可控酶解河蚬蛋白质的工艺优化

以河蚬为原料,水解度和可溶性蛋白含量为指标挑选酶种,再通过单因素和正交试验筛选可控酶解河蚬蛋白质的最佳工艺条件。结果表明:河蚬蛋白质的适宜水解酶为中性蛋白酶和胰蛋白酶,双酶复合水解的最佳工艺条件为:胰蛋白酶和中性蛋白酶按2:1(w/w)混合同时水解,加酶量为1.2%、料液比1:3.5(w/v)、pH7、温度55℃、水解6.5h,水解度为34.77%,可溶性蛋白含量为136.5mg/100g。该工艺条件得到的酶解液水解度较高,气味较好,腥味不明显。     

洪泽湖野生河蚬抗氧化肽酶解工艺及清除自由基能力的研究

探讨洪泽湖野生河蚬抗氧化肽的最佳酶解工艺条件及清除自由基能力。通过单因素和正交实验,得到的最佳酶解工艺条件为:添加0.5%胰蛋白酶(以河蚬肉质量计),初始pH3.5,酶解时间3.5h,酶解温度45℃,所得酶解液·OH清除率可达到76.19%。将此工艺得到的河蚬酶解液从还原能力、清除DPPH·能力、清除超氧阴离子自由基和羟自由基能力4个方面与V_C和BHT比较,结果表明,河蚬酶解液清除自由基能力弱于0.1mg/mL的V_C,与0.1mg/mL的BHT近似。      

洪泽湖野生河蚬抗氧化肽酶解工艺及清除自由基能力的研究

探讨洪泽湖野生河蚬抗氧化肽的最佳酶解工艺条件及清除自由基能力通过单因素和正交实验,得到的最佳酶解工艺条件为:添加0.5％胰蛋白酶(以河蚬肉质量计),初始pH3.5,酶解时间3.5h,酶解温度45℃,所得酶解液·OH清除率可达到76.19％.将此工艺得到的河蚬酶解液从还原能力、清除DPPH·能力、清除超氧阴离子自由基和羟自由基能力4个方面与Vc和BHT比较,结果表明,河蚬酶解液清除自由基能力弱于0.1 mg/mL的Vc,与0.1mg/mL的BHT近似.     

河蚬肉酶解液的活性炭脱腥脱苦条件优化

采用双酶解法制备河蚬肉酶解液,用活性炭进行脱腥脱苦吸附处理,测定蛋白质回收率,结合气味分析,评价吸附效果。通过正交实验获得较优吸附条件:起始pH值调为4,加入3%的粉末活性炭,55℃吸附30min,处理液的腥味苦味明显降低。     

河蚬肉酶解产物解酒护肝功效

采用体外试验法测定河蚬肉酶解产物对乙醇脱氢酶(ADH)活性的影响,采用动物试验测定灌胃河蚬肉酶解产物后小鼠醉酒时间、醒酒时间、血液乙醇浓度的变化以及小鼠肝组织中丙二醛(MDA)、甘油三酯(TG)、谷胱甘肽(GSH)等相关生化指标评价其解酒护肝的功效。体外试验表明:河蚬肉酶解产物对ADH具有激活作用,激活率为52%。动物试验表明:河蚬肉酶解产物组与阴性组比较,可显著延长小鼠的醉酒时间和缩短醒酒时间,时间延长率为69.42%,缩短率为13.40%,且能显著降低小鼠血液乙醇浓度(P0.05)。此外,河蚬肉酶解产物能显著降低小鼠肝组织中的MDA、TG的含量(P0.05),减缓GSH的消耗(P0.05)。综上可知河蚬肉酶解产物具有解酒护肝的功效。     

河蚬多肽的制备工艺

以酸溶性多肽得率（TCA-SN）为指标,研究河蚬多肽的制备工艺.比较了中性蛋白酶Neutrase、复合蛋白酶Protamex、碱性蛋白酶Alcalase和木瓜蛋白酶Papain对河蚬蛋白的水解效果,考察了加酶量、p H、温度、时间、底物浓度五种因素对Alcalase碱性蛋白酶酶解过程的影响,采用正交实验优化法确定碱性蛋白酶Alcalase最佳酶解工艺条件为:酶解温度55℃,加酶量3%,底物浓度2%,起始p H8.5,酶解时间为3 h;在此条件下酸溶多肽的得率为29.65%。再利用大孔树脂吸附法对河蚬多肽进行分离,比较SQD-67、DA201-A、DA201-DⅡ、DA201-M和DA201-H几种树脂对河蚬多肽的吸附性能,最终确定大孔吸附树脂DA201-C的最佳吸附条件为:上样流速1 BV/h,上样浓度30 mg/m L,乙醇洗脱浓度为75%,洗脱液经减压浓缩、冷冻干燥得到河蚬多肽,其纯度为82.19%。      

可控酶法制备河蚬抗氧化肽工艺优化

为优化酶法制备河蚬抗氧化肽的最佳工艺条件,在单因素试验的基础上,利用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法,研究不同因素水平时酶解产物对羟自由基清除率的影响。获得河蚬抗氧化肽的最佳制备条件为:添加0.94%中性蛋白酶(以河蚬肉计),在料液比1∶2(m∶V),pH 6.00,温度54.70℃的条件下酶解3.91h,该条件下羟自由基清除率为81.63%。     

酸法水解河蚬蛋白质的工艺优化研究

采用酸法水解河蚬蛋白质,对蚬肉进行绞碎、酸水解处理,以水解度为指标,通过盐酸、柠檬酸、乳酸的单因素实验,确定选用盐酸。通过正交实验,得出河蚬蛋白质酸水解的最佳条件为:盐酸用量5.5%,温度100℃,水解时间9h,料液比1∶3,河蚬蛋白质水解度达到59.34%。      

河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_(700 nm)、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。     

河蚬肉抗氧化肽的分离及活性研究

目的:为制备具有抗氧化活性的河蚬肉抗氧化肽。方法:河蚬肉酶解液经膜分离后,采用Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱进行分离,得到抗氧化性最强的组分经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离,并对各组分的体外抗氧化活性进行测定。结果:经Sephacryl S-100 HR凝胶层析柱分离得到5个活性组分A、B、C、D和E,其中组分C的抗氧化活性较强,其总抗氧化能力A_{700 nm}、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为1.79、83.33%和26.35%。组分C经CM Sepharose FF离子交换层析柱进一步分离得到2个活性组分C1和C2,其中C2的抗氧化活性最强,总抗氧化能力A_{700 nm}、羟自由基清除率和DPPH自由基清除率分别为2.03、92.34%和35.94%。结论:河蚬酶解液抗氧化肽的羟自由基清除能力突出,该研究为河蚬肉抗氧化肽的开发提供理论技术依据。      

酶法提取河蚬多糖的研究

选择木瓜蛋白酶法提取河蚬多糖,确定了不同料液比、酶解时间、酶解温度、加酶量、酶解pH等因素对河蚬多糖提取率的影响。通过正交实验,结果表明,河蚬多糖的最佳提取工艺条件为:料液比1:30,酶解温度55℃,加酶量1.5%,酶解pH7.5。在此条件下提取2h,河蚬多糖的提取率为4.53%。     

河蚬多糖分离纯化及抗氧化、抗肿瘤活性研究

采用DEAE-52纤维素色谱法和Sephadex~(TM) G-100葡聚糖凝胶色谱法对河蚬多糖进行分离纯化,获得CFP-1和CFP-2两个纯化组分,并对两组分进行紫外光谱和红外光谱扫描,结果表明:两组分中没有蛋白质和核酸,并证明它们是多糖类物质。液相色谱分析得到CFP-1和CFP-2的平均相对分子质量分别为1 172,3 627kD。对河蚬多糖的抗肿瘤、抗氧化活性研究结果表明:CFP-1对人肝癌细胞(HepG-2)抑制作用较CFP-2明显,作用48h时,CFP-1对人肝癌细胞的抑制活性IC_(50)值为0.24 mg/mL;而在抗氧化活性方面CFP-2优于CFP-1。     

河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性研究

以河蚬抗氧化肽清除羟自由基的活性变化为指标,研究温度、p H、食品原料、防腐剂和不同金属离子对河蚬抗氧化肽抗氧化稳定性的影响。结果表明:河蚬抗氧化肽具有较强的耐热性,加热到100℃仍能保持95%以上的活性;在酸性环境中活性保持较好,在碱性条件下丧失较快;蔗糖、Na Cl对河蚬抗氧化肽的稳定性影响不明显,而葡萄糖和山梨酸钾会明显降低河蚬抗氧化肽活性（p<0.05）;K+、Mg2+、Ca2+、Zn2+、Cu2+等金属离子对河蚬抗氧化肽稳定性均有不同程度的影响,其影响大小顺序为:Cu2+>Zn2+>Ca2+>K+>Mg2+。      

河蚬免疫活性糖蛋白分离及结构初步分析

采用DEAE-52纤维素柱层析,SephadexG-75葡聚糖凝胶层析和RP-HPLC柱层析手段分离纯化,从河蚬中分离纯化得到一种酸性糖蛋白CFP。经RP-HPLC和SDS-PAGE测定,CFP纯度为94.74%,其相对分子量为19030D。经苯酚-硫酸法测定,CFP的含糖量为5.18%,蛋白质含量为93.22%。碱性β-消除反应表明,河蚬糖蛋白中存在O-糖肽键。经红外光谱分析,CFP具有多糖的特征吸收,含有吡喃糖β-型糖苷键。     

河蚬营养成分的提取及其生理功能研究进展

河蚬(Corbicula fluminea)是一种双壳类软体动物,富含蛋白质、多糖、不饱和脂肪酸、矿物质及维生素等营养物质,具有清热解毒、醒酒护肝、利尿明目等多种生理功能。近年来,研究发现河蚬提取物能够抑制肝癌细胞HepG-2的生长,清除O2^-·、·OH、DPPH·自由基,降低血清胆固醇,甘油三酯的含量,促进胆固醇代谢,减少动脉粥样硬化,调控乙醇代谢过程中的关键酶细胞色素P4502E1(CYP2E1)的表达,降低对人体有害自由基的生成,抑制脂质过氧化反应,减少脂质过氧化物的生成,可以有效缓解酒精对肝脏造成的损伤。本文主要阐述了河蚬的营养成分、提取方式、生理功能及其开发研究现状,为实现河蚬精深加工以及工业化生产提供理论依据。     

河蚬中水溶性蛋白的提取及其抗氧化性质

研究超声波辅助法提取河蚬水溶性蛋白的工艺。以水溶蛋白的提取率为考察指标,以料液比、提取时间、提取温度和超声功率为考察因素,采用响应面法对河蚬水溶性蛋白提取工艺条件进行优化设计,并对其进行抗氧化研究。结果表明：最佳河蚬水溶性蛋白提取工艺条件为料液比1∶20、提取时间23 min、提取温度48 ℃、超声功率920 W,此条件下河蚬水溶性蛋白提取率达到最大值,为67.70%。其中,提取时间和超声功率对河蚬水溶蛋白提取率的影响显著。超声波的空化和振动作用可以促进细胞的破碎,使目标产物与溶剂充分混合,增大提取率,缩短提取时间,对河蚬中水溶性蛋白的提取具有很大意义。河蚬提取液具有较强的清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、超氧阴离子自由基的能力和较强的铁离子还原能力,而清除羟自由基的能力较弱。