木瓜蛋白酶水解绿豆蛋白制备可溶性肽的研究

通过研究木瓜蛋白酶对绿豆蛋白的水解作用,分析了酶浓度、底物浓度、温度、pH、水解时间等因素对水解度的影响,从而确定木瓜蛋白酶水解绿豆蛋白制备绿豆多肽的最佳水解条件,并利用葡聚糖凝胶(SephadexG-15)柱层析测定绿豆多肽分子量。实验结果表明,当水解度为30%时,绿豆多肽分子量绝大多数在1000Da以下。     

核桃粕中多肽的酶法制备工艺

探索生物酶法水解核桃蛋白制备核桃多肽的工艺。以酶解蛋白的水解度和氮溶指数作为考察指标,单因素筛选核桃蛋白水解酶、反应底物的液料比、酶解时间等条件,优化酶水解核桃蛋白及制备核桃多肽的提取的工艺参数。选用胰蛋白酶作为核桃蛋白的水解酶,酶解条件为:pH 7.0,温度45℃,液料比10∶1 (mL/g),酶解时间240 min,添加量4 000 U/g。该条件下改性后的核桃蛋白氮溶指数为69.61%,水解度为39.31%,提取的多肽分子量小于1 450 Da的含量为36.33%。基于酶水解法,此次试验的提取工艺合理可行,为核桃多肽的提取提供了理论依据。     

美藤果粕多肽的提取工艺优化

以多肽的水解度为参考指标,在单因素试验基础上,利用响应面试验优化美藤果粕多肽的高温蒸煮结合酶法提取工艺,并对该工艺下制备的美藤果粕多肽进行氨基酸组成和分子量分析。结果表明,其最佳工艺参数为液料比为20∶1（mL/g）、蒸煮时间6 h、酶解温度55 ℃、酶解时间6 h、酶添加量1.16%,该条件下美藤果粕多肽的水解度为32.5%。制得的多肽分子量小于1 000 Da 的肽段占94.5%,属于小分子多肽。     

双酶法制备大豆肽工艺优化研究

以大豆分离蛋白为原料,通过单因素试验研究蛋白液的浓度、水解的温度、水解时间、酶的加入量及pH等因素对大豆分离蛋白水解度的影响,确定适宜的范围值和因素组合。结果表明,大豆分离蛋白在蛋白液浓度8%,加酶底物比为2%,在55℃水解4 h,水解初始pH为9.0~10.0时水解率最高。水解后pH稳定在7左右。通过苦味值测定,结果表明,风味酶在50℃条件下,水解1 h,苦味值最低。液相色谱检测水解后肽的分子量主要分布在300 Da~1 000 Da范围。小于1 000 Da以下的肽占总量的80.3%,2 000 Da以下的肽含量占91.5%。     

胶原多肽制备工艺优化的研究

采用不同测定方法确定明胶等电点为pH4.5～4.6.以明胶为原料,利用木瓜蛋白酶水解法制备胶原多肽并确定最佳工艺条件.结果表明:胶原多肽制备的最适条件为pH7.0.温度60C,明胶浓度6%,加酶量2000u/g,水解时间6h,此时多肽得率为85.38%,水解度为45.87%.傅里叶变换红外光谱分析表明,胶原多肽具有胶原和蛋白多肽的双重特征.     

木瓜蛋白酶水解豌豆蛋白的工艺研究

研究木瓜蛋白酶对豌豆蛋白的水解作用,分析了酶量、底物浓度、温度、pH、水解时间因素对水解度的影响,确定木瓜蛋白酶水解豌豆蛋白制备豌豆多肽的最佳水解条件为:酶浓度8%(E/S质量比),底物浓度7%(固液比).反应温度65℃,反应时间3.5 h,pH6.5,并利用高效液相色谱法测定豌豆多肽分子量.试验结果表明,当水解度为30%时,豌豆多肽混合物分子量80%集中在500u左右.     

胰蛋白酶水解玉米胚芽蛋白的研究

研究了胰蛋白酶对玉米胚芽蛋白的水解作用,分析了酶浓度、pH、反应温度、底物浓度等因素对水解度的影响。结果表明:最佳水解条件为酶与底物比2%、温度40℃、pH8.0、底物浓度8%。在此条件下水解4 h,水解度可达10.4%。高效凝胶过滤色谱(HPSEC)分析酶解产物分子量分布发现,酶解产物的分子量主要集中在200~4 000 Da。     

超声辅助核桃饼脱脂和多肽制备工艺的优化

采用超声辅助核桃饼脱脂,并以脱脂核桃粉为原料制备核桃蛋白,采用碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备多肽。通过单因素实验和正交实验对超声辅助核桃饼脱脂和核桃多肽制备工艺条件进行优化,并对最优条件下制备的核桃多肽的特性进行分析。结果表明:超声辅助核桃饼脱脂最优条件为料液比1∶20、超声功率500 W、超声时间140 min,在最优条件下脱脂率为91.23%,蛋白损失率为11.32%;酶解制备核桃多肽的最优工艺条件为酶解温度50℃、酶解pH 9、加酶量3.0%、酶解时间5.0 h,在最优条件下水解度达到22.63%,多肽得率为88.24%。核桃多肽粗蛋白质含量约为95%,相对分子质量小于1 000 Da的多肽占比达91.61%。     

双酶分步水解大豆分离蛋白制备缩氨酸

以大豆分离蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶分步水解技术,结合膜分离技术与传统的纯化工艺制备大豆缩氨酸。通过单因素和正交试验得到最佳制备条件：碱性蛋白酶在pH值为9.0、酶用量为5%（W/V）、底物浓度为5%、温度为55℃条件下水解4h后灭酶,风味蛋白酶pH值为6.5、酶用量为5%（W/V）、温度为50℃,水解时间6h,水解度达到25.3%。在此条件下酶解液中Da〈1 000的多肽得率为49.12%。对其进行氨基酸分析,得出氨基酸总量和游离氨基酸的含量分别占寡肽溶液的3.21%和0.28%。     

芝麻多肽对美拉德反应制备的浓香芝麻油风味的影响及其膜分离纯化工艺优化

以芝麻多肽和精炼芝麻油为原料,利用美拉德生香源反应制备浓香芝麻油,研究不同水解度的芝麻多肽对浓香芝麻油感官综合评分的影响,采用高效液相色谱对浓香芝麻油感官综合评分最高的芝麻多肽进行相对分子质量分布分析,并对该芝麻多肽膜分离纯化工艺进行优化。结果表明：水解度为20%的芝麻多肽制备的浓香芝麻油感官综合得分最高,可达5.4分;水解度为20%的芝麻多肽中1 000 Da以下的芝麻多肽占83.33%,对美拉德生香源反应的影响最大;芝麻多肽最佳膜分离纯化工艺条件为酶解液pH 8.0、膜分离压力0.32 MPa、膜分离温度35.5 ℃、膜分离时间30 min,在此条件下膜通量可达89.20 g/（m2·min）。     

水牛乳酶解液ACE抑制率及其稳定性研究

利用胰蛋白酶和胃蛋白酶模拟胃肠道,在不同pH、不同温度下,测定水牛乳酶解液的ACE抑制率的稳定性影响,并对酶解液中多肽分子量分布以及各种氨基酸成分和含量进行分析。结果表明,水牛乳酶解液具有很好的胃蛋白酶耐受性,在pH 3~8,温度≤60℃范围内制备的酶解液ACE抑制率具有良好的稳定性;水牛乳酶解液冻干粉中多肽含量为38.2%,95%的相对分子质量在2 000 Da以下,其中谷氨酸和亮氨酸的含量比较高。     

复合酶水解蚕蛹蛋白制备功能性寡肽的工艺研究

为了制备分子量低、肽含量高的蚕蛹功能性寡肽,本文采用单素实验与响应面分析法,对不同蛋白酶及其不同组合、温度、pH值、底物浓度、酶的添加量等因素对蚕蛹分离蛋白水解工艺的影响进行了研究.研究结果表明,多酶复合水解可显著提高蚕蛹蛋白的水解度和寡肽得率,其中胰酶、风味蛋白酶与中性蛋白酶是最佳多酶组合,其最佳水解条件为底物浓度7.33％、酶添加量[E]/[S]3.62％、pH7.38、水解温度54.6℃、水解时间6h.在此条件下,蚕蛹蛋白的水解度高达29.2％,寡肽得率高达为81.14％.酶解后产品数均分子量为665.5 Da,重均分子量为726.9 Da,肽含量高达74.6％,而游离氨基酸含量仅为7.33％,表明复合酶解虽然提高了蚕蛹蛋白的水解度,但主要产物仍然是低分子寡肽,并没有大量生成游离氨基酸.     

正交试验优化长吻鮠肉蛋白酶解工艺

以脱脂长吻鮠肉蛋白为原料,利用碱性蛋白酶酶解制备水解鱼肉蛋白。通过单因素试验和正交试验优化确定酶解的工艺参数,并考察酶解产物的氨基酸组成和分子量分布特征。结果表明,碱性蛋白酶对长吻鮠肉蛋白酶解最佳工艺参数为加酶量2.0%、温度60℃、pH 8.0、酶解时间4 h,在此条件下,水解度可达27.14%。长吻鮠肉蛋白酶解产物中谷氨酸、天门冬氨酸、赖氨酸和亮氨酸含量相对较高,其中必需氨基酸约占33.44%,酶解产物分子量分布范围主要集中在500~5 000 Da,占总酶解产物的78.3%。     

啤酒酵母-花生粕酶解制备鲜味肽的研究

该研究以啤酒酵母和花生粕混合物为原料,综合分析蛋白回收率、水解度和感官评价等指标,通过单因素结合正交优化试验确定酶解制备鲜味多肽的最佳条件。正交试验选取温度、时间和加酶量3个因素进行优化,以蛋白回收率为指标。优化结果如下：风味蛋白酶∶胰蛋白酶=1∶3（质量比）,加酶量（E/S）为 1.2%,料液比 1∶12（g/mL）,pH 7.0,时间12 h,温度55℃,蛋白回收率为（67.78±1.06）%,水解度为（20.05±0.49）%。在上述条件下制备的样品肽分子量主要分布在5000Da以下,占比为99.72%。游离氨基酸总含量达169.98 mg/g,其中谷氨酸含量最高,占比15.45%。     

鲑鱼皮明胶的提取及胶原蛋白肽的制备

以鲑鱼皮为原料,采用酸浸-水提法提取明胶,通过氨基酸分析以及紫外吸收光谱等方法分析明胶的理化性质。结果显示:明胶提取率为60.46%,纯度为83.92%,紫外最大吸收波长为233 nm,氨基酸组成符合明胶的特性。为得到低相对分子质量胶原蛋白肽,选用木瓜蛋白酶对明胶进行水解,系统考察水解时间、加酶量(质量分数)、底物质量分数、pH、温度对水解率的影响,并通过正交实验对各影响因素进行优化,确定最优酶解条件。结果表明:水解时间2.5 h,加酶量7%,底物质量分数10%,酶解温度55℃,pH 8.0,该工艺条件下水解度为12.65%。制备的胶原蛋白肽相对分子质量小,其中低于1 000的占91.5%。     

茶树籽蛋白质微波辅助酶解制备多肽的研究

以碱提酸沉法制备茶树籽蛋白质,并用微波辅助酶解法制备茶树籽多肽。研究了胃蛋白酶用量、酶解温度、酶解时间、酶解液pH值等工艺因素对酶解产物的蛋白质水解度和多肽浓度的影响,并采用正交试验法优化微波辅助酶解的工艺条件。结果表明,产物的蛋白质水解度和多肽浓度随着加酶量提高和水解时间延长呈稳定上升后趋于平缓的趋势,而随着水解温度提高和酶解液pH值升高呈先上升后下降趋势,酶解液pH值对结果有显著影响。微波辅助酶解工艺可显著缩短蛋白质酶解进程、提高酶解液中多肽的含量,在胃蛋白酶用量6,000 u.g-1、酶解温度50 ℃、酶解时间15 min、酶解液pH值3.5等的优化条件下,酶解产物的蛋白质水解度为13.65%、多肽浓度为13.18 g.L-1。     

鮰鱼皮胶原蛋白肽酶解法制备工艺条件研究

以鮰鱼鱼皮为原料,选用多肽水解酶,分别从酶解时间、加酶量、酶解温度和酶解pH值等因素来研究多肽水解酶对鮰鱼皮酶解所形成肽含量的影响,并通过正交试验优化了酶解条件,其最佳酶解条件为加酶量0.5%,酶解pH值为8.0,酶解温度55℃和酶解时间3.5h,所得的水解液中多肽含量为18.84mg/mL,且鱼皮胶原蛋白肽中分子量在180Da~5000Da的占94.89%。     

响应面法优化鹿尾肽的制备工艺

采用碱性蛋白酶水解鹿尾蛋白质制备鹿尾肽。应用响应面分析法选取温度、时间、p H和酶量4个主要因素,以水解率为响应值,对其工艺进行了优化。得出了鹿尾蛋白水解的最佳工艺条件为:温度53℃、时间5.9 h、p H8.8、酶量1 560 U·g-1。在此条件下鹿血的实际水解率为24.37%,酶解后多肽的分子量分布在1 000 Da左右。试验证明响应面法对鹿尾肽的制备条件的优化是可行的,得到的工艺参数具有实际应用价值。     

鸿雁骨胶原多肽制备及其抗氧化活性研究

以鸿雁（Anser cygnoides）骨骼为原料,采用复合酶酶解制备雁骨胶原多肽,在单因素试验的基础上,采用响应面法优化酶解工艺。以水解度为指标,确定木瓜蛋白酶、中性蛋白酶和碱性蛋白酶为最佳酶组成复合酶,质量比为1∶2∶1,最佳酶解工艺为：酶解温度50℃、pH 7.1、加酶量6 100 U/g、酶解时间5 h,此时水解度为26.34%。通过超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除能力测定,发现雁骨胶原多肽的抗氧化活性与胶原多肽质量浓度成正相关,当底物浓度为6 mg/mL时,超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率分别为59.21%、51.82%。通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE）和分子排阻色谱法测定复合酶酶解制备的雁骨胶原多肽分子量为851 Da～11 092 Da。氨基酸组成分析显示雁骨胶原多肽富含甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、羟脯氨酸及天冬氨酸等,这些特定的氨基酸与胶原多肽的抗氧化活性相关,为雁骨的开发利用提供参考。     

复合酶解金枪鱼碎肉的工艺研究

以水解度为指标,筛选出水解金枪鱼碎肉蛋白效果较好的两种酶为胰蛋白酶和木瓜蛋白酶。以这两种酶组成双酶反应体系,经正交试验得到金枪鱼碎肉蛋白最佳水解条件为:反应温度45℃、反应时间6 h、胰蛋白酶添加量15 000 U/g、木瓜蛋白酶添加量为45 000 U/g、体系pH为7.0。在此条件下,金枪鱼肉水解度可以达到15.83%。酶解液采用10 000 Da和5 000 Da超滤膜进行分离,获得>10 000 Da,5 000～10 000 Da,<5 000 Da三个组分,得率分别为7.69%,30.71%,19.23%。