高效液相色谱法检测富硒酵母中的硒代蛋氨酸

建立了高效液相色谱法测定富硒酵母中硒代蛋氨酸的分析方法。采用酶解提取法提取富硒酵母样品中的硒代蛋氨酸,丹磺酰氯柱前衍生,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm i.d.,5μm)分离,以10 mmol/L磷酸二氢钠缓冲液(含4%N,N-二甲基甲酰胺,pH=6.55)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,荧光检测(激发波长:320 nm;发射波长:523nm)。硒代蛋氨酸的检出限为(S/N=3)1μg/L,定量限为(S/N=10)5μg/L。在1 mg/L~50 mg/L范围内的线性关系良好(R≥0.999 6)。加标回收率在91.12%~107.83%,方法相对标准偏差<1.2%。本方法具有专属性好,灵敏度高,适用于富硒酵母原料及相关产品中的硒代蛋氨酸的定量测定。     

日粮添加蛋氨酸对宫内发育迟缓生长猪肠道发育和抗氧化功能的影响

目的：研究蛋氨酸对宫内发育迟缓（intrauterine growth retardation,IUGR）生长猪肠道发育和抗氧化功 能的调节作用。方法：30 头正常初生体质量（normal birth weight,NBW）和60 头IUGR仔猪于21 日龄断奶,分别随 机分成3 个处理组,即NBW-CON组（NBW仔猪饲喂基础（control,CON）日粮）,IUGR-CON组（IUGR仔猪饲喂 基础日粮）,IUGR-MET组（IUGR仔猪饲喂蛋氨酸（methionine,Met）日粮）,每个处理组6 个重复,每个重复5 头 猪,实验期为84 d。结果：IUGR-CON组猪空肠和回肠绒毛高度（villus height,VH）、空肠绒毛表面积、回肠蔗 糖酶和麦芽糖酶活力、空肠OCLN mRNA相对表达量较NBW-CON组猪显著降低（P＜0.05）。与NBW-CON组猪 相比,IUGR-CON组猪空肠丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量显著升高（P＜0.05）,空肠还原型谷胱甘肽 （reduced glutathione,GSH）含量和GSH/氧化型谷胱甘肽值显著降低（P＜0.05）,回肠超氧化物歧化酶活力 显著降低（P＜0.05）。日粮添加蛋氨酸可显著增加IUGR猪空肠VH,升高回肠麦芽糖酶活力,上调空肠OCLN mRNA相对表达量（P＜0.05）。同时,蛋氨酸可显著缓解IUGR介导生长猪空肠MDA含量升高与GSH含量降低 （P＜0.05）。结论：蛋氨酸可降低IUGR猪肠道脂质过氧化程度,改善肠道抗氧化能力,一定程度上缓解了 IUGR对生长猪肠道发育的不良影响。     

亚硒酸钠和硒代蛋氨酸对人结肠腺癌细胞的毒性作用

探讨两种硒化物对人结肠腺癌Caco-2细胞的毒性作用。将Caco-2细胞暴露在不同浓度的亚硒酸钠(SeIV)和硒代蛋氨酸(SeMet)中培养24 h,用Annexin V-FITC/PI双染色法检测在同样浓度的SeIV和SeMet培养下细胞的凋亡率,并设置不做硒处理的空白对照。用MTT法检测细胞存活率;检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)释放率、细胞内的超氧化物歧化酶SOD活力和谷胱甘肽GSH的含量。相同浓度时(0.8μg Se/mL),与对照相比,SeIV诱导细胞凋亡显著率上升(p0.05),SeMet变化不显著。一定浓度的SeIV(≥0.4μg Se/mL)和SeMet(≥40μg Se/mL)与对照组相比均显著降低细胞的存活率(p0.05);随着Se含量的升高细胞的存活率呈下降趋势,SeIV、SeMet的IC_(50)分别为2.56、215.55μg Se/mL。当SeIV浓度为≥0.8μg Se/mL,SeMet浓度为≥40μg Se/mL时,细胞的LDH释放率均显著高于对照组(14.80%)(p0.05)。当SeIV浓度≥4μg Se/mL,SeMet≥4μg Se/mL时,细胞的SOD活性均显著低于对照组(56.76 U/mg prot)(p0.05)。当SeIV浓度≥4μg Se/mL,SeMet浓度为160μg Se/mL时,细胞的GSH含量均显著低于对照组(61.67μg/mg prot)(p0.05)。一定浓度的SeIV和SeMet会使Caco-2细胞产生氧化应激而导致细胞毒性,诱导细胞凋亡。     

富硒大豆中蛋白提取工艺优化及HPLC-MS联用测定硒代蛋氨酸

根据Box-Behnken试验设计原理和响应面分析法确定了富硒大豆中硒蛋白提取的最佳工艺;在此条件下,获取可溶性硒蛋白中的硒代氨基酸,并采用高效液相色谱-质谱联用技术对富硒大豆可溶性蛋白中的硒代蛋氨酸进行定性定量分析。结果表明,液料比11∶1（mL/g）、提取温度 44 ℃、提取时间96 min时,可溶性硒蛋白的提取率可达到76.03%。对4 种自行种植的富硒大豆中可溶性蛋白分析可知：硒-L-蛋氨酸中硒含量与可溶性蛋白中硒含量、富硒大豆中总硒量呈正相关;实验范围内硒代蛋氨酸相对于可溶性蛋白中硒含量最高可达28.46%;说明富硒大豆中不仅含有硒代蛋氨酸,还存在其他形态的硒代氨基酸,有待于进一步研究探索。对大豆进行富硒种植,不仅能提高大豆中含硒总量,而且能通过大豆的生物代谢将其转化成安全无毒营养的有机硒。     

富硒大米肽体内抗氧化活性研究

目的:比较普通大米肽、富硒大米肽和硒代蛋氨酸的体内抗氧化活性。方法:将60只老龄（12月龄）雄性昆明小鼠和10只少龄（1月龄）雄性昆明小鼠分成7组（每组10只）:老龄模型组（M组）、少龄对照组（YC组）、普通大米肽组（400 mg/kg·bw,Ⅰ组）、富硒大米肽组（400 mg/kg·bw,Ⅱ组）、硒代蛋氨酸组（2.5μg/kg·bw,Ⅲ组）、富硒大米肽+硒代蛋氨酸组（200 mg/kg·bw+1.225μg/kg·bw,Ⅳ组）和白藜芦醇组（10 mg/kg.bw,PC组）,其中富硒大米肽组、硒代蛋氨酸组以及富硒大米肽+硒代蛋氨酸组中的硒含量一致,连续灌胃30 d。结果显示:与M组相比,YC组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、PC组小鼠血清中超氧化物歧化酶（SOD）活性极显著提高（p<0.01）;YC组、Ⅰ组、Ⅳ组的还原型谷胱甘肽（GSH）含量显著增加（p<0.05）,Ⅱ组和PC组GSH含量极显著增加（p<0.01）;YC组、Ⅱ组、PC组的过氧化氢酶（CAT）活性显著增加（p<0.05）;Ⅲ组、Ⅳ组的肝匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性显著提高（p<0.05）,Ⅱ组的GSH-Px活性极显著增加（p<0.01）;Ⅱ组、Ⅳ组、PC组的T-AOC显著增加（p<0.05）;YC组、Ⅱ组的丙二醛（MDA）显著减少（p<0.05）,PC组的MDA极显著减少（p<0.01）;YC组、PC组的GSH显著增加（p<0.05）,Ⅱ组的GSH极显著增加（p<0.01）,以及胸腺、脾脏指数等指标均有不同程度地改善。其中所有指标以富硒大米肽组效果最好,抗氧化活性显著高于同剂量的普通大米肽,大多数指标也显著优于同等硒含量的硒代蛋氨酸组。结论:富硒大米肽中的硒与肽对增强抗氧化能力有一定的增效作用。      

富硒酵母中硒蛋氨酸的GC-MS/MS测定

建立酵母中硒蛋氨酸含量的气相色谱——串联质谱法(GC-MS/MS)分析方法。比较3种富硒酵母中硒蛋氨酸检测样品的提取方法,优化硒蛋氨酸的酶解提取条件;以氯甲酸乙酯为衍生化试剂,2-氯苯丙氨酸为内标物,采用选择离子模式对衍生物进行GC/MS/MS检测。结果表明,硒蛋氨酸的回收率为90.0%～97.0%,检测限为4μg/L,方法精密度(RSD)为7.8%。该方法简单快捷、定量准确、灵敏度高。     

日粮添加不同水平的蛋氨酸对山鸡产蛋高峰期生产性能的影响

试验选取46~48周龄,健康无病,体型、体重基本一致的产蛋高峰期山鸡200只,随机分为5组,1个对照组,4个试验组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组),每组设10个重复,每个重复4只山鸡。每组基础日粮相同(蛋氨酸质量分数为0.22%),各组蛋氨酸添加水平分别为0%、0.05%、0.10%、0.15%和0.20%,试验期2个月。结果表明,日粮中添加适量蛋氨酸不仅维持较长时间的产蛋高峰期和理想的产蛋峰值,显著地提高产蛋量和平均蛋重,而且还能提高饲料报酬和经济效益。     

饲料中添加赖氨酸及蛋氨酸对罗非鱼生长的影响

以平均初始体质量5g的罗非鱼为试验对象,在赖氨酸(Lys)及蛋氨酸(Met)均呈缺乏状态的基础饲料中,分别补充结合态Lys(PBL),晶体Lys(UCL)和包膜Lys(CL)等3种形式的Lys,晶体Met(UCM)、包膜Met(CM)和羟基蛋氨酸钙(MHA-Ca)等3种形式的Met,共配制8组等氮等能饲料,每个组设3个重复,每个重复30尾,实验水温24～30 ℃,持续56 d.结果表明,对照组增质量率317.99%,单独补充质量分数0.15% PBL、0.15% UCL、0.15% CL 3种形式外源Lys的增质量率分别是326.93%,337.02%、329.42%,对罗非鱼的生长无显著影响,但同时补充质量分数0.15% CL及0.1% CM,罗非鱼增质量率为353.22%,显著提高了罗非鱼的生长水平;而同时补充质量分数0.15% UCL及0.1% UCM、0.15% PBL及0.1% UCM、0.15% PBL及0.1%MHA-Ca的增质量率分别为304.15%、308.78%、337.19%,对罗非鱼的生长无显著影响.补充外源氨基酸对罗非鱼肝脏水分有降低趋势,对其它常规组成及肌肉氨基酸组成无明显影响.结果提示,包膜赖氨酸及包膜蛋氨酸在适宜的补充方式下,对罗非鱼的促生长效果要优于其它形式的赖氨酸及蛋氨酸,可有效平衡罗非鱼饲料配方的赖氨酸及蛋氨酸水平的不足.     

动物日粮中补充硒对肉品质影响的研究进展

动物日粮中补充硒在现代畜牧业中应用较为广泛,硒能改善肉品质及其营养价值。本文就硒改善肉品质的作用机制、硒缺乏对肉品质的影响以及通过在动物日粮中补硒改善肉的颜色、pH、系水力、营养成分等功效展开综述。      

富硒鸡蛋生产中影响蛋硒含量因素分析

我国是缺硒大国,食用富硒鸡蛋可便捷有效地解决缺硒问题.在富硒鸡蛋的生产过程中,不同硒源、添加量、饲喂时长以及日粮中其他维生素、微量元素、蛋氨酸等的添加均影响蛋硒的沉积.本研究对各因素进行了综述,旨在为安全、有效、经济地生产富硒鸡蛋提供参考.     

日粮中添加N-氨甲酰-L-谷氨酸及精氨酸对断奶小鼠生长性能的影响

目的：研究日粮中添加N-氨甲酰-L-谷氨酸(NCG)及精氨酸(Arg)对断奶小鼠生长性能的影响。方法：首先通过在日粮中添加0.025%、0.05%、0.1%的NCG,研究NCG对断奶小鼠生长性能的影响。在此基础上,选择同时添加0.05%的NCG和3个水平(0.025%、0.05%、0.1%)的Arg,研究NCG与Arg联合作用对断奶小鼠生长性能的影响。结果：日粮中添加0.1%的NCG,断奶小鼠平均日增质量较对照组提高了12.40%,饲料与体质量比与对照组相比下降了14.65% ;同时添加0.05%的NCG和0.025%的Arg,断奶小鼠平均日增质量提高了10.53%。结论：日粮中添加0.1%的NCG能显著提高断奶小鼠生长性能;日粮中同时添加0.05%的NCG和0.025%的Arg,断奶小鼠生长性能也得到显著提高,其提高生长性能的效果与添加0.1%剂量的NCG达到相同水平。     

不同类型日粮添加酶制剂对蛋品质和蛋鸭生产性能的影响

选用500羽50周龄金定蛋鸭,研究不同类型日粮添加酶制剂对蛋鸭生产性能和蛋品质的影响.试验随机分成2组,分别设为对照组(玉米-豆粕型+植酸酶500 FTU/kg)和试验组(小麦-豆粕型+植酸酶500 FTU/kg+木聚糖酶),每组5个重复,每个重复50羽.研究结果表明,试验组与对照组相比,平均产蛋率提高6.6%(P>0.05),平均蛋重提高1.6%(P>0.05),料蛋比降低12.4%(P>0.05);蛋品质方面,试验组和对照组在蛋壳重、蛋形指数、蛋壳色泽、蛋壳强度、蛋白高度、哈氏单位均差异不显著(P>0.05);蛋黄重与蛋黄色泽均差异极显著(P<0.01).结论:用小麦替代日粮中的全部玉米并添加植酸酶和木聚糖酶饲喂蛋鸭,可以提高蛋鸭生产性能,增加经济效益.     

小麦日粮添加不同配伍酶制剂对肉仔鸡养分利用率、食糜黏度和血液激素的影响

选择14日龄肉仔鸡,研究小麦日粮中添加不同配伍酶制剂对肉仔鸡养分利用率、食糜黏度和血液激素等的影响,结果表明:(1)添加酶制剂可显著提高粗蛋白(P<0.01)、粗脂肪(P<0.01)、总磷(P<0.05)和总能(P<0.01)的利用率,不同配伍之间也出现差异,但没有显著提高钙的利用率(P>0.05),而小麦日粮中钙的利用率显著低于玉米日粮;(2)添加酶制剂可显著降低肉仔鸡小肠食糜黏度(P<0.01),不同配伍之间有出现差异的趋势,但不显著,肉仔鸡食糜黏度在49日龄时显著低于35日龄;(3)添加酶制剂可显著提高35日龄和49日龄肉仔鸡血液生长激素浓度,在35日龄时不同配伍间出现显著差异(P<0.05);(4)添加酶制剂在35日龄时显著提高血液胰岛素浓度(P<0.01),而只在49日龄时有提高腹脂率的趋势。结果显示酶制剂可提高肉仔鸡对小麦日粮养分利用率和血液生长激素,并可显著降低食糜黏度,适宜配伍酶制剂的效果更为显著。     

Forage Growth and Performance of Grazing Dairy Cows Supplemented with Concentrate and Chopped or Long Hay

Holstein and Brown Swiss cows were in three groups of eight in a 3 × 3 Latin square design with 4-wk periods. Cows averaged 88 d in lactation at start of trial. All cows simultaneously grazed grass and clover pastures on a rotational basis. Supplement treatments were concentrate (A), concentrate with 10% added chopped hay (B), and concentrate plus 1 kg long hay/cow daily (C). Concentrate was offered at 1 kg/3 kg 4% fat-corrected milk to cows on A and C, and 1 kg/2.7 kg to those on B. Forage growth, amounts available for grazing, and average dry matter intake were measured by clipping subsamples prior to and after each grazing and by use of cages placed in the field.Milk yields and milk fat percentages were 27.1, 3.34; 27.9, 3.32; and 28.3, 3.20 for treatments A, B, and C, respectively. Differences between A and C were significant. Milk fat percentage decreased moderately when cows first went to pasture.There were no treatment differences in fat yield, milk protein percentage, yield of fat-corrected milk, rumen fluid composition, or body weight gain.Available forage per cow exceeded 22 kg dry matter/cow daily except during one 10-d period toward the end of the trial when it amounted to 16.6 kg. Intake of dry matter from pasturage, measured by the sward cutting technique, averaged 14.5 kg./cow daily over the 12 wk.     

添加马铃薯雪花粉对面团特性和纸杯蛋糕营养品质的影响

研究了马铃薯雪花全粉(potato flake,PF)对面团特性和对纸杯蛋糕营养品质的影响.在本研究中,将马铃薯雪花全粉以不同的浓度(10％,30％,50％)加入到纸杯蛋糕中.与对照组相比,添加马铃薯雪花全粉的纸杯蛋糕中蛋白含量增加了11.04％～16.55％,脂肪含量降低了3.10％～13.18％,总膳食纤维增加了将...     

孕鼠补充苏氨酸锌对仔鼠生长及其相关基因表达的影响

为研究母体补充苏氨酸锌对子代生长水平的影响,实验将40只受孕SD大鼠随机分为5组,于孕鼠妊娠期第6~15天分别灌胃补充高、中、低剂量苏氨酸锌(灌胃剂量分别为250、500、1 000 mg/(kg·d)),孕鼠分娩后将仔鼠常规饲养,并测量1月龄仔鼠的生长指标和相关基因的表达。结果表明,苏氨酸锌各剂量组仔鼠体质量与对照组相比有显著提高(P0.05);苏氨酸锌各剂量组与对照组相比较,其组织中锌转运体Zn T1基因的相对表达量都有显著提高(P0.05);苏氨酸锌高剂量组与对照组相比较,其组织中胰岛素样生长因子IGF1基因相对表达量都有显著提高(P0.05);且胰岛素样生长因子受体基因IGF1R的表达与IGF1的表达趋势基本保持一致。实验说明妊娠期补充苏氨酸锌能在一定程度上提升仔鼠的生长性能,能显著提高仔鼠锌转运体Zn T1、胰岛素样生长因子IGF1及其受体IGF1R基因表达水平。     

小麦型日粮添加酶制剂对蛋鸡生产性能的影响

试验以40周龄"尼克红"蛋鸡为试验对象,研究了用"小麦+酶制剂"完全替代蛋鸡日粮中的玉米对蛋鸡生长性能的影响。试验结果表明:与玉米基础日粮组相比,添加0.1%的酶制剂使蛋鸡的产蛋率提高了2.02%(P<0.05),产蛋量提高了2.03%(P<0.05),软壳蛋率降低了63.64%(P<0.05),料蛋比下降了1.38%(P<0.05)。     

五种单体酶配伍对肉仔鸡生长性能及非淀粉多糖消化率的影响

研究在小麦基础日粮中添加五种单体酶制剂(木聚糖酶、β-葡聚糖酶、纤维素酶、植酸酶和甘露聚糖酶)对1～21日龄肉仔鸡生长性能和非淀粉多糖(NSP)消化率的影响。试验将624只1日龄肉仔鸡按均匀设计方法随机分成13组,其中第13组为对照组,各处理组日粮为上述五种单体酶制剂的不同配伍添加在基础日粮中组成。结果表明,五种单体酶制剂的不同配伍能不同程度提高肉仔鸡生长性能和NSP的消化率。其最佳的配伍水平为:木聚糖酶450 u·kg-1、β-葡聚糖酶47 u·kg-1、纤维素酶333 u·kg-1、植酸酶135u·kg-1、甘露聚糖酶153 u·kg-1。     

野生葎草对育肥羊生产性能的影响

研究在自由采食条件下,新鲜葎草对育肥羊生产性能的影响.试验组每天饲喂2.5 kg新鲜葎草,对照组饲喂等量新鲜苜蓿;另外补加精料补充料0.5 kg/只.结果表明:试验组的平均日采食量和料肉比分别降低了18.1%和15.71%,均达到了显著水平(P<0.05);试验组粗蛋白质的消化率比对照组降低10.82%,但差异不显著(P>0.05),粗脂肪和粗纤维的消化率比对照组分别提高9.92%和2.69%,均差异不显著(P>0.05).     

白藜芦醇对高脂诱导肥胖小鼠生长性能及肝脏糖脂代谢、能量代谢的影响

研究添加白藜芦醇对高脂日粮诱导肥胖小鼠的体重、采食量、脂质代谢、糖代谢及能量代谢的影响。选取40只C57BL/6J雄性小鼠,随机分成4组,分别采用低脂日粮(LFD)、低脂日粮+0.0276%白藜芦醇(LR)、高脂日粮(HFD)、高脂日粮+0.04%白藜芦醇(HR)饲喂12周。结果表明:与饲喂低脂日粮小鼠相比,高脂日粮组小鼠的体重显著增加(p<0.05),前4周的采食量显著减少(p<0.05),血清中谷草转氨酶(AST)和谷丙转氨酶(ALT)活性显著升高(p<0.05),肝脏中ALT和AST活性显著下降(p<0.05),脂质过氧化物(LPO)和丙二醛(MDA)含量均显著升高(p<0.05),己糖激酶(HK)、丙酮酸激酶(PK)和琥珀酸脱氢酶(SDH)活力显著下降(p<0.05);另外,饲喂高脂日粮小鼠肝脏MDH1、Sdha、PGC-1α mRNA的表达量显著下降(p<0.05)。饲喂添加了白藜芦醇的高脂日粮后,与高脂日粮组比,小鼠的体重显著降低(p<0.05),采食量显著增加(p<0.05),血清中AST和ALT活性显著降低(p<0.05),肝脏中AST活性显著升高(p<0.05),LPO和MDA含量显著降低(p<0.05),HK和PK活力显著升高(p<0.05)。另外,饲喂白藜芦醇对高脂日粮导致的肝脏中Hk2、Pkm、Cs、MDH1、Sdha mRNA表达量降低有显著的提高作用(p<0.05)。综上所述,日粮中添加0.04%的白藜芦醇能一定程度地缓解高脂日粮造成小鼠机体损伤,修复机体的脂质代谢、糖代谢和能量代谢。