养液的粗酶活力达4.81U/mL。通过单因素实验和正交优化实验,确定了菌株产酶最适培养基组成(%)为:魔芋精粉1.5,NaNO3 0.3,MgSO4 0.3、KCl0.5、K2HPO40.1、FeSO4 0.001。此条件下酶活力高达9.12U/ml。     

三色革裥菌胞外漆酶发酵条件及部分特性研究

对三色革裥菌(Lenzites tricolor)漆酶的性质进行了初步研究,得到该酶最适反应温度为40℃,最适反应pH值为6.0.并通过正交实验研究了碳源、氮源、木素类似物以及初始pH值对该菌产胞外漆酶的影响.得到最佳培养基为:淀粉20g/L,牛肉蛋白胨2.0g/L,Na2HPO4·12H2O 0.47g/L,KH2PO4 0.45g/L,MgSO4·7H2O 0.5g/L,CaCl2 0.01g/L,MnSO4·4H2O 0.001g/L,FeSO4·7H2O 0.001g/L,ZnSO4·7H2O 0.001g/L,CuSO4·5H2 O 0.001g/L,愈创木酚0.062g/L及VB1 50μg,高压灭菌后pH值约5.0.在此基础上检测了不同培养方式下漆酶活性、菌丝绝干质量、残糖量及pH值变化情况,确定最佳培养方式为母液和发酵液均为静置培养.     

脂肪酶产生菌NJY-1-7的选育及发酵条件的研究

从云南省福贡县的玉米地土壤样品中筛选到一株耐高温产碱性脂肪酶的菌株NJY-1-7,通过16SrDNA鉴定该菌株为伯克氏菌(Burkholderia cenocepacia)。对其发酵条件进行研究结果表明:该菌株产酶的最适培养时间为48h,酶促反应的最适作用pH值为9.0,最适作用温度为50℃,摇瓶发酵最适产酶条件为橄榄油1%,MgSO4.7H2O 0.05%,可溶性淀粉0.3%,酵母膏0.5%,单蒸水70mL。在此条件下发酵脂肪酶酶活力为42.00U/mL。     

中性蛋白酶高产菌株的筛选及产酶条件的优化

从土壤中筛选出6株中性蛋白酶菌株,并对其中酶活力较强的1株枯草芽孢杆菌的发酵产酶条件进行了优化。最终得到最佳培养基配方为:玉米粉1%、硫酸铵0.6%、麸皮3%、Na2HPO4·12H2O 0.4%,KH2PO40.03%,CaCl20.1%,pH 6.0。最适培养条件为:发酵时间48 h、发酵温度30℃,酶活力最高可达1 475.6 U/mL。     

产烟碱脱氢酶菌株节杆菌Z3的发酵条件研究

以卷烟厂堆积烟尘的土壤中分离得到的产烟碱脱氢酶菌株节杆菌Z3(Arthrobacter Z3)为初发菌株,通过正交试验,对其发酵培养基进行优化,并对发酵条件(初始pH值、接种量、温度、转速、最佳发酵时间)进行了研究。获得的最佳摇瓶发酵配方为:2.5%烟末提取液、0.1%豆粉、0.1%硫酸铵、1.33%K2HPO4.3H2O、0.4%KH2PO4、0.02%MgSO4.7H2O、0.004%MnSO4.4H2O、0.002?Cl2.2H2O。最适发酵产酶条件为:温度30℃,摇床转速220r/min,发酵时间9h,初始pH7.0,接种量6%。