海洋枝顶孢霉BH0531发酵液对根结线虫卵及二龄幼虫的影响

实验以根结线虫的卵、卵囊和二龄幼虫（J2）为研究对象,对海洋枝顶孢霉（Acremonium sp.）BH0531发酵液处理根结线虫不同发育阶段的杀线作用进行了效果评价,并以J2幼虫为靶标,与市面上的灭线磷及阿维菌素的药效进行了初步对比。结果显示,在实验条件下,海洋枝顶孢霉BH0531发酵液对根结线虫卵囊和分散卵的孵化以及J2幼虫的活力均具有明显抑制作用,其对卵囊孵化的抑制作用达40.18%;对分散卵孵化的抑制作用可达84.28%;而对J2幼虫的杀线作用最为显著,校正死亡率高达97.41%,高于实验条件下灭线磷及阿维菌素的测定值,在根结线虫的生物防控方面显现出潜在的研究价值。     

杀线虫海洋枝顶孢霉BH0531发酵条件的响应面优化

以自主筛选出的杀线虫海洋枝顶孢霉BH0531为对象,对其发酵条件进行了响应面分析和优化研究。在单因素试验的基础上,采用Plackett-Burman试验筛选出影响杀线虫效果的因素为NaNO3、K2HPO4、发酵时间。通过Box-Behnken设计和响应面分析法优化以上影响因素并对其结果进行分析,最终得到最优发酵条件为NaNO3 3.4 g/L、K2HPO4 1.5 g/L、发酵时间130 h。在此优化条件下,经摇瓶发酵验证,优化后发酵液的杀线活性为88.00%,比优化前提高了22.77%。     

海洋枝顶孢霉BH0531代谢物对松材线虫形态和酶活的影响

使用海洋枝顶孢霉（Acremoniumsp.BH0531）活性代谢物处理松材线虫,通过线虫的形态、运动和酶活的变化对BH0531杀线虫机理进行初步探讨。结果表明,经BH0531代谢物处理后的线虫虫体严重扭曲,扭动频率显著提升,并随时间推移而趋缓,最终呈C形、新月形或直形死亡。酶活性测试表明,该菌代谢物对松材线虫体内的乙酰胆碱酯酶AChE具较强抑制作用,酶比活力由0.417 U/mg降至0.089 U/mg;ATP酶活力先升高后下降,处理2h酶比活力由0.447U/mg升至0.501U/mg,随着时间的持续又急剧下降至0.18 U/mg左右。这两种酶活力的变化情况与线虫处理后运动频率变化的观察结果相一致。     

海洋枝顶孢霉BH0531发酵液杀线虫组分的分离及活性测定

实验采用生物活性跟踪法,通过超滤、Sephadex凝胶层析、离子交换树脂、硅胶板薄层层析,以及特异性鉴别染色等方法对海洋枝顶孢霉BH0531发酵液的杀线虫活性组分进行分级分离和初步的性质分析。结果表明,Sephadex凝胶柱层析（G-25,G-10）可有效分离获得杀线虫活性组分,3 d的线虫校正死亡率达98.33%;以正丁醇:水:无水乙醇=1∶1∶1(V/V)为展开剂的薄层层析,可将活性组分有效分离,Rf = 0.31,斑点洗脱物的线虫校正死亡率达到94.00%;定性染色结果显示,茚三酮反应阳性,证实有α-氨基存在,茚三酮吡啶呈红色,显现出寡肽性质;双甲酮染色呈亮黄色,表明具有酮糖性质。结果表明,BH0531杀线虫活性代谢物应为含有酮糖基团的短肽类化合物。     

海洋真菌BH0531对黄瓜促生长作用的研究

通过室内盆栽试验研究了海洋枝顶孢霉（Acremonium sp.）BH0531次生代谢产物对黄瓜根结线虫病的防治效果及对黄瓜植株生长的促进作用。实验以根结线虫（Meloidogyne incognita）侵染后的黄瓜为材料,在土壤中加入质量浓度为5 mg/mL、10 mg/mL、20 mg/mL、40 mg/mL菌株BH0531发酵液40 mL,用等体积清水作为对照,测定黄瓜的株高、茎粗、叶片的可溶性蛋白及可溶性糖含量、叶绿素含量和根系活力。结果表明,在试验浓度范围内施入发酵液,对根结线虫病的防效最高达72.7%,同时施入发酵液显著增加叶片可溶性糖和叶绿素含量,提高黄瓜的根系活力。因此,海洋枝顶孢霉BH0531的代谢物不仅对黄瓜根结线虫病有显著的控制效果,而且对黄瓜生长有一定的促进作用。     

卵寄生真菌刀孢蜡蚧菌对烟草根结线虫的生物防治

根结线虫卵的寄生真菌对根结线虫病害的生物防治具有很大的应用潜力.本研究采用卵寄生真菌刀孢蜡蚧菌Lecanicillium psalliotae CGMCC5329对南方根结线虫卵和雌虫的寄生性进行了测定,同时利用该菌的生物菌剂对烟草根结线虫病害进行了田间防效测定.结果表明,该菌能寄生根结线虫的卵和雌虫.其中,培养5 d对卵寄生率为83.29%;培养15 d对卵块相对孵化抑制率为91.41%.刀孢蜡蚧菌菌剂在田间施用15 kg/667m²时,相对防效达80%以上,刀孢蜡蚧菌CGMCC5329对烟草根结线虫病害具有较好的防治效果.     

桃色顶孢霉发酵液对大豆的促生及对抗氧化酶活性的影响

采用管碟法和种子萌发法研究桃色顶孢霉对茄病镰刀菌Fusarium solanae的拮抗作用以及对大豆的促生作用,并采用愈创木酚法、紫外吸收法、氮蓝四唑光化还原法研究了顶孢霉发酵液对POD、CAT、SOD三种抗氧化酶活性的影响。结果表明：顶孢霉发酵液对镰刀菌菌丝生长有明显抑制作用,菌丝变稀疏。大豆种子经不同浓度桃色顶孢霉发酵液处理后,萌发率及种子酶活性均产生变化。不同浓度的发酵液对种子萌发促进作用不同,当发酵液浓度为10％时,胚根长、胚芽长、胚根鲜重和胚芽鲜重均达到最高值,分别为2．91cm、0．037g、4．07cm 和0．1666g,与对照相比分别提高了49．37％、63．24％、30．54％和45．80％。当处理种子的发酵液浓度为60％时,种子萌发率最高为83．67％,与对照相比提高了23．90％;POD、CAT和 SOD 酶活性最强,分别为683U、160．6U 和301U,与对照相比分别提高73．50％、43．78％和76．74％。初步证实了桃色顶孢霉发酵液中含有能够促进大豆种子萌发及抗氧化酶活性升高的物质。     

微生物菌剂对烟草根结线虫及根际微生物群落多样性的影响

为寻找对烟草根结线虫病有良好控制效果的药剂,探究药剂施用对烟草根际土壤微生物群落的代谢情况,改善土壤微生态环境,以烟草品种红花大金元为试验材料,通过田间试验研究施用枯草芽孢杆菌、淡紫拟青霉、荧光假单胞杆菌、哈茨木霉和阿维菌素、阿维·丁硫对烟草根结线虫病病害控制、根际土壤微生物群落多样性变化及烟草生长的影响。结果表明,淡紫拟青霉、荧光假单胞杆菌能够分别达到89%、76%的防治效果。AWCD值、McIntosh指数、Simpson指数均显示土壤中增施微生物菌剂能够提高根际土壤微生物群落代谢能力,促进土壤微生物群落对碳源的整体利用,增强代谢活性。Pearson相关分析表明,根际土壤中微生物群落对31种碳源的代谢利用与病情指数呈负相关。土壤中添加微生物菌剂淡紫拟青霉、枯草芽孢杆菌、荧光假单胞杆菌均能够控制烟草根结线虫病,增强土壤微生物群落多样性,促进烟株生长,淡紫拟青霉效果最好。淡紫拟青霉处理后通过提高根际土壤微生物对碳水化合物类（D-半乳糖酸-γ-内酯）碳源的代谢利用,达到对病情指数的有效调控。淡紫拟青霉处理除最大叶长外,株高、茎围、有效叶片数、最大叶宽均为最大增幅分别为44.91%、20.11%、11.78%、39.05%。     

23株曲霉属菌种的形态学复核鉴定研究

对中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)保藏的23株19种曲霉属菌种进行了形态学复核鉴定研究。根据《The Genus Aspergillus》、《中国真菌志——曲霉属及其相关有性型》和《Identification of commonAs-pergillusspecies》,采用曲霉属菌种形态观察的标准培养条件,以菌种培养特征和显微形态为依据进行复核鉴定。22株19种菌种的复核结果与原鉴定结果一致,其中5种5株菌种根据分类命名规则的最新进展重新命名;另1株CICC 2106,原定种为溜曲霉(Aspergillus tamarii),复核鉴定结果为黑曲霉(Aspergillus niger),ITS1-5.8S-ITS2序列分析和Biolog微生物快速分析实验支持复核结果。通过形态学复核鉴定,CICC保藏的23株曲霉属菌种原鉴定结果的准确性达到95.6%。