血清叶酸水平及其代谢通路关键酶基因多态性与胚胎停育的相关性分析

目的:分析血清叶酸水平及其代谢通路关键酶基因多态性与胚胎停育的关系,为其临床诊治提供新靶点。方法:以本院收治的137例有胚胎停育史的妇女和随机抽取的152例正常妊娠妇女为研究对象,抽取外周血,采用ELISA试剂盒检测血清叶酸水平;并取口腔黏膜脱落细胞,采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）检测叶酸代谢通路关键酶亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）C677T、A1298C,与甲硫氨酸合成酶还原酶（MTRR）A66G的基因多态性。 结果:病理组叶酸水平低于对照组,孕期服用叶酸时间也偏短,组间差异均有统计学意义（P<0.05）。Hardy-Weinberg遗传平衡检验结果显示两组的MTHFR C677T、A1298C,MTRR A66G基因型和等位基因分布均符合平衡定律（P>0.05）,具有代表性。经非条件Logistic回归分析,携带MTHFR C677T TT基因型、A1298C AC基因型和MTRR A66G GG基因型是发生胚胎停育的危险因素（P<0.05）,其发生风险分别是普通人群的3.002、1.970和2.321倍。结论:胚胎停育可能与叶酸水平及代谢通路关键酶基因多态性均有关系,其具体作用还需要进一步研究加以论证。     

皖南地区高血压患者MTHFR基因多态性分布及与血Hcy相关性研究

目的：探讨皖南地区高血压患者MTHFR基因多态性分布特征及与血同型半胱氨酸（Hcy）相关性,为皖南地区H型高血压预防和治疗提供参考。方法：选取2019年10月至2020年8月就诊本院657例高血压人群为研究对象,采用荧光染色原位杂交法进行MTHFR C677T和A1298C位点基因分型,采用酶循环法测定血Hcy浓度。对皖南地区汉族高血压人群MTHFR基因分布特征进行分析,并与已报道的其他地区及种族高血压人群MTHFR基因分布数据进行比较,同时分析不同MTHFR基因型的高血压患者血Hcy水平差异。结果：657例患者中MTHFR基因C677T位点CC、CT、TT型分布为212（32.27%）,321（48.86%）,124（18.87%）,A1298C位点AA、AC、TT型分布为467（71.08%）,171（26.03%）,19（2.89%）。该基因两位点在皖南地区高血压人群中分布无性别差异（P>0.05）。C677T位点CC基因型分布频率低于佛山地区及广西地区,高于河南地区、新疆地区、内蒙古地区;CT基因型分布频率高于佛山地区及广西地区;TT基因型分布频率高于佛山地区及广西地区,低于河南地区、新疆地区、内蒙古地区,差异有统计学意义（P<0.05）。657例患者血Hcy平均值为（15.8±7.80）μmol/L,其中符合H型高血压诊断的患者共510（77.62%）例。男性Hcy水平显著高于女性,差异有统计学意义（P<0.000 1）。C677T位点不同基因型间Hcy水平比较TT型高于CT型和CC型,差异均有统计学意义（P<0.05）。A1298C位点不同基因型间Hcy水平比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论：皖南地区汉族高血压人群MTHFR基因多态性分布与其他地区比较存在明显差异,并且和Hcy水平也显著相关,具有明显的地区特征,可通过基因检测技术结合Hcy浓度测定为皖南地区H型高血压防治提供科学依据。     

皖南地区脑卒中人群MTHFR C677T基因多态性分布研究

目的:探讨皖南地区脑卒中人群中5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR) C677T遗传基因多态性分布特征,分析皖南群体该基因分布特点,为皖南地区脑卒中的防治提供参考。方法:选取2018年1月至2019年10月我院脑卒中人群114例,利用荧光染色原位杂交分析技术对患者进行MTHFR C677T基因分型。检测MTHFR C677T位点基因型,用皖南地区脑卒中人群MTHFR C677T基因多态性分布数据,与已报道的中国其他地区汉族脑卒中人群基因分布数据进行比较。结果:114例患者中MTHFR C677T位点TT、CT、CC基因型频率分布为28.90%、50.00%、21.10%,C、T两个等位基因分布频率分别为53.95%、46.05%。该基因在皖南地区分布无性别差异,但CC型与重庆地区、黑龙江地区、广州地区比较,差异有统计学意义（P<0.05）。TT型与重庆地区、豫北地区、黑龙江地区比较,差异有统计学意义（P<0.05）。结论:皖南地区汉族脑卒中人群的MTHFR C677T基因多态性分布与其他地区之间比较存在差异,可通过基因检测技术为皖南地区高风险人群脑卒中防治提供科学依据。     

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性与不育不孕症相关性研究进展

5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶是叶酸代谢通路中的关键酶,在编码该酶的MTHFR基因中已发现多种单核苷酸多态性位点可能导致该酶活性的降低。该酶维持体内同型半胱氨酸正常水平及参与DNA的合成。MTHFR基因多态性被发现可能与男性不育及育龄女性复发性流产有关,将可能导致体内高同型半胱氨酸水平和DNA合成障碍及低甲基化反应,使人体叶酸代谢发生障碍。本文就5,10-亚甲基四氢叶酸还原酶基因多态性对男性不育、育龄女性复发性流产的影响进行综述。     

汉族人群ABCB13435C/T和2677T/G基因多态性对地高辛血清浓度的影响

目的: 研究ABCB1基因多态性对地高辛血清浓度的影响。方法: 选择2016年1月-12月接受地高辛治疗慢性充血性心力衰竭患者。采用荧光染色原位杂交分析技术对患者进行ABCB13435C/T和2677T/G基因分型。所有患者采用地高辛0.125 mg/d的给药方案，连续服用5 d后，采用荧光偏振免疫法检测地高辛血清谷浓度。比较ABCB13435C/T和2677T/G不同基因型患者地高辛血清浓度的差异。结果: 纳入93例患者，ABCB13435C/T和2677T/G基因突变率分别为38.17%和28.49%，且男女之间基因分布频率未见明显差异。与3435CC/CT和2677TT/TG基因型患者比较，3435TT和2677GG型地高辛血清浓度明显升高（P<0.001）。结论: ABCB1基因多态性可影响地高辛血清浓度，但需临床进一步验证。     

克罗恩病患者英夫利西单抗相关基因多态性与血药浓度及疗效关联性研究

目的：探讨克罗恩病（CD）患者英夫利西单抗（IFX）相关基因多态性与血药浓度、免疫原性及疗效之间的关联性,以期为优化CD患者IFX治疗方案提供参考。方法：前瞻性收集2017年9月至2019年9月在本院使用IFX治疗的CD患者相关临床资料,给药前采用多重PCR技术结合高通量测序技术的靶向测序法测得患者TNF-α-308、TNF-α-238、TNF-α-857、TNFRSF1B、ABCB1、FCGR3A基因型,借助酶联免疫吸附法检测维持期IFX谷浓度。利用SPSS 20.0软件进行统计分析,并绘制ROC曲线求临床疗效及抗体（ATI）产生的浓度阈值。结果：研究共纳入111例患者,携带TNF-α-238突变基因的患者IFX谷浓度显著低于野生型（0.55±0.52） vs. （1.75±1.46）μg/mL（P=0.003）,而TNF-α-308、TNF-α-857、TNFRSF1B、ABCB1、FCGR3A不同基因型间IFX谷浓度差异无统计学意义。TNFRSF1B突变型（TG+GG）临床应答率显著高于野生型（TT）（75.0%vs. 42.3%）（P=0.001）,其他基因不同基因型患者间临床疗效差异无统计学意义（P>0.05）。IFX治疗克罗恩病的疗效及ATI的产生与谷浓度显著相关（P<0.01）。预测治疗后生物学反应及临床反应的IFX谷浓度最佳阈值分别为1.33、0.85 μg/mL;谷浓度≤0.51 μg/mL作为指标预测ATI产生的特异性为91.0%,敏感性66.7%。结论：TNF-α-238、TNFRSF1B基因多态性可分别影响IFX治疗CD患者的谷浓度与临床反应。未发现TNF-α-308、TNF-α-857、ABCB1、FCGR3A基因多态性明显影响IFX治疗CD的浓度或疗效。IFX谷浓度>1.33 μg/mL对生物学反应具一定的预测意义,而谷浓度≤0.51 μg/mL可作为ATI产生的预测指标。     

连接蛋白37 rs1764390基因多态性与中国汉族人缺血性脑卒中的相关性研究

目的: 探讨连接蛋白37（connexin37,Cx37）基因rs1764390（A/G）多态性与中国汉族人缺血性脑卒中（ischemic stroke,IS）遗传易感性的关系。方法: 应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP）分析技术,结合琼脂糖凝胶电泳进行病例对照研究,检测184例IS患者（病例组）和149例健康人（对照组）Cx37基因 rs1764390（A/G）多态性位点的基因型分布和等位基因频率。结果: 病例组Cx37 rs1764390 AA、AG、GG基因型分布频率分别为 30.4%、48.9%、20.7%,其中突变等位基因G携带比例为45.1%,对照组AA、AG、GG基因型分布频率分别为 24.2%、51.0%、24.8%,其中突变等位基因G携带比例为 50.3%,经χ²检验,病例组与对照组基因型分布和等位基因频率均没有统计学差异（χ²=1.884 和1.804,P>0.05）。结论: Cx37基因rs1764390 A/G多态性与中国汉族人IS的发生和发展不存在明显的相关性,提示A/G等位基因可能不能作为判断中国汉族人IS易感性的分子遗传标记。     

OCT2、MDR1基因多态性与婴幼儿万古霉素血药浓度及临床疗效的相关性研究

目的: 考察有机阳离子转运体2（OCT2）和多药耐药基因1（MDR1）的基因多态性与婴幼儿万古霉素稳态谷浓度及临床疗效的相关性。方法: 收集91例万古霉素治疗的婴幼儿患者血样,酶免疫放大分析法测定万古霉素血药浓度,聚合酶链式反应（PCR）和DNA测序技术检测基因分型。比较OCT2 G808T（rs316019）和MDR1 C3435T（rs1045642）不同基因型对万古霉素谷浓度及临床疗效的影响。结果: 91例患者中,谷浓度达到10～20 μg/mL的比例为16.5%;5～<10 μg/mL和10～20 μg/mL浓度范围万古霉素的临床有效率（88%,93.3%）显著高于5 μg/mL以下浓度（44%）（P<0.05）,同时5～<10 μg/mL和10～20 μg/mL浓度范围万古霉素的临床有效率相近。OCT2 G808T纯合突变型（TT）患者万古霉素谷浓度（10.15±2.35） μg/mL和谷浓度/剂量比（0.98±0.27） μg·mL-1·mg-1·kg均显著高于野生型（GG）患者（6.92±2.83） μg/mL和（0.59±0.22） μg·mL-1·mg-1·kg（P<0.05）;同时,TT型患者临床有效率（100%）明显高于GG型（73.2%）（P<0.05）;而MDR1 C3435T突变型和野生型患者的万古霉素谷浓度、谷浓度/剂量比及临床疗效相近（P>0.05）。结论: OCT2 G808T基因突变可能与婴幼儿患者万古霉素的稳态谷浓度及临床疗效相关。     

MTHFR,GSTP1,ERCC1基因多态性与结直肠癌FOLFOX化疗方案疗效相关性研究

目的: 探讨亚甲基四氢叶酸还原酶(methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR),谷胱甘肽S转移酶P1(glutathione S-transferase pi-1,GSTP1),核苷酸切除修复交叉互补组-1(excision repair cross-complementing group 1,ERCC1)基因多态性与结直肠癌5-氟尿嘧啶/奥沙利铂/亚叶酸钙(FOLFOX)化疗方案疗效的相关性。方法: 150例晚期大肠癌患者抽取静脉血并提取DNA,用荧光定量PCR和高分辨率溶解曲线分型技术(HRM-SNP)等方法检测患者MTHFR、GSTP1、ERCC1基因型。所有患者均经FOLFOX方案治疗,以实体瘤化疗疗效评价标准(RECIST1.1) 评价疗效。运用SPSS 19.0 结合临床资料进行统计分析。结果: ⑴患者性别,年龄,结直肠癌分期(TNM),肿块部位等和FOLFOX化疗疗效均无明显相关性(P>0.05)。⑵GSTP1 Ile105Val Ile/Ile和Ile/Val+Val/Val有效率分别为19.7%、20.5%,两组基因型之间的OR值为 2.876,95%CI(1.288,6.424),P<0.05;MTHFR Ala222 Val Ala/Ala和Ala/Val+Val/Val有效率分别为 11.8%、28.3%,OR值为 2.236,95%CI(1.020,5.017),P<0.05。结论: GSTP1 Ile105Val 、MTHFR Ala222 Val单核苷酸多态性与结直肠癌对FOLFOX方案化疗疗效相关,检测GSTP1 Ile105Val、MTHFR Ala222Val单核苷酸多态性可能成为预测结直肠癌患者接受FOLFOX方案化疗疗效的指标。     

TCF7L2基因rs7903146多态性与2型糖尿病关系的Meta分析

目的: 系统评价TCF7L2基因rs7903146多态性与2型糖尿病的关系。方法: 通过中国知网（CNKI）和万方数据库及PubMed全面检索公开发表的关于TCF7L2基因rs7903146多态性的研究,采用Stata 11.0软件对纳入的文献进行Meta分析。结果: 最终纳入文献25篇,共纳入25 560例研究对象,糖尿病组13 748例,对照组11 812例。(TT+CT)/CC基因型 Meta分析异质性为I²=72.9%,所以采用随机效应模型合并数据,合并效应量(TT+CT)/CC基因型频率OR值为1.52,95%CI：1.34~1.71,（Z=6.75,P=0.000）;东南亚、欧洲、美洲差异有统计学意义,西亚人群中差异无统计学意义;敏感性分析稳定,漏斗图提示不存在发表偏移。等位基因T/C Meta分析异质性为I²=73.5%,采用随机效应模型;合并效应量等位基因T/C的OR值为1.43,95%CI：1.30~1.57（Z=7.39,P=0.000）,各亚组之间差异有统计学意义;敏感性分析稳定,漏斗图提示无发表偏倚。结论: TCF7L2基因rs7903146多态性与2型糖尿病的发生有关,TT+CT基因型是T2DM患者发病的危险因素;等位基因T是T2DM患者发病的危险因素。     

特利加压素对基线肾功能正常的肝硬化食管胃静脉曲张出血患者肾功能的影响

目的：探索特利加压素对肝硬化食管胃静脉曲张出血患者肾功能的影响。方法：回顾性收集2016年1月1日至2019年1月1日福建省立医院消化内科收治的96例肝硬化食管胃静脉曲张出血患者的临床资料,分析使用及停用特利加压素患者肾功能变化,进一步探索特利加压素使用过程中血肌酐（creatinine, Cr）下降的相关因素。结果：特利加压素组与生长抑素组在治疗期间最低血Cr［(58.41±14.58) μmol/L vs. (66.20±16.27) μmol/L, P=0.015］及最高估算肾小球滤过率（estimated glomerular filtration rate, eGFR）［(105.16±19.36) mL·min-1·1.73 m-2) vs. (95.62±16.18) mL·min-1·1.73 m-2, P=0.011］差异均有统计学意义。在使用特利加压素期间,血Cr值较基线值显著下降［(65.18±17.83) μmol/L vs. (58.41±14.58) μmol/L, P=0.001］,eGFR值较基线值显著升高［(98.94±20.25) mL·min-1·1.73 m-2 vs. (105.16±19.36) mL·min-1·1.73 m-2, P<0.001］,差异均有统计学意义。Logistic回归分析提示较高的基线Cr水平（OR=1.076,95%CI 1.015-1.142,P=0.015）是特利加压素使用期间血Cr下降的预测因子;停用特利加压素后血Cr及eGFR值较基线值未明显变化。使用生长抑素治疗期间及停用后血Cr值均未降低［(65.82±18.12) μmol/L vs. (66.20±16.27) μmol/L, P=0.766］、［(65.82±18.12) μmol/L vs. (68.24±17.99) μmol/L, P=0.085］,差异无统计学意义。结论：特利加压素显著降低基线肾功能正常的肝硬化食管胃静脉曲张破裂出血患者的血肌酐及增加eGFR,可能有利于预防基线肾功能正常的肝硬化食管胃静脉曲张破裂出血患者的肾功能损伤。     

β3肾上腺素受体基因Trp64Arg多态性与中国男性2型糖尿病患者合并高尿酸血症的相关性研究

目的: 探讨中国人群男性2型糖尿病患者中β3肾上腺素受体基因Trp64Arg多态性与高尿酸血症的相关性。方法: 196名高尿酸血症的2型糖尿病患者和196名正常尿酸水平的2型糖尿病患者进行基因分型。检测体重指数、腰臀比、收缩压、舒张压、血尿酸、肌酐、尿素氮、甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇脂、高密度脂蛋白胆固醇脂、空腹血糖和餐后血糖的水平。结果: 高尿酸血症组中,携带不同β3肾上腺素受体Trp64Arg基因型的2型糖尿病患者其尿酸水平有统计学差异,且呈基因剂量效应[CC组(599.53±113.70) vs CT组(529.78±81.10) vs TT组(507.33±74.27), P<0.01]。在该研究中,Trp64Arg TC+CC基因型患者的血尿酸水平亦显著高于TT基因型组[(557.95±99.91) vs (503.47±69.40) μmol/L, P<0.01]。结论: β3肾上腺素受体基因Trp64Arg多态性与2型糖尿病合并高尿酸血症的具有相关性。     

柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞环氧化酶2 mRNA及蛋白表达水平的影响

目的: 研究中药柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞环氧化酶2(COX-2)mRNA及蛋白表达水平的影响。方法: 常规培养人卵巢癌SKOV3细胞,分为空白对照组、柚皮苷 10 μmol/L 组、柚皮苷 20 μmol/L 组、柚皮苷 40 μmol/L 组、阳性对照组(塞来昔布 80 μmol/L)。MTT法测定柚皮苷对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的影响,运用Real-time PCR和Western Blot法测定培养48 h后各组细胞中COX-2 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果: MTT检测法显示,柚皮苷各浓度处理组,时间依赖性和剂量依赖性地抑制人卵巢癌SKOV3细胞生长。经药物处理48 h后,Real-time PCR结果显示,与空白对照组(1.094±0.053)比较,10、20 μmol/L 柚皮苷即对SKOV3细胞COX-2 mRNA表达抑制作用(0.828±0.006,0.753±0.011,P<0.05),而 40 μmol/L 柚皮苷则明显下调 COX-2 mRNA的表达(0.412±0.216,P<0.01),与塞来昔布组(0.321±0.017)的抑制程度相近。Western Blot法检测结果显示,与空白对照组(1.7325±0.0826)相比,10 μmol/L 柚皮苷组相对表达量(1.7925±0.0880)虽略有上调,但无统计学差异,20、40 μmol/L 柚皮苷组均可明显下调SKOV3细胞COX-2蛋白的表达(1.2225±0.0822,1.2725±0.0763,P<0.05),塞来昔布组也明显抑制COX-2蛋白的表达。结论: 柚皮苷可抑制人卵巢癌SKOV3细胞体外增殖并抑制COX-2 mRNA和蛋白的表达。     

二甲双胍对糖基化终末产物诱导的成骨细胞氧化应激和凋亡的影响

目的: 观察二甲双胍对糖基化终末产物(AGEs)诱导的大鼠颅骨成骨细胞内氧化应激产物活性氧簇(ROS)、细胞早期凋亡的影响。方法: 分离培养大鼠颅骨成骨细胞,2′7′-二乙酰二氯荧光素(DCFH-DA)作为荧光探针,流式细胞检测技术检测细胞内ROS水平,膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素/碘化丙啶(Annexin V-FITC/ PI)双染色分析细胞早期凋亡率。结果: 与未经葡萄糖处理的牛血清白蛋白(BSA)组对比,500 μg/mL AGEs显著促进成骨细胞内ROS形成和细胞凋亡(均P＜0.01);给予二甲双胍 (100~500 μmol/L)呈浓度依赖性抑制BSA组及AGEs组成骨细胞内ROS形成和细胞凋亡,浓度分别为500、400 μmol/L 时,对细胞内ROS形成和细胞凋亡的抑制作用达到最强。结论: AGEs显著诱导原代成骨细胞内ROS的形成和细胞凋亡,而二甲双胍能够呈浓度依赖性抑制AGEs诱导的成骨细胞内ROS的形成和细胞凋亡,减轻AGEs对成骨细胞的损害。