小麦胚凝集素的分离与纯化工艺

麦胚凝集素(WGA)是麦胚中一种具有生物学活性的蛋白质,将它从小麦麦胚中提取出来,能提高面粉生产企业经济效益。利用壳聚糖作为吸附剂,建立了从小麦胚中提取、分离和纯化麦胚凝集素的尼龙布袋法生产工艺;利用SDS凝胶电泳对纯化麦胚凝集素进行鉴定。结果显示,采用40～45的饱和硫酸铵制备粗WGA样品;粗品麦胚凝集素溶液与布袋中壳聚糖的使用比例在3:1～1:1;壳聚糖吸附麦胚凝集素的时间为20h,电泳显示可获得较纯化的麦胚凝集素样品。纯化的麦胚凝集素相对分子量为20412。     

麦胚凝集素分离纯化工艺研究

麦胚凝集素是麦胚中一种具有生物学活性蛋白质.根据甲壳素和麦胚凝集素的性质,以甲壳素作为吸附固相,建立了从麦胚中提取、分离和纯化麦胚凝集素的绢丝布袋法工艺.试验结果显示,采用40%～45%的饱和硫酸铵制备粗麦胚凝集素样品时,粗品麦胚凝集素溶液与布袋中甲壳素的使用比例在3:1～1:1,甲壳素吸附麦胚凝集素的时间为19 h,SDS-PAGE凝胶电泳显示可获得纯化度近100%的麦胚凝集素样品.纯化的麦胚凝集素相对分子质量为20415.     

响应面法优化麦胚凝集素分离纯化工艺研究

麦胚凝集素是一种具有生物学活性的蛋白质,将其从麦胚中提取、开发,能促进麦胚的综合利用,提高相关生产企业经济效益。依据Box-Behnken试验设计原理,进行饱和度硫酸铵质量分数、甲壳素用量和甲壳素吸附麦胚凝集素时间的响应面优化分析。建立了提取、纯化麦胚凝集素优化工艺的二次多项数学模型。优化麦胚凝集素分离、纯化工艺参数:饱和硫酸铵质量分数为47.5%、甲壳素用量为2.0:1和甲壳素吸附麦胚时间为19 h。优化工艺模型预测麦胚凝集素相对得率的理论值为92.1%,验证试验显示麦胚凝集素实际提取率为92.7%。     

麦胚凝集素的高效纯化工艺及其稳定性研究

通过单因素和正交试验确定了麦胚凝集素（WGA）的最佳提取条件（提取时间3.4h,甲酸浓度0.5mol/L,液料比10.15）,并建立了利用盐析分级、选择性热处理、部分水解甲壳素亲合层析和凝胶过滤层析对WGA进行高效纯化的工艺.研究了WGA的理化稳定性,发现WGA的活性随常压热处理温度、时间的增加而降低,而且对于湿热处理比干热处理更敏感.WGA在加压蒸汽处理（2.4kg/cm^2,20min）和挤压处理（145℃,140r/min）后完全丧失活性.WGA的活性在pH7.0～8.5范围内最高,在pH≤2.5或H≥11.0时完全丧失.WGA的活性随茶多酚浓度的增加而显著降低,在茶多酚浓度达到15g/L时完全丧失.     

麦胚凝集素的纯化及其与小麦根际促生细菌的亲和作用

植物凝集素可引导植物-微生物之间的相互识别,对植物根际促生细菌的定殖起着重要作用.采用石油醚和丙酮脱脂、甲酸抽提、硫酸铵盐析、热处理、甲壳素亲和层析的方法分离纯化麦胚凝集素(WGA),从小麦胚中纯化WGA的纯化倍数为115.9,血凝活力为6.8 mg/L,产率为0.566 mg/g.为检测WCA与小麦根际细菌的亲和性识别作用,依据Marshall法对纯化的WGA进行异硫氰酸荧光素(FITC)标记;用标记的WGA对小麦根际细茵染色,26株小麦根际促生细茵中23株具有FITc-WGA染色阳性.表明这些FITC-WGA染色阳性的菌株和WGA具有亲和性识别作用,揭示WGA可能影响定殖在小麦根际的促生细菌.     

麦胚多糖的分离纯化及组成分析

以水为溶剂从脱脂小麦胚芽中制备的麦胚多糖,采用Sephadex-G100柱层析进行分级,得到2种组分WGPⅠ和WGPⅡ。其中WGPⅡ,完全酸水解后,经HPLC测定,主要由葡萄糖、木糖、阿拉伯糖3种单糖组成。     

大孔树脂分离纯化麦胚黄酮研究

在前期研究麦胚黄酮最佳浸提工艺基础上,为探讨麦胚黄酮纯化工艺,本实验选择大孔树脂对其进行分离纯化。以吸附能力、吸附率及解吸率为考察指标,从7种型号大孔树脂中筛选出分离纯化麦胚黄酮效果优的树脂,并确定该树脂的最佳工艺条件。结果表明,H103大孔树脂的吸附率、吸附能力都较高,为麦胚黄酮最佳分离树脂,其最佳工艺条件为上样浓度约0.65 mg/m L、上样速度2.0 BV/h、解吸乙醇浓度70%、解吸速度2.0 BV/h。经H103树脂分离后的麦胚黄酮纯度大大提高,为11.77%,比浸提液中麦胚黄酮纯度0.96%提高了12.26倍。      

赤小豆凝集素的分离纯化及电泳分析

以赤小豆凝集素为研究对象,采用响应面试验对其提取工艺进行优化。采用硫酸铵分级沉淀法、Q Sepharose XL阴离子交换色谱、Phenyl FF HP疏水层析色谱和Sephadex G-50凝胶过滤色谱进一步纯化,通过SDS-PAGE电泳对其蛋白质进行分析。结果表明,赤小豆凝集素的最优提取条件为:以PBS为浸提液,料液比1∶23(g/mL),pH 7.8,持续时间14h,此条件下凝集活性为(37.18±0.18)HU;纯化后的凝集素凝集活性达127HU,经鉴定目标凝集素具有两条亚基,分子量分别在55kDa和27kDa附近。     

阿魏菇凝集素分离纯化及理化性质的研究

通过对新疆阿魏菇凝集素的提纯及分析,了解凝集素的基本理化特性,为深入探究阿魏菇凝集素的免疫调节活性在理论上奠定了基础。对阿魏菇组织实体打浆、PBS浸提、硫酸铵沉淀、冷冻干燥,DEAE-cellulose、Sepharose-4B等层析柱法分离纯化得到较为纯净的凝集素。采用小鼠血液测定凝集素凝集效价的方法初步研究凝集素的理化性质。分离纯化得到较为纯净的凝集素,此凝集素在温度升高至70℃时,凝血活性全部丧失;pH 4~9条件下,凝集素活性较为稳定,在pH 2以下及pH 10以上凝集素活性逐渐消失。盐度升高,凝集素活性降低;D-半乳糖是其良好的抑制剂;金属离子对凝集素活性的影响各不相同。     

玉米胚谷胱甘肽分离纯化工艺的研究

采用732阳离子交换树脂对玉米胚提取液中谷胱甘肽进行分离纯化,确定了分离纯化的最佳条件为:谷胱甘肽与树脂体积比4:1、吸附时间40min、流速1mL/min、洗脱剂NaOH浓度0.2mol/L、洗脱剂与树脂体积比4:1、解析时间105min,谷胱甘肽回收率83.33%。      

玉米胚谷胱甘肽分离纯化工艺的研究

采用732阳离子交换树脂对玉米胚提取液中谷胱甘肽进行分离纯化,确定了分离纯化的最佳条件为:谷胱甘肽与树脂体积比4:1、吸附时间40min、流速1 mL/min、洗脱剂NaOH浓度0.2mol/L、洗脱剂与树脂体积比4:1、解析时间105min,谷胱甘肽回收率83.33%.     

阿魏菇凝集素分离纯化及理化性质的研究

通过对新疆阿魏菇凝集素的提纯及分析,了解凝集素的基本理化特性,为深入探究阿魏菇凝集素的免疫调节活性在理论上奠定了基础。对阿魏菇组织实体打浆、PBS浸提、硫酸铵沉淀、冷冻干燥,DEAE-cellulose、Sepharose-4B等层析柱法分离纯化得到较为纯净的凝集素。采用小鼠血液测定凝集素凝集效价的方法初步研究凝集素的理化性质。分离纯化得到较为纯净的凝集素,此凝集素在温度升高至70℃时,凝血活性全部丧失;pH 4~9条件下,凝集素活性较为稳定,在pH 2以下及pH 10以上凝集素活性逐渐消失。盐度升高,凝集素活性降低;D-半乳糖是其良好的抑制剂;金属离子对凝集素活性的影响各不相同。     

麦胚降血糖肽的分离纯化及鉴定

建立麦胚降血糖肽的分离纯化方法及鉴定活性多肽的结构组成。采用胰蛋白酶酶解麦胚蛋白,得到降血糖多肽,并进行降血糖动物实验。超滤获得高活性组分,离子交换吸附实验选择最佳的树脂,并对麦胚降血糖肽进行离子交换吸附分离,SephadexG-25和SephadexG-15分离,再经过反相高效液相色谱（reverse phase-high performance liquid chromatography,RP-HPLC）分离高活性成分。最后采用高效液相色谱-电喷雾-质谱（HPLC-electrospray ionization-mass spectrometry,HPLC-ESI-MS）鉴定活性多肽的结构组成。结果显示酶解麦胚蛋白对α-葡萄糖苷酶的抑制性IC50为10.98?mg/mL,能够缓解糖尿病小鼠的症状。超滤获得分子质量小于5?kDa的高活性组分,IC50为1.60?mg/mL。732型阳离子交换树脂的分离效果最好,2.5%氨水的洗脱率为98.13%,通过动态离子交换吸附分离后,活性显著提高,IC50为0.30?mg/mL。通过SephadexG-25和SephadexG-15分离得到高活性组分,经RP-HPLC分离得到8?个组分（峰）,其中1号峰的活性和含量都最高,IC50为0.098?mg/mL。HPLC-ESI-MS结果显示m/z?274.45的丰度比较高,经离子碎片拼接,共有7?种多肽,其中二肽有1?种,三肽有6?种。本研究对于开发具有降血糖功效的新型功能性食品有一定的作用。     

谈谈小麦胚的提取工艺

介绍了国内常见的几种小麦胚的提取工艺，并分析了其特点。     

麦胚凝集素的肠道营养及免疫增强活性

麦胚凝集素(WGA)来源于谷物，是一种可以与甲壳素结合的高度保守性的凝集素。麦胚凝集素可以影响肠道及消化细胞的生理形态和功能，增强免疫细胞的免疫活性。详细述叙了麦胚凝集素的营养与抗营养功能，及其免疫增强活性，阐述了麦胚凝集素的研究现状与应用前景。     

麦胚凝集素红细胞凝集活性检测方法的改进

对红细胞进行蛋白酶处理、戊二醛固定,采用pH7.2等渗磷酸盐作为缓冲液,用光径0.5cm比色池测定凝集活性,读取测定终点的时间以2h为宜.建立的检测方法简单易行,得出的结果具有良好的灵敏度及重现性.     

大孔吸附树脂分离纯化麦胚蛋白酶解物中的抗氧化寡肽

采用DA201-C型大孔吸附树脂对麦胚蛋白酶解物(WGPHs)进行乙醇分步洗脱,不同浓度乙醇洗脱组分的疏水性氨基酸的摩尔百分比和疏水性Q值的分析结果表明:洗脱是按照疏水性递增的方式进行的,说明利用不同浓度乙醇将WGPHs按疏水性大小初步分离纯化是可行的,含疏水性氨基酸肽段的富集显著提高了WGPHs梯度洗脱组分的体外抗氧化活性。     

生物凝集素分类与纯化的研究进展

凝集素是一类具有糖专一性,可促使细胞凝集的糖蛋白。凝集素已广泛应用于化学、生物化学、生物学、免疫学及医学等各个领域。本文主要对生物凝集素的分类与纯化方法进行了较为系统的阐述,为凝集素资源的开发提供一定的参考和借鉴。     

小麦胚抗营养因子——麦胚凝集素的灭活研究

最近研究发现,小麦胚中的凝集素(WGA)是一种抗营养物质,并且有可能是人体某些免疫性疾病的诱因之一。通过对干热、湿热、酸碱、加压蒸汽、挤压以及茶多酚6种处理方法对WGA灭活效果和对小麦胚蛋白品质影响的研究发现,0.24MPa,≥20min加压蒸汽处理可以使WGA活性完全丧失,而且基本上保持小麦胚的功能特性不被破坏,同时也改善了小麦胚的贮藏特性;采用80℃,≥10min湿热处理也可以完全灭活WGA,而且对于小麦胚营养成分的破坏程度较小;其它4种方法在灭活WGA的条件下,对小麦胚蛋白的品质均造成显著的损害。      

小麦胚抗营养因子--麦胚凝集素的灭活研究

最近研究发现,小麦胚中的凝集素(WGA)是一种抗营养物质,并且有可能是人体某些免疫性疾病的诱因之一。通过对干热、湿热、酸碱、加压蒸汽、挤压以及茶多酚6种处理方法对WGA灭活效果和对小麦胚蛋白品质影响的研究发现,0.24MPa,≥20min加压蒸汽处理可以使WGA活性完全丧失,而且基本上保持小麦胚的功能特性不被破坏,同时也改善了小麦胚的贮藏特性;采用80℃,≥10min湿热处理也可以完全灭活WGA,而且对于小麦胚营养成分的破坏程度较小;其它4种方法在灭活WGA的条件下,对小麦胚蛋白的品质均造成显著的损害。