链格孢霉毒素细交链格孢菌酮酸的研究进展

链格孢霉（Alternaria）是污染食品和饲料最普遍的真菌之一。细交链格孢菌酮酸（tenuazonic acid,TeA）是链格孢霉毒素中最为重要的一种,可广泛污染蔬菜、水果及谷物。本文综述TeA毒素的来源及污染情况、理化性质及其毒性、检测方法等,并就未来研究方向进行展望。     

中草药提取物对链格孢菌抑制作用增效组合的研究

为寻找天然果蔬防腐剂,本实验在离体条件下,采用生长速率法测定了鹿蹄草素、黄连、黄柏、厚朴4 种中草药提取物对梨链格孢菌的抑制作用,并经线性回归计算50% 抑制时的有效浓度(EC50)分别为0.22、10.19、10.35、0.34mg/ml。根据EC50,用等效线法相加作用线的6 等分点设置配比,共毒因子法判断增效标准。结果表明,各种配比的混配剂中黄连＋厚朴为最佳增效作用组合,并以25:2 增效作用最显著。     

楼葱中脂溶性成分提取及其对链格孢霉菌的抑制作用

以宁夏楼葱假茎部位为材料,采用酶辅助有机溶剂萃取法,通过正交试验优化楼葱中脂溶性物质的提取条件,并利用滤纸片法测定提取物对枸杞源链格孢霉菌的抑菌作用。结果表明：以乙酸乙酯作为萃取液时,楼葱脂溶性物质最佳提取条件为料液比1 ∶40（g/mL）、加酶量0.3%、酶解时间60 min、萃取时间36 h,该条件下楼葱脂溶性物质得率为（6.33±0.24）%。抑菌试验结果表明：在放置含提取物滤纸片的链格孢霉菌培养基中,抑菌圈直径为（19.58±0.31）mm,最小抑菌浓度为1.250 mg/mL,表明楼葱脂溶性提取物对枸杞源链格孢霉菌有较好的抑制作用。     

银杏外种皮总黄酮提取工艺研究

本文考察了不同浓度的酒精,不同的浸提温度、料液比、浸提时间以及浸提次数对银杏外种皮总黄酮浸出的影响,并将所得粗提物用ADS-17大孔树脂进行初步分离纯化,结果表明银杏外种皮最佳浸提工艺为:用60%乙醇,料液比1∶12,温度为60℃,浸提两次(每次2～3h)。采用ADS-17大孔树脂,用70%洗脱,可将银杏外种皮黄酮进行初步纯化,纯化后提取物中总黄酮含量可达22.3%。银杏外种皮提取物在FeSO4-H2O2体系中有很强的清除·OH作用,其IC50值为0.18mg/ml。     

二氧化氯气体对葡萄链格孢菌的抑制作用

该文研究了二氧化氯气体(ClO 2)对链格孢菌的抑制作用,为降低采后葡萄贮藏过程中交链孢霉腐病带来的损失提供依据。用1.5、3.0、4.5、6.0、7.5、9.0μg/L ClO 2分别对离体链格孢菌处理10、20、30 min,以不做任何处理为对照组,通过测定菌落生长、孢子形成、芽管伸长抑制率及倒置显微镜观察菌丝形态来探究ClO 2对其抑制效果。并用3.0、6.0、9.0μg/L ClO 2对接种了链格孢菌的葡萄处理30 min,置于28℃的培养箱中贮藏,通过测定病斑直径、发病率及相关酶活性来探索ClO 2对交链孢霉腐病的抑制作用。结果表明,离体实验中,与对照组相比,ClO 2处理组均能显著抑制链格孢菌菌落生长、孢子形成及芽管伸长。且接种了链格孢菌的活体实验中,ClO 2处理组均能抑制果实的病斑直径及腐烂率,延缓果实中丙二醛含量的积累,维持较高的抗氧化活性,其中采用9.0μg/L ClO 2处理果实30 min效果最好。     

链格孢菌植物抑菌剂的筛选优化

以13种植物为原料,以抑菌圈的直径为指标,对链格孢菌植物抑菌剂进行了筛选优化。实验以丙酮提取剂筛选出甘草和苦参作为抑菌原料,然后分别考察了水、乙醇和丙酮等作为提取剂对抑菌活性大小的影响,最后以乙醇为提取剂,通过单因素和正交实验分别对苦参和甘草抑菌液提取条件进行了研究,获得最佳提取条件。      

银杏外种皮多酚氧化酶的研究

采用不同条件抽提银杏外种皮多酚氧化酶(简称PPO),比较抽提条件对PPO活性的影响;利用乙醇分级法对PPO进行初步分离纯化,比活力从49.8u/mg提高到292u/mg;研究pH、温度、金属离子对乙醇分级提纯后的PPO的影响,发现其最适温度为30℃,最适pH=7.6,Mg2+对酶有明显的激活作用。而Na+、K+、Fe2+则对酶有抑制作用。     

链格孢霉毒素检测方法研究进展

链格孢霉菌属于丝状真菌,是一种普遍存在于环境中的病原体和腐生菌,是低温环境下导致水果、蔬菜等农产品腐烂变质的主要微生物。链格孢霉毒素中有70多种具有明显毒性,对人或牲畜具有诱变性、致癌性和致畸性等慢性或急性毒性作用,因此引起了科学家们的广泛关注。但到目前为止,国内外现行的食品中真菌毒素的限量标准中尚不包括链格孢霉毒素,并且通常采用液相、液相-质谱、气相、气相-质谱等相关的检测方法进行检测。本文首先对链格孢霉菌的3种主要的次级代谢产物——链格孢酚、链格孢酚单甲醚和细交链孢菌酮酸的分类及毒性性质进行介绍;其次,对其主要的传统检测方法和快速检测方法进行综述;最后,对链格孢霉毒素检测的新技术新方法进行了展望。     

从银杏外种皮中提取银杏酚酸的工艺条件研究

研究从银杏外种皮中提取分离银杏酚酸的工艺条件，探讨了影响银杏酚酸浸出率的主要因素以合适的精制方法。结果表明，以80％乙醇为提取溶剂，采用1：7（W／V）的料液比，在60℃条件下回流提取3次，每次4h ,经过滤，真空浓缩后，采用大孔吸附树脂精制，冷冻干燥后得到的提取物中银杏酚酸总量为52．14％，得率为3．05％。     

链格孢菌植物抑菌剂的筛选优化

以13种植物为原料,以抑菌圈的直径为指标,对链格孢菌植物抑菌剂进行了筛选优化。实验以丙酮提取剂筛选出甘草和苦参作为抑菌原料,然后分别考察了水、乙醇和丙酮等作为提取剂对抑菌活性大小的影响,最后以乙醇为提取剂,通过单因素和正交实验分别对苦参和甘草抑菌液提取条件进行了研究,获得最佳提取条件。     

银杏外种皮挥发性成分分析

采用同时蒸馏萃取和固相微萃取两种萃取技术提取银杏外种皮的挥发性成分,并采用气相色谱-质谱联用对其挥发性物质成分进行分离鉴定。结果共鉴定出29种挥发性化合物,包括酸类9种、酯类9种、酮类3种、醛类1种、醇类4种、烃类1种、杂环类化合物2种,两种萃取物中都鉴定出的挥发性成分有12种。经SDE-GC-MS分析出的相对含量较高(峰面积比>1%)的化合物有己酸(65.88%)、丁酸(21.46%)、棕榈酸(4.53%)、辛酸(1.15%);经固相微萃取-气相色谱-质谱联用分析出的相对含量较高(峰面积比>1%)的化合物有丁酸(59.96%)、己酸(25.45%)、己酸甲酯(3.90%)、丁酸甲酯(3.59%)、乙酸(1.65%)。根据分析出的挥发性成分的香气特征可知对银杏外种皮挥发性气味贡献较大的物质有丁酸、己酸、丁酸甲酯和己酸甲酯等。     

银杏黄酮抑菌作用的研究

本文采用液相色谱法对银杏仁提取物主成分进行了定性测定,并对其抑菌作用进行了研究。结果表明：银杏仁乙醇提取物的主要成分为黄酮类化合物。在抑菌圈试验中,黄酮类化合物对细菌和真菌都有一定的抑制作用,且对细菌的抑制作用略好于真菌。在食物抑菌试验中,20mg/m L提取液对培养72h牛肉中的大肠杆菌、白葡萄球菌和毛霉都有很好地抑制作用;对豆腐中的毛霉抑菌作用明显,对大肠杆菌和白葡萄球菌没有抑制作用,反而呈现促进作用,食品的特性决定了黄酮类物质对菌类的抑制效果。     

银杏叶提取液复合涂膜对鲜切苹果品质的影响

以‘红富士’苹果为试材,采用0.5 mg/mL银杏叶提取液及其与1%海藻酸钠复合涂膜两种方式处理鲜切苹果,从色泽、硬度、质量损失率、VC含量、多酚氧化酶活性、菌落总数以及感官评定等方面对鲜切苹果的保鲜效果进行评价,探讨银杏叶提取液及其复合涂膜对鲜切‘红富士’苹果保鲜的影响。结果表明：银杏叶提取液处理和银杏叶提取液复合海藻酸钠涂膜处理均可降低鲜切‘红富士’苹果贮藏期间的呼吸强度及乙烯释放速率,延缓鲜切苹果可溶性固形物、可滴定酸和VC含量的下降,减缓鲜切苹果的质量损失及硬度的下降,抑制贮藏期间苹果表面微生物的生长,使多酚氧化酶和过氧化物酶的活性维持在较低的水平,较好地维持了鲜切苹果的感官品质,银杏叶提取液复合海藻酸钠涂膜保鲜效果最佳。     

氨基酸对烟草赤星病菌毒素毒性的影响

采用摩擦接种处理法、浇根处理法和发芽种子根处理法测定了烟草赤星病菌毒素的毒性,确定了烟草发芽种子根处理法作为烟草赤星病菌毒素毒性的测定方法.用8种氨基酸分别以5种不同浓度与烟草赤星病菌GL-6毒素混合接种,测定结果表明L-精氨酸、L-胱氨酸、L-谷氨酸、L-丙氨酸和L-天门冬氨酸所有供试浓度均增强病菌毒素毒性;而L-脯氨酸、L-色氨酸和L-缬氨酸对病菌毒素毒性有抑制作用,其有效浓度分别为0.02～0.2、0.02～0.2和0.02～2mg/mL.     

银杏叶粗提物对猕猴桃灰葡萄孢霉的抑制

为了寻找到一种天然无害的猕猴桃保鲜剂,同时降低猕猴桃采后贮藏过程中灰霉病的发生,本试验用类黄酮含量分别为0.3 mg/mL、0.5 mg/mL和0.7 mg/mL的银杏叶提取液（extract of Ginkgo biloba leaves,EGb）对接种了灰霉菌菌悬液的‘秦美’猕猴桃进行处理,以无菌水为对照组,通过测定硬度、发病率、病斑直径、呼吸速率、可溶性固形物和可滴定酸等生理指标及多酚氧化酶、过氧化物酶、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和苯丙氨酸解氨酶等酶活性来探究银杏叶提取液对猕猴桃采后灰霉病的抑制效果。结果表明：0.5 mg/mL和0.7 mg/mL的银杏叶提取液可以降低接种了灰霉菌的猕猴桃的发病率,同时较好的维持果实的硬度,延缓可溶性固形物的上升速率和可滴定酸的下降速率,使抗性酶活性维持在较高水平且可以更快的诱导几丁质酶和苯丙氨酸解氨酶活性的上升。其中效果最好的处理是0.5 mg/mL处理组。     

银杏叶提取液结合异抗坏血酸钠对鲜切砀山梨贮藏品质的影响

目的:研究银杏叶提取液结合异抗坏血酸钠对鲜切梨的保鲜效果。方法:以鲜切砀山梨为材料,探究总黄酮含量分别为0.25(处理1)、0.50(处理2)、0.75 mg/m L(处理3)的银杏叶提取液结合1%的异抗坏血酸钠(D-sodium ascorbate,D-VCNa)溶液对鲜切砀山梨在4℃条件下贮藏品质的影响。采用SPSS软件分析了贮藏期间鲜切梨的呼吸强度、质量损失率、色差、VC含量、硬度、可溶性固形物含量(soluble solid content,SSC)、过氧化物酶(peroxidase,POD)活力、相对电导率及pH值的变化等。结果:不同质量浓度黄酮的银杏叶提取液结合D-VCNa溶液都可以在不同程度上减缓鲜切梨的呼吸强度、质量损失率、色差的增加,减缓VC含量、硬度、SSC的下降速率,延迟褐变发生、POD活力高峰的出现时间,抑制果实pH值和相对电导率的上升。结论:银杏叶提取液结合D-VCNa对鲜切砀山梨的贮藏品质有一定的保鲜作用,其中以总黄酮含量为0.50 mg/m L银杏叶提取液结合1%的D-VCNa溶液处理的鲜切梨保鲜效果最好。     

银杏叶提取物对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响

本文探究了银杏叶提取物对甲状腺癌细胞增殖、凋亡作用的影响。将培养后的细胞分为空白组、低浓度银杏叶组、中浓度银杏叶组、高浓度银杏叶组,观察四组细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移和粘附能力,并对凋亡相关蛋白p53、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bax表达进行检测。研究结果显示,72 h时高浓度银杏叶组细胞增殖率为14.25%,低于其他三组;凋亡率为81.64%,高于其他三组。高浓度银杏叶组甲状腺癌细胞迁移数、侵袭数、粘附数分别为25.66、24.19、13.02,均低于其他三组(p0.05)。高浓度银杏叶组甲状腺癌细胞p53、Bcl-2相对表达量分别为0.36、0.26,均低于其他三组,Bax相对表达量为1.79,高于其他三组(p0.05)。结果表明银杏叶提取物能够抑制甲状腺癌细胞增殖、侵袭、迁移、粘附能力,还能够通过调控凋亡相关蛋白p53、Bcl-2、Bax表达而促进细胞凋亡,且其能力呈现浓度依赖性。