可降解咖啡碱菌株的筛选与鉴定

目的：筛选能够降解咖啡碱的细菌,以期在该毒素的生物脱毒中得到应用。方法：以咖啡碱作为唯一碳源和氮源进行咖啡碱降解菌株的初筛,之后将初筛的10 株菌通过液体培养基咖啡碱降解实验最终筛选出降解能力最强的1 株菌。结果：筛选出的HZ-1 菌株在48h 即可将咖啡碱完全降解,对目标菌株细胞形态、生理生化以及16SrDNA 进行鉴定,确定该菌株为Pseudomonas lutea,属于假单胞菌属。结论：利用咖啡碱作为唯一碳源和氮源从土壤中筛选出降解咖啡碱良好的菌株,为脱除咖啡碱提供了微生物菌种,填补了国内空白。     

可降解氨基甲酸乙酯酵母菌的筛选及降解条件优化

本实验旨在筛选得到一株可以有效降解氨基甲酸乙酯的酵母菌,并根据ITS DNA片段鉴定其种属。采用气相色谱-质谱联用(GC-MS)法,测定所筛选株菌的发酵产物中氨基甲酸乙酯的含量,确定一株降解能力较强的菌株,根据系统发育树确定酵母种属,并对该菌株的降解条件进行了优化。结果表明,降解能力较强的菌株为G1-3,为鲁考弗梅奇(Metschnikowia reukaufii)酵母,优化降解条件为接种量为3%,38℃,170 r/min,发酵4.5 d,最终氨基甲酸乙酯的降解量在65.57%左右。     

传统发酵酸牛奶中产蛋白酶酵母菌的筛选及产酶条件优化

从新疆哈萨克族传统发酵酸牛奶中分离筛产蛋白酶酵母菌菌株,并确定了各菌株的产酶能力。试验从新疆塔城地区采集酸牛奶样品,以蛋白酶活性作为筛选指标进行初筛、复筛,得到5株高产蛋白酶菌株并对其产酶条件进行优化。经形态观察及26S rDNA序列分析鉴定菌株D1-3为Pichia kudriavzevii,E1-5为Issatchenkia orientalis,S1-7为Kluyveromyces marxianus,W1-10为Candida parapsilosis,S1-16为Saccharomyces cerevisiae。对其产酶条件优化得出:在最佳产酶发酵液条件下,菌株D1-3最佳产酶活力达78 U/m L、S1-7为79 U/m L、S1-16为55 U/mL、E1-5为82 U/mL、W1-10为64 U/mL,其最适产酶温度为28℃,W1-10为37℃;菌株最适产酶初始p H、接种量和时间分别为5.0、3%、48 h。     

高产SOD海洋酵母菌的筛选及其发酵条件的研究

从海洋中筛选出1株产SOD能力较强的酵母菌菌株Y9,研究了不同碳源、氮源、碳氮比和金属离子对其细胞生物量及产SOD的影响。该菌株产SOD的适宜碳源为葡萄糖,氮源为蛋白胨,氮源浓度为2%,适宜金属离子为Mn2+。以其为出发菌株,通过正交试验优化其产SOD的发酵条件,结果表明,菌株Y9产SOD最适发酵条件为pH6.5、Mn2+浓度150μmol/L、装液量为60mL/500mL、接种量为10%,在此优化条件下,菌株Y9的SOD总量可达2280.2U/L,比初始产量提高了14.2%。     

合成棕榈油酸的酵母菌的筛选和鉴定

从江西共青葡萄园土壤样品中分离到一株产高含量棕榈油酸的酵母菌。该菌株产油脂量为菌体干重的３２％，棕榈油酸占油脂总量的５０．１４％，经初步鉴定认为是一株酿酒酵母Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ．     

宁夏甜瓜酒优良酵母菌的筛选及鉴定

在宁夏黄甜瓜自然发酵醪中分离得到56株具有典型性状的酵母菌,经过WL营养琼脂培养基初筛和氯化三苯基四氮唑(TTC)显色法、杜氏管发酵法及感官评定复筛出1株产酒精能力和发酵能力强,产果香酒香浓郁,典型性强的优良菌株NT13,通过耐受试验结果表明其符合果酒发酵对葡萄糖、乙醇、SO_2、p H值的条件要求。采用密度瓶法测其能够自然发酵产乙醇10.9%vol,生长曲线测定实验表明菌量在2 h后以指数级增加,10 h后趋于稳定。经生理生化初步鉴定及26S r DNA D1/D2序列鉴定NT13为酵母属酿酒酵母。     

葡萄表面所得酵母菌的筛选及其鉴定

从市售葡萄表面分离出两株酵母菌,经形态、培养特征、酵母菌假菌丝和酵母菌子囊孢子的观察和生理生化实验及发酵特性的研究,鉴定出这两株酵母菌分别为布鲁塞尔德克酵母(Brettanomyces bruxellensis)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive)。      

葡萄表面所得酵母菌的筛选及其鉴定

从市售葡萄表面分离出两株酵母菌,经形态、培养特征、酵母菌假菌丝和酵母菌子囊孢子的观察和生理生化实验及发酵特性的研究,鉴定出这两株酵母菌分别为布鲁塞尔德克酵母(Brettanomyces bruxellensis)和酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive).     

新疆哈萨克族奶酪产脂肪酶酵母菌的筛选及产酶条件优化

从新疆不同地区采集到的哈萨克族手工奶酪中分离得到100株菌种,通过分离(RB)培养基和罗丹明B培养基筛选出4株产脂肪酶酵母菌,分别为Y-2、Z-5、S-6、N-5。结合菌种生理生化及26SrDNA基因序列分析确定4株菌的系统进化地位,在系统发育上Y-2、Z-5隶属于马克斯克鲁维酵母(Kluyveromyces marxianus),S-6和N-5分别隶属于毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)、乳酸克鲁维酵母(Kluyveromyces lactis)。利用对硝基苯酚法对4株菌种产酶酶活进行测定,发现K.marxianus Z-5产脂肪酶酶活最高,达23.00 U/mL;对K.marxianus Z-5产酶条件进行优化,确定最优发酵条件为:温度30℃、pH 7.5、接种量2.5mL/100mL左右时,其酶学活性最强,为25.99U/mL。     

采后芒果炭疽病拮抗酵母菌的分离和筛选

从海南昌江芒果园果树根际土壤中分离出71株酵母菌,采用平板对峙法筛选出对胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides)拮抗作用最明显的酵母菌为LW,其抑菌带宽为12.25 mm。活体防效试验表明,经1×10~8 cfu/m L浓度的LW菌悬液处理的芒果果实(红玉品种)炭疽病病斑直径仅为11.67mm,显著低于对照组的29.63 mm,拮抗效果明显。LW对芒果自然发病的抑制试验表明,在25℃下,1×108 cfu/m L浓度的LW处理芒果,20 d后果实炭疽病病情指数仅为9.2;在15℃下,LW处理24 d后果实炭疽病病情指数仅为9.87。通过菌落和菌体形态及26 srDNA序列分析鉴定,确定LW为美极梅奇酵母(Metschnikowia pulcherrima)。     

酿酒糟醅中生香酵母的筛选及培养条件

为了提高浓香型白酒品质,作者以酿酒糟醅为原料,采用平板涂布法分离纯化出酵母菌,再通过液态发酵筛选出高产酯的菌株,并对其进行生理生化鉴定及26S rDNA同源性分析,最后采用响应面法对菌株的培养条件进行优化。结果表明：作者从酿酒糟醅中分离出1株产香浓郁的菌株,编号为S5。经鉴定S5菌株为异常威克汉姆酵母（Wickerhamomyces anomalus）。优化后的最佳培养条件为初始pH 4.95,发酵时间3 d,初始糖（葡萄糖）质量浓度6 g/dL,在此条件下发酵液中总酯质量浓度为7.67 g/L,比优化前提高了64.2%.由此可见,S5菌株对浓香型白酒品质的提高具有潜在的应用价值。     

产辅酶Q10海洋酵母的筛选及培养条件的优化

从50株海洋酵母中选取11株辅酶Q10产量相对高的菌株,经过复筛得到辅酶Q10高产菌株FH-08,经过对氮源、碳源、初始pH值、培养温度等条件的研究分析,得到最佳的发酵条件。通过优化实验,确定培养基的碳源为葡萄糖3%,氮源为酵母粉2%;pH6.5、温度30℃、接种量4%,300ml三角瓶中的装液量为50ml,摇床转速为200r/min。按此条件进行培养,发酵液中菌体生长量为2.34g/200ml,辅酶Q10的产量为28.6mg/L。     

优良猕猴桃酒酵母的筛选

通过微生物检测、理化测定、感官评定和SPME-GC/MS法对12株优良果酒酵母的单位酵母发酵力、发酵速度、所酿猕猴桃酒的理化、感官品质、主要香气物质种类及其含量进行比较研究,筛选出1株优良猕猴桃酒酵母.结果表明,酵母KD的单位酵母发酵力较高,发酵速度平缓,所酿猕猴桃酒澄清、透明,色泽浅黄,酒体醇和爽口,具有猕猴桃果香和纯正的酒香,典型性强;酒度达10.5%vol,VC含量为0.94 g/L,残糖、总酸和挥发酸含量均较低;共鉴定出48种香气物质,占总峰面积的97.33%,其中,酯类物质达19种,相对含量为34.65%,高级醇(5种,15.38%)和脂肪酸(6种,13.30%)含量少,烷烃类和醛酮类等香气物质种类丰富,酒体协调、饱满,是1株适宜猕猴桃酒酿造的优良酵母.     

富硒猕猴桃果酒酵母的筛选及鉴定

通过酵母菌的分离、显微镜观察和WL培养基的筛选,初筛出酵母菌10 株。采用猕猴桃果汁发酵法、CO2损失质量比较法、以及生理生化的鉴定,从中复筛出一株发酵能力好、产果香酒香浓郁的菌株Y-41。查阅《酵母菌的特征与鉴定手册》,初步鉴定该菌株为毕赤酵母属,再通过分子生物学鉴定,确定该菌株为库德里阿兹威氏毕赤酵母（Pichia kudriavzevii）。对Y-41菌种进行了耐受性检测,结果表明Y-41对葡萄糖、酒精度、pH值具有较高耐受性,可作为富硒猕猴桃果酒发酵专用菌种。     

野生嗜杀白假丝酵母LFA418的产毒条件优化及其毒素粗提物特性

对1株分离自新疆楼兰葡萄酒厂野生白假丝酵母(Candida albicans)LFA418的嗜杀特征及其粗毒素特性进行研究。结果显示,C.albicans LFA418具有致死克鲁维毕赤酵母(Pichia kluyveri)、贝酵母(Saccharomyces bayanus)、Lachancea thermotolerans和葡萄牙假丝酵母(Candida lusitaniae)的嗜杀性。接种体积分数7%C.albicans LFA418到YEPD液体培养基中,25℃培养32 h,可以获得最大产量的嗜杀毒素;利用截留分子质量为8 000 D的透析袋制备的粗毒素,在温度分别-20、4℃时pH 4.2~4.6和pH 4.2时温度4~20℃具有嗜杀活性的稳定性。     

酵母内海藻糖积累条件的优化

对面包酵母 (BY 11)海藻糖积累条件进行了较系统的研究 ,采用了PB和响应曲面设计法 ,得到了 1个优化的培养基。采用此培养基 ,以 3 g/L(以酵母干固物计 )的接种量 ,3 7℃震荡培养 3h可积累海藻糖 0 96g/L ,从而大大提高了海藻糖的产量 ,为工业生产提供了可行性。     

谷胱甘肽(GSH)高产酵母菌株的初筛及营养条件优化

对实验室保藏的14株不同种属的酵母菌株的谷胱甘肽(GSH)产量进行了比较,发现其中log酵母菌株的GSH产量最高,达127.785 mg/L.对其营养条件进行了研究,发现其最佳碳源为葡萄糖;硝酸盐会抑制其生长,而有机氮源对其生长有利;考虑到磷和钾对酵母细胞生长及发酵代谢的作用,选择KH2PO4为培养基中的基本成分.采用正交试验对培养基的基本成分进行优化,在最佳培养条件下log酵母的GSH产量有较大幅度的提高,达到148.547 mg/L.     

新疆石榴酒专用酵母的选育及应用研究

以石榴树叶、石榴皮及石榴园土壤为分离源,共分离到71 株酵母菌,经过三级筛选,获得两株适宜酿造石榴果酒的酵母菌,编号分别为SL18 和SL20 。发酵性能测试结果表明,SL20 菌株在25℃时的发酵周期比对照菌株和SL18 少1d,酒精度达到9.7%(V/V),并且所酿造的石榴酒香味浓郁纯正,而SL18 在25℃时虽然发酵周期与对照菌株相同但所酿造的石榴酒香味比对照菌株要浓郁纯正。30℃时,3 株菌起酵速度都比较快,SL20 和SL18 的发酵周期比对照菌株少1d,SL20 菌株的酒精度高于SL18 和对照菌株,为10.1%(V/V),但3 株菌发酵的石榴酒香味没有20℃和25℃浓郁,说明自选菌株SL20 和SL18 适于25℃发酵并且所酿制的石榴酒明显优于常用的酿酒活性干酵母,并且两株菌能耐受12%(V/V)的酒精度,经鉴定均为酵母属(Saccharomyces) 的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisive) 。