乌骨鸡黑色素及其降解产物的红外光谱结构解析

采用氨水-过氧化氢法和碳酸钾-过氧化氢法对乌骨鸡黑色素进行降解,并通过傅里叶红外光谱法对乌骨鸡黑色素及其降解产物可溶性部位的红外光谱学性质进行研究。结果显示：乌骨鸡黑色素降解产物可溶性部位与乌骨鸡黑色素在红外图谱上有较多相似之处,在3600～3100cm-1、2950～2850cm-1、1680～1630cm-1、1570～1515cm-1、1240～1200cm-1均有不同强度的吸收峰,特别是在1650cm-1附近均出现乌骨鸡黑色素的特征强吸收峰,推测经过氧化氢降解反应获得的乌骨鸡黑色素降解产物可溶性部位中含有乌骨鸡黑色素骨架结构片段,酰胺基团和环状烯烃可能是构成乌骨鸡黑色素骨架结构的主要基团。     

乌骨鸡黑色素及其研究进展

乌骨鸡最显著的特征是其体内含有大量黑色素。乌骨鸡黑色素是一种重要的活性物质,已证明其具有消除自由基、抗氧化、抗诱变、抑制病毒、提高机体免疫力、延缓衰老等多种生理功能。本文综述了国内外对乌骨鸡黑色素的结构特征、理化性质、生理功能、合成过程、沉积分布规律、提取方法等方面的研究进展,以期为今后有关乌鸡黑色素的研究工作提供理论参考。     

蛋白酶法提取乌骨鸡黑色素的研究

选用江西泰和乌骨鸡为研究对象，采用酶法水解蛋白质分离乌鸡黑色素。结果表明：酸性蛋白酶为最优水解酶，加酶量3．8％、肉水比1：2，其最佳酶解条件pH2．8、酶解温度34．8℃、酶解时间20h。与盐酸法相比，酶法黑色素的得率高于盐酸法。     

H2O2氧化-荧光分析法测定乌骨鸡中黑色素含量的研究

本研究首次建立了简单、快速地测定乌骨鸡黑色素含量的荧光分析方法。乌骨鸡黑色素在碱性条件下经过氧化氢氧化后产生强烈的荧光。本研究优化了样品前处理条件以及氧化反应条件,对线性范围、检测限以及加标回收率进行了评价。结果表明,最佳氧化条件:氧化温度为55℃,过氧化氢溶液工作浓度范围为20%～25%,氧化反应时间为2 h;最佳样品前处理的条件:Na OH浓度为0.1～0.2 M,超声时间为40 min,超声温度为70℃。黑色素浓度在50～600μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数r=0.9986。与传统检测方法相比,荧光分析法无需从样品中提取黑色素,极大地加快了分析速度,简化了分析操作,并且该方法相对于紫外分光光度法的检测限降低了至少10倍。样品添加不同浓度的黑色素工作标准品的平均回收率为102.87%,RSD值为4.51%。采用该方法测定了乌骨鸡鸡皮、腿肌、胸肌中的黑色素含量,结果显示乌骨鸡肉中的黑色素含量:鸡皮腿肌胸肌,分别占鲜重的1.08%、0.44%、0.34%。以上结果表明该方法较快速、准确、检测限低,适用于乌骨鸡中黑色素含量的测定。     

乌骨鸡黑色素的提取分离及抗氧化活性研究

采用双酶水解法提取乌骨鸡黑色素,研究碱液脱除蛋白,分离乌骨鸡黑色素的工艺条件。以腹腔注射D-半乳糖法建立小鼠氧化损伤模型,灌胃给予不同剂量乌骨鸡黑色素(500、250、100mg/kg bw),观察其抗氧化活性。结果表明：碱液脱除蛋白分离乌骨鸡黑色素的最佳工艺条件为NaOH 溶液(pH10),温度60℃,时间1.5h,料液比1:10,提取4 次。与模型组比较,乌骨鸡黑色素组小鼠血和肝脏中GSH-Px 活力显著升高,MDA 水平显著降低。乌骨鸡黑色素具有较强的体内抗氧化作用。     

黑羽乌骨鸡毛中黑色素提取工艺

以黑羽乌骨鸡毛为原料,采用盐酸水解法从乌骨鸡毛中提取黑色素并对黑色素的含量进行测定。通过单因素实验考察了提取时间、盐酸浓度、料液比对乌骨鸡毛中黑色素得率的影响,在单因素实验基础上通过响应面实验分析法得到二次多项式回归方程的预测模型。结果表明:乌骨鸡毛中黑色素提取的最佳工艺条件为,HCl浓度27%,提取时间6h,料液比(g∶mL)1∶2,在此条件下黑色素得率达4.72%。黑色素样品经过氧化氢法氧化处理,采用高效液相色谱法测出黑色素含量为76.20%。     

乌骨鸡黑色素三步法提取及结构性状研究

采用"脱脂-酶解-酸解"三步法提取乌骨鸡黑色素,研究酸液脱除蛋白,分离乌骨鸡黑色素的工艺条件,通过透射电镜对乌骨鸡黑色素纯化效果进行观察,并用元素分析仪对其结构进行分析。结果表明:最佳脱脂工艺为乙醇回流脱脂4次,每次1h,料液比1∶2,此工艺条件下乌骨鸡油脂得率7.5%。脱脂后用蛋白酶C进行酶解,酸化的最优工艺盐酸浓度为2mol/L,回流时间为3h,固液比为1∶10,回流次数为4次,此条件下杂质脱除率最高,且条件温和,通过透射电镜可见三步法纯化的黑色素颗粒形态完整,边缘清晰平滑,无破坏痕迹,可用于降解和结构研究。根据元素分析仪推测乌骨鸡黑色素是一类有别于真黑色素及脱黑色素的特殊黑色素。     

乌骨鸡黑色素三步法提取及结构性状研究

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乌骨鸡黑色素的酶法提取及其抗氧化作用的初步研究

以江西泰和乌骨鸡为研究对象,研究酶法水解乌鸡蛋白质分离黑色素的最佳工艺条件,并对黑色素清除DPPH自由基,以及黑色素延缓油脂酸败的能力进行了研究。结果表明:(1)酸性蛋白酶为最优水解酶,其加酶量3.8%、固液比1∶2;其最佳酶解条件pH2.8、酶解温度34.8℃、酶解时间20 h。(2)乌鸡黑色素能抑制DPPH.自由基,抑制率随黑色素浓度增加而提高。(3)黑色素能延缓油脂酸败,在70℃时添加浓度为0.1 mg/mL的黑色素于油脂中,60 h时酸价为0.3028 mg KOH/g,而对照(不加黑色素)的酸价在第32 h即升到0.3130 mg KOH/g。     

泰和乌骨鸡黑色素的体外抗氧化作用

采用分光光度法测定磷钼酸配合物、自由基和丙二醛(MDA)的含量,用于研究酶法提取的泰和乌骨鸡黑色素的总抗氧化能力及其清除自由基和抗脂质过氧化的作用,研究过程中用合成黑色素与之进行比较.结果表明:泰和乌骨鸡黑色素清除羟基自由基的能力虽然低于合成黑色素,但其总抗氧化能力与合成黑色素相当,而清除DPPH自由基和超氧阴离子自由基的能力以及抗脂质过氧化作用都优于合成黑色素,说明泰和乌骨鸡黑色素具有明显的体外抗氧化功能.     

乌骨鸡活性成分及其功能研究进展

乌骨鸡作为药食两用的滋补品在我国应用历史悠久,具有补肝肾、益气血、养阴清热、调经健脾、补肾固精等功效.本文介绍了国内外对乌骨鸡黑色素、活性肽和脂质等主要活性成分及其补血、抗氧化等活性功能的研究进展,为乌骨鸡的综合利用和功能食品开发提供了理论依据.     

乌骨鸡肉酶解条件的研究

本文阐述了研究Ａｓ１·３９８中性蛋白酶对乌骨鸡肉的水解条件。结果表明，乌骨鸡肉经９０℃，１０ｍｉｎ的加热处理，可促进酶解，酶解最适条件为：ｐＨ＝７．５，温度４０℃，酶与底物浓度之比为８０００ｕ／ｇ，底物浓度１０％，时间１０ｈｒ。     

乌鸡黑色素抗紫外线功能的应用研究

探讨了乌鸡黑色素的抗紫外线功能。结果表明:当乌鸡黑色素水悬液浓度高于0.009mg/mL时,对紫外线照射的唾液链球菌嗜热亚种和德氏乳杆菌保加利亚亚种,以及食品中的Vc有明显的保护作用,浓度越高保护作用越强;黑色素的保护作用随着照射时间的延长而减弱,但与对照相比差异仍极显著(P<0.01);黑色素经光照、室温或低温处理后,其抗紫外线性质几乎未受影响,高温处理则影响较大,温度越高影响越严重,但与对照相比仍具有较强的抗紫外线功能。     

乌骨鸡黑色素的分步酶解法制备及其性能研究

为有效提取乌骨鸡黑色素,采用复合蛋白酶和酸性蛋白酶联用法分步酶解提取得到乌骨鸡黑色素。探讨复合蛋白酶水解乌骨鸡肉糜的最佳条件,对不同的酶提方法获得的黑色素的得率、蛋白质含量、紫外图谱、抗油脂氧化性质、对VC的保护作用进行了比较。结果表明:复合蛋白酶水解乌骨鸡肉糜的最佳条件为酶解温度50℃、酶解时间3h、pH6.5、加酶量3.5%;复合蛋白酶和酸性蛋白酶联用法分步酶解法获得的乌骨鸡黑色素得率高,蛋白质含量低,对VC的保护作用强。     

乌鸡肽对小鼠免疫调节作用影响的实验研究

目的:观察并探讨乌鸡肽对小鼠免疫功能的影响。方法:以成年ICR雌性小鼠为动物模型,观察不同剂量(0.5、1.0、2.0 g/kg BW)乌鸡肽对小鼠体重、免疫器官相对重量、细胞免疫功能、体液免疫功能的影响,并从组织形态上观察胸腺的微观结构变化。结果:1.0、2.0 g/kg BW乌鸡肽干预组的足趾肿胀度、2.0 g/kg BW乌鸡肽干预组的溶血空斑数的对数转换值显著高于对照组(p<0.05)。与对照组相比,1.0、2.0 g/kg BW乌鸡肽干预组小鼠胸腺皮质的淋巴细胞数量显著增多(p<0.05)。各乌鸡肽剂量组对小鼠体重增长、免疫器官指数以及血清半数溶血值均无显著影响(p>0.05)。结论:乌鸡肽对小鼠的免疫功能有一定的促进作用。      

Determination of carnosine in Black-Bone Silky Fowl (Gallus gallus domesticus Brisson) and common chicken by HPLC

Black-Bone Silky Fowl (Gallus gallus domesticus Brisson) is both consumed as a healthy food and used particularly as a kind of traditional Chinese medicine. Carnosine in the muscles of Black-Bone Silky Fowl was identified by HPLC–MS/PAD. The carnosine content in the meat of Black-Bone Silky Fowl was determined by HPLC and compared with that contained in the meat of White Plymouth Rock, which were bred under the same condition. The results showed that the contents of carnosine in the mixed meat, breast meat and thigh meat of Black-Bone Silky Fowl were all remarkably higher than that in the White Plymouth Rock. These findings indicate that Black-Bone Silky Fowl would be a better chicken breed for carnosine supplement.     

偶氮染料降解氧化产物苯胺的液相色谱/质谱联用法测定

采用液相色谱/质谱联用法测定由Fenton法降解含偶氮染料的印染废水中的痕量苯胺。降解反应溶液中的苯胺通过HLB固相萃取小柱净化、富集后,在XR-ODS II 柱上,以乙腈/5 mmol/L乙酸铵+0.05%甲酸为流动相进行梯度洗脱,采用电喷雾（ESI）电离正离子多反应监测模式（MRM）测定。结果表明,实验采用的固相萃取小柱能有效地去除溶液中的Fe2+和干扰苯胺测定的化合物,苯胺在10.0–1000.0 μg/L范围内具有良好的线性,相关系数0.9993,回收率在93.0%–98.8% 范围,日内相对标准偏差（RSDs）在3.2%–6.9%之间,日间RSDs在4.8%–6.3%之间,最低定量检出限为2.0 μg/L。建立的方法简便、干扰少、特异性强,应用此法测定Fenton反应液中的痕量苯胺取得了满意的结果。