马氏珠母贝肉ACEIP分离及提取的初步研究

选用合适的蛋白酶对马氏珠母贝肉(Pinctada martensii)进行水解,水解液经过分离提取后,得到血管紧张素转换酶抑制肽(ACEIP)。2个较高 ACE 抑制活性的组分样品 A 和样品 B 的 IC_(50)分别为0．033mg/mL 和 0．041mg/mL。2个样品氨基酸含量最多的是 Phe,分别达到57．5%和53．2%,其相对分子量分别为1042和 256。     

马氏珠母贝肉酶解产物ACE抑制活性的研究

利用胰酶、枯草杆菌中性蛋白酶,在50℃、pH为7.0～8.0,m(贝肉)∶V水=1∶3的条件下,对马氏珠母贝肉进行双酶水解4h制备得到酶解产物及残渣。利用Alcalase2.4L、胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对残渣进行再次酶解。结果表明:残渣蛋白质含量按干基计达54.2%;Alcalase 2.4L、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对残渣的酶解效果较好;残渣的木瓜蛋白酶酶解产物ACE抑制活性较强;马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性较强的组分分子量为944u,残渣木瓜蛋白酶酶解产物清除自由基活性较强的组分分子质量在1300～259u。     

马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性的研究

对马氏珠母贝肉的风味酶酶解产物对超氧阴离子自由基、羟自由基及DPPH·的清除效果进行了研究.结果表明,马氏珠母贝肉酶解产物对三种自由基均有一定的清除活性,量效关系明显;其清除O2-·、·OH、DPPH·三种自由基的IC50分别为1.513、1.423、2.618mg/mL,清除自由基能力总体高于牡蛎和海湾扇贝提取物.     

马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性的研究

对马氏珠母贝肉的风味酶酶解产物对超氧阴离子自由基、羟自由基及DPPH·的清除效果进行了研究。结果表明,马氏珠母贝肉酶解产物对三种自由基均有一定的清除活性,量效关系明显;其清除O2-·、·OH、DPPH·三种自由基的IC50分别为1·513、1·423、2·618mg/mL,清除自由基能力总体高于牡蛎和海湾扇贝提取物。      

陶瓷膜微滤对马氏珠母贝肉酶解液理化特性的影响

以马氏珠母贝肉蛋白酶解液为原料,考察200 nm陶瓷膜微滤处理对酶解液色值、澄清度、蛋白质含量和分子量分布的影响。结果表明,200 nm陶瓷膜微滤处理可以改善酶解液的色值和澄清度,可以完全截留分子量15000 u以上的蛋白,能够截留绝大部分分子量10000 u以上的多肽,而分子量小于5000 u的多肽在透过液中得到了有效的富集。      

马氏珠母贝肉酶解产物对SD大鼠生化指标的影响研究

以马氏珠母贝肉为研究对象,采用正交实验对其酶解条件进行优化,并测定其酶解产物对SD大鼠血清生化指标的影响。结果表明:马氏珠母贝肉酶解的最优条件是酶用量0.6%、温度70℃、时间35min、pH8.0,在此条件下马氏珠母贝肉蛋白质水解度高达54.79%。马氏珠母贝肉酶解产物的调配试剂注射使SD大鼠血清中前白蛋白、载脂蛋白A1显著上升(p<0.05),谷丙转氨酶、谷草转氨酶、载脂蛋白B、肌酸激酶MB型同工酶、超敏C反应蛋白、葡萄糖、间接胆红素显著下降(p<0.05),结合相关研究结果,推测出马氏珠母贝肉酶解产物有保肝、保心血管的功效。      

蛋白酶水解马氏珠母贝肉对镉解离效果的研究

为了考查蛋白酶水解马氏珠母贝肉过程中对镉解离效果的影响,从木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、精制中性蛋白酶、胃蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶5种蛋白酶中筛选镉解离效果最好的酶,分别进行单一酶解试验和双酶复合酶解试验.以镉解离度和水解得率为指标,利用响应面法优化酶解条件.结果表明:枯草杆菌蛋白酶为最适蛋白酶,镉的解离度为75.57％,胰蛋白酶的效果次之,镉解离度为70.66％.用枯草杆菌蛋白酶进行单一酶解试验,最佳的酶解条件为时间5h,温度65℃,添加量4 700 U/g,液固比5∶1(V∶m),pH值7.5时,水解得率为87.43％,酶解镉解离度达到81.87％;用枯草杆菌蛋白酶与胰蛋白酶以活力比为3∶1组合,水解效果和镉解离度均最好.双酶复合酶解优化试验得到的最佳水解条件为时间5h,温度50℃,添加量5 700 U/g,pH值7.0,液固比4∶1(V∶m),水解得率为90.93％,镉解离度达到85.52％,比单一酶酶解效果更好.     

复合发酵马氏珠母贝酶解液工艺研究

利用木糖葡萄球菌和植物乳杆菌混合发酵改良马氏珠母贝酶解液风味.为了寻求最佳工艺,采用Box-Behnken组合设计研究了发酵马氏珠母贝酶解液的各参数的不同组合对其感官质量的影响,建立各参数与产品感官质量之间的回归模型,考察了各参数间的互作效应.最佳工艺条件为:木糖葡萄球菌与植物乳杆菌比例为3:1.接种量为4%,在30℃条件下发酵20 h,马氏珠母贝酶解液的整体风味得到了明显改善,并赋予了马氏珠母贝酶解液特殊的发酵香味.     

风味酶酶解马氏珠母贝肉的工艺研究

对风味酶酶解马氏珠母贝肉的工艺进行了研究.结果表明,酶解最适条件为1 g底物加酶量为7200 U,底料与水的质量比为1/3,反应温度为50℃,反应pH值为7.0,反应时间为4h,此时酶解率为43.45%,1 kg马氏睐母贝肉可得118.3 gEAP干粉,产品中粗蛋白占56.6%.酶解产物经Sephadex G-15葡聚糖凝胶层析分离,获得4个组分,分子量分布范围为57543～79.其中分子量小于6026的占83.4%,是良好的食物蛋白基料.     

马氏珠母贝酶解产物清除自由基活性的研究

利用胰酶、枯草杆菌中性蛋白酶,在50℃、pH为7.0～8.0、料水比1:3的条件下,对马氏珠母贝肉双酶水解4 h制备得到酶解产物及残渣.利用Alcatase 2.4 L、胃蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶对残渣进行再次酶解.结果表明:Alcalase 2.4 L、复合蛋白酶对残渣的酶解效果较好;残渣的复合蛋白酶酶解产物自由基清除活性较强;马氏珠母贝肉酶解产物清除自由基活性较强的组分分子量在1910 u～944 u之间,残渣复合蛋白酶酶解产物清除自由基活性较强的组分分子量在3 472u～834u之间.     

马氏珍珠贝肉蛋白水解特征及其ACE抑制肽的筛选

为探索马氏珍珠贝肉的水解规律及快速鉴定血管紧张素转化酶(angiotensin-converting enzyme,ACE)抑制活性肽,本研究以不同时间(2、4、6、8、10h)的酶解物为对象,采用三羟甲基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳、分子质量分布、反相高效液相色谱(reversed-phase high...     

响应面法优化超声波辅助蛋白酶水解合浦珠母贝肉的条件研究

利用响应面法优化超声波辅助酶解合浦珠母贝肉的工艺条件。单因素试验研究超声波功率、温度、超声时间对水解度的影响,在此基础上,应用Box-Behnken 中心组合设计建立数学模型,以水解度(DH)作为响应值,进行三因素三水平的响应面分析(Minitab)。结果表明,超声波辅助酶解合浦珠母贝肉的最佳工艺条件为：超声波功率160W、处理温度50℃、处理17min 后,水解1h 后产物水解度为31%,平均肽链长度3.2,与预测值的相对误差为0.5%。     

珍珠贝肉抗氧化肽制备工艺优化及其对酪氨酸酶的抑制活性

以马氏珠母贝肉为研究对象,采用ABTS自由基清除率为评价指标,通过单因素试验和响应面法优化制备抗氧化肽酶解物的工艺,并对酶解物冻干粉的抗氧化能力和酪氨酸抑制能力进行研究.结果表明,珍珠贝抗氧化肽的最优酶解工艺为温度50℃,pH 7.25,时间3 h,料液比1:1,酶底比0.4％,所得酶解液的ABTS自由基清除率为98....     

响应面法优化微波辅助酶解合浦珠母贝蛋白工艺

研究微波对酶解合浦珠母贝蛋白的影响,以水游离氨态氮含量和抗氧化活性为指标,选择较好的作用酶,通过单因素试验确定料液比、加酶量（E/S）、微波温度、微波功率及时间和后续水浴时间等因素水平,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,响应面法优化酶解合浦珠母贝蛋白工艺条件。结果表明,微波辅助蛋白酶酶解合浦珠母贝蛋白工艺条件为微波温度58 ℃、微波功率300 W、微波时间17 min、加酶量5 000 U/g,后续在58 ℃条件下再水浴1.5 h。预测响应值为0.224 4,水解度达到26.15%,验证实验证明与响应优化模型预测值误差不大,二次多元拟合度较好。     

珠母贝糖蛋白分离提取工艺条件优化

采用单因素实验与正交实验,研究珠母贝全脏器中糖蛋白的分离提取工艺条件.结果表明:珠母贝全脏器中糖蛋白的最佳分离提取条件为:以1.0 mol/L NaCl溶液为浸提剂,料液比为1:10,浸提温度为65 ℃,浸提时间为60 min,提取液经透析浓缩、醇沉后得到珠母贝糖蛋白,得率为3.37%,总糖和总蛋白含量分别为7.49%和25.33%.     

胰酶酶解珍珠贝分离蛋白制备低苯丙氨酸寡肽制品

苯丙酮酸尿症(PKU)是一种常见的氨基酸代谢性疾病,低苯丙氨酸饮食对于PKU患者非常重要。本研究以珍珠产业副产物马氏珠母贝肉为原料,提取分离蛋白后,采用胰酶酶解、超滤分级及活性炭吸附分离技术制备低苯丙氨酸寡肽营养功能基料。研究结果显示:随着酶解时间的进行,酶解液中<5 ku的寡肽含量呈现先增加后减少趋势(p<0.05),酶解1 h时,酶解液中所含的寡肽含量最多;经过超滤分级后,>5 ku和<300 u的酶解液中仍存在一些寡肽残留,其中>5 ku组分中寡肽含量为10.43%,<300 u组分含量为24.52%,而300 u~5 ku组分中寡肽含量达到了68.38%;<300 u组分的苯丙氨酸含量最高达到9.52%,活性炭对芳香族氨基酸的吸附量均高于其他氨基酸,300 u~5 ku组分经过活性炭吸附后得到1.29%的低苯丙氨酸寡肽溶液。可以以此为基料开发辅助治疗苯丙酮尿症、吸收率高的低苯丙氨酸寡肽营养功能制品。      

具ACE抑制活性的大豆肽的制备及精制研究

采用酶解技术制备具ACE抑制活性的大豆肽混合物。选择了最佳水解用酶,优化了反应条件。确定碱性蛋白酶解最佳条件为:pH9.0,温度50℃,底物浓度6%,酶用量([E]/[S])3%,作用时间4h。选择D3520型大孔树脂对水解产物进行脱盐精制,脱盐率91.2%,肽回收率89.3%,ACE抑制活性提高了28.5%,大豆分离蛋白ACE抑制肽混合物分子质量主要分布为200-720,在pH3-10,溶解性达98.1%以上,且稳定性好。     

南瓜籽蛋白源血管紧张素转化酶抑制肽的制备及其降血压活性

食源性降血压肽在调节机体血压过程中发挥着一定的积极作用。本实验采用碱性蛋白酶水解南瓜籽蛋白,水解物经膜分离获得血管紧张素转化酶（angiotensin converting enzyme,ACE）抑制肽,通过质谱鉴定其结构,并采用抑制动力学和分子对接方法研究ACE抑制肽的活性机制;此外,通过ACE抑制活性实验、自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rats,SHRs）模型等评价南瓜籽蛋白水解物、膜分离组分以及南瓜籽肽的降血压活性。结果表明,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物组分ACE抑制活性较好,1 mg/mL下ACE抑制率为46.22%,100 mg/kg mb 剂量下灌胃SHRs 6 h后收缩压可以降低21.42 mm Hg;鉴定出9 个ACE抑制肽（LLV、LVF、LTPL、SVLF、LLPQ、MLPL、LLPGF、VLLPE和RFPLL）,其中RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF具有较好的ACE抑制活性,半抑制浓度均低于1 mmol/L;RFPLL和LVF具有较好的降血压活性,30 mg/kg mb剂量下灌胃6 h后SHRs的收缩压降低量分别为37.0 mm Hg和22.2 mm Hg,SHRs的舒张压降低量分别为17.0 mm Hg和11.2 mm Hg;RFPLL、LLPGF、MLPL和LVF可以很好地对接ACE的活性中心,RFPLL是ACE混合型抑制剂,MLPL对ACE的抑制模式可能是竞争型抑制,LLPGF、LVF可能是ACE的非竞争型抑制剂。综上,低于1 kDa南瓜籽蛋白水解物是一种良好的降血压功能食品原料,其中RFPLL和LVF可用于降血压功能食品或者药品的开发原料。