糖肾方抑制TGF-β1/Smad3通路促进小鼠肾小管上皮细胞胆固醇流出

目的：利用高糖诱导的小鼠肾小管上皮细胞（mouse tubular epithelial cells, mTECs）观察中药糖肾方颗粒及Smad3抑制剂SIS3对于TGF-β1/Smad3通路及细胞胆固醇流出通路的影响。方法：25 mmol/L高糖诱导mTECs细胞后，分别给予糖肾方及Smad3抑制剂SIS3干预，利用ELISA试剂盒检测细胞中脂质含量，利用Western blot和Real-time PCR检测细胞中TGF-β1/Smad3通路及过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α（peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator 1α, PGC-1α）、肝脏X受体（liver X receptor, LXR）、ATP-结合盒转运蛋白A1（ABCA1）、ATP-结合盒转运蛋白G1（ABCG1）的表达。结果：糖肾方可以降低高糖诱导mTECs细胞中总胆固醇（total cholesterol, TC）、甘油三酸酯（triglyceride, TG）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol, LDL-C）含量，上调高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol, HDL-C）含量（P<0.05）；糖肾方及Smad3抑制剂SIS3可下调高糖诱导mTECs细胞中TGF-β1、Smad3、Collagen Ⅰ和Fibronectin的表达，上调PGC-1α、LXR、ABCA1、ABCG1的表达（P<0.05）。 结论：糖肾方可通过抑制TGF-β1/Smad3信号通路促进细胞胆固醇流出，减轻肾损害。     

烟碱通过N1受体促进热应激对RAW264.7细胞HSP70的诱导表达

目的:本研究探讨在巨噬细胞中,低剂量烟碱联合温和热应激对热休克因子1（heat shock factor 1,HSF1）和热休克蛋白70（heat shock proteins70,HSP70）表达的影响,并揭示其受体机制。方法:用低剂量烟碱（浓度1 mmol/L）联合温和热应激（39 ℃）刺激RAW264.7巨噬细胞,采用Western-blot观察HSP70的表达,免疫荧光细胞化学观察HSF1的入核,凝胶滞留实验（EMSA）观察HSF1与热休克元件（heat shock element,HSE）的结合;接着用不同的阻断剂预处理RAW264.7巨噬细胞,再给予烟碱和热应激刺激,观察HSP70的表达及HSF1的入核。结果: 单纯低剂量烟碱（浓度1 mmol/L）刺激不能诱导HSP70的表达,但HSF1入核明显增多,HSF1与HSE的结合增强;在39 ℃时,再加入烟碱能增强HSP70的表达、HSF1的入核、HSF1与HSE的结合;六烃季铵预处理,HSF1的入核较单纯烟碱处理明显减少,且能明显阻断烟碱在39 ℃时诱导的HSP70表达的作用。结论:低剂量烟碱（浓度1 mmol/L）刺激可以促进HSF1入核并与HSE结合,但不能诱导HSP70的表达;烟碱通过N1受体诱导HSF1入核并促进温和热应激（39 ℃）对RAW264.7巨噬细胞中HSP70的诱导表达。     

TLR2/NLRC5参与棕榈酸诱导的心肌细胞凋亡及相关机制研究

目的: 建立棕榈酸（palmitate acid, PA）诱导体外培养心肌细胞胰岛素抵抗（insulin resistance,IR）及凋亡模型,检测Toll样受体2(TLR2)和NLRC5在此模型中的表达变化及研究相关的可能机制。 方法: 用500 μmol/L 终浓度的PA处理培养H9C2心肌细胞后采用Annexin Ⅴ/PI双染和流式细胞术分析细胞凋亡情况,并分别采用q-PCR及Western blot方法分析处理后细胞的胰岛素受体（InsR）、CD36、PGC-1α、TLR2、NLRC5、SIRT1、p-AMPK/AMPK的mRNA或蛋白表达变化。结果: 与对照组比较, PA处理24 h后H9C2细胞的早、晚期和总凋亡率显著升高, 分别为(7.55±3.80)%、(53.84±4.70)%和(61.39±8.54)% (P<0.05); 处理6 h后心肌细胞的PGC-1α mRNA相对表达量开始下降(P<0.05),TLR2和NLRC5则显著升高(P<0.01),CD36 mRNA相对表达量在PA处理14 h时升高(P<0.05);InsR、SIRT1和AMPK蛋白相对表达量从PA处理8 h时开始下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论: TLR2/NLRC5参与PA诱导的心肌细胞IR和凋亡,并且可能与AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路的活性下降有关。     

栀子苷通过抑制VPO1/ERK1/2信号通路减轻糖尿病心肌病大鼠的心肌细胞凋亡

目的：探讨栀子苷（geniposide, GE）改善大鼠糖尿病心肌病的作用及其具体机制。方法：24只成年雄性SD大鼠,随机分为3组：正常组（Control组,8只）、糖尿病心肌病组（DCM组,8只）、糖尿病心肌病组+栀子苷组（DCM+GE组,8只）,采用高脂饲料联合链脲佐菌素（STZ）构建糖尿病心肌病大鼠模型,应用次氯酸（HOCl）诱导H9C2损伤模型。干预12周后,HE和Masson染色观察心脏组织病理学改变;TUNEL法检测大鼠心肌细胞凋亡水平;免疫组化检测及Western blot检测法检测VPO1/ERK1/2信号通路及凋亡相关蛋白表达水平。给予次氯酸刺激心肌细胞后,Western blot检测法检测ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的改变。给予ERK1/2酶抑制剂U0126后,用Western blot检测法再次检测ERK1/2、p-ERK1/2、Bcl-2、Bax蛋白表达水平的改变。结果：HE及Masson染色显示,与Control组相比,DCM组出现心肌纤维排列紊乱、心肌胶原含量明显增多,而DCM+GE组心肌损伤情况明显改善（P<0.05）。与Control组相比,DCM组心肌细胞凋亡水平及Bax/Bcl-2比值明显增加,而DCM+GE组心肌凋亡情况得到明显好转（P<0.05）。免疫组化和Western blot结果显示,在DCM组中VPO1、p-ERK1/2蛋白表达水平升高,而DCM+GE组中VPO1、p-ERK1/2蛋白表达水平得到了抑制（P<0.05）。进一步对H9C2细胞行HOCl干预发现,与Control组相比,次氯酸组出现p-ERK1/2蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值增加,而加入ERK1/2酶抑制剂U0126后p-ERK1/2蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值下降（P<0.05）。 结论：栀子苷通过抑制VPO1/ERK1/2信号通路抑制心肌细胞凋亡从而改善糖尿病引起的心肌损伤。     

Nrf2通路在氟他胺诱导的肝细胞线粒体生物合成中的作用

目的：探讨氟他胺对人肝细胞线粒体生物合成的影响以及抗氧化通路Nrf2的调节作用。方法：采用人源肝细胞HepG2,氟他胺（0~50 μmol/L）给药24 h,通过RT-PCR和Western blot方法,检测mtDNA拷贝数和线粒体生物合成关键蛋白的表达,再通过应用基因敲降和特异性激活剂或抑制剂等技术方法进一步观察ERK1/2对氟他胺诱导的线粒体生物合成的影响以及Nrf2通路的调控作用。结果：氟他胺可诱导线粒体生物合成,mtDNA拷贝数和ERK1/2、PGC-1α蛋白均呈现剂量依赖性上升;ERK1/2抑制和激活能改变氟他胺诱导的mtDNA拷贝数和PGC-1α的表达;Nrf2通路抑制可影响氟他胺诱导的mtDNA拷贝数和ERK1/2、PGC-1α的表达。 结论：氟他胺可影响线粒体生物合成,其机制与Nrf2介导的ERK1/2改变密切相关。     

蛇床子素抑制NF-κB和p38/MAPK改善糖尿病诱导的肾脏损伤

目的：研究蛇床子素（osthole）对链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病（T1DM）小鼠的治疗作用,并探讨其相关机制。方法：构建STZ诱导的1型糖尿病小鼠模型,将小鼠随机分为正常对照组、STZ模型组和STZ+osthole组（20 mg/kg）。观察各组小鼠体质量、血糖、尿蛋白、尿素氮和肌酐以检测肾脏功能。H&E染色和PAS染色检测肾脏组织损伤程度,Sirius Red染色检测肾脏纤维化程度。CD68和F4/80免疫荧光染色观察肾脏组织巨噬细胞浸润情况,RT-qPCR检测肾脏组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）和白介素-6（interleukin-6, IL-6）的mRNA表达水平,Western blot检测磷酸化的核因子κB p65（nuclear factor kappa-B p65, NF-κB p65）、NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白（inhibitor of nuclear factor kappa-B alpha, IκBα）、p-IκBα和磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38（p-p38）的蛋白相对表达水平。结果：与STZ模型组相比,在蛇床子素治疗后,尿蛋白、尿素氮、肌酐和肾重/体重均显著降低（P<0.05或P<0.01）。肾脏组织结构紊乱、系膜基质面积、胶原纤维堆积、巨噬细胞浸润均显著改善（P<0.05或P<0.01）。促炎细胞因子TNF-α和IL-6的mRNA表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）;磷酸化的NF-κB p65、磷酸化的IκBα和磷酸化的p38蛋白表达水平均显著下调（P<0.05或P<0.01）,而NF-κB p65、IκBα蛋白表达水平上调（P<0.05）。结论：蛇床子素可有效改善糖尿病诱导的肾脏损伤,该保护作用可能与其抑制NF-κB和p38/MAPK信号通路有关。蛇床子素可能成为防治糖尿病相关肾脏损伤的潜在药物。     

氟非尼酮对二乙基亚硝胺诱导的肝损伤大鼠肝细胞中TGF-β1/Smads通路的抑制作用

目的：探究氟非尼酮（fluorofenidone, AKF-PD）对二乙基亚硝胺所致大鼠肝损伤的保护作用及对肝细胞中TGF-β1/Smads通路的影响。方法：55只雄性Sprague Dawley（SD）大鼠随机分为3组：模型组（DEN组,n=20）,灌胃给予10 mg/kg DEN,每周5次至14周停药;对照组（Control组,n=20）,灌胃给与同模型组等体积的生理盐水;治疗组（DEN+AKF-PD组,n=15）,在造模4周后,灌胃给与500 mg/kg AKF-PD,每天一次,至14周停药。实验结束后,麻醉,脊椎脱臼法处死大鼠。肝脏组织进行Masson染色以观察胶原沉积;提取并鉴定原代肝细胞,测定肝细胞中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β1（TGF-β1）、Smad3、Smad7 mRNA的水平,以及Smad3、Smad7蛋白质的表达。结果：与对照组相比,Masson染色显示DEN组中大鼠肝组织胶原纤维明显增多,而AKF-PD治疗可有效减轻肝损伤和纤维化程度。此外,与DEN组相比,AKF-PD治疗组中α-SMA、TGF-β1、Smad3 mRNA水平明显降低,Smad7 mRNA水平升高,AKF-PD治疗也可在一定程度上降低Smad3蛋白的表达,增加Smad7蛋白的表达。 结论：AKF-PD可显著改善DEN所致大鼠肝损伤和纤维化,该作用可能与AKF-PD下调肝细胞中α-SMA、TGF-β1、Smad3 mRNA水平,增加Smad7 mRNA水平相关。     

不同剂量地塞米松对脓毒症肾损伤大鼠血管紧张素II及其受体、NO水平变化的影响

目的：探讨内毒素（LPS）所致脓毒症急性肾损伤（AKI）大鼠血管紧张素II（AngII）及其受体、NO表达的变化及不同剂量地塞米松（DXM）对其干预作用。方法：将Wistar大鼠随机分为5组：对照组（NC）、LPS组、三种剂量的DXM干预组（小剂量0.5 mg/kg、中剂量1.0 mg/kg、大剂量5.0 mg/kg）。AKI组通过尾静脉注射LPS,DXM干预组注射LPS后给予不同剂量的DXM,于2、6、12和24 h采集标本。HE染色观察肾组织病理,全自动生化分析仪测定血清肌酐、尿素氮,ELISA检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、巨噬细胞炎性蛋白-1α（MIP-1α）水平;应用放射免疫分析法检测血浆及肾组织中AngII浓度变化,Western blot、免疫组化法检测肾组织血管紧张素受体1（AT1R）、血管紧张素受体2（AT2R）蛋白变化,应用硝酸还原酶法检测血清、肾组织NO变化。结果：与对照组比较,LPS组血清TNF-α、MIP-1α、肌酐、尿素氮、血浆及肾组织AngII、肾组织AT2R、血清及肾组织NO均明显升高（P<0.05）,而肾组织AT1R表达明显下降（P<0.05）;病理显示LPS组出现肾小球内中性粒细胞浸润,肾小管上皮细胞肿胀、空泡变性、坏死,随着LPS作用时间的延长,病理损伤越明显;与LPS组比较,DXM干预各组血清TNF-α、MIP-1α、肌酐、尿素氮、血浆及肾组织AngII、肾组织AT2R、血清及肾组织NO下降（P<0.05）,而肾组织AT1R表达明显升高（P<0.05）,肾损伤病理明显减轻;其中,血清TNF-α、MIP-1α、血浆AngII以大剂量DXM干预组下降最为显著（P<0.05）,血清肌酐、尿素氮、肾组织NO以小、中剂量地塞米松干预组下降更为明显（P<0.05）,肾组织AngII以中剂量地塞米松干预组下降最为明显（P<0.05）,肾组织AT1R以中、大剂量地塞米松组干预效果明显（P<0.05）,肾组织AT2R、血清NO各地塞米松干预组差异无统计学意义。 结论：LPS能诱导大鼠AKI,DXM对肾损伤具有保护作用,其作用机制可能与DXM下调炎症因子、AngII、AT2R、NO及上调AT1R表达有关,且针对不同的效应分子,不同剂量地塞米松的干预作用不同。     

低氧诱导因子-1α对脓毒症肠黏膜屏障的保护作用

目的：探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）对脓毒症肠黏膜屏障的影响及机制。方法：SD大鼠随机分4组：假手术组、脓毒症组、脓毒症+HIF-1α刺激剂组（脓毒症+DMOG组）、脓毒症+HIF-1α抑制剂组（脓毒症+Bay87-2243组）,每组6只。采用盲肠结扎穿孔（cecal ligation and perforation, CLP）建立脓毒症模型。ELISA检测大鼠血浆炎性标记物IL-1β、IL-6、TNF-α,氧化应激标记物丙二醛（MDA）以及抗氧化因子超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）的水平。Western blot检测大鼠肠黏膜HIF-1α表达。HE染色检测肠黏膜病理学损伤。结果：与假手术组相比,脓毒症大鼠炎症因子、氧化应激因子以及HIF-1α显著上调（P<0.05）;给予腹腔注射DMOG明显降低脓毒症大鼠血浆IL-1β、IL-6、TNF-α、MDA水平（P<0.05）;增加血浆SOD、CAT水平（P<0.05）;HIF-1α表达上调（P<0.05）,肠黏膜病理损伤减轻,Chiu's评分显著降低（P<0.05）。口服灌胃Bay87-2243则得到相反的结果。 结论：HIF-1α对脓毒症肠黏膜损伤具有保护作用,其机制可能与缓解脓毒症炎性反应和抑制氧化应激水平有关。     

中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠肾纤维化的改善作用及TGF-β1 /Smads信号通路的影响

目的: 观察中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠（SHR）肾损伤的改善作用,并探讨其可能存在的机制。方法: 14周龄雄性SHR大鼠随机分为SHR模型组（0.5%羧甲基纤维素钠,CMC-Na 5 mL/ kg）、玉夏胶囊高、中、低（0.6、0.3、0.15 g/kg）剂量组,每组7只。另设WKY（0.5%CMC-Na 5 mL/kg）正常对照组7只,每日灌胃给药一次,连续10周。于给药前及给药后每两周尾袖法测血压;末次给药后收集大鼠24 h尿液并检测尿微量白蛋白（U-mAlb）含量;腹主动脉取血测定血清β2-微球蛋白（β2-MG）、血浆及肾组织血管紧张素II(AngII)含量;HE及Masson染色观察肾脏病理组织学和胶原纤维变化;Western blot法测定肾组织TGF-β1、Smad4、Smad7蛋白含量及Smad2/3蛋白磷酸化水平表达。结果: 玉夏胶囊能明显降低SHR大鼠血压(P<0.05或P<0.01),降低U-mALb、血β2-MG含量、血浆及肾组织AngII水平(P<0.01),明显减轻肾脏病理组织损伤和胶原纤维沉积,上调肾组织Smad7蛋白表达,下调TGF-β1、Smad4蛋白表达及Smad2/3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论: 中药玉夏胶囊能有效改善SHR大鼠肾纤维化,在一定范围内呈剂量依赖性,其机制可能与降低血压,下调AngII水平,抑制过度激活的TGF-β1/Smads 信号通路有关。     

疏肝健脾方调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴抑制肝纤维化小鼠细胞焦亡的机制研究

目的：基于TLR4/MyD88/NLRP3信号轴探究疏肝健脾方对肝纤维化小鼠的治疗作用及机制。方法：采用四氯化碳（CCl4）与橄榄油混合液背部皮下注射的方法，复制化学性肝纤维化小鼠模型。造模首日，灌胃给予疏肝健脾方，每天1次，连续12周；HE、Masson和天狼猩红染色观察小鼠肝组织病理学损伤程度，透射电镜观察肝组织超微结构的变化及焦亡小体情况；RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色检测肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4/MyD88/NLRP3信号轴表达的变化情况。结果：病理分析显示模型组小鼠肝脏肝小叶结构模糊，肝细胞索排列紊乱，胶原沉积增加，焦亡小体数量明显增加，肝组织中α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3的mRNA和蛋白表达水平相较于正常组肝脏均显著升高。与模型组相比，疏肝健脾方给药后可改善肝脏病理组织学损伤程度，抑制细胞焦亡，显著下调α-SMA、Collagen Ⅰ、Caspase-1、IL-1β、IL-18以及TLR4、MyD88和NLRP3 mRNA与蛋白表达水平。 结论：疏肝健脾方抗肝纤维化作用可能与调控TLR4/MyD88/NLRP3信号轴，减少细胞焦亡，抑制肝星状细胞活化有关。     

中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠肾纤维化的作用研究

目的：探讨中药玉夏胶囊改善自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat, SHR）肾纤维化的作用及其相关机制。方法：以WKY大鼠（Wistar Kyoto rat）为正常对照组（0.5%羧甲基纤维素钠,5 mL/kg）;SHR大鼠随机分为SHR模型组（0.5% 羧甲基纤维素钠,5 mL/kg）、玉夏胶囊高剂量组（0.6 g/kg）、中剂量组（0.3 g/kg）及低剂量组（0.15 g/kg）,每组7只。连续10周,每日灌胃给药一次。测量大鼠给药前与给药后第2、4、6、8、10周舒张压（DBP）;测量给药前与给药后第3、5、8周大鼠尿量;检测血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量;免疫组化法检测肾组织TGF β1阳性细胞表达水平;RT-qPCR检测肾组织TGF β1 mRNA表达水平;Western blot法检测肾组织ERK1/2、p ERK1/2、P38、p-P38、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平。结果：玉夏胶囊能剂量依赖性地降低SHR大鼠DBP,增加尿量,降低血清中Scr和BUN含量以及肾组织中P38、ERK1/2、TGF β1、MMP 9、TIMP 1蛋白表达（P<0.05, P<0.01）。结论：玉夏胶囊具有减轻SHR大鼠肾纤维化的作用且在一定范围内呈剂量依赖性,其机制可能与其利尿、降压,抑制P38/MAPK、ERK/MAPK相关通路,降低TGF β1、MMP 9、TIMP 1表达水平,恢复MMP 9/TIMP 1比值平衡有关。     

丹皮酚对FSL-1与IL-4共刺激诱导树突状细胞成熟及细胞因子表达的影响

目的: 研究牡丹皮提取物丹皮酚对TLR2配体FSL-1刺激诱导慢性前炎因子释放的分子机制,为天然药物治疗慢性皮炎提供新的思路。方法: 将小鼠髓源性树突状细胞（DCs）分成5组,对照组、FSL-1刺激组、丹皮酚低、中、高剂量干预组（25、50、100 μg/mL）,所有组均给予10 ng/mL rmIL-4环境培养,ELISA法检测树突状细胞培养上清液中IL-10、IL-12的含量,流式细胞术检测树突状细胞表面MHC-II、CD40和CD86分子表达的水平。结果: 各组树突状细胞表面分子表达水平：刺激组与对照组相比,树突状细胞表面MHC- II、CD40和CD86表达量明显增加（P<0.05）。丹皮酚干预组与刺激组相比,DCs表面MHC- II、CD40和CD86表达量均降低,且高、中剂量组具有统计学差异 （P<0.05）。细胞因子分泌水平：刺激组与对照组相比,抗炎性细胞因子IL-10的水平明显降低（P<0.05）,而前炎细胞因子IL-12的水平明显升高（P<0.05）;丹皮酚干预组与FSL-1刺激组相比,各个干预组的IL-10的分泌水平显著上升（P<0.05）,丹皮酚干预组中IL-12的分泌水平均有下降,但仅高、中剂量组具有统计学差异（P<0.05）。结论: TLR2配体FSL-1可以和IL-4共刺激DCs,促进DCs活化并成熟,促进前炎性因子IL-12释放,抑制IL-10等抗炎细胞因子分泌,诱导CD4+T细胞向Th1分化,导致了Th1极化状态,诱导慢性皮肤炎症;而天然药物丹皮酚可抑制TLR2配体介导TLR2通路活化DCs这一过程,具有抑制皮肤慢性炎症的潜力。     

脂多糖刺激的骨髓间充质干细胞来源外泌体改善小鼠心肌梗死后炎症和纤维化

目的: 探讨脂多糖（LPS）刺激下的骨髓间充质干细胞（BMSCs）来源的外泌体对小鼠心肌梗死（MI）后的治疗作用。方法: 流式成像细胞分析术鉴定BMSCs的表面标记分子，油红O和茜素红染色于镜下观察成骨成脂分化能力。LPS刺激BMSCs 48 h，提取细胞培养上清外泌体，用透射电镜和粒度分析仪捕捉其形态和粒径大小，流式细胞术和Western blot检测特异性表面标记分子及蛋白表达。建构小鼠MI模型并予以外泌体心脏局部注射，利用心脏超声、组织病理切片和PCR评价治疗结果。结果: 分离的BMSCs表达CD29、CD44、CD90、CD73、CD105，未表达HLA-DR、CD14、CD34、CD45，具有成骨成脂分化能力。Western blot检测到外泌体表达Alix、HSP70、Flotillin-1蛋白，流式成像仪检测到外泌体膜表面的CD63、CD9和CD81标记分子，粒径众数为69.2 nm。LPS刺激下BMSCs产生的外泌体注射小鼠心脏后，与PBS注射的MI对照组比较，心脏超声评价7天和28天的射血分数（EF）和短轴缩短率（FS）都显著增大（P<0.01,P<0.05），在第28天的舒张末期容积（LVEDV）和收缩末期容积（LVESV）均显著减小（P<0.05），Masson染色显示纤维化面积减小（P<0.01），PCR检测到炎症因子IL-6、IL-1β、转化生长因子β（TGF-β）和趋附因子CCL2表达减少，CX3CL1表达增多，术后第14天最为明显。结论: LPS刺激的BMSCs来源外泌体可以改善小鼠MI后心肌收缩功能和纤维化，降低炎症因子表达量。     

熊果酸减轻高糖高脂诱导的人主动脉内皮细胞损伤

目的：探讨熊果酸（ursolic acid, UA）对人主动脉内皮细胞（human aortic endothelial cells, HAEC）高糖高脂损伤的影响及机制。方法：MTT法选取合适的高糖和棕榈酸钠（sodium palmitate, SPA）损伤浓度以及UA预孵浓度。采用试剂盒检测NO、ROS的含量，乳酸脱氢酶（LDH）的释放率以及抗氧化酶包括总超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的活性。Western blot法检测内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、细胞间黏附分子（ICAM-1）、血管细胞黏附分子（VCAM-1）、半胱天冬酶-1（caspase-1）以及GSDMD的蛋白表达情况。Hoechst33342联合PI荧光染色检测细胞膜的完整状态以探讨焦亡发生情况。观察UA对HAEC的保护作用。结果：预孵UA（1 μmol/L和5 μmol/L）可以减轻高糖高脂（30 mmol/L GLU+0.1 mmol/L SPA）造成的HAEC损伤，提升HAEC活力，减轻氧化应激损伤，增加NO的释放和eNOS的蛋白表达，减少黏附分子的蛋白表达，减少细胞焦亡。 结论：UA可能通过减轻高糖高脂诱导的HAEC氧化应激反应，抑制细胞焦亡的发生，减轻内皮细胞损伤。     

当归红芪超滤物对miR-21-5P靶向调控TGF-β1介导放射性心肌纤维化的干预效应

目的：揭示miR-21-5P靶向调控TGF-β1是介导心肌成纤维细胞活化的关键机制,明确当归红芪超滤物对miR-21-5P靶向调控TGF-β1机制的干预效应。方法：（1）将细胞随机分为正常组、辐照组,辐照组接受6Gry单次照射,后采用RT-PCR检测miR-21-5P,Western Blot检测α-SMA、TGF-β1的表达;（2）细胞随机分为正常组、辐照组、miR-21-5PNC+辐照组、miR-21-5Pinhibitor+辐照组,后采用RT-PCR检测miR-21-5P,Western Blot检测TGF-β1、Smad3、Smad7的表达,免疫荧光染色检测MMP-9、TIMP1表达,EDU染色检测细胞凋亡;（3）将细胞随机分为正常组、辐照组、RAS-RH+辐照组,后采用RT-PCR检测miR-21-5P,Western Blot 检测TGF-β1、Smad3、Smad7的表达,免疫荧光染色检测MMP-9、TIMP1表达,EDU染色检测细胞增殖。结果：（1）辐照组miR-21-5P、α-SMA、TGF-β1的表达明显高于正常组（P<0.01）,表明X线辐射可诱导心肌成纤维细胞活化,同时miR-21-5P、TGF-β1与心肌纤维化的发生密切相关;（2）miR-21-5Pinhibitor+辐照组中miR-21-5P、TGF-β1、Smad3、TIMP1表达明显低于辐照组、miR-21-5PNC+辐照组,MMP-9、Smad7表达明显高于辐照组,EDU染色阳性率降低、细胞数目减少,表明miR-21-5P靶向调控TGF-β1是介导心肌纤维化的关键机制;（3）RAS-RH+辐照组miR-21-5P、α-SMA、TGF-β1、Smad3、TIMP1表达明显低于辐照组,MMP-9、Smad7表达明显高于辐照组,EDU染色阳性率、细胞数目略有降低,表明RAS-RH可通过抑制miR-21-5P靶向调控TGF-β1机制干预放射性心肌纤维化的发生。结论：RAS-RH可通过抑制miR-21-5P靶向调控TGF-β1的机制干预心肌纤维化的发生。     

甘草提取物对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞纤维化的影响

目的：考察甘草提取物对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞（CFs）纤维化干预作用。方法：10 ng/mL TGF-β1诱导CFs建立心肌纤维化细胞模型。用甘草提取物处理纤维化细胞,MTT法检测不同浓度甘草提取物对细胞增殖的影响;CCK-8检测TGF-β1诱导后,甘草提取物对CFs细胞增殖的影响;免疫荧光检测平滑肌肌动蛋白（α-SMA）的表达;Western blot检测TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白及p-Smad2、p-Smad3蛋白表达水平;RT-PCR检测Smad2、Smad3、Smad4 mRNA表达水平。结果：各浓度甘草提取物处理细胞后细胞活性与对照组比较,差异有统计学意义（P<0.05）。甘草提取物各浓度组细胞增殖率显著低于TGF-β1组（P<0.05）;100 μg/mL甘草提取物对α-SMA、TGF-β1/Smad信号通路相关蛋白表达水平显著低于TGF-β1组（P<0.05）。 结论：甘草提取物对TGF-β1诱导的心肌纤维细胞纤维化的发生发展具有一定改善作用,其作用机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路有关。     

发酵虫草菌粉对DEN致大鼠肝损伤的保护作用及TGF-β1/Smads通路的影响

目的: 探讨发酵虫草菌粉（fermented cordyceps sinensis powder,CS）对二乙基亚硝胺（DEN）诱导大鼠肝损伤的保护作用及对TGF-β1/Smads通路的影响。方法: 无特定病原体（SPF级）健康雄性Sprague Dawley（SD）大鼠48只,体质量（180±20） g,随机分为4组：对照组、模型组、CS治疗组与CS溶媒组,每组12只。模型组：灌胃给予10 mg/kg DEN每周5次共8周,构建慢性肝损伤模型;对照组：灌胃给予与模型组相同体积的生理盐水;CS治疗组：在建模4周后灌胃给予80 mg/kg CS每周5次共8周;CS溶媒组：灌胃给予与CS组相同体积的5%甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液。实验结束后,麻醉,脊椎脱臼法处死大鼠,收集血液,紫外分光光度法检测各组大鼠血清中AST、ALT以反映肝功能;H&E染色观察肝组织形态变化,Masson染色观察胶原沉积情况;改良Nycodenz法分离各组大鼠原代肝星状细胞（HSC）,RT-qPCR检测肝组织与HSC中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子（TGF）-β1、Smad3、Smad7 mRNA的表达水平;Western blot检测肝组织Smad3与Smad7蛋白表达水平。结果: 与对照组相比,模型组大鼠血清中AST、ALT含量显著升高,H&E染色结果显示肝脏组织形态显著改变,Masson染色结果显示胶原沉积增多;与模型组相比,CS治疗四周能显著降低肝损伤大鼠血清中升高的AST、ALT水平,改善其肝脏病理损伤程度,减少肝脏中胶原沉积。RT-qPCR结果显示,CS可减少肝损伤大鼠组织及HSC中α-SMA、TGF-β1 mRNA表达水平,增加Smad7 mRNA表达水平;CS溶媒组各项检测指标均与模型组无差异;此外,Western blot结果显示,CS可下调肝损伤大鼠肝组织Smad3蛋白的表达,上调Smad7。结论: CS可显著改善DEN诱导的大鼠肝损伤,该作用可能与CS上调Smad7,并抑制TGF-β1/Smads通路有关。     

PGC-1α基因多态性与代谢性疾病的相关性

过氧化物酶体增殖物激活受体γ共激活因子1-α（peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha,PGC-1α）属于人体内一种重要的核转录辅助激活因子,能与多种核受体及转录因子相互作用,以调控其靶基因的表达。PGC1-α在人体能量代谢中发挥着重要的作用,其参与脂肪酸氧化,肝糖异生以及调节线粒体ATP的生物合成等。研究表明PGC-1α基因多态性与Ⅱ型糖尿病、糖尿病肾病、肥胖以及冠心病等代谢性疾病的发生有着密切的关系。探究PGC-1α基因多态性与代谢性疾病的相关性有利于从基因层面检测和评估代谢类疾病的发生风险,从而实现早期发现和预防该疾病的发生,提高代谢性疾病的生存质量,延长生存期。本文拟就近五年PGC-1α参与的代谢途径和其基因多态性与代谢性疾病的相关性的研究进展做一综述。     

钎焊温度对TA1/Ti-Zr-Cu-Ni-Ag/TA1接头界面组织性能的影响

采用Ti-Zr-Cu-Ni-Ag钎料进行TA1钛合金的连接，并使用光学显微镜（OM）、扫描电子显微镜（SEM）和能谱仪（EDS）等分析测试手段对不同钎焊温度下获得的接头界面组织和断口形貌进行了分析。研究表明，TA1/Ti-Zr-Cu-Ni-Ag/TA1接头典型界面微观组织为α-Ti/α-Ti+β-Ti+(α-Ti+γ)/α-Ti。随着钎焊温度的升高，钎缝宽度呈先增加后减小的趋势，共析组织更加分散，α-Ti组织逐渐增多，α-Ti和（α-Ti+γ）的片层状结构也逐渐明显；剪切试验表明当钎焊温度为900℃，保温时间为20 min时，钎焊接头的抗剪强度达到172.04 MPa的峰值，接头的断裂模式为韧脆混合断裂；接头平均抗拉强度为260.04 MPa，达到了母材的65%。