干酪乳杆菌产酸培养基的优化

为了提高干酪乳杆菌发酵产酸量,本研究以MRS培养基为基础培养基,通过单因素实验和4因素3水平正交试验确立了干酪乳杆菌HJB-006的最佳氮源、碳源、生长盐类等成分配比及培养基初始pH值.结果表明,葡萄糖2.2％、酪蛋白胨1.35％、MgSO4· 7H2O 0.2％,MnSO4·7H2O0.7％,牛肉膏1.0％,酵母膏0.5％,柠檬酸三铵0.2％,乙酸钠0.8％,吐温-80 1 mL/L,培养基初始pH值为6.0,用此培养基在37℃恒温下发酵24 h,其乳酸产量较优化前提高45.45％.     

干酪乳杆菌高浓度培养的初步研究

通过选择不同中和剂调酸、补料培养等方法研究了干酪乳杆菌的高浓度培养条件.结果表明初始培养基不调酸,在培养过程中,采用饱和Ca(0H)2作为中和剂,通过调酸碱控制pH值在6.3～6.6之间,不进行补料培养,干酪乳杆菌菌数达到109/mL,可用于菌粉的干剂制造中.     

干酪乳杆菌LC-15的增菌培养基设计及生长动力学研究

对1株具有降胆固醇作用的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)LC-15的增殖培养基进行了筛选和优化,同时对其在分批培养时的生长动力学进行了研究。所得增菌培养基配方为0.1mol/L pH6.8的Na2HPO4-柠檬酸配制经蛋白酶预水解的10%脱脂乳冻干粉,再添加0.5%的葡萄糖,1.5%的胰蛋白胨,0.3%酵母浸膏,在此培养基中的最大菌数可达8.8×109cfu/mL,分别比MRS及脱脂复原乳中提高了1.35倍和0.75倍。得到的干酪乳杆菌在优化培养基中分批培养的生长动力学模型为:N(t)=3.4088/(1+e3.3560-0.3254t)。     

植物乳杆菌ZU018增殖培养基的优化

本研究以植物乳杆菌ZU018为研究对象,最终活菌数为主要参考指标,对其发酵培养基成分进行了优化。采用单因素实验选择碳源、氮源的种类及优化浓度,通过部分因子试验设计初步确定了麦芽糖、酵母浸粉及柠檬酸三铵为培养基中最主要的三个影响因素,进一步运用最陡爬坡试验及Box-Benhnken试验设计对培养基组分进行优化。结果表明,最佳优化培养基配方为:麦芽糖30.03 g/L、酵母浸粉37.50 g/L、牛肉浸粉25.00 g/L、柠檬酸三铵4.39 g/L、磷酸氢二钾2.00 g/L、乙酸钠5.00 g/L、硫酸镁 0.20 g/L、硫酸锰0.05 g/L以及1.00 g/L的吐温80。最终发酵液中植物乳杆菌ZU018活菌数相比优化前提高4.86倍,达到10.67×10⁹ CFU/mL,为后续植物乳杆菌高密度发酵及应用提供了理论依据。     

干酪乳杆菌LZ183E高密度培养条件优化

为提高干酪乳杆菌LZ183E在发酵培养液中的菌体密度,首先通过在不同温度下培养菌株,测定48 h内菌液的OD600 nm值并作出生长曲线,得到菌株最适培养温度为37 ℃、接种时间为16 h及收获时间30 h。随后通过单因素试验和正交试验优化,探究不同碳源、氮源、生长因子、初始pH值以及接种量对菌株LZ183E活菌数和OD600 nm值的影响。结果表明,菌株LZ183E的最佳培养条件为葡萄糖25 g/L、酵母膏20 g/L、南瓜汁24 g/L、初始pH 6.5以及接种量2%。此优化条件下,干酪乳杆菌LZ183E的活菌数对数值达到了9.20±0.04,满足高密度培养要求,并且比原始MRS培养基活菌数对数值（8.12±0.06）高出一个数量级,为干酪乳杆菌LZ183E的冻干保护提供了足够的活菌数。     

副干酪乳杆菌耐乳酸的驯化及增殖培养基的优化

为提高乳酸菌对自身代谢产物乳酸的耐受性、增加发酵液的生物量,采用pH梯度降低法对副干酪乳杆菌进行耐乳酸能力驯化,并通过单因素试验、Plackett-Burman试验设计和响应面法,对驯化后的副干酪乳杆菌增殖培养基进行优化。结果表明,驯化后副干酪乳杆菌在初始pH 5.0的培养基中生长正常,且接种到正常培养基中培养21h其活菌数达到(1.19±0.45)×109 CFU/mL;增殖培养基优化后的配方为酵母膏3%、乳糖2.48%、NH4H2PO40.8%、低聚异麦芽糖0.5%、马铃薯汁11.97%,在该培养基中副干酪乳杆菌培养21h活菌数增加近4倍。     

利用乳清为主要原料高密度培养干酪乳杆菌

利用乳清为原料高密度培养干酪乳杆菌(Lactobacillus casei STL3102),用于生产浓缩发酵剂。在5L发酵罐研究了pH控制和补料培养条件,结果表明,加碱控制pH对菌体生长有利,控制pH为6·0时的菌体干重最高。不同碱液对菌体的生长有显著影响,流加NH3·H2O菌体的产量较高,24h时菌体干重达3·74g/L。在流加NH3·H2O,控制pH6·0条件下,对菌体补料发酵进行了研究。采用30g/L为初始乳清浓度,发酵16h以1·0mL/min恒速补料,发酵44h,菌体干重达4·79g/L,此时测定发酵液中活菌数为1·95×1011CFU/mL。      

干酪乳杆菌(HN-2)固态发酵培养基的优化

该研究选择一株具有水质净化能力的干酪乳杆菌(Lactobacillus casei HN-2),以麸皮及米糠为主要基质对其开展了固态发酵研究。通过部分因子析因试验设计及响应面分析,获得了最佳的固体培养基组合,包括:麸皮6.87g、米糠9.84g、葡萄糖0.26g、大豆蛋白胨0.10g、MgSO4.7H2O 0.05g、CaCO30.25g、K2HPO4.3H2O 0.10g。当初始湿度为65%、初始pH值为6.0时,在37℃经过48h的固态发酵,干酪乳杆菌HN-2的菌体密度最大可达2.47×1010cfu/g。     

拟干酪乳杆菌乳酸发酵培养基氮源优化

从发酵原料成本的角度出发,首先对发酵培养基中的碳氮比进行优化,将培养基中的碳氮比(质量比)提高为28.97;然后逐步将原始发酵培养基中的进口分析纯试剂替代为国产试剂及工业级试剂,并实现了工业级酵母粉FM802和蛋白胨FP101的完全替代。经过5 L发酵罐验证表明,原料替代后,成本降低为原来的1/3,而发酵时间仅增加1 h。     

干酪乳杆菌纯种发酵大豆乳培养基的优化调配

从益生菌乳制品中自行分离选育出的生长繁殖力强、发酵活力高的干酪乳杆菌(05-20)为试验菌株,研究了牛乳和蔗糖在大豆乳中的添加量对干酪乳杆菌在大豆乳中发酵的凝乳时间、凝乳时活菌数、pH值、滴定酸度及产品感官风味的影响,通过方差分析确定了发酵培养基中牛乳和蔗糖的最适添加量分别为20%和7%,完成了以大豆乳作为干酪乳杆菌最佳载体的初步探索,为进一步研制开发益生菌发酵大豆乳制品奠定了基础.     

干酪乳杆菌浓缩发酵剂乳清增菌培养基的优化

利用乳清为基本培养基原料培养干酪乳杆菌(Lactobacillus caseiSTL3102),用于生产浓缩发酵剂.采用Plackett-Burman设计对影响L.casei STL3102菌体生长的培养基成分进行了评价,从7个相关的培养基营养因子中筛选,确定了乳清、牛肉膏和酵母粉为关键影响因子.采用响应曲面法对影响菌体增殖的关键因子最佳水平进行了优化.通过建立的二次模型方程得到最优培养基组成为,乳清59.43g/L、牛肉膏8.44g/L、酵母粉8.85g/L,初始pH值为7.0.通过验证试验证实了模型的预测值与实际值之间吻合较好.不同缓冲盐对菌体增殖影响的实验结果表明,磷酸氢二钾对菌体的增殖较好,确立了培养基缓冲盐成分为磷酸氢二钾3.48g/L.采用优化后的乳清培养基,3%接种量,35℃培养16h,活菌数达3.31×109cfu/mL.     

从干酪乳杆菌的分类看我国益生菌相关法规

概述了干酪乳杆菌相关菌株的分类历史,分析了分类方法对于干酪乳杆菌分类产生的影响,以及对于干酪乳杆菌分类系统产生的影响,希望能够对于我国益生菌法规制定中,菌株鉴定提供借鉴.     

干酪乳杆菌LC-15冻干发酵剂制备条件研究

在益生菌发酵乳制品的开发与应用研究中,益生菌发酵剂的制备具有重要的研究价值。对一株具有降低胆固醇作用的益生菌干酪乳杆菌LC-15（Lactobadllus casei LC-15）进行冻干发酵剂制备研究。通过正交优化得到最佳冻干保护剂组合为：脱脂奶粉100g／L,甘油30mL／L,麦芽糊精100g／L,海藻糖150g／L,L-谷氨酸钠10g／L。将此冻干保护剂应用于干酪乳杆菌LC-15冷冻干燥,其存活率达到82．2％,活菌数达4．4×10^10g^-1。在此基础上,对冻干过程中干酪乳杆菌LC-15的预培养条件和预冻条件进行考察,得到的优化结果为：在37℃预培养60min后以-40℃预冻3h,存活率最高可达到84．8％,活菌数达4．9×10^10g^-1,凝乳时间为13h。     

干酪乳杆菌发酵过程的研究

发酵过程中干酪乳杆菌(L.casei)经过约12h由迟滞期后进入对数期,并保持几何增长直至发酵终点(72h),终点活菌数为(2.21±0.14)×1012g-1。发酵开始pH值为6.42±0.05,发酵终点pH值降至3.7±0.01。pH值降到6.30±0.01时,黏度开始变大且在发酵后期处于稳定状态。发酵过程中发酵乳中的氨基酸态氮的质量浓度从(0.022±0.002)g/100mL升至(0.0389±0.0005)g/100mL。     

干酪乳杆菌GF101活性乳酸菌饮料稳定性研究

从活菌数、乙醛质量浓度和组织状态三个方面,研究了GF101活性乳酸菌饮料冷藏21 d天的稳定性,发现在活性乳酸菌饮料的储存过程中:①活菌数维持在3.0×108 mL-1以上;②乙醛质量浓度缓慢上升,但是变化不大;③沉淀率变化不大,没有任何析水现象.     

干酪乳杆菌粉末发酵剂的研制

研究了干酪乳杆菌粉末发酵剂的制备及活化的条件.将高浓度培养后的干酪乳杆菌离心浓缩,以10%脱脂乳加2.7%甘油作保护剂制成悬浮液后冷冻干燥,采用4%脱脂乳粉作为活化液,活化时间150min,在此条件下粉末发酵剂活化完全,活力恢复较好.     

干酪乳杆菌LC2W合成胞外多糖培养基成分的优化

研究了不同培养基对干酪乳杆菌LC2W胞外多糖产量的影响，并研究了以脱脂乳为基础培养基，添加不同碳源、氮源和其他盐类对LC2W胞外多糖产量的影响。结果表明，不同培养基对LC2W胞外多糖产量影响较大，其中PTYG和脱脂乳培养基胞外多糖产量较高；以脱脂乳培养基为基础培养基，添加质量分数1．0％大豆蛋白胨、1．5％葡萄糖、0．1％的K2HPO4可以提高胞外多糖产量28.75％。     

拟干酪乳杆菌全合成培养基氨基酸及维生素组分优化研究

该文在已有的乳酸发酵全合成培养基基础上,研究了氨基酸和维生素类组分对菌体生长和乳酸生成的影响。通过单组分浓度梯度实验确定了对菌体生长和乳酸合成有明显影响的6种氨基酸和3种维生素;以此作为Plackett-Burman实验设计的因素,筛选出了生物素、天冬氨酸、谷氨酸3种对于乳酸生物合成有极显著影响的因素;通过最陡爬坡实验确定3种因素具有最大响应值的浓度范围;并最终通过Box-Behnken实验得出3种因素的最佳添加浓度。在250 mL摇瓶和2.5 L发酵罐中对优化后的培养基进行验证实验,发现优化后合成培养基的乳酸产量、产率和糖酸转化率都较优化前有了显著提高。该实验研究结果为该菌株今后的代谢调控研究奠定了基础。     

瑞士乳杆菌与干酪乳杆菌在脱脂乳中发酵特性的研究

研究了瑞士乳杆菌(Lh134)和干酪乳杆菌(Lc134)单独与组合在脱脂乳中发酵32 h的pH、发酵乳酸度值、活菌数和氨基酸态氮变化.结果表明,Lh134在脱脂乳中发酵速度比Lc134快,Lh134和Lc134组合在脱脂乳中的发酵能力高过二者单株发酵,发酵结束时pH下降至3.90,发酵乳酸度达到281.30°T,活菌数...     

干酪乳杆菌蛋白酶的性质研究

干酪乳杆菌（Lactobacilluscasei,Lc）6033经增菌培养、超声波破碎、高速冷冻离心后获得粗酶液,并经70%～80%饱和度范围的硫酸铵分级沉淀初步提纯,酶活力回收率（OD275）为9.71%,酶液最适pH为6.5左右、最适温度为40℃,Co2+、Mn2+能显著增强酶液活力;Cu2+、Fe3+、乙二胺四乙酸（EDTA）和苯甲基磺酰氟（PMSF）对酶液有较强的抑制作用;而Zn2+、碘乙酸和β-巯基乙醇的抑制作用较轻微。可见,酶液中可能含金属酶、丝氨酸酶及巯基酶等多种蛋白酶。