焦磷酸测序技术检测SLCO1B1基因多态性方法的建立

目的:建立SLCO1B1 A388G和T521C单核苷酸多态位点的焦磷酸测序方法,分析中国健康人群中分布频率。方法: 制备300例健康人外周血gDNA,应用PyroMark ID焦磷酸测序仪进行多态位点分型分析。并通过重复性检验和毛细管电泳测序验证方法正确性。结果: 建立了SLCO1B1 A388G和T521C多态性分析的焦磷酸测序新方法,经毛细管电泳测序验证和重复性验证,结果准确可靠。在300例标本中, 388A、388G、521T、521C等位基因频率分别为28%、72%、89.5%和 10.5%,符合Hardy-Weinberg平衡。结论:焦磷酸测序方法可准确、高通量、快速检测SLCO1B1 A388G和T521C单核苷酸多态性,特别适宜大样本量的临床及科研批量检测需要。     

有机阴离子转运多肽1B1遗传多态性与个体化用药

有机阴离子转运多肽1B1(organic anion transporting polypeptide 1B1, OATP1B1) 由SLCO1B1基因编码,对多种内源性物质及药物具有转运作用,其单核苷酸多态性对药物反应个体差异有重要影响。本文阐述了OATP1B1遗传多态性对他汀类药物、抗肿瘤药物及降糖药物等药代动力学及药效学的影响,以利于药物的合理应用及临床个体化用药。     

CYP1B1遗传多态性与个体化治疗

CYP1B1是细胞色素P450（cytochrome P450, CYP450s）家族成员,作为I相代谢酶,主要通过催化性激素、脂肪酸、维生素、褪黑素及外源性化学物质和药物的代谢,参与人体组织正常结构和生理功能的维持。研究发现,CYP1B1基因多态性会影响其蛋白表达水平和酶活性,对其催化的代谢过程产生影响,尤其是对性激素和外源物质的代谢过程的改变,与青光眼、各类癌症的发生发展及治疗密切相关。研究CYP1B1参与的机体代谢途径及基因多态性对其影响,有利于深入了解代谢途径的改变在相关疾病发生发展和药物治疗中的作用,加深对癌症、青光眼等疾病的认识,促进从基因层面检测和评估相关疾病的发生风险和预后,从而实现疾病的预防和早期发现,为个体化治疗提供依据,改善患者生存质量,延长生存期。本文拟就近五年CYP1B1参与的主要代谢途径及基因多态性对其影响的研究进展作一综述。     

受体SLCO1B1 rs2291075位点多态性对肝移植术后早期他克莫司剂量校正谷浓度的影响

目的：探索肝移植术后早期SLCO1B1 rs2291075基因型对他克莫司（FK506）剂量校正谷浓度（dose-corrected trough concentration,C/D,ng·mL-1·mg-1·kg-1）的影响作用。方法：利用PCR扩增和DNA测序技术对210例肝移植受体及其供体进行SLCO1B1 rs2291075位点以及FK506代谢经典生物标志物CYP3A5 rs776746位点基因分型,分析多态性与FK506代谢表型C/D值的相关性。根据肝功能恢复和C/D值变化情况,肝移植术后早期分为恢复期（1～14 d）和平稳期（15～28 d）,分别进行统计分析。结果：供体和受体CYP3A5 rs776746联合分析可将FK506代谢表型区分为快（EM）、中（IM）、慢（PM）代谢3组,形成E-I-P分型体系。受体SLCO1B1 rs2291075 CC、CT+TT基因型患者C/D值在术后恢复期（P=0.019 5）和平稳期（P=0.015 2）差异均有统计学意义;供体SLCO1B1 rs2291075基因型与FK506 C/D值无关联。多因素分析显示FK506日剂量、总胆红素、E-I-P分型和受体SLCO1B1 rs2291075进入恢复期FK506剂量C/D值预测模型;而在平稳期,受体SLCO1B1 rs2291075未能进入C/D值多因素预测模型。PM亚组分析,排除供体和受体CYP3A5 rs776746影响后,受体SLCO1B1 rs2291075基因型在术后恢复期和稳定期均是FK506 C/D值的独立影响因素（P分别为0.030,0.040）。结论：受体SLCO1B1 rs2291075位点可能是影响肝移植早期FK506 C/D值的新遗传位点,其与供体和受体CYP3A5 rs776746基因型相结合,有助于形成精准用药指导体系。     

CYP2B6 基因多态性及其功能意义的研究进展

CYP2B6 是一个在药理和毒理学上均占有重要地位的代谢酶, 参与约7 %临床上常用药物代谢, 其中包括一些治疗窗较窄的药物。CYP2B6具有高度基因多态性, 在基因编码区和非编码存在许多单碱基突变。到目前为止, 已发现并被命名的等位基因有CYP2B6^*1 ~^*29。本文主要对CYP2B6 的基因多态性、种族差异及其在药物代谢上的功能意义等方面的研究进展进行综述。     

MDR1基因多态性及其临床相关性

P-糖蛋白作为一种广泛分布于全身各组织和器官的重要转运体,对多种药物在体内的吸收、分布、代谢、排泄过程以及防止有害外源性物质的侵袭起重要作用。作为P 糖蛋白的编码基因,多药耐药基因(multidrug resistance-1, MDR1)的多态性在一定程度上决定了上述过程在个体与个体之间的差异,因此对许多疾病的易感性以及特定药物在体内的药动学,药效学和治疗效应均存在较大影响。本文将对MDR1基因多态性对疾病易感性和临床上药动、药效学过程的影响进行综述。     

MTNR1B rs10830963基因多态性对瑞格列奈治疗2型糖尿病患者疗效的影响

目的: 研究MTNR1B rs10830963基因多态性对瑞格列奈治疗2型糖尿病（T2DM）患者疗效的影响。方法: 选取新诊断的T2DM患者90例,口服瑞格列奈 1 mg,一日3次,连续8周,服药前和服药第8周末收集静脉血标本,测定治疗前后人体参数及糖脂代谢相关指标。采用高分辨溶解曲线方法对患者进 MTNR1B rs10830963基因分型。结果: 80例患者完成8周随访,CG+GG基因型携带者空腹血糖（FPG）下降幅度、胰岛β细胞功能指数（HOMA-β）升高幅度均小于CC野生型携带者（P<0.05）。结论: MTNR1B rs10830963基因变异与瑞格列奈治疗T2DM的疗效相关,CC基因型携带者疗效更好。     

安徽地区汉族人群CYP2C9*3和VKORC1-1639G>A基因多态性分布及对华法林稳定剂量的影响

目的：研究CYP2C9*3及VKORC1-1639G>A基因多态性在安徽地区汉族人群中的分布情况及对患者华法林稳定剂量的影响。方法：选取安徽省5个地区6家三级综合型医院2020年1月至2021年12月1 169例患者血液样本,采用原位杂交荧光染色分析技术检测患者CYP2C9*3及VKORC1-1639G>A基因型。结果：1 169例患者CYP2C9*3基因型分布情况：AA型、AC型、CC型基因频率分别为90.16%、9.24%、0.60%;VKORC1基因型分布情况：AA型、AG型、GG型基因频率分别为84.26%、14.71%、1.03%;两基因型在患者性别、年龄及地区分布上差异无统计学意义（P>0.05）;755例达到华法林稳定剂量患者CYP2C9*3 AA基因型华法林日平均剂量（3.02±0.59）mg/d,显著高于AC与CC基因型患者（P<0.05）;VKORC1-1639AA基因型患者华法林日平均剂量（2.72±0.40）mg/d,显著低于AG与GG基因型患者（P<0.05）;达到华法林稳定剂量与未达稳定剂量患者在性别、年龄以及临床诊断上存在统计学差异（P<0.05）。结论：CYP2C9和VKORC1基因型与华法林稳定剂量有关联,以CYP2C9和VKORC1基因型为导向实施临床抗凝治疗,可为华法林个体化用药提供指导。     

染料木素临床不良反应与CYP1A2、UGT1A7基因多态性研究

目的:探讨染料木素临床不良反应与CYP1A2、UGT1A7基因多态性的相关性。方法:114例健康志愿者随机分为试验组与对照组,试验组分别口服染料木素一个剂量50、100、200mg,每人服药1次,观察3d了解有无不良反应发生;用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(RFLRPCR)扩增基因片段并酶切电泳观察分析CYP1A2G2964A、C734A和UGT1A7Trp208Arg的多态性。结果:试验组及对照组的基因型及等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05)。试验组受试者根据有无不良反应的出现分为两组基因,CYP1A2G2964A基因:不良反应组14例受试者中有10例的基因型为G/A(占71.43%),而无不良反应组41例受试者中有22例的基因型为G/G(占53.66%);CYP1A2C734A基因:不良反应组13例受试者中有7例的基因型为C/A(占53.85%),而无不良反应组32例受试者中有16例的基因型为A/A(占50.00%);UGT1A7Trp208Arg基因:不良反应组15例受试者中有12例的基因型为Trp/Trp(占80.00%),并且无不良反应组53例受试者中有32例的基因型也为Trp/Trp(占60.38%)。结论:染料木素不良反应组中CYP1A2G2964A基因以G/A型较高,CYP1A2C734A基因以G/G型较高;UGT1A7基因以TrpTrp型较高。     

皖南地区高血压患者MTHFR基因多态性分布及与血Hcy相关性研究

目的：探讨皖南地区高血压患者MTHFR基因多态性分布特征及与血同型半胱氨酸（Hcy）相关性,为皖南地区H型高血压预防和治疗提供参考。方法：选取2019年10月至2020年8月就诊本院657例高血压人群为研究对象,采用荧光染色原位杂交法进行MTHFR C677T和A1298C位点基因分型,采用酶循环法测定血Hcy浓度。对皖南地区汉族高血压人群MTHFR基因分布特征进行分析,并与已报道的其他地区及种族高血压人群MTHFR基因分布数据进行比较,同时分析不同MTHFR基因型的高血压患者血Hcy水平差异。结果：657例患者中MTHFR基因C677T位点CC、CT、TT型分布为212（32.27%）,321（48.86%）,124（18.87%）,A1298C位点AA、AC、TT型分布为467（71.08%）,171（26.03%）,19（2.89%）。该基因两位点在皖南地区高血压人群中分布无性别差异（P>0.05）。C677T位点CC基因型分布频率低于佛山地区及广西地区,高于河南地区、新疆地区、内蒙古地区;CT基因型分布频率高于佛山地区及广西地区;TT基因型分布频率高于佛山地区及广西地区,低于河南地区、新疆地区、内蒙古地区,差异有统计学意义（P<0.05）。657例患者血Hcy平均值为（15.8±7.80）μmol/L,其中符合H型高血压诊断的患者共510（77.62%）例。男性Hcy水平显著高于女性,差异有统计学意义（P<0.000 1）。C677T位点不同基因型间Hcy水平比较TT型高于CT型和CC型,差异均有统计学意义（P<0.05）。A1298C位点不同基因型间Hcy水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：皖南地区汉族高血压人群MTHFR基因多态性分布与其他地区比较存在明显差异,并且和Hcy水平也显著相关,具有明显的地区特征,可通过基因检测技术结合Hcy浓度测定为皖南地区H型高血压防治提供科学依据。     

调节性B细胞在自身免疫性溶血性贫血患者外周血中的表达及临床意义

目的: 探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血中调节性B细胞（Bregs）的表达及其在该病发病中的意义。方法:选择16例自身免疫性溶血性贫血患者和14例健康志愿者为研究对象,用流式细胞术分析外周血CD19+IL-10+调节性B细胞及CD19+CD24hiCD27+调节性B细胞的表达;ELISA方法检测培养上清液中IL-10的水平。结果:自身免疫性溶血性贫血患者外周血中CD19+IL-10+调节性B细胞、CD19+CD24hiCD27+调节性B细胞的表达分别为（1.27±0.39）％、（9.85±2.18）％,健康志愿者组分别为（2.92±0.71）％、（26.47±4.31）％,两组比较差异有统计学意义（P<0.05）;自身免疫性溶血性贫血患者细胞培养上清中IL-10的水平低于健康志愿者组（P<0.05）。结论:自身免疫性溶血性贫血患者外周血中CD19+IL-10+调节性B细胞及CD19+CD24hiCD27+调节性B细胞比例降低,提示调节性B细胞可能参与自身免疫性溶血性贫血的发病过程。     

肝癌患者经导管动脉化学药物栓塞术前后血清肝细胞生长因子水平变化及其临床意义

目的: 研究肝癌患者经导管动脉化学药物栓塞术(TACE) 前后血清肝细胞生长因子(HGF)水平的动态变化及其影响因素, 探讨其临床意义。方法: 以30 例慢性乙型肝炎基础上的肝癌患者为研究对象, 用酶联免疫法(ELISA) 测定TACE 术前1 天, 术后第3 、7 、28 天血清HGF 浓度, 分析TACE前后血清HGF 水平动态变化及其影响因素。以10 例健康献血者为正常对照组, 10 例慢性乙型肝炎患者及10 例慢性乙型肝炎肝硬化患者为慢性肝炎组和肝硬化组。结果: 肝癌患者TACE 术前血清HGF 浓度为[(0.63 ±0.28) ng /mL], 显著高于正常对照组[(0.17 ±0.04) ng /mL] 、慢性肝炎组[(0.35 ±0.08) ng /mL] 以及肝硬化组[(0.39 ±0.09) ng /mL] (P <0.05) 。TACE 术后血清HGF浓度上升高峰出现在术后第3 天[(1.37 ±0.21) ng /mL], 术后第7 天逐渐下降[(0.79 ±0.14) ng /mL], 术后第28 天基本恢复术前水平[(0.66 ±0.19) ng /mL] 。TACE 术后有肿瘤转移的肝癌患者, 其术前血清HGF 水平显著高于无肿瘤转移的患者[(0.94 ±0.18) ng /mL vs (0.51 ±0.23) ng /mL, P <0.05] 。栓塞范围超过1 2 肝脏体积的肝癌患者术后第3 天血清HGF 水平上升更明显[(1.74 ± 0.16) ng /mL vs (1.16 ±0.17) ng /mL, P <0.05] 。结论: 血清HGF 水平可作为肝癌诊断和TACE 治疗后随访的肿瘤标记物之一, 肝癌患者TACE 术后血清HGF 水平的持续升高可能与术后肿瘤转移有关。