大米原料根霉发酵制L—乳酸的发酵条件研究

对几种产L－乳酸的根霉菌进行了筛选,根据其产酸水平及稳定性筛选出一株高产菌,并就其发酵条件对产酸水平的影响作了初步探讨,从5株购得菌中筛选出了少根根霉As3.2893,并确定发酵条件如下：氮源采用硫酸铵,浓度为0．6％,装液量在40－50mL/250mL锥形瓶,发酵温度30℃,发酵时间48h,在摇瓶培养条件下,其产酸水平稳定5．8－6．5g/100mL。     

温度和pH值对溶解氧、红法夫酵母生长和类胡萝卜素积累的影响

通过分析发酵过程中溶解氧变化、红法夫酵母生物量及类胡萝卜素积累规律,研究了温度和pH值对红法夫酵母发酵的影响.结果表明,较低温度有利于虾青素合成,在温度为16℃时虾青素含量最高(15.23mg/L),较高温度积累较多的β-胡萝卜素,20℃时生物量和β-胡萝卜素含量最大,分别为15.56g/L和4.26mg/L.pH值为5.0培养时生物量和虾青素产量最高,分别为15.26g/L和15.08mg/L,pH值较低或较高时积累较多的β-胡萝卜素.培养温度和pH值影响发酵体系溶解氧浓度、红法夫酵母生长和类胡萝卜紊的合成.     

离子注入选育高产类胡萝卜素红酵母

通过离子注入N^ 诱发基因突变，从而获得高产类胡萝卜素红酵母菌株RY－3－9，其出产率较出发菌株RY－3提高76．2％；经复筛和传代实验表明，该高产菌株遗传性能较为稳定，3代平均类胡萝卜素产量提高了74．0％，质量浓度达10.9mg/L。     

L—乳酸高产突变株——米根霉NAF—032

运用正交试验理论,对L－乳酸高产突变株NAF－032的优化摇瓶发酵条件作了初步研究,确定了优化的发酵培养基和发酵条件,优化发酵培养基为（g／L）：葡萄糖140,氯化铵1,KH2PO40．3,MgSO4.7H2O0.25,ZnSO4.7H2O0.08;优化培养条件为：34℃,摇床转移200r/min,装液量50mL（250mL容积三角瓶）,一次性添加CaCO380g/L调节pH值,米根霉NAF－032的摇瓶发酵L－乳酸积累量可达94．28g/L。     

番茄红素生产菌的筛选及初步鉴定

为实现番茄红素的发酵生产,从自然界中分离筛选出一株产番茄红素的微生物,初步鉴定为红酵母。该菌株在葡萄糖40 g/L、酵母粉40 g/L、自然pH的液体培养基中,28℃摇瓶发酵96~120 h,生物量为26 g/L发酵液,番茄红素产量为2.8 mg/L发酵液。     

红曲霉发酵产胞多糖工艺的优化

研究了碳源、氮源和无机盐对红曲霉Y－7产多糖的影响，优化并确定了产胞外多糖的培养基组成：麦芽糖60g/L，蛋白胨2．5g/L，磷酸二氢钾4g/L，硫酸镁0．5g/L，氯化钙0．6g/L。研究了油脂对胞外多糖的影响，并确定棕榈油的添加量为0．2g/dL。在500mL的三角瓶装培养基75mL，接种量15％，种子液种龄24h，培养温度33℃，摇床转速220r/min，培养96h。在上述条件下生物量干重为1．42g/dL，发酵液胞外多糖产量可达3．24g/L，比初始条件高出2．5倍。     

间型脉孢菌产类胡萝卜素研究

筛选了一株产类胡萝卜素的间型脉孢菌（Neurosporaintermedia）,研究了该菌发酵过程中培养条件、添加物和光照条件对类胡萝卜素产量的影响．实验结果表明,间型脉孢菌产类胡萝卜素的适宜温度为30℃;当培养基中添加了1.5mg／L没食子酸和0．05g／L植酸钙后,所培养菌丝中类胡萝卜素含量分别可达46．44和54．03（μg／g干菌体）,比对照产量分别提高了100％和133％（以干菌体计）;增加光照对菌体产类胡萝卜素也有明显的促进作用,与对照相比,类胡萝卜素产量提高了73．7％．间型脉孢菌孢子中类胡萝卜素含量明显高于菌丝含量,达145．5μg／g孢子．固体培养时产孢量大,因此物料中类胡萝卜素产量可达81．94μg／g干曲．     

高产S-腺-苷蛋氨酸啤酒酵母诱变选育及其培养条件

为了筛选高产S-腺-苷蛋氨酸（SAM）啤酒酵母突变株，采用不同剂量^60Coγ射线对出发啤酒酵母菌悬液进行反复辐射处理，最终得到SAM高产突变株S—W55，并研究了其最优培养条件。结果表明最优化培养基为（％）：葡萄糖4、L-蛋氨酸0．03、酵母浸粉0．4、CaCl2 0．01、KH2PO4 0．4、NaH2PO4 0．1、MgSO4 0.1，此条件下摇瓶发酵突变株S-W55的生物量和SAM产量分别达到12.15g/L和1．88g／L，分别比未优化前提高了27．1％和19．7％。10L发酵罐放大培养表明酵母突变株S—W55最适培养温度和pH值分别为28℃和5.0，发酵罐中其生物量、SAM产量比摇瓶发酵有了进一步的提高。     

响应曲面法优化羊肚菌富硒深层发酵条件

以亚硒酸钠为无机硒源,对羊肚菌菌丝体的富硒深层发酵条件进行了优化研究。选择培养温度、发酵时间和硒浓度作为优化因素,研究各因素的不同水平对富硒羊肚菌菌丝生物量和硒含量的影响。通过单因素试验和响应曲面法得出了羊肚菌菌丝体富硒深层发酵的最佳条件条件:发酵时间5.22d、培养温度25.73℃、硒质量浓度86.67μg/ml;预测菌丝生物量的达到10.512g/L、硒含量达到18.8μg/ml,实际菌丝生物量的达到10.339g/L、硒含量达到18.6μg/ml。研究结果表明,响应曲面法可对羊肚菌富硒深层发酵条件进行优化。     

聚唾液酸的摇瓶工艺

研究了突变株JYL－11（Escherichia coli）的摇瓶发酵工艺条件：在山梨醇40g/L,K2HPO4 20g/L，NH4Cl4g/L,MgSO40.9g/L，蛋白胨1.5g/L，起始pH值7.8，装液量35mL(250mL的三角瓶中），转速250r/min，培养温度37℃，接种量为4％（体积分数）的条件下，聚唾液酸产量达到3.5mg/mL，比优化前提高了1.0mg/mL，提高幅度为40％。     

9株益生菌混合发酵条件的优化

对9株益生菌(4株芽孢杆菌、3株乳酸菌、1株酵母菌和1株光合细菌)混合发酵的培养基配方以及培养条件进行了优化。结果表明,最佳混合发酵的培养基配方为:葡萄糖10g/L,可溶性淀粉15g/L,蛋白胨10g/L,酵母膏2.5g/L,乙酸钠5g/L,柠檬酸三铵2g/L,K2HPO40.15g/L,MgSO40.2g/L,MnSO40.05g/L,吐温80 1mL,蒸馏水1L;最佳培养条件为接种量3%,发酵温度25℃,初始pH 6.5~7.0,装液量为250mL瓶装50mL液体,转速180r/min。微生态制剂活菌数可达4.4×109 cfu/mL,是优化前的2倍。     

圆红冬孢酵母类胡萝卜素代谢流的阻遏及走向

以野生型的圆红冬孢酵母为出发菌株,利用常压室温等离子体(ARTP)进行诱变,筛选获得4株类胡萝卜素缺陷型圆红冬孢酵母突变株。对圆红冬孢酵母的野生型及类胡萝卜素缺陷型菌株进行发酵,并对其生物量、类胡萝卜素含量、油脂含量、脂肪酸组成及有机酸含量进行测定。结果表明,利用ARTP技术能够有效实现对类胡萝卜素代谢流的阻遏,突变株类胡萝卜素质量浓度较野生型菌株降低了70%。碳流代谢走向分析结果表明,类胡萝卜素代谢途径的阻断并未导致油脂合成途径的加强,反而造成圆红冬孢酵母生物量和油脂合成能力的分别下降48%和40%,对胞内脂肪酸组成也有较为显著的影响,其中突变株W-4所产硬脂酸、亚油酸及油酸质量分数较野生型菌株分别下降了60%、42%和77%。类胡萝卜素合成途径阻断后,碳流主要指向有机酸合成,其中乙醛酸、乳酸、苹果酸及琥珀酸变化较为显著。类胡萝卜素缺陷型突变株中大量积累的类胡萝卜素合成前体主要流入了有机酸合成途径中。     

腈水合酶耐底物突变株的筛选及产酶条件优化

采用紫外诱变和梯度平板法筛选出耐底物的突变株,通过单因素实验考察发酵液起始pH值、装液量、发酵周期、接种量对产酶的影响,确定最佳的发酵条件;采用均匀设计实验优化发酵培养基。筛选出．株能耐受4％丙烯腈的腈水合酶产生菌,在最佳产酶条件下,耐底物突变株的腈水合酶酶活达到11．5MU／mL,与优化前相比,酶活提高了49．35％。腈水合酶耐底物突变株的最佳发酵条件为：初始pH7．0、装液量16％、发酵周期58h、接种量10％。最佳发酵培养基配方为：ρ（葡萄糖）=26g／L,ρ（酵母膏）=2g／L,ρ（尿素）=4g／L,ρ（谷氨酸钠）=0．5g／L,ρ（K2HP04）=0．2g／L,ρ（KH2P04）=0．2g,／L,ρ（MgS04）=0．05g／L,φ（DXL）=0．5mL／L。     

重组大肠杆菌生产人表皮生长因子的发酵条件

通过质粒转化实验,获得了较好的产hEGF重组菌,对重组菌发酵进行优化,获得最佳初始糖质量浓度为5g/L、蛋白胨20g/L、酵母抽提物10g/L、（NH4）2HPO43．5g／L、Amp100mg/L;最佳接种时间为种子液生长到5－6h,即菌体OD值在1．0－2．0;诱导剂最佳添加时间为8h,即菌体OD值在8．0左右,通过流加发酵进行高密度培养,可使重组菌的hEGF的产率达102mg/L,比优化前提高了近30％。     

脂肪酶产生菌的筛选及产酶条件优化

从不同土样中分离获得36株脂肪酶产生茼,其中zj-5菌株产酶活性最高,通过对zj-5进行形态学观察,初步确定其属于酵母茵.通过正交试验设计,对zj-5的产脂肪酶条件进行优化,在摇瓶培养条件下,其最适产酶条件为:葡萄糖10.0 g/L,蛋白胨6.0 g/L,反应起始pH值为6.0,发酵温度为42℃,在此条件下的产酶可达245 U/mL.     

法夫酵母产虾青素的摇瓶工艺

以法失酵母（Ｐｈａｆｆｉａ ｒｈｏｄｏｚｙｍａ）ＷＳＳ－ＦＦ６为产生菌进行摇瓶条件下的类胡葛卜素（主要为青素）发酵条件研究。正交试验表明：葡萄糖质量分数对酵母驿酵母产色素影响较大,在起始ＰＨ值为６,培养温度２２℃,葡萄糖３．０％、尿素０．１％、磷酸二氢钾０．６％、玉米浆０．６％的培养基下经过７２ｈ、２２０ｒ／ｍｉｎ摇瓶发酵,其生物量为６．５８ｍｇ／ｍｌ,类胡萝卜素产量为１４．９２μｇ／ｍｌ,其中虾     

高产S-腺-苷蛋氨酸啤酒酵母诱变选育及其培养条件

为了筛选高产S-腺-苷蛋氨酸(SAM)啤酒酵母突变株,采用不同剂量60Coγ射线对出发啤酒酵母茵悬液进行反复辐射处理,最终得到SAM高产突变株S-W55,并研究了其最优培养条件.结果表明最优化培养基为(%)葡萄糖4、L-蛋氨酸0.03、酵母浸粉0.4、CaCl2 0.01、KH2PO40.4、NaH2PO40.1、MgSO40.1,此条件下摇瓶发酵突变株S-W55的生物量和SAM产量分别达到12.15g/L和1.88g/L,分别比未优化前提高了27.1%和19.7%.10L发酵罐放大培养表明酵母突变株S-W55最适培养温度和pH值分别为28℃和5.0,发酵罐中其生物量、SAM产量比摇瓶发酵有了进一步的提高.     

产海藻糖酵母的培养条件优化研究

对产海藻糖酿酒酵母进行培养条件优化,得到的最适条件为:每升发酵液中葡萄糖10 g,酵母膏7.5 g,尿素7.5 g,KH2PO42.5 g,Na2HPO42.5 g,微量元素液7.5 mL,发酵初始pH为7.0,对数生长期培养温度选择30℃,稳定期培养温度37℃,装液体积分数40%。摇瓶优化后海藻糖质量比为152 mg/g,约为优化前的2.3倍。选用最优条件在5 L发酵罐中进行培养,培养过程中两次补料,确定最佳培养时间为52 h,在该时间海藻糖产量为1 072 mg/L,比摇瓶中培养的最高值831mg/L高出241 mg/L。     

枯草芽孢杆菌产β-甘露聚糖酶的发酵条件优化分析

为获得枯草芽孢杆菌产旷β-甘露聚糖酶的最佳发酵条件,分别对碳源、氮源、碳氮质量比、发酵时间和培养温度进行了单因素实验,在此基础上对发酵温度、接种量、培养基初始pH值和发酵时间四因素进行了L9（3^4）正交优化试验．结果表明枯草芽孢杆菌分泌β-甘露聚糖酶的最佳碳源为40g／L魔芋精粉,最佳氮源为5g／L酵母抽提物,两者最佳质量比为5：1,最佳发酵条件为30℃的条件下摇瓶培养28h;最佳发酵参数组合为发酵温度30℃、接种量5％、培养基初始pH6．5、发酵时间28h;各因素对枯草芽孢杆菌产β－甘露聚糖酶的影响程度大小依次为发酵时间〉发酵温度〉接种量〉培养基初始pH,其中发酵时间对产酶的影响最为显著。     

基于遗传算法的木糖醇发酵培养基的优化

运用遗传算法,利用莫格假丝酵母由木糖生产木糖醇的发酵培养基进行优化,用40个实验样本完成了6种培养基成分、50个浓度水平的优化任务。实验结果表明：利用遗传算法可优化培养基成分含量,取得更好的发酵效果。按照优化后的培养基组成,由50g/L木糖获得了29．7g/L木糖醇,理论转化率为65．1％,比优化前提高了3．5％。