外界因素对嗜酸乳杆菌WS所产细菌素的影响

细菌素是某些细菌利用核糖体合成机制产生的一种具有抗菌作用的蛋白质或多肽类物质。嗜酸乳杆菌是乳酸菌的一种，可以产生有机酸、细菌素、双已酰、过氧化氢等多种天然抑菌物质，具有维持肠道内菌群平衡，提高机体免疫力，促进营养物质的吸收等多种功能。是肠道的主要益生菌之一。尤其是嗜酸乳杆菌产生的具有抑菌活性的代谢产物细菌素，不仅可以改善肠道生态，而且是一类具有潜在开发能力的天然食品防腐剂和饲料添加剂。     

嗜酸乳杆菌WS所产细菌素生物学特性的研究

LactobacliiusacidophilusWS在MRS培养基中经过37℃培养得到的细菌素经受70℃、121℃处理20min后,活性几乎不变,对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,而对大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌的抑制作用不明显,说明该细菌素是一种广谱抗菌的细菌素。细菌素对木瓜蛋白酶(papain)、蛋白酶K(proteinaseK)以及胰蛋白酶(trypsin)敏感,而对中性蛋白酶(subtilisin)和胃蛋白酶(pepsin)的敏感性差。在一定的范围内,细菌素的抑菌活性和环境的酸度呈正相关。     

嗜酸乳杆菌WS所产细菌素生物学特性的研究

LactobacliiusacidophilusWS在MRS培养基中经过37℃培养得到的细菌素经受70℃、121℃处理20min后,活性几乎不变,对以金黄色葡萄球菌为代表的革兰氏阳性菌有明显的抑制作用,而对大肠杆菌为代表的革兰氏阴性菌的抑制作用不明显,说明该细菌素是一种广谱抗菌的细菌素。细菌素对木瓜蛋白酶(papain)、蛋白酶K(proteinaseK)以及胰蛋白酶(trypsin)敏感,而对中性蛋白酶(subtilisin)和胃蛋白酶(pepsin)的敏感性差。在一定的范围内,细菌素的抑菌活性和环境的酸度呈正相关。      

嗜酸乳杆菌产细菌素培养基及培养条件的优化

为了提高嗜酸乳杆菌单位体积的活菌数及其产细菌素的产量,通过单因素试验和正交试验优化了培养基配方及培养条件。优化后培养基配方为葡萄糖10g/L,蛋白胨15g/L,牛肉膏15g/L,氯化钠3g/L,碳酸钙1g/L,MgSO4.7H2O 0.4g/L,柠檬酸三铵2g/L,K2HPO4.3H2O 4g/L,MnSO4.H2O 0.2g/L。优化后培养条件为37℃发酵22h,接种量为2%,初始pH值为6.8,摇床转速160r/min。在此条件下,细菌素效价为231.34AU/mL。     

嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2分离纯化研究

采用氯仿萃取和硫酸铵梯度盐析两种方法对嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2进行粗提,氯仿萃取获得的粗提物抑菌直径为17.40mm;硫酸铵饱和梯度盐析,其中60%~80%饱和梯度粗提物抑菌效果较好,抑菌直径为15.50mm。两种粗提物经离子交换cellufine A-500柱层析纯化后,抑菌效价和比活力显著增强,分别是380.60Au/mL和355.60Au/mL、5.55Au/μg和9.96Au/μg,提纯倍数分别为15.86、28.46。Tricine-SDS-PAGE电泳测得Lactobacillin XH2分子量在14.4~20.1ku之间。     

嗜酸乳杆菌产细菌素的提取及其生物特性研究

以嗜酸乳杆菌为研究对象,通过响应面实验和生物学方法,对该菌细菌素产生条件、细菌素定位和稳定性进行研究。结果表明:该菌产生细菌素的最适培养条件为:培养温度38℃、初始p H7.0、培养时间18 h;在嗜酸乳杆菌发酵液中提取的细菌素具有抑制大肠杆菌生长的作用,主要存在于细胞外;该菌产生的细菌素在40~70℃保持较高的活性;在蛋白酶K、胃蛋白酶和胰蛋白酶处理后,抑菌活性显著下降;在p H3.0~10.0之间具有抑菌活性;在紫外照射时间0.25~1 h之间,活性较稳定。此研究结果对该菌产细菌素的分离鉴定及应用提供了重要参考。      

嗜酸乳杆菌NX2-6细菌素在猪肉保鲜上的应用

为探讨嗜酸乳杆菌NX2-6细菌素对冷鲜猪肉的保鲜效果,选取新鲜猪肉为研究对象,以菌落总数、pH、挥发性盐基氮、感官评价为鲜度指标,经不同浓度嗜酸乳杆菌NX2-6抑菌溶液浸泡30 min后,于4 ℃条件下贮藏9 d,测定不同时间点其鲜度的变化。结果表明,从3 d开始,4% S组的菌落总数水平就始终在对照组的1/10以下;pH变化拐点比对照组延迟2 d出现;TVB-N值比对照组推迟2 d到达国标最高检出限;从3 d开始中高剂量处理组气味评分始终显著优于对照组(p<0.05)。结论:4%嗜酸乳杆菌NX2-6抑菌溶液的保鲜效果最佳,猪肉变质较对照组可延缓2 d。     

嗜酸乳杆菌NX2-6产细菌素的发酵条件优化

在Plackett-Burman试验结果基础上,采用响应曲面法(Box-Behnken设计)对嗜酸乳杆菌NX2-6发酵产细菌素的关键影响因素,即葡萄糖质量浓度、乙酸钠质量浓度、柠檬酸三钠水合物质量浓度及培养时间的最佳水平范围进行研究和探讨。通过对发酵液抑菌圈直径的二次多项回归方程求解得知,在葡萄糖质量浓度、乙酸钠质量浓度、柠檬酸三钠水合物质量浓度和培养时间分别为60.0、8.0、5.0g/L和36h时,菌株NX2-6的发酵液抑菌圈直径预测值为21.37mm,验证实验抑菌圈直径实测值与预测值的相关系数R2为0.9918。优化后培养基与基础培养基相比,发酵液抗菌活性增加约80.0%,由此可见,利用响应曲面法对嗜酸乳杆菌NX2-6发酵产细菌素条件进行优化是经济有效且科学合理的。     

嗜酸乳杆菌产类细菌素Lactobacillin NX2-6的初步研究

从内蒙古传统乳制品酸马奶中筛选出1株产生具有广谱抑菌活性物质的嗜酸乳杆菌NX2-6。在排除酸性产物和过氧化氢的干扰后,菌株NX2-6所产生的类细菌素对金黄色葡萄球菌等革兰氏阳性菌和大肠杆菌等革兰氏阴性菌及米曲霉等真菌具有较强的抑制作用;经胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白酶K处理后发酵液抑菌活性明显下降,但仍具有较强的抑菌活性,对α-胰凝乳蛋白酶抗菌活性没有显著变化,因此表明该抗菌活性物质为蛋白类物质或非单一物质。在酸性条件下它具有很好的热稳定性,pH2.0时活性最强,中性或碱性条件下不具有抗菌活性,抑菌活性pH值范围在2.0-5.0。此抗菌物质不同于一般细菌素,属于类细菌素,命名为Lactobacillin NX2-6。菌株NX2-6产物在生防、食品具有潜在的应用价值。     

嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2抑制大肠杆菌作用机理的探讨

将离子交换色谱纯化获得的抑菌效价为380.60 AU/mL的嗜酸乳杆菌细菌素Lactobacillin XH2作用于大肠杆菌（Escherichia coli）,从死亡率、细胞膜损伤及引起胞内物质外泄方面,探讨Lactobacillin XH2抑制大肠杆菌的机理。结果表明：Lactobacillin XH2作用于大肠杆菌后,在3 h内大肠杆菌死亡率达96%,菌体细胞变形并出现孔洞,菌体短小且不规整。进一步分析发现,细胞膜通透性增大,胞内K+快速大量泄露,膜电位紊乱失衡;胞内紫外吸收物质、乳酸脱氢酶等生命大分子物质大量流失;同时导致了大肠杆菌胞内三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）外泄,细胞物质代谢、能量代谢失常,最终导致了菌体死亡。这些现象表明,孔道形成（pore formation）理论可能同样适用于Lactobacillin XH2对革兰氏阴性菌大肠杆菌的作用机理。     

嗜酸乳杆菌发酵乳保藏性的研究

对嗜酸乳杆菌发酵乳在冷藏条件下保藏性进行了研究. 结果表明, 7 ℃条件下 14 d两株嗜酸乳杆菌发酵乳中细菌的存活率分别为 3.43% 和 2.20%, 且活菌数仍在 108 mL 1以上, 酸度为 90 ° T和 107 ° T, 双乙酰分别增加了 11.80% 和 56.41%, 乙醛含量分别为 2.993 mmol/ mL和 2.561 mmol/ mL, 使发酵乳具有良好风味.     

嗜酸乳杆菌生物学特性及其发酵乳的研究

研究了嗜酸乳杆菌的生物学特性,并确定其发酵乳的合适的加工工艺。结果表明,在质量分数为11％脱脂乳培养基中加入质量分数为7％的啤酒能显著提高嗜酸乳杆菌的产酸速率及活菌总数。该菌株耐盐和耐胆酸盐能力分别达到6 0％和1.5％,同化胆固醇达80％,证明是一株性能优良的益生菌株。在此基础上确定嗜酸乳杆菌发酵乳的加工工艺:①采用乳糖部分水解的牛乳（水解率40％）为原料,接种质量分数为3％的嗜酸乳杆菌;②采用混合菌种（嗜酸乳杆菌+唾液链球菌嗜热亚种+德氏乳杆菌保加利亚亚种=3％+0.5％+0.5％）为发酵剂,按常规酸乳工艺生产。产品中嗜酸乳杆菌的活菌数达到109mL-1以上,5d后其活菌数仍有6×108mL-1,且产品口风味良好。     

提高嗜酸乳杆菌在豆乳中发酵性能的研究

测定了嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌发酵豆乳的单菌产酸曲线与混菌产酸曲线,并采用正交实验分析了它们对发酵豆乳的品质影响及与单菌发酵豆乳贮存期质量变化的比较。结果表明,嗜酸乳杆菌、保加利亚乳杆菌是影响酸豆乳质量的主要因素,嗜热链球菌次之。按体积分数为2.2%嗜酸乳杆菌、体积分数为3.0%保加利亚乳杆菌、体积分数为1.8%嗜热链球菌配比共同发酵,可得到组织状态、口感风味较好的酸豆乳,克服了单一嗜酸乳杆菌发酵豆乳产酸慢、凝乳时间长、活菌数不高且贮存期活菌数下降快的缺陷。     

一株高效降胆固醇嗜酸乳杆菌在发酵乳中的应用

采用高效降胆固醇嗜酸乳杆菌菌株2-2和嗜热链球菌调制发酵剂B,研究了发酵剂B在发酵乳中的应用。通过与传统保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌调制的发酵剂A的对比,结果表明,发酵剂B有较强的胆固醇去除效力和弱的后酸化能力。4℃条件下存放15d后发酵乳的酸度为103.6°T,发酵乳中乳酸菌活菌数为2.6×107cfu/mL,高于标准的最低限制(≥106cfu/mL)。研究表明,在降胆固醇和抑制后酸化意义上,发酵剂B能够取代发酵剂A。     

嗜酸乳杆菌发酵大豆酸凝乳的研究

本文研究了嗜酸乳杆菌在豆乳中的生长情况,考察了温度、接种量、木瓜汁添加、嗜酸乳杆菌与植物乳杆菌复配比例对发酵的影响,最后根据发酵豆乳的感官指标,确定了嗜酸乳杆菌发酵豆乳的最佳工艺。结果表明,发酵温度为39℃、接种量为6%、木瓜汁添加量为10%、嗜酸乳杆菌与植物乳杆菌配比为1:2是制作木瓜发酵豆乳的最佳工艺条件。产品中嗜酸乳杆菌的活菌数达到3.0×109CFU/mL,且产品口感良好。     

A study of the growth of Lactobacillus acidophilus in bovine, ovine and caprine milk

The fermentation of reconstituted bovine, ovine and caprine milks with Lactobacillus acidophilus was investigated. Better growth of Lb. acidophilus was observed in ovine milk, but higher acidities developed in caprine milk. The high acidity produced after 12 h of fermentation (pH 3.9) created a hostile environment for the survival of the microorganism in caprine milk.     

乳铁蛋白及乳铁素对嗜酸乳杆菌生长影响的研究

本实验主要针对乳铁蛋白和乳铁素对嗜酸乳杆菌的生长影响进行研究。结果表明,在37℃恒温培养下,添加一定浓度的乳铁蛋白或乳铁素,可促进嗜酸乳杆菌生长繁殖。乳铁蛋白的最适添加浓度为2.5mg/ml,乳铁素的最适添加浓度为0.15mg/ml,培养26h后活菌数分别达到6.7×108CFU/ml和8.0×108CFU/ml。     

嗜酸乳杆菌发酵乳增酵因子的研究

以质量浓度100g／L脱脂乳为基础培养基，研究了添加不同比例和种类的维生素、氨基酸、蛋白质及糖类等营养素对嗜酸乳杆菌产酸能力及凝乳时间的影响。结果表明：乳糖0．5％、泛酸0．08％、半胱氨酸1％、大豆蛋白胨0．25％可使发酵乳凝乳时间从18-24h缩短到4h，pH值达4．30～5．25，因此该四种营养素可作为嗜酸乳杆菌发酵乳的增酵因子。