三氧化二铝柱层析法分离大豆磷脂中磷脂酰胆碱的研究

研究了三氧化二铝柱层析法,以95%乙醇为洗脱剂从大豆磷脂中分离磷脂酰胆碱的方法。通过本方法可使磷脂酰胆碱的含量及柱上的洗脱得率达90%以上,为用色谱法工业化生产磷脂酰胆碱提供了实验依据。     

无水乙醇萃取联合氧化铝柱层析制备高纯磷脂酰胆碱

以大豆粉末磷脂为原料,采用无水乙醇萃取和氧化铝柱色谱相结合的技术,研究了高纯度磷脂酰胆碱的制备方法。乙醇萃取后磷脂酰胆碱的纯度为62.00%,得率为31.94%。主要考察了柱层析过程中的固定相、洗脱液浓度、上样量、料液比及洗脱液流速对分离效果的影响。结果表明：当固定相为100～200 目三氧化二铝、洗脱液为90%乙醇、上样量为1 g/30 g、料液比为1∶12（g/mL）、洗脱液流速为3.0 mL/min时,磷脂酰胆碱的纯度可达到94.52%,回收率为83.71%。该研究结果为进一步探讨工业化制备磷脂酰胆碱的研究提供了技术支持和数据支撑。     

醇相体系制备高纯甘油磷脂酰胆碱的研究

探讨了在醇相体系中甲醇钠催化制备甘油磷脂酰胆碱(L-alpha glycerylphosphorylcholine)的可行性,建立了磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine)和L-α-GPC的HPLC-ELSD检测方法,研究了温度、料液比、甲醇钠添加量、反应时间对PC转化率和GPC得率的影响。利用Design Expert软件对工艺参数进行优化,得最佳条件:温度35℃、料液比3/20(g/mL)、甲醇钠添加量2 mL、反应时间1.5 h,GPC得率为88.2%。极差分析结果,反应条件对GPC得率影响的顺序为:甲醇钠添加量>温度>反应时间>料液比。大豆粉末磷脂的醇解反应液经过硅胶柱色谱纯化,最终可以得到纯度为99.8%的L-α-GPC,回收率78.4%,这为工业级规模制备高纯L-α-GPC提供了一种好的思路和方法。     

柱色谱纯化溶血磷脂酰胆碱的方法研究

利用磷脂酶A1水解蛋黄磷脂酰胆碱制备溶血磷脂酰胆碱(LPC),探讨柱色谱纯化溶血磷脂酰胆碱的可行性。通过实验确定固定相为硅胶,洗脱液为甲醇-氯仿(体积比为2.5∶1),进行LPC的纯化方法研究。得到最佳工艺条件为硅胶粒径为38～48μm,上样质量为300 mg(固定相质量为10 g),样品浓度为30 mg/mL,在最佳工艺条件下得到LPC产品的纯度为93.09%,回收率为82.06%,为工业上提纯LPC提供理论指导。     

柱层析法分离纯化大豆磷脂酰胆碱

利用硅胶柱层析法,通过梯度洗脱对大豆粉末磷脂中的磷脂酰胆碱进行分离纯化.比较氯仿/甲醇和异丙醇/甲醇两个洗脱体系所得磷脂酰胆碱的纯度和回收率.梯度洗脱时,在氯仿/甲醇体系中氯仿:甲醇的比例为3:2(体积分数),异丙醇/甲醇体系异丙醇:甲醇的比例为1:1(体积分数)洗脱,是获得磷脂酰胆碱的最佳洗脱条件.结果表明:在氯仿,甲醇洗脱体系获得磷脂酰胆碱的纯度为97.0%、回收率为86.5%.异丙醇/甲醇洗脱体系获得磷脂酰胆碱的纯度为95.0%、回收率为83.0%.     

高纯度磷脂酰胆碱研制

高纯度磷脂酰胆碱(PC)作为药物脂质体重要原料之一,是当今药物研究新成果及研究热点。该研究报道采用层析分离法提纯卵磷脂,并对物料浓度、填充剂、洗脱剂、及干燥等工艺参数进行研究,制备成PC含量达90%以上高纯度产品。     

树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱

研究了树脂柱色谱纯化甘油磷脂酰胆碱(L-α- GPC)的可行性,通过树脂筛选,确定D001大孔阳离子交换树脂为最佳纯化树脂,并对纯化工艺条件进行了优化.通过静态实验得到最优条件:上样质量浓度1.52 mg/mL,样品溶液pH为7,吸附时间300 min,解吸液为去离子水.在静态实验的基础上,进行了树脂柱色谱纯化L-α - GPC的动态实验,对吸附流速、解吸液和解吸流速进行优化.动态实验最优条件:吸附流速2 mL/min,解吸液为去离子水,解吸流速2 mL/min.依据动态实验最优条件,最终L -α- GPC的纯度为96％,回收率为54.1％,这表明树脂柱色谱纯化L-α - GPC的方法是经济、方便、可行的.     

柱色谱法分离甘油磷脂酰胆碱的研究

通过大豆粉末磷脂水解获得甘油磷脂酰胆碱(GPC)混合物,然后从3种典型的离子交换树脂中筛选出D113树脂作为分离GPC的主要树脂,研究了不同pH的解吸液对柱色谱分离GPC的影响。研究表明,不同条件下各组分的洗脱曲线和GPC纯度具有较明显的变化,pH接近7的情况下,在整个解吸过程中GPC纯度均较理想。解吸液通过特定的阴离子交换树脂的进一步纯化,所得产品经过HPLC分析,GPC的干基含量为97.11%。     

磷脂及磷脂酰胆碱生物学功能

本文研究了磷脂的生物学功能及机理,认为在磷脂中,磷脂酰胆碱是最值得关注的磷脂之一。     

HPLC-ELSD法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量

该研究探讨采用HPLC–ELSD(蒸发光散射检测器)法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱和溶血磷脂酰胆碱含量。结果表明,选用硅胶色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),磷脂酰胆碱(PC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)分别在0.5 mg/mL~8.0 mg/mL和0.4 mg/mL~6.0 mg/mL范围呈良好线性关系;PC和LPC平均回收率为99.42%和99.83%,相对标准偏差(RSD)分别为1.44%和1.21%。该法对大豆磷脂PC和LPC分析均具有良好精密度和重复性。     

柱层析法分离大豆磷脂

通过实验探讨了使用低压制备色谱柱在等度洗脱方式下分离大豆磷脂中的磷脂酰肌醇(PI)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰胆碱(PC)等成分.结果表明,在使用100cm×26 mm规格的色谱柱、氯仿-甲醇(2∶1)作为流动相、流速控制在3.0 mL/min,负载量为0.25 g/150 g硅胶(100～200目)的条件下可以分离得到PI纯度在90%以上、PE纯度在80%以上、PC纯度在95%以上的各种产品.     

柱色谱法制备高纯大豆卵磷脂和脑磷脂研究

以大豆油脚为原料,采用溶剂萃取法和柱色谱法相结合的工艺制备高纯卵磷脂和脑磷脂,研究了不同洗脱剂及不同洗脱模式对卵磷脂和脑磷脂柱色谱分离效果的影响.实验结果表明:大豆油脚先经脱水、脱油,再经95%乙醇浸提后粗分为粗卵磷脂和粗脑磷脂,以硅胶为吸附介质,分别进行柱色谱分离.粗卵磷脂为原料用无水甲醇作为洗脱剂等度淋洗,可获得大量相对含量为91.9%的卵磷脂和少量含量为74.2%的脑磷脂产品;粗脑磷脂为原料用氯仿-甲醇(2:1,V/V)、无水甲醇的梯度淋洗模式,可获得少量含量96.7%的高纯卵磷脂和大量含量82.1%的脑磷脂产品.     

高效液相色谱法测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量

目的建立高效液相色谱法(highperformance liquid chromatography,HPLC)测定大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的分析方法。方法采用高效液相色谱仪、Kromasil 100-5-SIL硅胶柱,以流动相正己烷:异丙醇:水=0.25:4:1(V:V:V),流速为0.5 mL/min,检测波长为207 nm,柱温为30℃,进样量10μL,进行检测。结果磷脂酰胆碱浓度为0.1～2.0mg/mL时,线性关系良好,回归方程的相关系数r2=0.9998,相对标准偏差(relative,standarddeviation,RSD)为0.50%,平均回收率为98.01%～98.73%。结论该方法高效,准确,简便,适合于检测大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱的含量。     

Separation of phospholipids from hen egg yolk by short packed silica gel column chromatography

Short packed silica gel column chromatography has been performed to optimize the production of phosphatidylethanolamine (PE) and phosphatidylcholine (PC) from hen egg yolk with very low or no toxic solvents. The effects of silica type, sample loading amount, dimension of the glass chromatotube, and mobile phase compositions were investigated and high separation efficiency was achieved: gradient elution as 200 mL ethanol followed by 300 mL 95% ethanol to fractionate PE and PC after neutral lipids (NL) removed by 120 mL ethyl acetate, 40 mm silica gel (54 to 74 μm) bed height of the chromatotube with 22 mm inner dia (ID), and 0.25 g sample loading amount. By this procedure, 3.69 g PE and 2.88 g PC per 100 g egg yolk lipids were obtained, respectively. The refined PE and PC were identified by high-performance liquid chromatography/ultraviolet detector (HPLC-UV) with purity over 96%. The fatty acids in egg yolk revealed that PE and PC characterized higher ratios of n- 6/n- 3 (PE, 7.41; PC, 8.99). 18:2 n- 6 of PC (15.21%) predominated over PE (10.29%), whereas the level of 20:4 n- 6 of PC (8.78%) was lower than PE (15.67%).     

正相色谱法测定大豆磷脂中的磷脂酰胆碱

目的建立正相色谱法测定大豆磷脂中磷脂酰胆碱含量,用于大豆磷脂类保健食品生产过程中该物质含量的测定和质量控制。方法采用硅胶柱(4.6 mm×250 mm,5.0μm)进行分离;色谱条件为流动相:异丙醇:正己烷:蒸馏水=70:16:14(V:V:V),等度洗脱,流速:1.0 m L/min;柱温:40℃;进样量:10μL;检测波长:205nm;并进行方法学验证,考察方法检测限、精密度、回收率等指标。结果磷脂酰胆碱峰面积与其浓度呈良好的线性关系,线性范围为0.1~0.8 mg/m L(r=0.9999),检出浓度0.04μg/m L,检出限为20μg/g,定量限为66.666μg/g,精密度(RSD)为0.6%,平均回收率99.37%(n=9)。结论本文建立的方法灵敏度高,重复性好,且具有很好的专属性,能够应用于大豆磷脂类保健食品中磷脂酰胆碱含量的检测。     

高效液相色谱法测定牛奶中磷脂酰胆碱的含量

目的建立高效液相色谱法测定牛奶磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine, PC)含量的分析方法。方法对高效液相色谱法测定条件进行优化,包括流动相选取、柱温选取和流速选取问题。其中,在V(乙腈):V(甲醇):V(水)=600:200:5的条件下进行不同浓度PC标准溶液的响应值分析试验;在60℃柱温条件下进行PC分离效果试验;选取流速为0.6 mL/min,进行PC溶液洗脱分析试验。最后采用高效液相色谱法,进行牛奶磷脂酰胆碱含量测定,并根据试验结果绘制标准曲线。结果 PC的平均加标回收率在90.8%～96.53%之间,相对标准偏差是2.82%～9.81%。5份牛奶样品测定含量的相对误差在5%以内,满足要求。结论该方法准确、可行、高效,适用于牛奶磷脂酰胆碱含量的测定。     

尿素柱层析分离共轭亚油酸甲酯异构体的研究

利用负载型尿素层析柱对共轭亚油酸甲酯异构体进行分离。考察了固定相中甲醇残留量、尿素硅胶质量比、固定相结晶温度、层析温度及洗脱剂种类对分离效果的影响。结果表明:当固定相中甲醇残留量为3%~5%,尿素硅胶质量比为1∶1,固定相结晶温度0~8℃,层析温度0℃,洗脱剂为石油醚时,经过层析分离反10,顺12共轭亚油酸甲酯的含量从样品中的33.94%提高到57.69%。     

硅胶柱色谱法提纯天然生育酚的初步研究

采用粗孔硅胶做吸附剂,对生育酚浓缩液进行提纯,初步研究了色谱条件.实验结果表明,采用正己烷-异丙醇混合溶剂做洗脱剂,两者配比正己烷:异丙醇为9:1(V/V)时进行柱洗脱,生育酚含量能达到86%,回收率达80%.     

单柱离子色谱法同时测定水中10种金属离子

采用单柱非抑制离子色谱法,选用柠檬酸-乙二胺作为淋洗液,同时分离和测定了水中Li+、Al3+、K+、Cs+、Mg2+、Co2+、Ca2+、Sr2+、Cd2+和Ba2+10种金属离子。对测定中淋洗液的浓度、pH与离子保留时间的关系进行了研究,得出了10种金属离子的工作曲线方程,相关系数为0.9947⁰.9996。精密度（RSD）为0.73%¹.99%,回收率为94.0%¹02.0%。该法用于水样的分析,结果良好。